MAP4K4抑制剂的制作方法

本发明涉及可用作丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶4(map4k4)抑制剂的化合物。本发明还涉及这些化合物例如在治疗方法中的用途。还提供了用于产生本发明的化合物的方法以及这些化合物的使用方法。特别地，本发明涉及式(i)的化合物。

背景技术：

心脏病仍然是全世界范围内死亡和残疾的单一最常见原因，并且预计会随着人口老龄化而增加，因此其社会经济负担在可预见的未来都会增加。心肌细胞死亡是急性缺血性损伤还有慢性心力衰竭的重要组成部分。在临床前模型中，对心脏细胞死亡的分子学和遗传学剖析表明其中有潜在的节点控制点enref8，这是由丝裂原活化蛋白激酶(mapk)，特别是junn-末端激酶(jnk)和p38mapk控制的信号传导途径(dorn,2009；fiedler等人,2014；rose等人,2010；whelan等人,2010)。直接抑制心肌细胞死亡是合乎逻辑的；然而，没有临床对策靶向相关的细胞内途径。此外，迄今为止，几乎没有针对心脏病的人类试验设法直接提高心肌细胞存活率_enref_11，并且几种有希望的策略也失败了(hausenloy和yellon,2015；heusch,2013；newby等人,2014a；piot等人,2008)。

人诱导多能干细胞来源的心肌细胞(hipsc-cm)已被广泛接受作为在心脏毒性和患者特异性途径的情况下的预测指标，并且为增强靶标验证和增进心脏药物发现提供了潜在变革性手段(bellin等人,2012；blinova等人,2017；mathur等人,2015；matsa等人,2014)_enref_14。

由于“末端”mapkp38和jnk接收来自保护性和不利性的多个信号的输入，因此考虑靶向可能更具选择性地将这些mapk与细胞死亡联系起来的特异性近端激酶是合乎逻辑的。map激酶激酶激酶激酶(map4k)是mapk超家族中最近端的蛋白激酶。map4k4(hpk/gck样激酶[hgk]；nck相互作用激酶[nik])是一种与酿酒酵母(s.cerevisiae)中的ste20相关的丝氨酸-苏氨酸激酶。和它们的酵母直系同源物一样，哺乳动物ste20激酶控制细胞的运动性、命运、增殖和应激反应(dan等人,2001)。随着人map4k4的克隆，出现了首个这样的证据，即，将促炎性细胞因子与jnk联系起来的关键作用(yao等人,1999)。如今，将map4k4认为是炎症、细胞骨架功能尤其是细胞死亡的介体，对癌症和糖尿病具有非常确实的作用(chen等人,2014；lee等人,2017a；miled等人,2005；vitorino等人,2015；yang等人,2013；yue等人,2014)。

map4k4的病理生物学作用已通过其参与转化生长因子-β活化激酶-1(tak1/map3k7)、jnk(yao等人,1999)和p38mapk(zohn等人,2006)而表明，这些下游mapk均已报告了在心肌细胞中的促死亡功能(fiedler等人,2014；jacquet等人,2008；rose等人,2010；zhang等人,2000)。相比之下，raf-mek-erk途径具有心脏保护作用(fiedler等人,2014；lips等人,2004；rose等人,2010)。

丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶4(map4k4)在衰竭的人类心脏和相关啮齿动物模型中被活化。使用人诱导多能干细胞来源的心肌细胞(hipsc-cm)，我们证明氧化应激诱导的死亡需要map4k4。值得注意的是，通过map4k4短发夹rna进行的基因沉默赋予了对hipsc-cm的保护。因此，我们证明map4k4是心脏损伤的相关靶标。

本发明的某些实施例旨在提供药理学map4k4抑制剂。本发明的目的是拯救心肌细胞中的细胞存活、线粒体功能和钙循环。本发明明确地旨在抑制人心肌细胞死亡。本发明的目的还在于减少例如成人心脏在“心脏病发作”期间的损伤(缺血性损伤或缺血再灌注损伤)。本发明的某些实施例提供了相对于其他激酶和生物靶标对map4k4的选择性调节。在某些实施例中，本发明的化合物提供了相对于实验部分呈现的表34所列的激酶而言对map4k4的选择性。某些实施例试图实现本文讨论的一个或多个目的。

本发明提供了map4k4的药理学抑制剂，并证明抑制map4k4有效地保护完整的成人心肌，并且特别是保护心肌细胞免受损伤。进一步表明了map4k4在疾病中的功能，因此map4k4抑制剂的治疗适应症包括神经变性和骨骼肌病症(loh等人,2008；yang等人,2013；schroder等人,2015；wang等人,2013)。

技术实现要素：

根据本发明，提供了式(i)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中

w为ch或n；

x为n且y为c，或y为n且x为c；

z为h或-ch2op(＝o)(oh)2；

l¹和l³独立地选自键、-(cr^ar^b)m-、-o(cr^ar^b)m-或-nh(cr^ar^b)m-，其中m在每次出现时独立地选自1、2、3或4；

z¹为键、-nr^5a-、-o-、-c(o)-、-so2-、-so2nr^5a-、-nr^5aso2-、-c(o)nr^5a-、-nr^5ac(o)-、-c(o)o-或-nr^5ac(o)nr^5a-；

z²为键、-nr^5b-、-o-、-c(o)-、-so2-、-so2nr^5a-、-nr^5aso2-、-c(o)nr^5a-、-nr^5bc(o)-或-c(o)o-；

l²和l⁴独立地为键或-(cr^cr^d)n-，其中n在每次出现时独立地选自1、2、3或4；

r¹选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、c1-6卤代烷基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-op(＝o)(oh)2、-c(o)r^6a、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系，

其中这些杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)r⁷和-nr⁸c(o)r⁷；

r²选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、c1-6卤代烷基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-op(＝o)(oh)2、-c(o)r^6a、-nr^5bc(o)o-c1-6烷基、苯基、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系，

其中这些苯基、杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)or^g和-nr⁸c(o)r⁷；

r³和r⁴独立地选自h、卤代、-cn和c1-6烷基；

r^5a和r^5b在每次出现时独立地选自：h、c1-6烷基或c3-6环烷基；

r^6a和r^6b在每次出现时独立地选自：h、c1-6烷基、-or^e取代的c1-6烷基、-nr^er^f取代的c1-6烷基、和c3-6环烷基；

r⁷选自h、-or^g、c1-6烷基和c3-6环烷基；

r⁸选自h和c1-6烷基；

r^a、r^b、r^c和r^d在每次出现时独立地选自：h、卤代、c1-6烷基和-or^h，或r^a和r^b或r^c和r^d与它们所附接的原子一起形成3至6元环烷基环或含有1或2个o、n或s原子的3至6元杂环烷基环，其中该环烷基环未经取代或被1或2个卤代基团取代；以及

r^e、r^f、r^g和r^h在每次出现时独立地选自h或c1-6烷基，

其条件是该式(i)的化合物不是选自以下的化合物：

在本发明的一个实施例中，式(i)的化合物是式(i′)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中

x为n且y为c，或y为n且x为c；

l¹和l³独立地选自键、-(cr^ar^b)m-、-o(cr^ar^b)m-或-nh(cr^ar^b)m-，其中m在每次出现时独立地选自1、2、3或4；

z¹为键、-nr^5a-、-o-、-c(o)-、-so2-、-so2nr^5a-、-nr^5aso2-、-c(o)nr^5a-、-nr^5ac(o)-、-c(o)o-或-nr^5ac(o)nr^5a-；

z²为键、-nr^5b-、-o-、-c(o)-、-so2-、-so2nr^5a-、-nr^5aso2-、-c(o)nr^5a-、-nr^5bc(o)-或-c(o)o-；

l²和l⁴独立地为键或-(cr^cr^d)n-，其中n在每次出现时独立地选自1、2、3或4；

r¹选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、c1-6卤代烷基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-c(o)r^6a、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系，

其中这些杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：c1-6烷基、氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)r⁷和-nr⁸c(o)r⁷；

r²选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、c1-6卤代烷基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-c(o)r^6a、-nr^5bc(o)o-c1-6烷基、苯基、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系，

其中这些苯基、杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)or^g和-nr⁸c(o)r⁷；

r³和r⁴独立地选自h、卤代、-cn和c1-6烷基；

r^5a和r^5b在每次出现时独立地选自：h、c1-6烷基或c3-6环烷基；

r^6a和r^6b在每次出现时独立地选自：h、c1-6烷基、-or^e取代的c1-6烷基、-nr^er^f取代的c1-6烷基、和c3-6环烷基；

r⁷选自h、-or^g、c1-6烷基和c3-6环烷基；

r⁸选自h和c1-6烷基；

r^a、r^b、r^c和r^d在每次出现时独立地选自：h、卤代、c1-6烷基和-or^h，或r^a和r^b或r^c和r^d与它们所附接的原子一起形成3至6元环烷基环或含有1或2个o、n或s原子的3至6元杂环烷基环，其中该环烷基环未经取代或被1或2个卤代基团取代；以及

r^e、r^f、r^g和r^h在每次出现时独立地选自h或c1-6烷基，

其条件是式(i)的化合物不是如上定义的化合物。

在实施例中，本发明的化合物具有以下条件：当y为n且x为c时，则当-l¹-z¹-l²-r¹为h时-l³-z²-l⁴-r²不可以是ome，并且

当x为n且y为c时，则当-l³-z²-l⁴-r²为h、卤代、甲基或ome时-l¹-z¹-l²-r¹不可以是h、卤代、甲基、三氟甲基、ome、oet、-och2ch2nhch2ch2oh、-so2nh2或so2nme2。

在实施例中，本发明的化合物具有以下条件：当y为n，x为c，w为n，r³为h且r⁴为h时，则当-l¹-z¹-l²-r¹为h时-l³-z²-l⁴-r²不可以是ome，并且

当x为n，y为c，w为n，r³为h且r⁴为h时，则当-l³-z²-l⁴-r²为h、卤代、甲基或ome时-l¹-z¹-l²-r¹不可以是h、卤代、甲基、三氟甲基、ome、oet、-och2ch2nhch2ch2oh、-so2nh2或so2nme2。

在实施例中，本发明的化合物具有以下条件：(任选地，如果r³为h且r⁴为h，则)-l¹-z¹-l²-r¹和-l³-z²-l⁴-r²不可以同时选自以下定义：

-l¹-z¹-l²-r¹不可以选自：h、卤代、c1-6烷基、-so2nr^6ar^6b或-o-c1-6烷基；并且

-l³-z²-l⁴-r²不可以选自：h、卤代、c1-6烷基、-so2nr^6ar^6b或-o-c1-6烷基。

式(i)中的虚键表示双键存在的可能性。如技术人员将理解的，两个虚键不可以同时表示双键；一个虚键将是双键，而另一个虚键将是单键。当x或y为c时，双键将来源于x或y。为了避免疑问，式(i)的化合物可以是式(ia)或(ib)的化合物，这两种化合物展示出式(i)中虚键的两种可能构型：

在实施例中，l¹由键或-ch2-表示。

在实施例中，z¹为键、-o-、-c(o)-、-so2-或-nr^5ac(o)-。

在实施例中，l²为键、-ch2-、-ch2ch2-、-(ch2)3-、-ch2ch(oh)ch2-或

在实施例中，r¹选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、c1-6卤代烷基、-nr^6ar^6b、-or^6a、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系(任选为4、5或6元)，其中这些杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：c1-6烷基、-or^6a和氧代。

在实施例中，l¹由键或-ch2-表示；z¹为键、-o-、-c(o)-、-so2-或-nr^5ac(o)-；l²为键、-ch2-、-ch2ch2-、-(ch2)3-、-ch2ch(oh)ch2-或

并且r¹选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、-nr^6ar^6b、-or^6a、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系(任选为4、5或6元)，其中这些杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：c1-6烷基、-or^6a和氧代。

在实施例中，l¹由键表示。

在实施例中，z¹由键或-o-表示。

在实施例中，l²为键、-ch2-、-ch2ch2-、-(ch2)3-或-ch2ch(oh)ch2-。

在实施例中，r¹选自h、卤代、c1-6烷基、-nr^6ar^6b或-or^6a。任选地，r^6a和r^6b可以独立地选自：h或c1-6烷基。

在实施例中，r¹为h、-cf3、chf2、f、-oh或-nme2。

在实施例中，l¹由键表示；z¹由键或-o-表示；l²为键、-ch2-、-ch2ch2-、-(ch2)3-或-ch2ch(oh)ch2-；并且r¹选自h、卤代、-nr^6ar^6b或-or^6a。任选地，r^6a和r^6b可以独立地选自：h或c1-6烷基，任选地r¹为h、-cf3、chf2、f、-oh或-nme2。

在实施例中，r³为h、f或cn。

在实施例中，l³由键或-ch2-表示。

在实施例中，z²为键、-nr^5b-、-o-、-c(o)-或-nr^5ac(o)-。

在实施例中，l⁴由以下表示：键、-ch2-、-ch2ch2-、-ch2c(me)2-、-ch(me)ch2--ch2ch2c(me)2-、-(ch2)3-、-ch2ch(oh)ch2-、-ch2ch(ome)ch2-、-ch2ch(me)--ch2ch(oh)ch(oh)-、-ch2ch2ch(oh)-、-cf2ch2-、-ch2ch(ch3)2ch2-、-ch2ch(oh)c(me)2-或

在实施例中，r²选自：h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-c(o)r^6a、-nr^5bc(o)o-c1-6烷基以及3至8元杂环烷基环系，

其中这些杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)r⁷和-nr⁸c(o)r⁷。

在实施例中，l³由键或-ch2-表示；z²为键、-nr^5b-、-o-、-c(o)-或-nr^5ac(o)-；l⁴由以下表示：键、-ch2-、-ch2ch2-、-ch2c(me)2-、-ch2ch2c(me)2-、-(ch2)3-、-ch2ch(oh)ch2-或-ch2ch(ome)ch2-；并且r²选自：h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-c(o)r^6a、-nr^5bc(o)o-c1-6烷基以及3至8元杂环烷基环系，

其中这些杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)r⁷和-nr⁸c(o)r⁷。

在实施例中，l³由键表示。

在实施例中，z²为键或-o-。

在实施例中，l⁴由键、-ch2ch2-、-ch2ch(oh)ch2-、-ch2ch2c(me)2-或-(ch2)3-表示。

在实施例中，r²选自：-or^6a、-op(＝o)(oh)2、-nr^6ar^6b和3至8元杂环烷基环系，其中这些杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基和or^6a取代的c1-6烷基。任选地，r^6a和r^6b可以独立地选自：h或c1-6烷基。

在实施例中，l³由键表示；z²为键或-o-；l⁴由键、-ch2ch2-、-ch2ch(oh)ch2-、-ch2ch2c(me)2-或-(ch2)3-表示；并且r²选自：-or^6a、-op(＝o)(oh)2、-nr^6ar^6b和3至8元(任选地5或6元)杂环烷基环系，其中这些杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基和or^6a取代的c1-6烷基。任选地，r^6a和r^6b可以独立地选自：h或c1-6烷基。

在实施例中，r²的杂环烷基环上的1或2个取代基独立地选自：氧代、甲基、乙基、oh、ome、-ch2c(me)2oh、-oh取代的乙基和nme2取代的乙基。

在实施例中，r²选自：h、me、-op(＝o)(oh)2、-ome、-oh、-oet、-nh2、-nhme、-nme2、-nhc(o)o-叔丁基、咪唑基、吗啉基、n-甲基哌嗪基、吡咯烷酮、哌啶酮、咪唑烷酮、n-甲基咪唑烷酮、氮杂环丁烷基、n-甲基氮杂环丁烷基、吗啉酮或

在实施例中，l³由键表示；z²为键或-o-；l⁴由键、-ch2ch2-、-ch2ch(oh)ch2-、-ch2ch2c(me)2-或-(ch2)3-表示；并且r2选自：h、me、-op(＝o)(oh)2、-ome、-oh、-oet、-nh2、-nhme、-nme2、-nhc(o)o-叔丁基、咪唑基、吗啉基、n-甲基哌嗪基、吡咯烷酮、哌啶酮、咪唑烷酮、n-甲基咪唑烷酮、氮杂环丁烷基、n-甲基氮杂环丁烷基、吗啉酮或

其中这些杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、甲基、乙基、oh、ome、-oh取代的乙基和nme2取代的乙基。

在实施例中，式(i)的化合物可以是式(iia)或(iib)的化合物：

其中

r¹¹选自：h、卤代、c1-6烷基、-o-c1-6卤代烷基、c2-6烯基、-(ch2)or^y、-(ch2)onr^zr^6a、-(ch2)oor^z、-(ch2)oso2r^6a、-(ch2)oso2nr^6ar^6b、-(ch2)oc(o)nr^zr^6a、-(cr^ar^b)pop(＝o)(oh)2或-(ch2)oc(o)or^z，

r^y选自5或6元杂芳基环或者5或6元杂环烷基环，

其中这些杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)r⁷和-nr⁸c(o)r⁷；

r^z选自h、c1-6烷基、-c(o)r^6a、-c(o)or^6a、-c(o)(cr^ar^b)pnr^6ar^6b、(cr^ar^b)por^6a、(cr^ar^b)pnr^6ar^6b、(cr^ar^b)pr^v；以及

r^v选自3至8元杂环烷基环系，其中该杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、c1-6烷基或卤代，以及

r¹²选自：h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、-(ch2)or^y2、-(ch2)onr^z2r^6a、-(ch2)oor^z2、-(ch2)oc(o)nr^z2r^6a、-(cr^ar^b)pop(＝o)(oh)2或-(ch2)oc(o)or^z2，

r^y2选自5或6元杂芳基环或者5或6元杂环烷基环，

其中这些苯基、杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)or^g和-nr⁸c(o)r⁷；

r^z2选自h、c1-6烷基、-c(o)r^6a、-c(o)or^6a、-c(o)(cr^ar^b)nnr^6ar^6b、(cr^ar^b)por^6a、(cr^ar^b)pnr^6ar^6b、(cr^ar^b)pr^v2或-c(o)(cr^ar^b)pr^v2；

r^v2选自3至8元杂环烷基环系，其中该杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基或or^6a取代的c1-6烷基；

o选自0、1、2或3；以及

p选自0、1、2或3。

在实施例中，l¹-z¹-l²-r¹为r¹¹。同样，r¹¹可以表示l¹-z¹-l²-r¹。

在实施例中，l³-z²-l⁴-r²为r¹²。同样，r¹²可以表示l³-z²-l⁴-r²。

技术人员将认识到，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹取代到苯环上。苯环也被含y和x的双环取代。苯环上-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹基团的取代是相对于含y和x的双环定义的。因而，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹可以取代在苯环的2、3或4位(分别也称为邻位、间位或对位)上。

优选地，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹取代在苯环的3或4位。因此，式(i)的化合物可以是式(iiia)的化合物(其中r¹¹(或-l¹-z¹-l²-r¹代替r¹¹)取代在4位)，或(iiib)的化合物(其中r¹¹(或-l¹-z¹-l²-r¹代替r¹¹)取代在3位)：

同样，技术人员将认识到，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²取代到苯环上。苯环也被含y和x的双环取代。苯环上-l³-z²-l⁴-r²或r¹²基团的取代是相对于含y和x的双环定义的。因而，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²可以取代在苯环的2、3或4位(分别也称为邻位、间位或对位)上。

优选地，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²取代在苯环的3或4位。因此，式(i)的化合物可以是式(iva)的化合物(其中r¹²(或-l³-z²-l⁴-r²代替r¹²)取代在4位)，或(ivb)的化合物(其中r¹²(或-l³-z²-l⁴-r²代替r¹²)取代在3位)：

在实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自：h、卤代、-or^6a、-(cr^ar^b)m-5或6元杂芳基环、-so2-c1-6烷基、-c(o)or^6a、-c(o)nr^6ar^6b、-o(cr^ar^b)n-nr^6ar^6b和-o(cr^ar^b)n-3至8元杂环烷基环，其中这些杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：c1-6烷基、氧代或卤代。任选地，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²也可以为h。

在实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自：h、卤代、-or^6a、-o-c1-6卤代烷基、-(cr^ar^b)o-5或6元杂芳基环、-(cr^ar^b)o-5或6元杂芳基环、-so2-c1-6烷基、-c(o)or^6a、-c(o)nr^6ar^6b、-nr^6ac(o)r^6a、-(ch2)oso2nr^6ar^6b、-o(cr^ar^b)n-nr^6ar^6b和-o(cr^ar^b)n-3至8元杂环烷基环、-c(o)-3至8元杂环烷基环，其中这些杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：c1-6烷基、氧代、or^6a或卤代。任选地，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²也可以为h。

优选地，在实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自：h、卤代、-(cr^ar^b)mor^6a、-or^6a和-o(cr^ar^b)m-nr^6ar^6b。

任选地，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自：卤代、-(cr^ar^b)mor^6a、-or^6a和-o(cr^ar^b)m-nr^6ar^6b；并且-l³-z²-l⁴-r²或r¹²为h。

在实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²选自：卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、-cn、-or^6a、-nr^6ar^6b、-(cr^ar^b)m-苯基、-(cr^ar^b)m-5或6元杂芳基环、-(cr^ar^b)mnr^6ar^6b、-(cr^ar^b)mor^6a、-(cr^ar^b)moc(o)r^6a、-(cr^ar^b)mc(o)or^6a、-(cr^ar^b)mc(o)nr^6ar^6b、-(cr^ar^b)mnr^5ac(o)-c1-6烷基、-(cr^ar^b)mnr^5ac(o)or^6a、-o(cr^ar^b)nor^6a、-o(cr^ar^b)nnr^5bc(o)oc1-6烷基、3至8元杂环烷基环、-o(cr^ar^b)n-3至8元杂环烷基环、-o(cr^ar^b)n-nr^6ar^6b、-nr^5a(cr^cr^d)nor^6a、-c(o)nr^6ar^6b、-nr^5bc(o)-c1-6烷基、-nr^5bc(o)(cr^cr^d)nnr^6ar^6b、-nr^5bc(o)(cr^cr^d)nor^6a和-nr^5bc(o)(cr^cr^d)n-3至8元杂环烷基环，

其中这些苯基、杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)r⁷和-nr⁸c(o)r⁷。任选地，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹可以为h。

优选地，在实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²选自：-；-o(cr^ar^b)nor^6a；-o(cr^ar^b)n-nr^6ar^6b；被1或2个选自以下的基团取代的3至8元杂环烷基环：氧代、c1-6烷基、c2-6烯基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基或or^6a取代的c1-6烷基；-被1或2个选自以下的基团取代的o(cr^ar^b)n-3至8元杂环烷基环：氧代或c1-6烷基。任选地，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹也可以为h。

在实施例中，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自：h、f、-ome、-c(o)oh、-c(o)oet、-c(o)nhme、-c(o)nh2、-so2me、-ch2-咪唑基-o(ch2)3nme2、-och2吡咯烷基、-och2-n-甲基吡咯烷基、-o(ch2)3-吗啉基或-och2ch(oh)ch2-吗啉基。

在实施例中，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自：h、me、cl、f、-ome、-ch2oh、-oh、ocf3、ochf2、-och2c(me)2op(＝o)(oh)2、-och2ch2c(me)2op(＝o)(oh)2、-c(o)oh、-c(o)oet、-c(o)nhme、-c(o)nh2、-so2me、-so2nh2、-c(o)nh2、-nhc(o)me、-c(o)nme2、-c(o)-n-甲基哌嗪基、-o(ch2)2oh、-ch2-咪唑基-o(ch2)3nme2、-och2-吡咯烷基、-och2-n-甲基吡咯烷基、-o(ch2)3-吗啉基、-och2ch(oh)ch2-吗啉基或

在实施例中，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自h、-cn、-c(o)oh、-c(o)oet、-o(ch2)3nme2、-och2吡咯烷基、-och2-n-甲基吡咯烷基、-o(ch2)3-吗啉基或-och2ch(oh)ch2-吗啉基。任选地，当x为c且y为n时，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹具有前一句中的定义。

在实施例中，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自h、-ch2oh、-ocf3、-ochf2、-so2nh2、-c(o)oh、-c(o)oet、-c(o)nh2、-nhc(o)me、-o(ch2)2oh、-o(ch2)3nme2、-och2-吡咯烷基、-och2-n-甲基吡咯烷基、-o(ch2)3-吗啉基或-och2ch(oh)ch2-吗啉基或

任选地，当x为c且y为n时，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹具有前一段中的定义。例如，在化合物是式(ib)的化合物的实施例中，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自本段中列举的组。

在实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自h、f、-ome、-c(o)oh、-c(o)nhme、-c(o)nh2、-so2me或-ch2-咪唑基。任选地，当x为n且y为c时，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自f、ome、-c(o)oh、-c(o)nhme、-c(o)nh2、-so2me或-ch2咪唑基。

在实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自h、f、-ome、-c(o)oh、-c(o)nhme、-c(o)nh2、-c(o)nme2、-so2me、-c(o)-n-甲基哌嗪基或-ch2-咪唑基。任选地，当x为n且y为c时，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自f、ome、-c(o)oh、-c(o)nhme、-c(o)nh2、-so2me或-ch2咪唑基。例如，在化合物是式(ia)的化合物的实施例中，l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹选自本段中列举的组。

在实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²选自：h、f、cl、-ome、cn、甲基、nh2、-ch2-苯基、-ch2-咪唑基、-ch2nh2、-ch2nme2、-ch2nhme、-ch2nhc(o)me、-ch2n(me)c(o)ot-bu、-ch2oh、-ch2ch2oh、-ch2ch2ome、-ch2ch2nhme、-(ch2)3oh、-(ch2)3ome、-ch2c(me2)oh、-ch2ch2oc(o)me、-ch2c(o)ome、-ch2c(o)oh、-ch2c(o)oet、-ch2c(o)nh2、-ome、-och2ch2oh、-och2ch2ome、-och2c(me)2oh、-och2ch2c(me)2oh、-och2ch(oh)ch2oh、-och2c(me2)oh、-och2ch2nh2、-och2ch2nme2、-o(ch2)3nme2、-och2ch(oh)ch2nme2、-och2ch2nhc(o)o^tbu、-och2ch(oh)ch2ome、-och2ch(oh)ch(oh)me、-och2ch2ch(oh)me、-ocf2ch2oh、-och2c(me)2op(＝o)(oh)2、-och2ch(me)2ch2oh、-och2ch2c(me)2nh2、-och2c(me)2nh2、-och2ch(oh)c(me)2oh、-och2c(me)2ome、-och2ch2c(me)2op(＝o)(oh)2、-och(me)ch2ome、-och2ch(me)ome、-och2-氮杂环丁烷基、-och2-n-甲基氮杂环丁烷基、-o-n-乙基哌啶基、-o(ch2)3-吗啉基、-och2ch(oh)ch2-吗啉基、-och2ch(ome)ch2-吗啉基、-o(ch2)3-n-甲基哌嗪基、-och2ch(oh)ch2-n-甲基哌嗪基、-och2ch(oh)ch2-n-甲基哌嗪酮基、-o(ch2)3-n-甲基哌嗪酮基、-och2ch(oh)ch2-吗啉酮基、-och2ch(oh)ch2-吗啉酮基、-och2ch(oh)ch2-硫代吗啉-二酮基、-nhch2ch2oh、-n(me)ch2ch2oh、-nhch2ch2ome、-c(o)nhch2ch2nme2、-c(o)nhch2ch2oh、-nhc(o)me、-nhc(o)ch2oh、-nhc(o)ch2nh2、-nhc(o)ch2nhme、-nhc(o)ch2nme2、-nhc(o)ch2ch2nhme、-nhc(o)(ch2)3nme2、-nhc(o)ch2-吗啉基、-nhc(o)ch2-n-氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、羟基吡咯烷基、甲基哌嗪基、吡咯烷酮基、咪唑烷酮基、n-甲基咪唑烷酮基、哌啶酮基、

在实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²选自：h、f、cl、-ome、-ch2-咪唑基、-ch2oh、-ch2nh2、-ch2nme2、-ch2nhme、-ch2c(o)oh、-ch2c(o)oet、-ch2c(o)nh2、-ch2nhc(o)me、-ch2n(me)c(o)ot-bu、-ome、-och2ch2oh、-och2ch2ome、-och2c(me)2oh、-och2ch2c(me)2oh、-och2ch2nh2、-och2ch2nme2、-och2ch(oh)ch2nme2、-och2ch(oh)ch2ome、-och2ch(oh)ch(oh)me、-och2ch2ch(oh)me、-ocf2ch2oh、-och2c(me)2op(＝o)(oh)2、-och2ch(me)2ch2oh、-och2ch2c(me)2nh2、-och2c(me)2nh2、-och2ch(oh)c(me)2oh、-och2c(me)2ome、-och2ch2c(me)2op(＝o)(oh)2、-och(me)ch2ome、-och2ch(me)ome、-och2ch2nhc(o)o^tbu、-och2-氮杂环丁烷基、-och2-n-甲基氮杂环丁烷基、-o-n-乙基哌啶基、-o(ch2)3-吗啉基、-och2ch(oh)ch2-吗啉基、-och2ch(ome)ch2-吗啉基、-o(ch2)3-n-甲基哌嗪基、-c(o)nhch2ch2nme2、-c(o)nhch2ch2oh、-nhc(o)me、-nhc(o)ch2oh、-nhc(o)ch2nh2、-nhc(o)ch2nhme、-nhc(o)ch2nme2、-nhc(o)ch2ch2nhme、-nhc(o)(ch2)3nme2、-nhc(o)ch2-吗啉基、-nhc(o)ch2-n-甲基哌嗪基、吡咯烷酮基、咪唑烷酮基、n-甲基咪唑烷酮基、哌啶酮基、

任选地，当x为n且y为c时，l³-z²-l⁴-r²或r¹²具有前一句中的定义。例如，在化合物是式(ia)的化合物的实施例中，l³-z²-l⁴-r²或r¹²选自本段中列举的组。

在实施例中，l³-z²-l⁴-r²或r¹²为h或ome。任选地，当x为c且y为n时，l³-z²-l⁴-r²或r¹²具有前一句中的定义。例如，在化合物是式(ib)的化合物的实施例中，l³-z²-l⁴-r²或r¹²选自本段中列举的组。

在实施例中，l³-z²-l⁴-r²或r¹²选自：-me、-f、-、-nh2、-ch2-苯基、-ch2ch2oh、-ch2ch2ome、-ch2ch2nhme、-(ch2)3oh、-(ch2)3ome、-ch2ch2oc(o)me、-ch2c(o)ome、-ome、-och2ch2ome、-o(ch2)3nme2、-och2c(me)2oh、-och2ch2c(me)2oh、-o(ch2)3-吗啉基、-o(ch2)3-n-甲基吗啉基、-och2ch(oh)ch2-吗啉基、-och2ch(ome)ch2-吗啉基、-nhch2ch2oh、-n(me)ch2ch2oh、-nhch2ch2ome、-nhc(o)me、-nhc(o)ch2ch2nhme、氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、羟基吡咯烷基、

任选地，当x为n且y为c时，l³-z²-l⁴-r²或r¹²具有前一句中的定义。例如，在化合物是式(ia)的化合物的实施例中，l³-z²-l⁴-r²或r¹²选自本段中列举的组。

在实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²为-och2ch(oh)ch2oh、-och2c(me2)oh、-ch2c(me2)oh、-och2ch(oh)ch2-n-甲基哌嗪基、-och2ch(oh)ch2-n-甲基哌嗪酮基、-och2ch(oh)ch2-吗啉酮基、-och2ch(oh)ch2-吗啉酮基、-och2ch(oh)ch2-硫代吗啉-二酮基或-och2ch(oh)ch2-吗啉基。

在优选的实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹为h、f、-ch2oh、-och2ch2nme2、-o(ch2)3nme2、-och2ch(oh)ch2nme2或-och2ch2oh。

在优选的实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹取代在苯环的3位(例如，如式(iiib)所示)，并且为f或-ch2oh。

在优选的实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹取代在苯环的4位(例如，如式(iiia)所示)，并且选自：-och2ch2nme2、-o(ch2)3nme2、-och2ch(oh)ch2nme2和-och2ch2oh。

在优选的实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²选自：-、-och2ch2oh、-och2ch2ome、-och2ch(oh)ch2oh、-och2ch2c(me)2oh、吡咯烷酮基、咪唑烷酮基、n-甲基咪唑烷酮基、-o(ch2)3-吗啉基、-o(ch2)3-n-甲基哌嗪基、-o(ch2)3-n-甲基哌嗪酮基、-och2ch(oh)ch2-吗啉酮基、-och2ch(oh)ch2-n-甲基哌嗪基、-och2ch(oh)ch2-n-哌嗪酮基、-o(ch2)3nme2,-och2ch(oh)ch2nme2、

在优选的实施例中，r⁴取代在苯环的3位(例如，该取代模式以式(ivb)中的r¹²为例)并且为-cn。

在实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²取代在苯环的4位(例如，如式(iva)所示)，并且选自：-och2ch2oh、-och2ch2ome、-och2ch(oh)ch2oh、-och2ch2c(me)2oh、吡咯烷酮基、咪唑烷酮基、n-甲基咪唑烷酮基、-o(ch2)3-吗啉基、-o(ch2)3-n-甲基哌嗪基、-o(ch2)3-n-甲基哌嗪酮基、-och2ch(oh)ch2-吗啉酮基、-och2ch(oh)ch2-n-甲基哌嗪基、-och2ch(oh)ch2-n-哌嗪酮基、-o(ch2)3nme2、-och2ch(oh)ch2nme2、

在实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²是如上定义的除h以外的基团，而-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹为h。在替代性实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹是如上定义的除h以外的基团，而-l³-z²-l⁴-r²或r¹²为h。

在一个实施例中，本发明的化合物可以是根据式(va)或(vb)的化合物：

在一个实施例中，本发明的化合物可以是根据式(via)或(vib)的化合物：

在优选的实施例中，-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹为-o(cr^ar^b)1-3-r¹。

在优选的实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²为-o(cr^ar^b)1-3-r²。

在实施例中，w为n。在实施例中，w为ch。在实施例中，w为ch，x为n且y为c。

在实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²为-(ch2)oo(cr^ar^b)por^6a、-(ch2)oo(cr^ar^b)pnr^6ar^6b、未取代或被1或2个选自以下的基团取代的5或6元杂环烷基环：氧代、卤代、or^6a和c1-6烷基。在实施例中，-l³-z²-l⁴-r²或r¹²为-och2ch2ome、-och2ch2c(me)2oh或吡咯烷酮。

在实施例中，w为ch，x为n，y为c且-l³-z²-l⁴-r²或r¹²为-och2ch2ome、-och2ch2c(me)2oh或吡咯烷酮。

在某些实施例中，w为ch时，则-l¹-z¹-l²-r¹或r¹¹为h。

在一个实施例中，本发明的化合物是根据式(xx)的化合物及其药学上可接受的盐：

其中

x为n且y为c，或y为n且x为c；

r^x和r^x2为(a)或(b)：

(a)r^x选自：h、-cn、-(ch2)mr^y、-(ch2)mnr^zr^6a、-(ch2)1-3or^z、-(ch2)mso2r^6a、-(ch2)mc(o)nr^zr^6a、-(ch2)mc(o)or^z，

r^y选自5或6元杂芳基环；

r^z选自h、c1-6烷基、-c(o)r^6a、-c(o)or^6a、-c(o)(cr^ar^b)nnr^6ar^6b、(cr^ar^b)nor^6a、(cr^ar^b)nnr^6ar^6b、(cr^ar^b)nr^v；以及

r^v选自3至8元杂环烷基环系，其中该杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、c1-6烷基或卤代；以及

r^x2选自：h、卤代、c1-6烷基、-cn、-(ch2)mr^y2、-(ch2)mnr^z2r^6a、-(ch2)mor^z2、-(ch2)mc(o)nr^z2r^6a、-(ch2)mc(o)or^z2，

r^y2选自5或6元杂芳基环；

r^z2选自h、c1-6烷基、-c(o)r^6a、-c(o)or^6a、-c(o)(cr^ar^b)nnr^6ar^6b、(cr^ar^b)nor^6a、(cr^ar^b)nnr^6ar^6b、(cr^ar^b)nr^v2或-c(o)(cr^ar^b)nr^v2；以及

r^v2选自3至8元杂环烷基环系，其中该杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基或or^6a取代的c1-6烷基；

或者

(b)r^x选自：h、卤代、c1-6烷基、-cn、-(ch2)mr^y、-(ch2)mnr^zr^6a、-(ch2)mor^z、-(ch2)mso2r^6a、-(ch2)mc(o)nr^zr^6a、-(ch2)mc(o)or^z，

r^y选自5或6元杂芳基环；

r^z选自h、c1-6烷基、-c(o)r^6a、-c(o)or^6a、-c(o)(cr^ar^b)nnr^6ar^6b、(cr^ar^b)nor^6a、(cr^ar^b)nnr^6ar^6b、(cr^ar^b)nr^v；以及

r^v选自3至8元杂环烷基环系，其中该杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、c1-6烷基或卤代；以及

r^x2选自：h、-cn、-(ch2)mr^y2、-(ch2)mnr^z2r^6a、-(ch2)1-3or^z2、-(ch2)mc(o)nr^z2r^6a、-(ch2)mc(o)or^z2，

r^y2选自5或6元杂芳基环；

r^z2选自h、c1-6烷基、-c(o)r^6a、-c(o)or^6a、-c(o)(cr^ar^b)nnr^6ar^6b、(cr^ar^b)nor^6a、(cr^ar^b)nnr^6ar^6b、(cr^ar^b)nr^v2或-c(o)(cr^ar^b)nr^v2；以及

r^v2选自3至8元杂环烷基环系，其中该杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基或or^6a取代的c1-6烷基；

其条件是r^x和r^x2不都是h，也不都是卤代；

m选自1、2或3；

n选自1、2或3；

r³和r⁴独立地选自h、卤代、-cn和c1-6烷基；

r^6a和r^6b在每次出现时均独立地选自：h和c1-6烷基；

r^a、r^b、r^c和r^d在每次出现时独立地选自：h、卤代、c1-6烷基和-or^e；以及

r^e选自h或c1-6烷基。

在本发明的一个优选实施例中，式(i)的化合物是选自以下的化合物：

前一段和下一段中的任何特定化合物都可以是前药，其中该前药是在化合物的双环核的nh上有-ch2op(＝o)(oh)2取代(置换h)的化合物。替代性地，在化合物包含游离oh或ome的情况下，h或me可以用-p(＝o)(oh)2置换。下面展示了本发明的潜在前药的实例。前药可以用于本发明的一部分。本文披露为前药的化合物也可以对map4k4具有活性。因此，本文披露为前药的那些化合物也可以是本发明的化合物。

本发明还考虑到根据式(i)的化合物可以选自：

根据本发明，提供了用作药剂的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中

w为ch或n；

x为n且y为c，或y为n且x为c；

z为h或-ch2op(＝o)(oh)2；

l¹和l³独立地选自键、-(cr^ar^b)m-、-o(cr^ar^b)m-或-nh(cr^ar^b)m-，其中m在每次出现时独立地选自1、2、3或4；

z¹为键、-nr^5a-、-o-、-c(o)-、-so2-、-so2nr^5a-、-nr^5aso2-、-c(o)nr^5a-、-nr^5ac(o)-、-c(o)o-或-nr^5ac(o)nr^5a-；

z²为键、-nr^5b-、-o-、-c(o)-、-so2-、-so2nr^5a-、-nr^5aso2-、-c(o)nr^5a-、-nr^5bc(o)-或-c(o)o-；

l²和l⁴独立地为键或-(cr^cr^d)n-，其中n在每次出现时独立地选自1、2、3或4；

r¹选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、c1-6卤代烷基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-op(＝o)(oh)2、-c(o)r^6a、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系，

其中这些杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)r⁷和-nr⁸c(o)r⁷；

r²选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、c1-6卤代烷基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-p(＝o)(oh)2、-c(o)r^6a、-nr^5bc(o)o-c1-6烷基、苯基、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系，

其中这些苯基、杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)or^g和-nr⁸c(o)r⁷；

r³和r⁴独立地选自h、卤代、-cn和c1-6烷基；

r^5a和r^5b在每次出现时独立地选自：h、c1-6烷基或c3-6环烷基；

r^6a和r^6b在每次出现时独立地选自：h、c1-6烷基、c1-6烷基、-or^e取代的-p(＝o)(oh)2、-nr^er^f取代的c1-6烷基、和c3-6环烷基；

r⁷选自h、-or^g、c1-6烷基和c3-6环烷基；

r⁸选自h和c1-6烷基；

r^a、r^b、r^c和r^d在每次出现时独立地选自：h、卤代、c1-6烷基和-or^h，或r^a和r^b或r^c和r^d与它们所附接的原子一起形成3至6元环烷基环或含有1或2个o、n或s原子的3至6元杂环烷基环，其中该环烷基环未经取代或被1或2个卤代基团取代；以及

r^e、r^f、r^g和r^h在每次出现时独立地选自h或c1-6烷基。

在本发明的一个实施例中，用作药剂的式(i)的化合物是式(i′)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中

x为n且y为c，或y为n且x为c；

l¹和l³独立地选自键、-(cr^ar^b)m-、-o(cr^ar^b)m-或-nh(cr^ar^b)m-，其中m在每次出现时独立地选自1、2、3或4；

z¹为键、-nr^5a-、-o-、-c(o)-、-so2-、-so2nr^5a-、-nr^5aso2-、-c(o)nr^5a-、-nr^5ac(o)-、-c(o)o-或-nr^5ac(o)nr^5a-；

z²为键、-nr^5b-、-o-、-c(o)-、-so2-、-so2nr^5a-、-nr^5aso2-、-c(o)nr^5a-、-nr^5bc(o)-或-c(o)o-；

l²和l⁴独立地为键或-(cr^cr^d)n-，其中n在每次出现时独立地选自1、2、3或4；

r¹选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、c1-6卤代烷基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-c(o)r^6a、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系，

其中这些杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：c1-6烷基、氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)r⁷和-nr⁸c(o)r⁷；

r²选自h、卤代、c1-6烷基、c2-6烯基、c1-6卤代烷基、-nr^6ar^6b、-or^6a、-c(o)r^6a、-nr^5bc(o)o-c1-6烷基、苯基、5或6元杂芳基环或3至8元杂环烷基环系，

其中这些苯基、杂芳基和杂环烷基环未经取代或被1或2个选自以下的基团取代：氧代、卤代、or^6a、c1-6烷基、nr^6ar^6b取代的c1-6烷基、or^6a取代的c1-6烷基、-c(o)or^g和-nr⁸c(o)r⁷；

r³和r⁴独立地选自h、卤代、-cn和c1-6烷基；

r^5a和r^5b在每次出现时独立地选自：h、c1-6烷基或c3-6环烷基；

r^6a和r^6b在每次出现时独立地选自：h、c1-6烷基、-or^e取代的c1-6烷基、-nr^er^f取代的c1-6烷基、和c3-6环烷基；

r⁷选自h、-or^g、c1-6烷基和c3-6环烷基；

r⁸选自h和c1-6烷基；

r^a、r^b、r^c和r^d在每次出现时独立地选自：h、卤代、c1-6烷基和-or^h，或r^a和r^b或r^c和r^d与它们所附接的原子一起形成3至6元环烷基环或含有1或2个o、n或s原子的3至6元杂环烷基环，其中该环烷基环未经取代或被1或2个卤代基团取代；以及

r^e、r^f、r^g和r^h在每次出现时独立地选自h或c1-6烷基。

上面的式(i)或式(i′)的化合物可以用于治疗方法中。同样地，一种治疗方法可以包括将治疗有效量的式(i)或式(i′)的化合物施用给有需要的患者的步骤。用于该方法中的式(i)或式(i′)的化合物不受以上针对化合物本身提供的条件的限制。然而，在实施例中，用于该治疗方法中的式(i)或式(i′)的化合物可受以上讨论的条件的限制。

有或无条件的式(i)或式(i′)的化合物可用于治疗以下讨论的任何病状的方法。

治疗用途及应用

根据另一方面，本发明提供了用作药剂的本发明化合物或其药学上可接受的盐。

本发明还提供了用于治疗由map4k4介导的疾病的本发明化合物。因此，本发明考虑了一种治疗由map4k4介导的疾病的方法，其中该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明化合物。

本发明还提供了用于治疗心肌梗塞(俗称，由于动脉粥样硬化、冠状动脉血栓形成、冠状动脉异常或其他对于向心脏的血流或氧气和养分递送的干扰引起的“心脏病发作”)的map4k4抑制剂。本发明的这个方面可以是治疗梗塞的方法，其中该方法包括施用治疗有效量的map4k4抑制剂。这个方面还可以提供用于治疗梗塞的方法中，作为恢复冠状动脉血流的标准疗法(血管成形术、支架放置、血栓溶解)的辅助的map4k4抑制剂，但可能矛盾地受再灌注损伤所抵消。梗塞的治疗可构成梗塞的完全逆转或梗塞面积的减小。已知梗塞面积的减小会减轻向心力衰竭的后续进展(selker等人2017.amheartj188:18-25)。

在一个实施例中，map4k4抑制剂是本发明的化合物，其用于预防或治疗其他形式的心肌细胞损伤。这些包括但不限于药物诱导的心肌病(varga等人2015amjphysiolheartcircphysiol.2015年11月；309(9):h1453-67)，例如广泛使用的抗癌药[蒽环类(阿霉素(doxorubicin)/亚德里亚霉素(adriamycin))、顺铂、曲妥珠单抗(trastuzumab)(herceptin)、三氧化二砷(trisenox)、米托蒽醌(novantrone)、伊马替尼(gleevec)、贝伐单抗(avastin)、舒尼替尼(sunitin)和索拉非尼(nevaxar)]、抗病毒化合物叠氮胸苷(azt，齐多夫定(zidovudine))、几种口服抗糖尿病药[例如罗格列酮(avandia)]和违禁药物，诸如酒精、可卡因、去氧麻黄碱、摇头丸和合成大麻素(香料，k2)。

在一个实施例中，map4k4抑制剂是本发明的化合物，其用于预防或治疗任选由于心肺分流术导致的其他形式的心肌细胞损伤。

在一个实施例中，map4k4抑制剂是本发明的化合物，其用于预防或治疗慢性形式的心肌细胞损伤，诸如肥大型、扩张型或线粒体心肌病。这些包括由于以下原因引起的心肌病：遗传条件；高血压；先前心脏病发作造成心脏组织受损；慢性快速心率；心脏瓣膜问题；代谢失调，例如肥胖、甲状腺疾病或糖尿病；必需维生素或矿物质诸如硫胺素(维生素b1)的营养性缺乏；妊娠并发症；饮酒；使用可卡因、安非他命或合成代谢类固醇；放射疗法治疗癌症；某些可能损伤心脏并触发心肌病的感染；血色沉着病；结节病；淀粉样变性；和结缔组织病症。

在一个实施例中，map4k4抑制剂是本发明的化合物，其用于预防或治疗其他形式的缺血性损伤或缺血再灌注损伤，包括缺血性中风、肾动脉闭塞和全心缺血再灌注损伤(心搏停止)。

在一个实施例中，map4k4抑制剂是本发明的化合物，其用于预防或治疗心肌细胞坏死或心肌细胞凋亡。

在实施例中，提供了本发明的化合物，用于治疗以下疾病的方法中：心肌细胞损伤、因心肺分流术引起的心肌细胞损伤、慢性形式的心肌细胞损伤、肥厚型心肌病、扩张型心肌病、线粒体心肌病、因遗传条件引起的心肌病；因高血压引起的心肌病；因先前心脏病发作造成心脏组织受损而引起的心肌病；因慢性快速心率引起的心肌病；因心脏瓣膜问题引起的心肌病；因代谢紊乱引起的心肌病；因必需维生素或矿物质的营养性缺乏引起的心肌病；因饮酒引起的心肌病；因使用可卡因、安非他命或合成代谢类固醇而引起的心肌病；因放射疗法治疗癌症引起的心肌病；因某些可能损伤心脏并触发心肌病的感染而引起的心肌病；因血色素沉着病引起的心肌病；因结节病引起的心肌病；因淀粉样变性引起的心肌病；因结缔组织病症引起的心肌病；药物或辐射诱导的心肌病；特发性或隐源性心肌病；其他形式的缺血性损伤，包括但不限于缺血再灌注损伤、缺血性中风、肾动脉闭塞和全心缺血再灌注损伤(心搏停止)；心肌细胞坏死；或心肌细胞凋亡。

一方面，提供了一种使用干细胞来源的心肌细胞鉴定心肌梗塞疗法的方法，其中该方法包括在心肌细胞死亡的细胞培养模型中使干细胞来源的心肌细胞与化合物接触。例如，如本申请的实例中所示。

在实施例中，该方法离体进行。因此，在实施例中，该方法不是治疗或诊断的方法。

在一个实施例中，使用干细胞来源的心肌细胞鉴定心肌梗塞疗法的方法使用人干细胞来源的心肌细胞。

在实施例中，提供了一种使用人干细胞来源的心肌细胞鉴定心肌梗塞疗法的方法，其中该方法包括在心肌细胞死亡的细胞培养模型中用候选测试化合物处理人干细胞来源的心肌细胞。可用以测试化合物的相关应激源的实例包括：h2o2、甲萘醌和其他赋予氧化应激的化合物；缺氧；缺氧/再氧合；葡萄糖剥夺或干扰代谢的化合物；心脏毒性药物；促进细胞死亡的蛋白质或基因；对拮抗细胞死亡的蛋白质或基因的表达或功能的干扰。细胞死亡被认为涵盖细胞凋亡、坏死、坏死性凋亡或自噬(单独的或组合的)。

附图说明

下面参照附图进一步描述本发明的实施例，其中：

图1提供了证明map4k4与心肌细胞死亡之间的关系的数据。

图2提供了其中模拟map4k4活性模拟增加并证明map4k4的促凋亡作用的数据。

图3提供了证明心肌细胞限制的map4k4使心肌对其他亚致死性死亡信号敏感，从而加重心肌细胞损失、纤维化和功能障碍。

图4提供的数据表明map4k4在心肌细胞死亡中的关键作用。

图5提供了map4k4在源自人诱导多能干细胞的心肌细胞中的作用的数据。

图6提供了本发明化合物和已知化合物随时间变化的血浆浓度。

图7提供的数据证明抑制map4k4可抑制人心肌细胞死亡。

图8提供的数据证明map4k4抑制可改善人心肌细胞功能。

图9提供的数据证明map4k4抑制可减少小鼠中的梗塞面积。

图10和图11示出了前药在人s9肝脏级分中水解成相应化合物的速率。

图12和图13示出了在大鼠中前药水解成相应化合物的速率。

具体实施方式

除非另有说明，否则说明书和权利要求书中使用的以下术语具有下文陈述的以下含义。

应当理解，提及“治疗”包括预防以及缓解病状的已确定的症状或物理表现。因此，状态、病症或病状的“治疗”包括：(1)预防或延迟在人中发展的状态、病症或病状的临床症状的出现，该人可能患有或易患该状态、病症或病状但是还没有经历或显示该状态、病症或病状的临床或亚临床症状；(2)抑制该状态、病症或病状，即阻止、降低或延迟该疾病的发展或其复发(在维持治疗的情况下)或其至少一种临床或亚临床症状；或(3)减轻或减缓该疾病，即引起该状态、病症或病状或其至少一种临床或亚临床症状的消退。

“治疗有效量”意指当向哺乳动物施用以治疗疾病时，足以实现对该疾病的这种治疗的化合物的量。“治疗有效量”将根据化合物、施用方法、疾病及其严重程度以及待治疗的哺乳动物的年龄、体重等而变化。

术语“卤代”或“卤素”是指周期表第17族的其中一种卤素。特别地，该术语是指氟、氯、溴和碘。优选地，该术语是指氟或氯。

术语cm-n是指具有m至n个碳原子的基团。

术语“c1-6烷基”是指含有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链烃链，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。“c1-4烷基”类似地是指含有1至4个碳原子的此类基团。亚烷基是二价烷基，并且同样可以是直链或支链的，并且与分子的其余部分具有两个附接点。此外，亚烷基可以例如对应于本段中列出的那些烷基之一。烷基和亚烷基可以未经取代或被一个或多个取代基取代。下面更加详细地描述可能的取代基。烷基的取代基可以是卤素，例如氟、氯、溴和碘、oh、c1-c4烷氧基。可替代性地使用烷基的其他取代基。

术语“卤代烷基”，例如“c1-6卤代烷基”是指被至少一个卤素原子取代的烃链，卤素在每次出现时独立地选自例如氟、氯、溴和碘。卤素原子可以存在于烃链上的任何位置。例如，c1-6卤代烷基可以指氯甲基、氟甲基、三氟甲基、氯乙基(例如1-氯甲基和2-氯乙基)、三氯乙基(例如1,2,2-三氯乙基、2,2,2-三氯乙基)、氟乙基(例如1-氟甲基和2-氟乙基)、三氟乙基(例如1,2,2-三氟乙基和2,2,2-三氟乙基)、氯丙基、三氯丙基、氟丙基、三氟丙基。

术语“c2-6烯基”包括含有至少一个双键并具有2、3、4、5或6个碳原子的支链或直链烃链。双键可以作为e或z异构体存在。双键可以在烃链的任何可能位置。例如，“c2-6烯基”可以是乙烯基、丙烯基、丁烯基、丁二烯基、戊烯基、戊二烯基、己烯基和己二烯基。

术语“c2-6炔基”包括含有至少一个三键并具有2、3、4、5或6个碳原子的支链或直链烃链。三键可以在烃链的任何可能位置。例如，“c2-6炔基”可以是乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基和己炔基。

术语“c3-6环烷基”包括含有3、4、5或6个碳原子的饱和烃环系。例如，“c3-c6环烷基”可以是环丙基、环丁基、环戊基、环己基、双环[2.1.1]己烷或双环[1.1.1]戊烷。

术语“杂环烷基”包括饱和单环或稠环、桥环或螺环双环杂环系。术语“杂环烷基”包括在环中具有1至5个(合适地为1、2或3个)选自氮、氧或硫的杂原子的环系。除非通过列举杂环烷基环内原子的数量来另外说明，否则单环杂环烷基环可以含有约3至12个(合适地为3至7个)环原子，在环中具有1至5个(合适地为1、2或3个)选自氮、氧或硫的杂原子。双环杂环在环中可以含有7至17个成员原子，适当地7至12个成员原子。一个或多个双环杂环可以是稠环、螺环或桥环环系统。杂环烷基基团的实例包括环醚，诸如环氧乙烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、二噁烷基和经取代的环醚。在环位置包含至少一个氮的杂环烷基环包括，例如氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢三嗪基、四氢吡唑基、四氢吡啶基、高哌啶基，高哌嗪基、3,8-二氮杂-双环[3.2.1]辛基、8-氮杂-双环[3.2.1]辛基、2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚基等。典型的含硫杂环烷基环包括四氢噻吩基、二氢-1,3-二硫醇、四氢-2h-噻喃和六氢硫杂(hexahydrothiepine)。其他杂环烷基环包括二氢氧杂硫杂环戊二烯基(dihydrooxathiolyl)、四氢噁唑基、四氢噁二唑基、四氢二噁唑基、四氢氧杂噻唑基、六氢三嗪基、四氢噁嗪基、四氢嘧啶基、二氧戊基、八氢苯并呋喃基、八氢苯并咪唑基和八氢苯并噻唑基。对于含硫的杂环，还包括含有so或so2基团的氧化硫杂环。实例包括亚砜和砜形式的四氢噻吩基和硫代吗啉基，如四氢噻吩1,1-二氧化物和硫代吗啉基1,1-二氧化物。带有1或2个氧代(＝o)的杂环基基团的合适的值是例如2-氧代吡咯烷基、2-氧代咪唑烷基、2-氧代哌啶基、2,5-二氧代吡咯烷基、2,5-二氧代咪唑烷基或2,6-二氧代哌啶基。特定的杂环基基团是含有1、2或3个选自氮、氧或硫的杂原子的饱和单环3至7元杂环基，例如氮杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、吡咯烷基、吗啉基、四氢噻吩基、四氢噻吩基1,1-二氧化物、硫代吗啉基、硫代吗啉基1,1-二氧化物、哌啶基、高哌啶基、哌嗪基或高哌嗪基。如技术人员将理解的，任何杂环可以经由任何合适的原子(如经由碳或氮原子)连接到另一个基团。例如，术语“哌啶代”或“吗啉代”是指经由环氮连接的哌啶-1-基或吗啉-4-基环。

术语“桥环系”包括其中两个环共享多于两个原子的环系，参见例如advancedorganicchemistry[高等有机化学]，由jerrymarch编辑，第4版，威利国际科学出版社(wileyinterscience)，第131-133页，1992。

术语“螺双环环系”包括其中两个环系共享一个共同的螺碳原子的环系，即杂环通过单个共同的螺碳原子与另一个碳环或杂环连接。

当整体应用于取代基时，术语“芳族”包括在环或环系内的共轭π体系中具有4n+2个电子的单环或多环环系，其中所有对共轭π体系起作用的原子都在同一平面内。

术语“芳基”包括芳族烃环系。该环系在环内的共轭π体系中具有4n+2个电子，其中所有对共轭π体系起作用的原子都在同一平面内。例如，“芳基”可以是苯基和萘基。芳基系统本身可以被其他基团取代。

术语“杂芳基”包括并入一个或多个(例如1-4个，特别是1、2或3个)选自氮、氧或硫的杂原子的芳族单环或双环。该环或环系在环内的共轭π体系中具有4n+2个电子，其中所有对共轭π体系起作用的原子都在同一平面内。

杂芳基基团的实例是含有五至十二个环成员，并且更通常是五至十个环成员的单环和双环基团。杂芳基基团可以是例如5元或6元单环或者9元或10元双环，例如由稠合的五元和六元环或两个稠合的六元环形成的双环结构。每个环可以含有至多约四个通常选自氮、硫和氧的杂原子。通常，杂芳基环将含有至多3个杂原子，更通常至多2个，例如单个杂原子。在一个实施例中，杂芳基环含有至少一个环氮原子。杂芳基环中的氮原子可以是碱性的，如在咪唑或吡啶的情况下那样，或基本上非碱性的，如在吲哚或吡咯氮的情况下那样。一般而言，存在于杂芳基基团(包括环的任何氨基基团取代基)中的碱性氮原子的数目将小于五。

杂芳基的实例包括呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、1,3,5-三氮烯基、苯并呋喃基、吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噻唑基、吲唑基、嘌呤基、苯并呋咱基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、噌啉基、蝶啶基、萘啶基、咔唑基、吩嗪基、苯并异喹啉基、吡啶并吡嗪基、噻吩并[2,3-b]呋喃基、2h-呋喃并[3,2-b]-吡喃基、5h-吡啶并[2,3-d]-o-噁嗪基、1h-吡唑并[4,3-d]-噁唑基、4h-咪唑并[4,5-d]噻唑基、吡嗪并[2,3-d]哒嗪基、咪唑并[2,1-b]噻唑基和咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪基。在环的位置包含至少一个氮的杂芳基基团的实例包括吡咯基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、1,3,5-三氮烯基、吲哚基、异吲哚基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噻唑基、吲唑基、嘌呤基、苯并呋喃氮基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、噌啉基和蝶啶基。“杂芳基”还涵盖部分芳族的双环或多环环系，其中至少一个环是芳环，并且一个或多个其他环是非芳族的、饱和或部分饱和的环，条件是至少一个环含有一个或多个选自氮、氧或硫的杂原子。部分芳族杂芳基基团的实例包括例如四氢异喹啉基、四氢喹啉基、2-氧代-1,2,3,4-四氢喹啉基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并呋喃基、2,3-二氢-苯并[1,4]二噁英基、苯并[1,3]二氧杂环戊烯基、2,2-二氧代-1,3-二氢-2-苯并噻吩基、4,5,6,7-四氢苯并呋喃基、二氢吲哚基、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶基、1,2,3,4-四氢吡啶并[2,3-b]吡嗪基和3,4-二氢-2h-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪基。

五元杂芳基基团的实例包括但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、呋咱基、噁唑基、噁二唑基、氧杂三唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、三唑基和四唑基基团。

六元杂芳基基团的实例包括但不限于吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基和三嗪基。

包含与五元环稠合的六元环的双环杂芳基基团的特定实例包括但不限于：苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、异苯并呋喃基、吲哚基、异吲哚基、吲嗪基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、嘌呤基(例如，腺嘌呤基、鸟嘌呤基)、吲唑基、苯并二氧杂环戊烯基(benzodioxolyl)、吡咯并吡啶、和吡唑并吡啶基基团。

含有两个稠合六元环的双环杂芳基基团的具体实例包括但不限于喹啉基、异喹啉基、色满基、硫代色满基、色烯基、异色烯基、色满基、异色满基、苯并二噁烷基、喹嗪基、苯并噁嗪基、苯并二嗪基、吡啶并吡啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、萘啶基和蝶啶基基团。

术语“任选取代的”包括被取代的基团、结构或分子以及未被取代的基团、结构或分子。

当任选的取代基选自“一个或多个”基团时，应当理解，该定义包括选自指定基团之一的所有取代基或选自两个或更多个指定基团的取代基。

短语“本发明的化合物”意指本文中总体上和具体地披露的那些化合物。

以结尾的键表示该键连接到结构中未示出的另一个原子。终止于环状结构内部而不是终止于环结构的原子的键表示该键可以在化合价允许的情况下连接至环结构中的任何原子。

当一个部分被取代时，在化学上可能且与原子价要求一致的情况下，可以在该部分的任何点上取代。该部分可以被一个或多个取代基，例如1、2、3或4个取代基取代；任选地，基团上存在1或2个取代基。当存在两个或更多个取代基时，这些取代基可以是相同的或不同的。

取代基仅存在于它们在化学上可能的位置，本领域技术人员能够不费力地决定(实验上或理论上)在化学上可能的取代和在化学上不可能的取代。

邻位、间位和对位取代是本领域众所周知的术语。毫无疑问，“邻位”取代是相邻碳原具有取代基的取代模式，无论是单一基团(例如以下实例中的氟代基团)还是分子的其他部分，如以结束的键所示。

“间位”取代是其中两个取代基在碳上，彼此隔开一个碳，即在取代的碳之间具有单个碳原子的取代模式。换句话说，第二个原子上有一个取代基，远离具有另一个取代基的原子。例如，下面的基团是间位取代的。

“对位”取代是其中两个取代基在碳上，彼此隔开两个碳，即在取代的碳之间具有两个碳原子的取代模式。换句话说，第三个原子上有一个取代基，远离具有另一个取代基的原子。例如，下面的基团是对位取代的。

术语“酰基”包括由例如有机酸通过去除羟基而衍生的有机基团，例如具有式r-c(o)-的基团，其中r可以选自h、c1-6烷基、c3-8环烷基、苯基、苄基或苯乙基，例如r为h或c1-3烷基。在一个实施例中，酰基为烷基-羰基。酰基基团的实例包括但不限于甲酰基、乙酰基、丙酰基和丁酰基。特定的酰基基团为乙酰基(也表示为ac)。

贯穿本说明书的描述和权利要求，词语“包含”和“含有”以及它们的变型意指“包括但不限于”，并且它们并不旨在(并且并不)排除其他部分、添加剂、组分、整数或步骤。贯穿本说明书的描述和权利要求，除非上下文另有要求，否则单数涵盖复数。特别地，当使用不定冠词时，除非上下文另有要求，否则本说明书应被理解为考虑到复数以及单数。

结合本发明的具体方面、实施例或者实例一起描述的特征、整数、特性、化合物、化学部分或基团应被理解为可适用于本文所描述的任何其他方面、实施例或实例，除非与之不相容。在本说明书中所披露的所有特征(包括任何所附权利要求书、摘要以及附图)和/或如此披露的任何方法或过程的所有步骤可以按任何组合的形式组合，这类特征和/或步骤中的至少一些相互排斥的组合除外。本发明并不限于任何前述实施例的细节。本发明扩展到本说明书(包括任何所附权利要求书、摘要以及附图)中所披露的特征的任何新颖特征或任何新颖组合，或扩展到如此披露的任何方法或过程的步骤的任何新颖步骤或任何新颖组合。

读者的关注点是针对与本说明书同时或在本说明书之前连同本申请一起提交并且与本说明书一起开放以供公众检验的所有论文和文献，并且所有这类论文和文献的内容通过援引并入本文。

本发明任何化合物的合适或优选特征也可以是任何其他方面的合适特征。

本发明考虑到本发明化合物的药学上可接受的盐。这些可以包括化合物的酸加成盐和碱式盐。这些可以是化合物的酸加成盐和碱式盐。

适合的酸加成盐由形成无毒的盐的酸形成。实例包括乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、羟苯酰苯酸盐、盐酸化物/氯化物、氢溴化物/溴化物、氢碘化物/碘化物、羟乙磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酚盐、1,5-萘二磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、磷酸盐/磷酸/磷酸二氢盐、糖质酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐以及三氟乙酸盐盐类。

适合的碱式盐由形成无毒盐的碱形成。实例包括铝盐、精氨酸盐、苄星青霉素盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、环匹罗司乙醇胺盐、钾盐、钠盐、氨丁三醇盐以及锌盐。也可以形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。有关合适的盐的综述，参见stahl和wermuth(德国魏因海姆wiley-vch出版公司(wiley-vch,weinheim,germany)，2002)的“handbookofpharmaceuticalsalts:properties,selection,anduse[药用盐手册：特性、选择和使用]”。

本发明化合物的药学上可接受的盐可以通过例如以下一种或多种方法制备：

(i)通过使本发明的化合物与所需的酸或碱反应；

(ii)通过从本发明化合物的合适前体中去除酸或碱不稳定的保护基，或通过使用所需的酸或碱将合适的环状前体例如内酯或内酰胺开环；或者

(iii)通过与适当的酸或碱反应或借助于合适的离子交换柱将本发明化合物的一种盐转化为另一种盐。

这些方法通常在溶液中进行。所得的盐可以沉淀出来并通过过滤收集，或者可以通过蒸发溶剂来回收。所得的盐中的电离度可以从完全电离到几乎未电离变化。

具有相同分子式但其原子键合的性质或顺序或者其原子在空间中的排列不同的化合物称为“异构体”。术语“立体异构体”是其原子在空间排列上不同的异构体。彼此不成镜像的立体异构体称为“非对映异构体”，彼此是无法重叠的镜像的那些立体异构体则称为“对映异构体”。当化合物具有不对称中心，例如，该不对称中心键合到四个不同的基团时，可能有一对对映异构体。对映异构体以其不对称中心的绝对构型来表征，并且通过cahn和prelog的r-和s-测序规则、或通过分子旋转偏振光平面的方式被描述并指定为右旋或左旋的(即，分别作为(+)或(-)-异构体)。手性化合物可以作为单独的对映异构体或其混合物存在。含有相等比例对映异构体的混合物称为“外消旋混合物”。当本发明的化合物具有两个或更多个立体中心时，可以考虑(r)和(s)立体异构体的任何组合。(r)和(s)立体异构体的组合可以产生非对映异构体混合物或单一非对映异构体。本发明的化合物可以作为单一立体异构体存在或者可以是立体异构体的混合物，例如外消旋混合物和其他对映异构体混合物，以及非对映异构体混合物。当混合物是对映异构体的混合物时，对映异构体过量可以是以上披露的任何对映异构体。当化合物是单一立体异构体时，化合物仍可含有其他非对映异构体或对映异构体作为杂质。因此，单一立体异构体不一定具有100％的对映异构体过量(e.e.)或非对映异构体过量(d.e.)，但是可以具有至少约85％的e.e.或d.e.。

本发明的化合物可具有一个或多个不对称中心；因此，此类化合物可以作为单独的(r)-或(s)-立体异构体或其混合物生成。除非另有说明，否则说明书和权利要求书中对特定化合物的描述或命名旨在包括单独的对映异构体及其外消旋混合物或其他混合物。用于立体化学测定和立体异构体分离的方法在本领域中是众所周知的(参见“advancedorganicchemistry[高等有机化学]”中第4章的讨论，第4版，j.march，约翰·威利父子出版公司(johnwileyandsons)，纽约(newyork)，2001)，例如通过从光学活性原材料合成或通过拆分外消旋形式。本发明的一些化合物可具有几何异构中心(e-和z-异构体)。应当理解，本发明涵盖所有光学、非对映异构体和几何异构体及其混合物。

本说明书中描述的化合物和盐可以是同位素标记的(或“放射性标记的”)。因此，一个或多个原子被原子质量或质量数不同于自然界通常发现的原子质量或质量数的原子置换。可掺入的放射性核素的实例包括²h(对于氘也写为“d”)、³h(对于氚也写为“t”)、¹¹c、¹³c、¹⁴c、¹⁵o、¹⁷o、¹⁸o、¹⁸f等。使用的放射性核素将取决于该放射性标记衍生物的具体应用。例如，对于体外竞争测定，³h或¹⁴c通常有用。对于放射性成像应用，¹¹c或¹⁸f通常有用。在一些实施例中，放射性核素是³h。在一些实施例中，放射性核素是¹⁴c。在一些实施例中，放射性核素是¹¹c。并且在一些实施例中，放射性核素是¹⁸f。

还应当理解，本发明的某些化合物能以溶剂化形式以及非溶剂化形式存在，例如水合形式。应当理解，本发明涵盖具有map4k4抑制活性的所有此类溶剂化形式。

还应当理解，本发明的某些化合物可以表现出多态性，并且本发明涵盖具有map4k4抑制活性的所有此类形式。

本发明的化合物能以许多不同的互变异构形式存在，并且提及的本发明化合物包括所有此类形式。为了避免疑问，当化合物能以若干种互变异构体形式之一存在，并且只有一种被具体描述或显示时，本发明的化合物仍然包含所有其他形式。互变异构体形式的实例包括酮、烯醇和烯醇化物形式，例如，在以下互变异构体对中那样：酮/烯醇(在下文中示出)、亚胺/烯胺、酰胺/亚氨基醇、脒/脒、亚硝基/肟、硫酮/烯硫醇和硝基/酸式硝基。

本发明的化合物的体内作用可以部分地通过一种或多种代谢产物来发挥，这些代谢产物是在施用本发明的化合物后在人或动物体内形成的。

同样地，本发明的化合物可以负责体内作用，但是该化合物可以以前药形式施用。因此，本发明考虑到式(i)化合物的前药，无论有无前提条件。

实例部分提供了有关本发明化合物制备的进一步信息。实例中描述的通用反应方案和具体方法形成了本发明的另一方面。

可以使用本领域众所周知的技术分离和纯化由以上定义的方法得到的本发明的化合物。

本发明的化合物可以以单一晶型或晶型混合物的形式存在，或者它们可以是无定形的。因此，旨在用于药物用途的本发明化合物可以呈结晶或无定形产物形式施用。它们可以通过诸如沉淀、结晶、冷冻干燥或喷雾干燥或蒸发干燥的方法，例如呈固体塞、粉末或膜的形式获得。为此可以使用微波或射频干燥。

本文定义的方法还可包括使本发明的化合物进行盐交换的步骤，特别是在其中本发明的化合物作为不同盐形式的混合物形成的情况下。盐交换合适地包括将本发明的化合物固定在合适的固体载体或树脂上，并用适当的酸洗脱化合物以得到本发明化合物的单一盐。

在本发明的另一方面，提供了可通过本文定义的任何一种方法获得的本发明化合物。

在以上反应方案和本文实例中描述的某些中间体可能是新型的。此类新型中间体或其盐，特别是其药学上可接受的盐形成本发明的另一方面。

药物组合物

根据另一方面，本发明提供了包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的赋形剂的药物配制品。

用于选择和制备合适的药物配制品的常规程序在例如“pharmaceuticals-thescienceofdosageformdesigns[药物-剂型设计科学]”,m.e.aulton,churchilllivingstone[丘吉尔利文斯敦],1988中有所描述。

本发明的组合物可以呈适合于以下使用的形式：口服使用(例如作为片剂、锭剂、硬胶囊或软胶囊、水性或油性悬浮液、乳剂、可分散的粉末或颗粒剂、糖浆剂或酏剂)，局部使用(例如作为霜剂、软膏剂、凝胶，或者水性或油性溶液或悬浮液)，通过吸入施用(例如作为细碎的粉末或液体气溶胶剂)，通过吹施用(例如作为细碎的粉末)或肠胃外施用(例如作为静脉内、冠状动脉内、皮下、心肌内、腹膜内或肌肉内给药的无菌水性或油性溶液，或者作为直肠给药的栓剂)。

本发明的组合物可以使用常规药物赋形剂，通过本领域众所周知的常规程序获得。因此，旨在口服使用的组合物可以包含例如一种或多种着色剂、甜味剂、调味剂和/或防腐剂。

用于治疗病状的本发明化合物的有效量是足以在具有病状症状的温血动物，特别是人类中实现症状缓解，减轻症状的身体表现，或减缓病情进展的量。

与一种或多种赋形剂组合以产生单一剂型的活性成分的量必定将根据所治疗的宿主和特定施用途径而变化。例如，旨在向人类口服施用的配制品将通常含有例如与适当且便利的量的赋形剂(按总组合物的重量计可以从约5％变化至约98％)配混的0.5mg至0.5g(更合适地0.5mg至100mg，例如1mg至30mg)的活性剂。

根据众所周知的医学原理，本发明化合物针对治疗或预防目的的剂量大小将会自然而然地根据病状的性质和严重程度，在分离的细胞中有效所需的化合物浓度，在实验动物中有效所需的化合物浓度，动物或患者的年龄和性别，以及施用途径而变化。

在使用本发明的化合物用于治疗目的或预防目的时，通常这样施用该化合物：使得如果需要分剂量，则接受在一定范围内的日剂量，例如选自0.1mg/kg体重至100mg/kg体重、1mg/kg体重至75mg/kg体重、1mg/kg体重至50mg/kg体重、1mg/kg体重至20mg/kg体重或5mg/kg体重至10mg/kg体重的日剂量。一般而言，当采用肠胃外途径时，将施用较低剂量。因此，例如，对于静脉内或腹膜内施用，将通常使用例如0.1mg/kg体重至80mg/kg体重范围内的剂量。类似地，对于通过吸入施用，将使用例如0.05mg/kg体重至25mg/kg体重范围内的剂量。合适地，本发明的化合物口服施用，例如以片剂或胶囊剂型的形式。口服施用的日剂量可以是例如选自1mg至2000mg、5mg至2000mg、5mg至1500mg、10mg至750mg或25mg至500mg的总日剂量。通常，单位剂型将含有约0.5mg至0.5g的本发明化合物。

实验

通用化学合成

除非另有说明，否则所有试剂均购自商业来源或根据已知文献程序合成。除非另有说明，否则商业试剂无需进一步纯化即可使用。微波反应使用cemdiscover(200w)进行。使用预填充的硅胶snap(kp-sil/kp-c18-hs)筒柱进行快速柱色谱法。使用scx-2和nh2筒柱进行离子交换色谱法。使用在实验方法中称为si-硫醇的siliaprep^tmspe硫醇筒柱进行钯去除。在许多情况下，在水性后处理(workup)过程中使用相分离器将有机层与水层分离。这些被称为相分离器。

使用的缩写

分析方法

通过以下反相制备型hplc-ms纯化许多化合物：使用制备型c-18色谱柱(phenomenexlunac18(2)，100×21.2mm，5μm)通过制备型lc-ms进行质量导向的纯化。

产物和中间体的分析已使用以下列出的参数，使用反相分析型hplc-ms进行。

hplc分析方法：

analph2_meoh_4min：phenomenexlunac18(2)3μm，50×4.6mm；a＝水+0.1％甲酸；b＝meoh；45℃；％b：0min5％，1min37.5％，3min95％，3.51min5％，4.0min5％；2.25ml/min。

analph2_meoh_4min(1)：phenomenexlunac18(2)3μm，50×4.6mm；a＝水+0.1％甲酸；b＝meoh+0.1％甲酸；45℃；％b：0min5％，1min37.5％，3min95％，3.51min5％，4.0min5％；2.25ml/min。

analph2_mecn_4min：phenomenexlunac18(2)3μm，50×4.6mm；a＝水+0.1％甲酸；b＝乙腈；45℃；％b：0min5％，1min37.5％，3min95％，3.51min5％，4.0min5％；2.25ml/min。

analph2_mecn_4min(1)：acquitybehc18(2)1.7μm，50×2.1mm；a＝水+0.1％甲酸；b＝乙腈+0.1％甲酸；35℃；％b：0min3％，0.4min3％，2.5min98％，3.4min98％，3.5min3％，4.0min3％；0.6ml/min。

analph9_meoh_4min：phenomenexlunac18(2)3μm，50×4.6mm；a＝水ph9(碳酸氢铵10mm)；b＝meoh；45℃；％b：0min5％，1min37.5％，3min95％，3.51min5％，4.0min5％；2.25ml/min。

analph9_mecn_4min：phenomenexlunac18(2)3μm，50×4.6mm；a＝水ph9(碳酸氢铵10mm)；b＝乙腈；45℃；％b：0min5％，1min37.5％，3min95％，3.51min5％，4.0min5％；2.25ml/min。

analph9_mecn_6min：xbridgebehc182.5μm，50×4.6mm；a＝水ph9(碳酸氢铵10mm)；b＝乙腈；35℃；％b：0min5％，0.5min5％，1min15％，3.3min98％，5.2min98％，5.5min5％，6.0min5％；1.3ml/min。

analph2_meoh_qc_v1：phenomenexgemininxc185μm，150×4.6mm；a＝水+0.1％甲酸；b＝meoh；40℃；％b：0min5％，7.5min95％，10min95％，10.10min5％，13.0min5％；1.5ml/min。

analph2_meoh_qc_v1(1)：phenomenexgemininxc18(2)5μm，150×4.6mm；a＝水+0.1％甲酸；b＝meoh+0.1％甲酸；40℃；％b：0min5％，7.5min95％，10min95％，10.10min5％，13.0min5％；1.5ml/min。

analph2_mecn_qc_v1：phenomenexgemininxc185μm，150×4.6mm；a＝水+0.1％甲酸；b＝乙腈；40℃；％b：0min5％，7.5min95％，10min95％，10.10min5％，13.0min5％；1.5ml/min。

analph9_meoh_qc_v1：phenomenexgemininxc185μm，150×4.6mm；a＝水+ph9(碳酸氢铵10mm)；b＝meoh；45℃；％b：0min5％，7.5min95％，10min95％，10.10min5％，13.0min5％；1.5ml/min。

analph9_meoh_qc_v1(1)：phenomenexgemininxc185μm，150×4.6mm；a＝水+ph9(碳酸氢铵10mm)；b＝meoh；40℃；％b：0min5％，7.5min95％，10min95％，10.10min5％，13.0min5％；1.5ml/min。

analph9_mecn_qc_v1：phenomenexgemininxc185μm，150×4.6mm；a＝水+ph9(碳酸氢铵10mm)；b＝乙腈；45℃；％b：0min5％，7.5min95％，10min95％，10.10min5％，13.0min5％；1.5ml/min。

化学合成实例

许多式(i)的实例的合成需要合成硼酸或酯，这些硼酸或酯不易从商业供应商处购得。这些硼酸/酯中的许多是由相应的溴代化合物制备的。

1-(4-溴-苯基)-3-甲基-咪唑烷-2-酮(a1)

在0℃于n2下向nah(在矿物油中的60％分散体)(120mg，2.99mmol)中添加在无水dmf(30ml)中的1-(4-溴苯基)四氢-2h-咪唑-2-酮(600mg，2.49mmol)。15分钟后，添加碘甲烷(0.19ml，2.99mmol)并在室温下将反应混合物于n2下搅拌过夜。将反应混合物用冰冷却并用1mhcl(水溶液)淬灭。添加etoac并分离有机层。有机层用h2o洗涤，分离，通过相分离器并蒸发至干。用dcm萃取水层(也发现含有产物)，并将有机相与etoac层合并并蒸发至干。通过用20％-60％etoac/异己烷洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈白色固体的1-(4-溴-苯基)-3-甲基-咪唑烷-2-酮(a1)(413mg，65％)；lc-ms.rt2.77min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z255.2,257.2[m+h]⁺。

使用与用于合成化合物a1类似的程序制备以下溴代中间体：

表1

许多溴代中间体是通过环氧化物的开环制备的。

4-[3-(4-溴-苯氧基)-2-羟基-丙基]-吗啉-3-酮(a5)

在0℃于n2下，向nah(在矿物油中的60％分散体)(148mg，3.71mmol)在无水dmf(2ml)中的悬浮液中添加在无水dmf(3ml)中的吗啉-3-酮(250mg，2.47mmol)，并将混合物在该温度下搅拌1小时。此时之后，使反应混合物温热至室温，并添加在无水dmf(5ml)中的2-[(4-溴苯氧基)甲基]环氧乙烷(850mg，3.71mmol)，并将反应在室温于n2下搅拌过夜。将反应混合物滴加到冰水(50ml)中并用etoac(50ml)萃取。分离有机相(相分离器)并真空浓缩。通过用0-3％meoh/dcm洗脱的硅胶柱色谱法对粗制化合物进行纯化。将该化合物通过反相制备型hplc-ms进一步纯化，得到呈白色固体的4-[3-(4-溴-苯氧基)-2-羟基-丙基]-吗啉-3-酮(250mg，31％)；lc-ms.rt1.72min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z330.1,332.1[m+h]⁺。

1-(4-溴-苯氧基)-3-吗啉-4-基-丙-2-醇(a6)

将2-[(4-溴苯氧基)甲基]环氧乙烷(500mg，2.18mmol)和吗啉(267μl，3.05mmol)在异丙醇(10ml)中的溶液在微波反应器(200w)中于100℃下加热30分钟。再次重复该反应。将2种反应混合物合并并真空浓缩。将粗制固体预先吸附到二氧化硅上，并通过用0-20％meoh/dcm洗脱的硅胶色谱法纯化，得到呈无色油状物的1-(4-溴-苯氧基)-3-吗啉-4-基-丙-2-醇(a6)(1.21g，88％)。lc-ms.rt1.50min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z316.2,318.2[m+h]⁺。

1-(4-溴苯氧基)-3-甲氧基丙-2-醇(a21)

向2-((4-溴苯氧基)甲基)环氧乙烷(500mg，2.1mmol)在无水meoh(10ml)中的溶液中添加nah(在油中的60％分散体)(167mg，4.3mmol)。将反应重新密封并用氮气吹扫并在室温下搅拌66小时。将反应混合物用水淬灭，并且用dcm萃取。将有机物真空浓缩。通过用0-45％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化粗制固体，得到呈无色油状物的标题化合物a21(550mg，89％)；lc-ms.rt2.87min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z283.2,285.3[m+na]⁺。

通过相应醇的甲基化制备以下甲氧基化合物：

4-[3-(4-溴-苯氧基)-2-甲氧基-丙基]-吗啉(a7)

将溴代化合物(a6)(1.18g，3.7mmol)的溶液溶解在thf(20ml)中，并添加nah(在油中的60％分散体，448mg，11.2mmol)。10分钟后，添加碘甲烷(279μl，4.5mmol)，并将混合物在室温下搅拌4小时。将反应混合物在0℃下用水淬灭，并通过旋转蒸发仪缩减成残留物。将残留物在水(100ml)和etoac(100ml)之间分配。将有机层用盐水(100ml)洗涤，干燥(无水na2so4)，过滤并真空浓缩。将粗制固体预先吸附到二氧化硅上，并通过用0-100％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化，得到呈无色油状物的4-[3-(4-溴-苯氧基)-2-甲氧基-丙基]-吗啉(a7)(993mg，81％)；lc-ms.rt1.72min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z330.2,332.2[m+h]⁺。

通过相应酚的烷基化制备以下溴代中间体：

4-(4-溴-苯氧基)-2-甲基-丁-2-醇(a8)

将4-溴苯酚(690mg，4.06mmol)和k2co3(826mg，5.98mmol)溶解在无水dmf(20ml)中，并添加4-溴-2-甲基丁-2-醇(800mg，4.79mmol)。将混合物在130℃下搅拌18小时，然后冷却至室温。将该反应混合物用h2o(30ml)稀释，并用dcm(3×20ml)萃取。通过相分离器干燥合并的有机级分，并使用genevac蒸发成残留物。将粗制固体预先吸附到二氧化硅上，并通过用0-100％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化，得到呈黄色油状物的4-(4-溴-苯氧基)-2-甲基-丁-2-醇(a8)(483mg，47％)；lc-ms.rt3.16min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z243.2,245.2[m-h2o+h]⁺。

使用与化合物a8类似的程序，在80℃-140℃下加热6-66小时，制备以下溴代化合物。

表2

^a使用氯化物代替溴化物。^b将甲苯磺酸盐试剂用作烷化试剂。^c将cs2co3用作碱。^d还使用了2当量的ki。^e使用乙腈代替dmf。

^##a27需要由相应的甲磺酸盐而不是溴化物合成。甲磺酸盐a30通过以下方法分3个步骤合成：

步骤1：2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙酸乙酯(a28)

在-70℃下，向etoac(36.68g，416mmol)在thf(400ml)中的溶液中滴加lihmds(229ml，458mmol，2m的thf溶液)，持续20分钟。添加之后，将反应混合物在相同温度下再搅拌1小时，然后将在thf(50ml)中的氧杂环丁烷-3-酮(30g，416mmol)滴加到反应混合物中，然后在-70℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃，通过添加饱和nh4cl水溶液(200ml)淬灭，并允许在室温下搅拌30分钟。将粗制混合物用h2o(200ml)稀释并用etoac(3×400ml)萃取。用水(2×100ml)、盐水(1×200ml)洗涤合并的有机层，用na2so4干燥，过滤并减压浓缩。通过用20％etoac/己烷洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制残留物，得到呈黄色液体的2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙酸乙酯(a28)(25g，37％)。

步骤2：3-(2-羟乙基)氧杂环丁-3-醇(a29)

在0℃下逐份向2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙酸乙酯(a28)(15g，93.8mmol)在thf(400ml)和etoh(100ml)中的溶液中添加硼氢化钠(7g，37.8mmol)。添加后，将反应在环境温度下搅拌16小时。在0℃下，将所得悬浮液用dowex50wx8-100(h⁺形式)酸化至ph6。将反应混合物搅拌15分钟，然后过滤树脂并用etoac(100ml)洗涤。将滤液减压浓缩，得到呈白色固体的3-(2-羟乙基)氧杂环丁-3-醇(a29)(8g，72％)。

步骤3：2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)甲磺酸乙酯(a30)的合成

在0℃下向3-(2-羟乙基)氧杂环丁-3-醇(a29)(8g，67.8mmol)和net3(20.5g，203mmol)在dcm(150ml)中的搅拌溶液中滴加甲磺酰氯(11.59g，102mmol)。添加后，将反应在10℃下搅拌3小时。完成后，将反应混合物用水(100ml)稀释，并用dcm(3×200ml)萃取。将合并的有机层用水(2×100ml)和盐水(1×200ml)洗涤，用na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色液体的2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)甲磺酸乙酯(a30)(5.5g，42％)。

[3-(4-溴-苯氧基甲基)-氧杂环丁烷-3-基]-甲醇(a10)

在0℃于n2下将4-溴苯酚(100mg，0.58mmol)溶解于无水dmf(8ml)中。逐份添加nah(在矿物油中的60％分散体，25mg，0.64mmol)，并将溶液搅拌15分钟。滴加3-(溴甲基)氧杂环丁烷-3-基甲醇(105mg，0.58mmol)的dmf(2ml)溶液。在0℃下搅拌该溶液，并使其在4小时内温热至室温。过量的nah用h2o(2ml)淬灭，并通过旋转蒸发仪去除挥发物。将所得残留物悬浮在h2o(15ml)中，并用dcm(3×10ml)萃取，将合并的有机级分通过相分离器干燥，并通过高真空过夜去除残留的dmf。产物a10以粗制澄清油形式继续使用(155mg，定量)；lc-ms.rt2.92min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z273.2,275.2[m+h]⁺。

使用与化合物a10类似的程序制备以下溴代化合物a31：

表3

^##化合物a31由相应的甲苯磺酸酯而不是溴化物合成。甲苯磺酸盐由相应的市售醇制得：

(s)-3-羟基丁基4-甲基苯磺酸酯(a32)

在室温下于n2下，将对甲苯磺酰氯(381mg，1.68mmol)溶解在无水dcm(10ml)中。添加(s)-(+)-1,3-丁二醇(300μl，3.33mmol)，接着添加net3(450μl，3.33mmol)，并将该溶液搅拌18小时。将溶液用h2o(15ml)分配并用dcm(3×10ml)萃取，将合并的有机级分通过相分离器干燥，并将混合物上样到二氧化硅上以通过快速色谱法纯化。分离出呈澄清油状物的所需化合物a32(144mg，29％)；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ7.78(d,j＝8.0hz,2h),7.48(d,j＝8.0hz,2h),4.56(d,j＝5.0hz,1h),4.12-4.00(m,2h),3.65-3.57(m,1h)。2.43(s,3h),1.69-1.54(m,2h),1.00(d,j＝6.0hz,3h)。

通过还原2-(4-溴苯氧基)-2,2-二氟乙酸乙酯来制备以下溴代化合物a33(该酯是根据org.lett.,2016,18,18,4570-4573中报道的文献程序制备的)：

2-(4-溴苯氧基)-2,2-二氟乙醇(a33)

在0℃下，向硼氢化钠(2.7g，71.4mmol)在etoh(40ml)中的溶液中逐份添加2-(4-溴苯氧基)-2,2-二氟乙酸乙酯(7g，23.8mmol)。将反应混合物缓慢温热至室温，并在该温度下搅拌2小时。完成后，将反应用饱和氯化铵溶液(30ml)、1mhcl溶液(2ml)淬灭，然后用etoac(2×300ml)萃取。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈白色固体的2-(4-溴苯氧基)-2,2-二氟乙醇(a33)(5g，59％)。

由相应的三氟甲磺酸酯中间体制备以下溴-异糖苷，这些中间体是根据文献方法^a制备的：

(3r,3as,6r,6as)-6-(4-溴苯氧基)六氢呋喃并[3,2-b]呋喃-3-醇(a34)

在0℃下将氢化钠(73mg，2.16mmol，在油中的60％分散体)添加至4-溴苯酚在thf(10ml)中的溶液中，一旦停止鼓泡，就将反应在0℃下搅拌30分钟。然后滴加粗制的(3r,3as,6s,6ar)-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)六氢呋喃并[3,2-b]呋喃-3-基乙酸酯(509mg)的thf(6ml)溶液。一旦完成添加，就将反应在0℃下搅拌2小时，然后在室温下搅拌30分钟。tlc分析显示消耗了三氟甲磺酸酯；将反应真空浓缩并重新溶解在thf(12ml)中。然后添加在水(4ml)中的lioh(890mg，15.9mmol)，并将反应在50℃下搅拌2小时。在此之后，再添加一定量的lioh(800mg)，并将反应在室温下搅拌16小时。真空去除thf，添加etoac(50ml)并分离各层。用etoac(3×50ml)萃取水层，合并有机层，然后干燥(相分离器)。通过用5％-65％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化粗制物质，得到呈白色结晶固体的标题化合物a34(352mg，73％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.38(d,j＝9.0hz,2h),6.81(d,j＝9.0hz,2h),4.76-4.70(m,2h),4.59(d,j＝4.1hz,1h),4.38(brs,1h),4.00(ddd,j＝4.1,6.9,10.5hz,2h),3.94-3.86(m,2h),1.69(brs,1h)。

(通过与化合物a34类似的程序制备反式异构体。

表4

^a根据rscadv.[英国皇家化学会进展],2014,4,47937-47950中报道的文献方法制备的。

通过根据j.med.chem.[医药化学杂志],2016,59,8848-8858中报道的文献程序制备的5,5-二氟-1-氧杂螺[2.3]己烷的开环制备以下环丁基中间体。

1-((4-溴苯氧基)甲基)-3,3-二氟环丁-1-醇(a36)

将碳酸钾(1.44g，10.4mmol)添加到30ml密封管中5,5-二氟-1-氧杂螺[2.3]己烷(500mg，4.17mmol)和4-溴苯酚(788mg，4.58mmol)在mecn(5ml)中的搅拌溶液中，并将所得混合物在120℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并用etoac(10ml)洗涤。用水(10ml)和盐水(10ml)洗涤滤液。将有机层经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到粗产物，将粗产物通过用0-10％etoac/石油醚洗脱的硅胶柱色谱法纯化，得到呈浅黄色胶状物的标题化合物a36(400mg，33％)，lc-ms。rt3.59min,analph9_mecn_4min(1)；(esi^-)m/z586.0[2m-h]^-。

n-[3-(4-溴苯氧基)-1,1-二甲基-丙基]氨基甲酸叔丁酯(a37)

在室温下向4-溴苯酚(471mg，2.72mmol)、(4-羟基-2-甲基丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.38g，6.81mmol)和三苯基膦(1.78g，6.81mmol)在无水thf(9ml)中的溶液中滴加1,1’-(偶氮二羰基)二哌啶(1.73g，6.81mmol)在无水thf(9ml)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌2天，并将混合物过滤以去除白色沉淀物。将滤液用dcm稀释并用naoh水溶液(2m)洗涤以去除未反应的苯酚原材料。将有机级分蒸发至干，并通过用0-15％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物a37(464mg，48％)。

1-(4-溴-苯氧基甲基)-环丙醇(a38)

在0℃下于n2下，向(4-溴苯基)乙酸乙酯(2g，7.7mmol)在thf(20ml)中的溶液中添加异丙醇钛(iv)(2.3ml，7.7mmol)，然后滴加乙基溴化镁(3.0m的et2o溶液，7ml，20.8mmol)。使反应温热至室温，并搅拌2.5小时。将反应滴加到冰上，并将所得混合物用etoac(200ml)萃取，随之沉淀出固体，通过过滤收集该固体。分离有机层，使其通过相分离器并真空去除溶剂。通过用9％-17％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化粗制物质，得到呈白色固体的1-(4-溴-苯氧基甲基)-环丙醇(a38)(788mg，42％)；lc-ms.rt2.90min,analph2_meoh_4min(1)；(esi^-)m/z242.4(m-h)^-；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ7.46-7.32(m,2h),6.94-6.82(m,2h),5.55(s,1h),3.89(s,2h),0.67-0.59(m,2h),0.60-0.53(m,2h)。

使用与用于合成化合物ax类似的程序制备以下溴代中间体：

表5

^a化合物a39需要由所得酸制备的酯a40：

3-(4-溴苯氧基)丙酸甲酯(a40)

向3-(4-溴苯氧基)丙酸(4.90g，20mmol)在甲醇(16ml)中的搅拌悬浮液中小心地添加发烟硫酸(98％，20％-30％so3，4滴)。于微波中将反应混合物在140℃下加热5分钟，并再次以相同规模重复一次。将合并的反应混合物真空浓缩，并将所得残留物在etoac(100ml)和10％氢氧化钠水溶液(100ml)之间分配。分离有机层，并将水层用etoac(100ml)进行反萃。然后将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈浅黄色固体的标题化合物a40(9.86g，95％)。lc-ms.rt3.10min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z281.1,283.1[m+na]⁺。

5-溴-2-(环氧乙烷-2-基甲氧基)苯甲腈(a11)

将5-溴-2-羟基苯甲腈(2g，10.1mmol)和cs2co3(3.9g，12.1mmol)溶解在无水thf(25ml)中。滴加2-(氯甲基)环氧乙烷(789μl，10.1mmol)，并将溶液回流搅拌18小时。使溶液冷却至室温，并用etoac/异己烷溶液(1:1，150ml)稀释。过滤所得悬浮液，并真空去除挥发物。将粗制固体预先吸附到二氧化硅上，并通过用0-100％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化，得到呈白色固体的5-溴-2-(环氧乙烷-2-基甲氧基)苯甲腈(a11)(714mg，28％)；lc-ms.rt2.77min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z254.3,256.3[m+h]⁺。

(r)-1-(4-溴-苯氧基)-丙-2-醇(a12)

将r-(+)-环氧丙烷(1.22ml，17.3mmol)添加到装有4-溴苯酚(750mg，4.3mmol)和k2co3(1.19g，8.7mmol)在dmf中的搅拌悬浮液的反应容器中。将反应容器密封，并将悬浮液加热16小时至85℃过夜。一旦完成，就通过添加2mnaoh(水)溶液(10ml)淬灭反应，并允许搅拌1小时。然后添加h2o(80ml)，并将所得溶液用etoac(3×50ml)萃取，将合并的有机物合并并用盐水(2×50ml)洗涤，然后通过经mgso4过滤进行干燥并真空浓缩。通过用0-40％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化粗制物质，得到呈无色油状物的(r)-1-(4-溴-苯氧基)-丙-2-醇(a12)(744mg，75％)；lc-ms.rt2.88min,analph2_meoh_4min(1)，未检测到质量离子。¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ7.37(d,j＝8.9hz,2h),6.78(d,j＝8.9hz,2h),4.22-4.14(m,1h),3.89(dd,j＝9.2,3.2hz,1h),3.75(dd,j＝9.2,7.8hz,1h)。2.32-2.21(brs,1h),1.27(d,j＝6.4hz,3h)。

通过与化合物a12类似的程序制备s-对映异构体a13。

表6

根据文献方法合成以下溴代中间体：

表7

1-(4-溴苯氧基)-2-甲基-丙-2-胺(a43)

将溴乙腈(1.2ml，17.3mmol)添加到4-溴苯酚(2.00g，11.6mmol)和碳酸钾在dmf(60ml)中的搅拌悬浮液中。一旦完成添加，就将所得混合物在50℃下加热过夜。将反应混合物冷却至室温，用etoac(150ml)稀释并分离有机层，用水(2×70ml)、盐水(2×40ml)洗涤，然后通过相分离器进行干燥。将有机物真空浓缩，并将粗制化合物通过用0-50％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化，得到2-(4-溴苯氧基)乙腈(2.40g)。在n2下将一份这种材料(1.00g，4.72mmol)溶解在无水thf(20ml)中，并滴加甲基溴化镁(3m于et2o中，5.5ml，16.5mmol)。将反应混合物加热至60℃，保持1小时，然后滴加异丙醇钛(iv)(1.4ml，4.72mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌16小时。将反应混合物在dcm和盐水之间分配。将混合物通过硅藻土过滤，并用dcm洗涤滤饼。分离有机级分，再次用盐水洗涤，接着用10％naoh水溶液(2x)洗涤以去除苯酚原材料，通过相分离器干燥并蒸发至干，得到呈褐色油状物的所需产物a43(712mg，62％)；lc-ms.rt1.48min,analph2_mecn_4min(1)；(esi⁺)m/z244.0,246.0(m+h)⁺。

上述溴代中间体的boc保护得到a44：

n-[2-(4-溴苯氧基)-1,1-二甲基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(a44)

将1-(4-溴苯氧基)-2-甲基丙-2-胺(a43)(712mg，2.92mmol)溶解在dcm(5ml)中。添加溶解在dcm(4ml)中的二碳酸二叔丁酯(668mg，3.062mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌16小时。向反应混合物中加水淬灭未反应的二碳酸二叔丁酯，并将混合物再搅拌24小时。将反应混合物蒸发至干，并通过用0-15％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化，得到呈浅黄色固体的产物a44(516mg，51％)；lc-ms.rt3.48min,analph2_mecn_4min(1)；(esi⁺)m/z365.9,367.9(m+na)⁺。

由4-溴苯酚分2步制备以下二醇中间体a45。

1-(4-溴苯氧基)-3-甲基丁-2,3-二醇(a45)

在0℃下将4-溴苯酚(1.00g，5.78mmol)和nah(388mg，11.56mmol，在油中的60％分散体)的混合物悬浮于无水thf(80ml)中并搅拌30分钟，然后滴加1-溴-3-甲基丁-2-烯(1.29g，8.67mmol)。一旦完成添加，就使反应温热至室温并搅拌过夜。将反应混合物用水(70ml)稀释，分离各层，并用etoac(2×75ml)洗涤。使合并的有机物通过相分离器并真空浓缩。通过用0-50％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化粗制化合物，得到呈无色油状物的1-溴-4-((3-甲基丁-2-烯-1-基)氧基)苯(1.35g)，用于进一步衍生化。将混合物α(2.00g)添加到1-溴-4-((3-甲基丁-2-烯-1-基)氧基)苯(1.35g，5.6mmol)在叔丁醇/水中的搅拌双相溶液中。形成黄色双相溶液，允许将其搅拌16小时。添加另一份混合物α(500mg)，并允许将反应搅拌18小时。添加另一份混合物α(1.50g)，并允许将反应混合物搅拌18小时。将反应混合物用亚硫酸钠(5g)淬灭，并搅拌1小时。将混合物用etoac(75ml)和水(75ml)稀释，分离各层，并将水层用etoac(3×50ml)萃取，用盐水(20ml)洗涤，并使用相分离器进行干燥。通过用0-75％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化粗制固体，得到呈黄色油状物的标题化合物a45(1.13g)；lc-ms.rt2.81min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z297.1,299.1[m+na]⁺。未确定对映异构体过量。

溴代中间体用于使用双(频哪醇合)二硼来合成相应的硼酸酯或硼酸。这些反应可以使用传统的加热方法或在微波反应器中进行。

1-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基]-咪唑烷-2-酮(b1)

将koac(609mg，6.21mmol)和双(频哪醇合)二硼(631mg，2.48mmol)添加到圆底烧瓶中并置于n2下。添加在dmso(11ml)中的1-(4-溴苯基)四氢-2h-咪唑-2-酮(500mg，2.07mmol)，接着添加pd(dppf)cl2.dcm(51mg，0.06mmol)。向反应混合物中鼓入n2气体10分钟，在此之后将反应在85℃下加热3.5小时。将反应混合物冷却至室温，添加etoac(50ml)，用饱和nahco3(水溶液，50ml)和盐水(50ml)洗涤。分离有机相，使其通过相分离器并蒸发至干。通过用0％-2％meoh/dcm洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈白色固体的1-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基]-咪唑烷-2-酮(b1)(377mg，63％)；lc-ms.rt2.87min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z289.3[m+h]⁺。

使用与化合物b1类似的程序，通过在85℃下加热3小时，制备以下硼酸酯：

表8

1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基]-咪唑烷-2-酮(b2)

将1-(4-溴-苯基)-3-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-咪唑烷-2-酮(1.16g，2.9mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.10g，4.35mmol)、pd(dppf)cl2.dcm(237mg，0.29mmol)、koac(854mg，8.7mmol)和1,4-二噁烷(15ml)的混合物用氮气脱氧10分钟，然后于微波中在130℃下加热1小时。通过硅藻土过滤混合物，进一步用甲醇洗涤，然后真空浓缩。将粗制物质在dcm(50ml)和水(50ml)之间分配，使其通过相分离器，真空浓缩，然后通过用0-100％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化，得到呈乳状固体的1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基]-咪唑烷-2-酮(b2)(817mg，1.83mmol，63％)；lc-ms.rt3.80min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z447.3[m+h]⁺

使用与化合物b2类似的程序制备以下硼酸酯，加热持续时间在30分钟至16小时之间变化，并且加热温度在100℃至130℃之间：

表9

^a使用thf代替1,4-二噁烷作为溶剂

1-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基]-吡咯烷-2-酮(b16)

向1-(4-溴苯基)吡咯烷-2-酮(1.51g，6.3mmol)中添加在1,4-二噁烷:h2o混合物(25ml，4:1)中的双(频哪醇合)二硼(1.92g，7.56mmol)、cs2co3(2.46g，7.56mmol)、pd(dppf)cl2.dcm(515mg，0.63mmol)，并将反应混合物用n2吹扫15分钟。将反应混合物加热至回流，保持18小时。将反应混合物蒸发至干，悬浮于etoac(100ml)中并用h2o(100ml)洗涤，随之形成沉淀，通过过滤去除沉淀。分离有机相，使其通过相分离器并蒸发至干。通过用7％-32％etoac/异己烷洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈浅黄色固体的1-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基]-吡咯烷-2-酮(b16)(756mg，42％)；lc-ms.rt3.00min,analph2_meoh_4min；(esi⁺)m/z288.3[m+h]⁺。

使用与b16类似的程序制备以下硼酸酯：

表10

二甲基-{2-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯氧基]-乙基}-胺(b18)

向n-[2-(4-溴苯氧基)乙基]-n-n-二甲胺(500mg，2.05mmol)、双(频哪醇合)二硼(625mg，2.46mmol)、k2co3(425mg，3.07mmol)在dme(10ml)中的悬浮液中添加pd(dppf)cl2.dcm(84mg，0.1mmol)，并将反应混合物用n2脱氧10分钟，并将反应混合物在100℃下加热15小时。通过硅藻土筒柱(2.5g)过滤反应混合物，用meoh(8×cv)洗涤该柱，并真空蒸发滤液。通过用100％dcm-10％meoh/dcm洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈黄色油状物的二甲基-{2-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯氧基]-乙基}-胺(b18)(700mg，定量)；lc-ms.rt1.93min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z292.4[m+h]⁺。

通过相应醇的甲基化制备以下异糖苷硼酸酯：

2-(4-(((3r,3as,6s,6as)-6-甲氧基六氢呋喃并[3,2-b]呋喃-3-基)氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(b69)

在0℃下向氢化钠(73mg，2.20mmol，在油中的60％分散体)在无水thf(14ml)中的搅拌悬浮液中添加(3s,3as,6r,6as)-6-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯氧基)六氢呋喃并[3,2-b]呋喃-3-醇(b66)(500mg，1.44mmol)在无水thf(5ml)中的溶液。将反应在0℃下搅拌10分钟，然后添加碘甲烷(267μl，4.32mmol)。将所得反应混合物在0℃下搅拌30分钟，然后温热至室温并真空浓缩。将残留物重新溶解在dcm中，吸附到硅胶上，通过用5％-75％etoac/异己烷洗脱的硅胶柱色谱法纯化，得到呈无色油状物的标题化合物(110mg，21％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.74(d,j＝8.7hz,2h),6.90(d,j＝8.7hz,2h),4.82(d,j＝3.2hz,1h),4.75(d,j＝4.4hz,1h),4.62(d,j＝4.6hz,1h),4.18(dd,j＝10.5,4.1hz,1h),4.12(d,j＝8.7hz,1h),4.01-3.91(m,2h),3.67(t,j＝7.3hz,1h),3.48(s,3h),1.32(s,12h)。

使用酰胺偶联反应，由相应的苯胺基取代的硼酸酯合成许多硼酸酯：

2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-n-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]乙酰胺(b19)

向4-(4,4,5,5)四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基苯胺(500mg，2.28mmol)、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙酸(433mg，2.74mmol)和hatu(1.04g，2.74mmol)在dmf(11ml)中的混合物中添加dipea(1.2ml，6.85mmol)，并将反应在室温下搅拌2小时。真空去除溶剂，将残留物溶解在dcm(50ml)中，并用饱和nahco3(水溶液)(50ml)洗涤。分离各层(相分离器)，并将有机相蒸发至干。通过用100％dcm至10％meoh/dcm洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈白色固体的2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-n-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基]乙酰胺(b19)(565mg，69％)；lc-ms.rt2.03min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z360.4[m+h]⁺。

使用与化合物b19类似的程序制备以下硼酸/硼酸酯：

表11

^a使用2.4当量的hatu和酸性物质，反应时间为36小时；^b使用tbtu代替hatu；^c使用hoat和edc.hcl代替hatu，使用tea代替dipea，使用dcm代替dmf，持续24小时，使用scx-2筒柱纯化。

使用酰胺偶联条件，由相应的苯甲酸制备以下酰胺：

n-(2-二甲基氨基-乙基)-3-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯甲酰胺(b26)

向3-羧基苯硼酸频哪醇酯(500mg，2.02mmol)、hoat(411mg，3.02mmol)和edc.hcl(579mg，3.02mmol)在dmf(10ml)中的溶液中添加n,n-二甲基乙二胺(440μl，4.03mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(30ml)稀释，然后在etoac(2×50ml)中萃取。将合并的有机物用h2o(2×30ml)洗涤，然后用盐水(30ml)洗涤，干燥(无水mgso4)，过滤并真空浓缩，得到呈浅黄色油状物的n-(2-二甲基氨基-乙基)-3-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯甲酰胺(b26)(186mg，0.58mmol，29％)；lc-ms.rt2.03min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z319.3[m+h]⁺

通过相应环氧化物的开环合成了许多经取代的硼酸酯：

1-吗啉-4-基-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯氧基]-丙-2-醇-(b27)

将4-(环氧乙烷-2-基甲氧基)苯基硼酸、频哪醇酯(1.0g，3.62mmol)和吗啉(443μl，5.07mmol)在异丙醇(20ml)中的溶液在微波反应器(200w)中于100℃下加热30分钟。再次重复该反应。将两种反应混合物合并并真空浓缩。将粗制固体预先吸附到二氧化硅上，并通过用0-5％meoh/dcm洗脱的硅胶色谱法纯化，得到呈白色固体的1-吗啉-4-基-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯氧基]-丙-2-醇(b27)(2.56g，97％)；lc-ms.rt1.90min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z364.4[m+h]⁺。

使用与化合物b27类似的程序制备以下硼酸酯：

表12

^a使用2-(环氧乙烷-2-基甲氧基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯甲腈(b12)合成的；^b胺类物质用作hcl盐，因此还添加了1当量的et3n。

由市售的异氰酸酯制备以下脲取代的硼酸酯的两种对映异构体。

(s)-3-羟基-吡咯烷-1-羧酸[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基]-酰胺(b35)

向4-(异氰酰苯基)硼酸、频哪醇酯(100mg，0.41mmol)和(s)-3-吡啶醇(53mg，0.61mmol)中添加dcm(1ml)，并将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物进行真空蒸发，溶解在meoh(2ml)中，并使其通过5gscx-2筒柱，用meoh(2×cv)和dcm(2×cv)洗脱。真空去除溶剂，得到呈紫色油状物的(s)-3-羟基-吡咯烷-1-羧酸[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基]-酰胺(b35)(107mg，79％)；lc-ms。rt2.72min,analph2_meoh_4min(1)；(esi+)m/z333.4[m+h]⁺

使用类似于化合物b35的程序制备(r)对映异构体b36。

表13

通过相应酚的光延反应(mitsunobureaction)制备许多硼酸酯：

3-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯氧基甲基]-氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(b37)

将4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯酚(100mg，0.45mmol)、1,1′-(偶氮二羰基)二哌啶(230mg，0.91mmol)和pph3(238mg，0.91mmol)于n2下溶解在thf(5ml)中，并添加3-羟甲基-氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(80μl，0.45mmol)。将溶液在室温下搅拌18小时。将反应在h2o(10ml)和dcm(3×15ml)之间分配，并通过相分离器干燥有机层。通过快速色谱法(在异己烷中的0-100％etoac)获得最终化合物。分离出呈透明胶状物的标题化合物(120mg，68％)。lc-ms.rt3.53min,analph2_meoh_4min(1)；(esi+)m/z390.3[m+h]⁺。

使用与化合物b37类似的程序制备以下硼酸酯。

表14

^a使用了聚合物支撑的三苯基膦。^b使用偶氮二羧酸二异丙酯代替1,1′-(偶氮二羰基)二哌啶。

通过置换相应的甲苯磺酰基衍生物制备以下氧杂环丁烷中间体：

甲苯-4-磺酸3-羟基-氧杂环丁烷-3-基甲基酯(a46)

在0℃下于n2下，向3-(羟甲基)氧杂环丁-3-醇(250mg，2.4mmol)在无水dcm(7ml)和无水吡啶(7ml)中的搅拌溶液中添加对甲苯磺酰氯(595mg，3.12mmol)。将反应维持在该温度下5.5小时。将反应混合物蒸发至干，在etoac(50ml)和h2o(50ml)之间分配。分离有机相，用2mhcl(50ml)、饱和nahco3水溶液(50ml)洗涤。分离有机相(相分离器)并蒸发至干。通过用30％-80％etoac/异己烷洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈白色固体的甲苯-4-磺酸3-羟基-氧杂环丁烷-3-基甲基酯(a46)(411mg，66％)；lc-ms.rt2.23min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z259.3[m+h]⁺。

3-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯氧基甲基]-氧杂环丁-3-醇(b41)

将甲苯-4-磺酸3-羟基-氧杂环丁-3-基甲基酯(100mg，0.39mmol)、4-羟基苯硼酸酯(102mg，0.46mmol)、k2co3(80mg，0.58mmol)和无水dmf(1ml)添加到微波小瓶中，并在80℃下加热4小时。将反应混合物蒸发至干，悬浮在dcm(20ml)中，并用h2o(20ml)洗涤。分离有机相(相分离器)并蒸发至干。通过用5％-35％etoac/异己烷洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈白色固体的3-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯氧基甲基]-氧杂环丁-3-醇(71mg，60％)；lc-ms.rt2.93min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z329.3[m+na]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ7.58(**d,2h,j＝8.2hz),6.94(**d,2h,j＝8.7hz),5.99(s,1h),4.47-4.43(m,4h),4.09(s,2h),1.24(s,12h)。

根据文献方法合成以下硼酸/硼酸酯：

表15

根据以下路线合成许多式(ia)的实例：

路线1：方案1

实例ex-1：4-(4-氧代-5-苯基-3,4-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸

2-(2-氧代-2-苯基-乙基)-异吲哚-1,3-二酮(a16)

在室温下轻轻搅拌在无水dmf(64ml)中的邻苯二甲酰亚胺化钾(6.00g，32mmol)和2-溴苯乙酮(6.44g，32mmol)，直至放热反应停止。将反应混合物在150℃下加热30分钟。将反应混合物冷却至室温，并将所得固体过滤。将滤液倒入h2o中，并将所得固体过滤，用h2o洗涤并真空干燥过夜，得到呈浅黄色固体的2-(2-氧代-2-苯基-乙基)-异吲哚-1,3-二酮(7.30g，85％)；lc-ms.rt2.85min,analph2_meoh_4min；(esi⁺)m/z266.2[m+h]⁺。

2-氨基-4-苯基-1h-吡咯-3-腈(a17)

在0°下向在etoh(55ml)中的2-(2-氧代-2-苯基-乙基)-异吲哚-1,3-二酮(a16)(7.30g，27.0mmol)和丙二腈(2.36g，35.6mmol)中添加乙醇钠(3.75g，55.1mmol)，并将反应在室温下搅拌30分钟，然后在60℃下搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至室温并真空浓缩。将残留物用1％acoh(水溶液)(100ml)淬灭，得到褐色沉淀，过滤褐色沉淀并用h2o洗涤。将粗产物溶解在meoh(20ml)中，并通过scx-2(50g)纯化，用meoh(2×cv)洗涤，并用0.5mnh3/meoh从柱上洗脱化合物，得到呈暗红色固体的2-氨基-4-苯基-1h-吡咯-3-腈(a17)(3.30g，65％)；lc-ms.rt2.47min,analph2_meoh_4min；(esi⁺)m/z184.2[m+h]⁺。

2-氨基-4-苯基-1h-吡咯-3-羧酸酰胺(a18)

将2-氨基-4-苯基-1h-吡咯-3-腈(a17)(670mg，3.65mmol)溶解在浓h2so4(6ml)中，并将反应混合物在100℃下加热45分钟。将反应混合物冷却至0℃，并用2mnaoh(100ml)淬灭至ph7-8。用etoac(3×50ml)萃取化合物，并用h2o洗涤合并的有机层，经na2so4干燥，过滤并在真空中去除溶剂，得到呈暗红色固体的2-氨基-4-苯基-1h-吡咯-3-羧酸酰胺(a18)(126mg，17％)；lc-ms.rt2.19min,analph9_meoh_4min；(esi⁺)m/z202.3[m+h]⁺。

5-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(a19)

向2-氨基-4-苯基-1h-吡咯-3-羧酸酰胺(a18)(1.46g，7.25mmol)在dmf(18ml)中的溶液中添加对甲苯磺酸(41mg，0.22mmol)和原甲酸三乙酯(24ml，145mmol)，并将溶液在室温下于n2下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干，得到呈暗红色固体的5-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(a19)(1.8g，定量)，将其用于下一步骤，无需进一步纯化；lc-ms.rt2.31min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z212.3[m+h]⁺。

4-氯-5-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(a20)

将5-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(a19)(1.53g，7.25mmol)溶解在pocl3(36ml，7.2mmol)和dmf(6.5ml)中并将反应混合物在120℃下加热1小时。蒸发反应混合物得到粘性油状物。将冰添加到残留物中，并将残留物置于冰浴中。边连续搅拌边添加nh4oh(水溶液，30％nh3)，并将残留物碱化至ph10，然后用dcm(3×200ml)萃取。使有机层通过相分离器并蒸发至干。在水层和相分离筒柱中均观察到沉淀，过滤沉淀并且发现含有所需产物。将该沉淀与蒸发的滤液合并。通过用15％-35％etoac/异己烷洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈灰白色固体的4-氯-5-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(a20)(789mg，47％)；lc-ms.rt3.01min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z230.3,232.3[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ12.83-12.79(brs,1h),8.63(s,1h),7.79(s,1h),7.55(m,2h),7.44(m,2h),7.36(m,1h)。

4-(4-氯-5-苯基-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸(cp1)

向4-氯-5-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(a20)(100mg，0.44mmol)、cu(oac)2(198mg，1.09mmol)、4-羧基苯硼酸(181mg，1.09mmol)、net3(303μl，2.18mmol)和分子筛(1x小抹刀)中添加dmf(2.2ml)。盖上反应容器并插入针头以使o2(空气)进入反应混合物。将反应混合物在60℃下加热2小时。添加另外量的cu(oac)2(79mg，0.44mmol)、4-羧基苯硼酸(72mg，0.44mmol)和net3(121μl，0.88mmol)，并将反应混合物在60℃下再加热1小时。将反应混合物蒸发至干，悬浮在dcm(50ml)中，并用h2o(50ml)洗涤。过滤合并的水/有机层，并使其通过相分离器。将有机相蒸发至干，再溶解在dcm(2ml)中，并使其通过si-硫醇筒柱(2g)，用dcm(2cv)、meoh(2cv)洗脱，将滤液进行真空蒸发。通过反相制备型hplc-ms纯化粗制化合物，得到呈白色固体的4-(4-氯-5-苯基-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸(cp1)(21.6mg，14％)；lc-ms.rt3.42min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z350.2,352.2[m+h]⁺。

使用市售的硼酸酯/硼酸，使用用于合成中间体cp1的类似程序(反应持续时间为1至3小时)，由(a20)制备以下经取代的4-氯-5-苯基吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物：

表16

4-(4-氧代-5-苯基-3,4-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸(ex-1)

向4-(4-氯-5-苯基-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸(cp1)(21.6mg，0.06mmol)中添加naoac(10.1mg，0.12mmol)和冰acoh(0.12ml，0.06mmol)并将反应混合物在100℃下加热过夜。将反应混合物用dcm(5ml)和h2o(5ml)稀释，形成细小沉淀，通过过滤收集沉淀。使所得滤液通过相分离器。将有机相与过滤的沉淀合并，并蒸发至干。将产物从1:1mecn/h2o中冻干，得到呈白色固体的4-(4-氧代-5-苯基-3,4-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸(ex-1)(20mg，100％)；lc-ms.rt7.52min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z332.2[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ13.13(brs,1h),12.28(brd,j＝3.8hz,1h),8.11(d,j＝8.8hz,2h),8.04(d,j＝3.8hz,1h),8.02-7.97(m,4h),7.93(s,1h),7.40(t,j＝7.3hz,2h),7.28(tt,j＝7.3,1.3hz,1h)。

使用与实例ex-1类似的程序合成以下实例：

表17

^a由经取代的4-氯-5-苯基吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物计算得出的产率。^f以甲酸盐形式分离

由ex-1合成许多酰胺实例：

n-甲基-4-(4-氧代-5-苯基-3,4-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-苯甲酰胺(ex-5)

向在无水dmf(0.55ml)中的4-(4-氧代-5-苯基-3,4-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸(16mg，0.05mmol)和tbtu(16mg，0.05mmol)中添加1mdipea/dcm，并将反应混合物在室温下搅拌50分钟(在n2气球下)。添加在1mdipea/dcm中的甲胺盐酸盐(7mg，0.1mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。使反应混合物通过1gsi-nh2筒柱(用dmf+meoh预先调节)，并用dmf(2×cv)和meoh(2×cv)洗涤该柱。真空去除溶剂。通过反相制备型hplc-ms纯化粗制化合物，并将产物从1:1mecn/h2o中冻干，得到呈灰白色固体的n-甲基-4-(4-氧代-5-苯基-3,4-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-苯甲酰胺(ex-5)(9mg，55％)；lc-ms.rt7.10min,analph2_meoh_qc(1)；(esi⁺)m/z345.2[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ12.27-12.08(brs,1h),8.57(q,j＝4.5hz,1h),8.03-7.99(m,5h),7.93(**d,j＝8.8hz,2h),7.90(s,1h),7.39(**t,j＝7.3hz,2h),7.28(tt,j＝7.33,1.3hz,1h),2.83(d,j＝4.5hz,3h)。

使用与ex-5类似的程序合成以下实例：

表18

根据以下路线2a或路线2b合成许多式(ia)的实例：

路线2：方案2

使用路线2合成化合物需要使用chanlam化学方法合成许多4-氯-5-碘-7-芳基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶中间体。

4-氯-5-碘-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(ch1)

向4-氯-5-碘-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(15.0g，53.5mmol)在dmf(100ml)中的溶液中添加2-苯基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(17.3g，107.0mmol)、一水合乙酸铜(ii)(21.35g，107.0mmol)和活化分子筛(0.4g)，接着添加net3(22.3ml，160.4mmol)，并将所得反应混合物在60℃下搅拌24小时。然后将反应混合物冷却至室温，并将溶剂真空浓缩。将粗制残留物溶解在dcm(300ml)中，并用饱和edta(水溶液)(100ml)淬灭。分离的水层用dcm(2×100ml)萃取，合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并真空浓缩。粗制化合物通过反相制备型hplc纯化，得到呈灰白色固体的4-氯-5-碘-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(6.2g，33％)；lc-ms.rt3.37min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z356.1,358.0[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.70(s,1h),8.39(s,1h),7.81-7.77(m,2h),7.61-7.56(m,2h),7.47(tt,j＝7.8,1.4hz,1h)。

使用与中间体ch1类似的程序制备以下中间体(反应持续时间在5-24小时之间变化)：

表19

^a通过硅胶色谱法纯化。^b后处理程序涉及使反应混合物通过scx-2筒柱并用meoh、dmf、dcm和etoac洗脱。

路线2a，步骤2，铃木-宫浦偶联(suzuki-miyauracoupling)

5-(4-氯-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-2-(2-羟基-2-甲基-丙氧基)-苯甲腈(cp5)

将4-氯-5-碘-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(ch1)(100mg，0.281mmol)、2-(2-羟基-2-甲基-丙氧基)-5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯甲腈(b13)(133.9mg，0.42mmol)、pd(dppf)cl2.dcm(22.9mg，0.028mmol)和k2co3(77.7mg，0.56mmol)在1,4-二噁烷:h2o(1.5ml，9:1)中的混合物用n2脱氧5分钟，然后在微波反应器中于90℃加热1小时。将反应混合物通过si-硫醇筒柱(1g)过滤，并用甲醇(3×cv)洗涤，接着用dcm(3×cv)洗涤。将有机物真空浓缩。通过用0-60％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化粗制固体，得到呈橙色油状物的4-氯-7-[4-(3-吗啉-4-基丙氧基)苯基]-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(cp5)(61.3mg，52％)。lc-ms.rt3.23min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z419.3[m+h]⁺。

使用与cp5类似的程序制备以下化合物(加热持续时间在15-90分钟之间变化；温度在90℃-95℃之间变化)：

表20

^≠除非另有说明，否则使用商业原料或ch1。^a在90℃下加热1小时，然后添加pd(d^tbupf)cl2并加热230分钟；^b2,6-二氟苯基硼酸(1.5当量)、(tbu3p)2pd(0.2当量)、dipea(2当量)、1,4-二噁烷:h2o(9:1)。^f以甲酸盐形式分离。

路线2a，步骤2，添加net3进行铃木-宫浦偶联

1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-3-[4-(4-氯-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯基]-咪唑烷-2-酮(cp59)

将4-氯-5-碘-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(ch1)(80mg，0.225mmol)、1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯基]-咪唑烷-2-酮(b2)(151mg，0.338mmol)、pd(dppf)cl2.dcm(9.2mg，0.011mmol)、k2co3(62mg，0.450mmol)、net3(47μl，0.338mmol)在1,4-二噁烷:h2o(2ml，4:1)中的混合物用氮气脱氧10分钟，然后在微波中于90℃加热30分钟。通过硅藻土过滤混合物，进一步用甲醇洗涤，然后真空浓缩。将粗制物质在dcm和水之间分配，使其通过相分离器，真空浓缩，然后通过用0-100％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化。奖获得的物质通过用0-100％et2o/异己烷洗脱的硅胶色谱法进一步纯化，得到1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-3-[4-(4-氯-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯基]-咪唑烷-2-酮(cp5)(53mg，43％)；lc-ms.rt3.86min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z548.3[m+h]⁺。

使用与cp59类似的程序合成以下化合物：

表21

通过相应酚的烷基化制备以下氯-嘧啶化合物：

5-(4-(丁-2-烯-1-基氧基)苯基)-4-氯-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(cp75)

将碳酸钾(75mg，0.54mmol)添加到5-(4-羟苯基)-7-苯基-3,7-二氢-4h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(cp74)(87mg，0.27mmol)和反式-1-溴-2-丁烯(138μl，1.35mmol)在丙酮(6ml)中的溶液中，然后加热至60℃，保持18小时。将反应混合物过滤并将有机物真空浓缩。通过用1％-35％etoac/异己烷洗脱的硅胶色谱法纯化粗制残留物，得到呈白色固体的(4-(丁-2-烯-1-基氧基)苯基)-4-氯-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(cp75)(138mg，68％)；lc-ms.rt3.65min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z376.2[m+h]⁺。

路线2a，步骤3：通过酸性水解的最终化合物

2-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-5-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)苯甲腈(ex-7)

将5-(4-氯-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-2-(2-羟基-2-甲基-丙氧基)-苯甲腈(cp5)(74.8mg，0.179mmol)和naoac(29.4mg，0.358mmol)在acoh(358μl)中的混合物在100℃下加热3小时。将反应混合物真空浓缩。通过反相制备型hplc-ms纯化粗制残留物，得到呈白色固体的2-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-5-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)苯甲腈(ex-7)(48.6mg，68％)；lc-ms.rt7.88min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z401.3[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):12.23(brs,1h),8.45(d,j＝2.5hz,1h),8.33(dd,j＝9.2,2.3hz,1h),7.99(s,1h),7.97(s,1h),7.80-7.76(m,2h),7.59-7.54(m,2h),7.45-7.41(m,1h),7.28(d,j＝8.7hz,1h),4.75(s,1h),3.92(s,2h),1.26(s,6h)。

使用与ex-7类似的程序合成以下化合物(加热持续时间在1.5-24小时之间变化)：

表22

^a使用对映异构体混合物。

路线2a：步骤3，通过酸性水解然后碱性水解的最终化合物

5-[4-(2-羟基-3-吗啉-4-基-丙氧基)-苯基]-7-(3-甲氧基-苯基)-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-41)

将1-{4-[4-氯-7-(3-甲氧基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基]-苯氧基}-3-吗啉-4-基-丙-2-醇甲酸盐(cp35)(21.0mg，0.039mmol)和naoac(6.40mg，0.078mmol)在acoh(50μl)中的搅拌溶液在100℃下加热3小时。然后将反应混合物真空浓缩，并将所得残留物用h2o稀释，并且添加lioh.h2o(43.2mg，1.03mmol)。将所得混合物在40℃下加热2小时。将反应混合物真空浓缩，并将粗制化合物通过反相制备型hplc-ms纯化，得到呈白色固体的5-[4-(2-羟基-3-吗啉-4-基-丙氧基)-苯基]-7-(3-甲氧基-苯基)-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-41)(15mg，83％)；lc-ms.rt5.47min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z477.1[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):12.12-12.02(brs,1h),7.93-7.86(m,3h),7.68(s,1h),7.43-7.38(m,1h),7.34-7.30(m,2h),6.96-6.89(m,3h),4.84(d,j＝4.6hz,1h),4.00-3.93(m,3h),3.79(s,3h),3.56-3.50(m,4h),2.44-2.38(m,6h)。

使用与ex-41类似的程序制备以下实例(对于每次水解，加热持续时间在0.5-24小时之间变化)：

表23

^a在室温下进行66小时的碱性水解。f以甲酸盐的形式分离。

由甲硅烷基保护的氯-嘧啶直接制备以下最终化合物。

5-{4-[3-(2-羟基-乙基)-2-氧代-咪唑烷-1-基]-苯基}-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-55)

将1-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-3-[4-(4-氯-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯基]-咪唑烷-2-酮(cp29)(65mg，0.12mmol)、naoac(30mg，0.36mmol)和acoh(1ml)的溶液在100℃下加热4小时。将混合物真空浓缩，然后重新溶解在thf(1ml)中。添加tbaf在thf中的溶液(180μl，1m，0.18mmol)，并将混合物在室温下搅拌3小时。再添加一等份的tbaf(180μl，1m，0.18mmol)，并在室温下继续搅拌90分钟。将混合物真空浓缩，然后再溶解在thf(1ml)和h2o(1ml)的混合物中。添加lioh.h2o(25mg，0.6mmol)，并将混合物在室温下搅拌18小时。再添加一定量的lioh.h2o(15mg，0.36mmol)，并在室温下继续再搅拌1小时。通过反相制备型hplc-ms纯化混合物。通过用0-20％meoh/dcm洗脱的硅胶色谱法纯化获得的物质。将获得的物质重新溶解在mecn:h2o(2ml，1:1)中，然后冻干得到呈灰白色固体的5-{4-[3-(2-羟基-乙基)-2-氧代-咪唑烷-1-基]-苯基}-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(24mg，48％)；lc-ms.rt7.30min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z416.1[m+h]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ12.11(brs,1h),7.98-7.94(m,3h),7.78-7.74(m,3h),7.58-7.52(m,4h),7.41(t,j＝7.6hz,1h),4.74(brs,1h),3.84-3.80(m,2h),3.57-3.52(m,4h),3.25(t,j＝6.0hz,2h)。

路线2a，步骤3：通过碱性水解的最终化合物

5-[2-氟-4-(2-羟基-乙氧基)-苯基]-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-56)

将2mnaoh(415μl，0.83mmol)添加到2-[4-(4-氯-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-3-氟-苯氧基]-乙醇(cp28)(32.0mg，0.083mmol)在1,4-二噁烷(500μl)中的搅拌溶液中。将所得混合物回流加热90分钟。将反应混合物冷却至室温，并用甲酸酸化至ph5。将所得反应混合物真空浓缩，然后将粗制固体通过反相制备型hplc-ms纯化，得到呈白色固体的5-[2-氟-4-(2-羟基-乙氧基)-苯基]-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-56)(10mg，34％)；lc-ms.rt7.36min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z366.3[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):12.18-12.11(brs,1h),7.98(s,1h),7.80-7.72(m,3h),7.60-7.53(m,3h),7.46-7.41(m,1h),6.88(dd,j＝12.6,2.5hz,1h),6.84(dd,j＝8.6,2.5hz,1h),4.86(t,j＝5.6hz,1h),4.03(t,j＝5.1hz,2h),3.74(q,j＝5.1hz,2h)。

使用与ex-56类似的程序制备以下实例：

表24

路线2b，步骤4：酸性水解

5-碘-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ch4)

将4-氯-5-碘-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(ch1)(4.00g，11.25mmol)和naoac(1.85g，22.5mmol)在acoh(25ml)中的悬浮液在100℃下加热15小时。将反应混合物真空浓缩。用h2o稀释粗制固体，并将所得固体过滤并真空干燥，得到呈黄色固体的5-碘-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ch4)(3.68g，97％)；lc-ms.rt2.79min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z338.1[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ12.16(brs,1h),7.95(s,1h),7.70-7.66(m,2h),7.68(s,1h),7.56-7.51(m,2h),7.41(tt,j＝7.31.4hz,1h)。

使用与ch4类似的程序制备以下中间体：

表25

^a通过硅胶色谱法纯化。

路线2b，步骤5：通过铃木-宫浦偶联的最终化合物

5-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-58)

将5-碘-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ch4)(180mg，0.534mmol)、2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(186mg，0.667mmol)(商业来源)、pd(dppf)cl2(43.6mg，0.053mmol)和k2co3(148mg，1.07mmol)在1,4-二噁烷:h2o(3ml，9:1)中的混合物脱氧5分钟，然后在微波反应器中于120℃下总共加热90分钟。在微波反应器中加热2小时，以相同规模重复反应。通过硅藻土过滤反应混合物，并用甲醇洗涤。将合并的有机物真空浓缩。将粗制固体用dcm(25ml)和h2o(25ml)稀释，并将各层通过相分离器分离。将合并的有机物真空浓缩。通过用0-7.5％meoh/dcm洗脱的硅胶色谱法纯化粗制固体，接着进行反相制备型hplc-ms。用0-5％meoh/dcm洗脱，使用硅胶色谱法进行最终纯化，得到呈白色固体的5-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-58)(70mg，18％)；lc-ms.rt7.66min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z362.2[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):12.13(brs,1h),7.95(s,1h),7.93(d,j＝8.8hz,2h),7.78-7.75(m,2h),7.73(s,1h),7.58-7.55(m,2h),7.42(tt,j＝7.6,1.3hz,1h),6.95(d,j＝8.8hz,2h),4.13-4.11(m,2h),3.69-3.66(m,2h),3.32(s,3h)。

使用与ex-59类似的程序合成以下实例(加热持续时间在0.5-3小时之间变化)：

表26

^a使用cs2co3代替k2co3；^b使用pd(pph3)4代替pd(dppf)cl2.dcm；^f以甲酸盐的形式分离。^≠如果没有说明，则为商用的和/或ch4。

路线2b，步骤5：使用pdxphosg3和k3po4作为碱通过铃木偶联生成的最终化合物

5-(2-氟-4-(3-羟基-3-甲基丁氧基)苯基)-7-苯基-3,7-二氢-4h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-107)

将在1,4-二噁烷:h2o(3ml，4:1)中的5-碘-7-苯基-3,7-二氢-4h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(100mg，0.297mmol)、4-(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯氧基)-2-甲基丁-2-醇(b56)(115mg，0.356mmol)、k3po4(126mg，0.594mmol)、pdxphosg3(12.7mg，0.015mmol)用n2脱氧5分钟，然后在微波反应器中于90℃加热1小时。将反应混合物通过si-硫醇筒柱(2g)过滤，并用meoh(3×cv)洗涤，接着用dcm(3×cv)洗涤。将滤液蒸发至干，并将粗制残留物通过用0-10％meoh/dcm洗脱的硅胶柱色谱法纯化，接着进行反相制备型hplc纯化，得到呈白色固体的5-(2-氟-4-(3-羟基-3-甲基丁氧基)苯基)-7-苯基-3,7-二氢-4h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(47mg，39％)；lc-ms.rt8.27min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z408.3[m+h]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ12.12(s,1h),7.97(s,1h),7.78-7.72(m,3h),7.58-7.53(m,3h),7.45-7.40(m,1h),6.90-6.80(m,2h),4.41(s,1h),4.14(t,j＝7.1hz,2h),1.86(t,j＝7.1hz,2h),1.18(s,6h)。

使用与化合物ex-x类似的程序制备以下式(1a)的化合物，加热持续时间在1小时-1.5小时之间：

表27

^≠如果没有说明，则为商用的和/或ch4。^a以水溶液形式添加k3po4

通过酸性boc-脱保护，接着将所得的胺乙酰化来制备实例ex-71。

n-[3-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苄基]-乙酰胺(ex-71)

将[3-(4-氯-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苄基]-氨基甲酸叔丁酯(cp46)(26mg，0.06mmol)、naoac(15mg，0.18mmol)和acoh(1ml)的混合物在100℃加热18小时。将混合物真空浓缩，然后重新溶解在dcm(5ml)中。添加ac2o(8.5μl，0.09mmol)和吡啶(7.3μl，0.09mmol)，并将混合物在室温下搅拌5分钟。将混合物用1mhcl(水溶液)稀释，萃取到乙酸乙酯(x2)中，用盐水洗涤，干燥(无水mgso4)，过滤，真空浓缩，通过反相制备型hplc-ms纯化，然后从mecn:h2o混合物(2ml，1:1)中冻干，得到呈白色固体的n-[3-(4-氧代-5-苯基-4,5-二氢-3h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苄基]-乙酰胺(ex-71)(9.8mg，0.027mmol，46％)；lc-ms.rt7.02min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z359.3[m+h]⁺。

由ex-11合成实例ex-72。

[4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苄基]-氨基甲酸叔丁酯(ex-72)。

将4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯甲腈ex-11(30mg，0.1mmol)、nicl2(12mg，0.1mmol)和二碳酸二叔丁酯(42mg，0.2mmol)悬浮在1:1thf:meoh(0.8ml)中并冷却至0℃。添加nabh4(26mg，0.7mmol)，接着再添加1:1thf:meoh(0.2ml)，并将反应混合物在室温下搅拌18小时。再添加nabh4(26mg，0.7mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。添加在thf(0.1ml)中的二亚乙基三胺(11μl，0.1mmol)，并将反应混合物搅拌30分钟。真空去除溶剂，将残留物悬浮在dcm(20ml)中，并用nahco3(饱和水溶液，2×20ml)洗涤。分离有机层(相分离器)并蒸发至干，得到呈浅紫色固体的[4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苄基]-氨基甲酸叔丁酯(22mg，52％)，无需进一步纯化即可用于下一步；lc-ms.rt3.28min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z361.2[m+h-tert-bu]⁺.,833.2[2m+h]⁺。

使用与ex-72类似的程序合成以下实例：

表28

由ex-72合成实例ex-74。

5-(4-氨基甲基-苯基)-7-苯基-3,7-二氢吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-74)

将tfa/dcm1:2(0.45ml)添加至[4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苄基]-氨基甲酸叔丁酯(ex-72)(22mg，0.05mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干，用0.7mnh3/meoh中和并蒸发至干。将残留物溶解在dcm(2ml)中，并使其通过scx-2筒柱(1g)，用meoh(2×cv)和dcm(2×cv)洗涤。用0.7mnh3/meoh从柱上洗脱化合物。通过反相制备型hplc-ms纯化粗制化合物，并从1:1mecn/h2o中冻干获得呈白色固体的5-(4-氨基甲基-苯基)-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(5.4mg，34％)；lc-ms.rt5.04min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z317.3。

使用与实例ex-74类似的程序合成以下实例(反应持续时间在0.5-1.5小时之间变化)：

表29

^f以甲酸盐形式分离。

由boc保护的氯-嘧啶直接制备以下最终化合物：

由cp37合成实例ex-80。

5-[4-(氮杂环丁烷-3-基甲氧基)-苯基]-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮-甲酸盐(ex-80)

将3-[4-(4-氯-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苯氧基甲基]-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯cp37(81mg，0.16mmol)和naoac(41mg，0.49mmol)溶解在acoh(5ml)中，并在回流下搅拌18小时。用naoh溶液(50％的水溶液)中和该溶液，并将混合物在dcm和h2o之间分配。通过相分离器干燥有机层，并真空去除挥发物。将残留物溶解在dmso中，并通过反相制备型hplc-ms纯化。在1:1h2o:mecn中冷冻干燥后，获得呈白色固体的ex-80(5mg，8％)；lc-ms.rt7.71min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z373.2[m+h]⁺。

使用与ex-80类似的程序合成以下实例：

表30

^f以甲酸盐的形式分离。

由ex-10合成实例ex-82。

[4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯基]-乙酸(ex-82)

向[4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯基]-乙酸乙酯(ex-10)(40mg，0.11mmol)、lioh·h2o(14mg，0.33mmol)中添加thf:meoh3:1(2.2ml)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用dcm(10ml)稀释并蒸发至干。通过反相制备型hplc-ms纯化粗制化合物，并从1:1mecn/h2o中冻干得到呈白色固体的[4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯基]-乙酸(ex-82)(18.4mg，48％)；lc-ms.rt7.40min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z346.3。

由ex-82合成实例ex-83。

2-[4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯基]-乙酰胺(ex-83)

向在无水dmf(0.55ml)中的[4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯基]-乙酸(17mg，0.05mmol)(ex-82)、tbtu(16mg，0.05mmol)中添加1mdipea/dcm溶液(50μl，0.05mmol)，并将反应混合物搅拌50分钟。将在1mdipea/dcm溶液(100μl，0.1mmol)中的氯化铵(5.2mg，0.1mmol)添加至反应混合物中，接着添加无水dmf(0.1ml)。将反应容器密封并在室温下搅拌18小时。使反应混合物通过1gsi-nh2筒柱(用dmf+meoh预先调节)，并用dmf(2×cv)和meoh(2×cv)洗涤该柱。真空去除溶剂。通过反相制备型hplc-ms纯化粗制化合物，并将产物从1:1mecn/h2o中冻干得到呈白色固体的2-[4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)-苯基]-乙酰胺(13mg，77％)；lc-ms.rt6.95min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z345.3。

由cp75分两步制备以下二醇ex-139。

5-(4-((2s,3s)-2,3-二羟基丁氧基)苯基)-7-苯基-3,7-二氢-4h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-139)

将在acoh(2ml)中的(4-(丁-2-烯-1-基氧基)苯基)-4-氯-7-苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(cp75)(138mg，0.37mmol)和naoac(60mg，0.74mmol)在100℃下加热2.5小时。将反应混合物真空浓缩并将残留物用dcm和水稀释。分离有机层，用dcm(2×30ml)洗涤，接着用etoac(2×30ml)洗涤，用无水mgso4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈白色固体的5-(4-(丁-2-烯-1-基氧基)苯基)-7-苯基-3,7-二氢-4h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(80mg，60％)。lc-ms.rt3.39min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z358.3[m+h]⁺。将一份这种物质用于下一步骤，无需进一步纯化。将ad-混合物α(120mg)添加至^tbuoh/h2o的搅拌溶液(1.5ml，1:1)中。搅拌混合物直到固体溶解，然后冷却至0℃，并添加e和z5-(4-(丁-2-烯-1-基氧基)苯基)-7-苯基-3,7-二氢-4h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮的混合物(40mg，0.11mmol)。将所得混合物搅拌4小时，然后使其温热至室温，并再搅拌18小时。添加甲磺酰胺(20mg，0.11mmol)、ad-混合物α(100mg)和^tbuoh(750μl)，并将反应混合物在40℃下加热3小时。通过添加亚硫酸钠(675mg)淬灭反应，用水(30ml)稀释并用etoac(3×30ml)萃取。将粗制残留物真空浓缩。将粗制残留物取入thf(800μl)中，并添加至ad-混合物α在^tbuoh/水(50:50，1ml)中的溶液中，然后搅拌过夜。添加ad-混合物α(500mg)，并将反应搅拌过夜。添加亚硫酸钠(500mg)并搅拌直至反应变成无色，然后用水(30ml)稀释，并用etoac(3×30ml)萃取，并干燥(无水mgso4)。通过用0-10％meoh/dcm洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制残留物，接着通过反相制备型hplc纯化，得到呈白色固体的5-(4-((2s,3s)-2,3-二羟基丁氧基)苯基)-7-苯基-3,7-二氢-4h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-139)(10mg，23％)。lcmsrt7.53minanalph2_meoh_qc_v1(1),,(esi⁺)m/z392.3[m+h]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ12.09(brs,1h),7.93-7.86(m,3h),7.73(d,j＝7.3hz,2h),7.68(s,1h),7.52(t,j＝7.8hz,2h),7.40-7.35(m,1h),6.90(d,j＝8.7hz,2h),5.09(d,j＝5.0hz,1h),3.97-3.84(m,3h),3.43-3.32(m,2h),3.20(s,3h)。未确定对映异构体过量。

磷酸酯的合成

将许多式(1a)的实例转化为磷酸酯类似物：

磷酸二叔丁酯5-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-3-基甲基酯(ex-140)

将5-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-7-苯基-3,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(50mg，0.14mmol)、磷酸二叔丁基(氯甲基)酯(ex-58)(38μl，0.17mmol)、cs2co3(50mg，0.15mmol)和dmf(5ml)的混合物在n2下于室温搅拌18小时。将反应混合物用h2o(20ml)稀释，用etoac(2×20ml)萃取，用h2o(2×20ml)、盐水(20ml)洗涤，并经mgso4干燥。将有机物真空浓缩，并将粗制化合物通过用20％-100％etoac/异己烷洗脱的硅胶柱色谱法纯化，得到呈无色油状物的磷酸二叔丁酯5-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-3-基甲基酯(ex-140)(30mg，37％)；lc-ms.rt3.52min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z584.3[m+h]⁺。

使用与ex140类似的程序合成以下实例：

表31

磷酸单-{5-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-4-氧代-7-苯基-4,7-二氢吡咯并[2,3-d]嘧啶-3-基甲基}酯(ex-142)

将磷酸二叔丁酯5-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-吡咯并[2,3-d]嘧啶-3-基甲基酯(ex-140)(30mg，0.05mmol)和acoh:h2o(4:1，2ml)的混合物在65℃下加热2小时。将反应混合物蒸发至干，并将粗制化合物通过反相制备型hplc-ms纯化，得到呈双铵盐白色固体的磷酸单-{5-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-4-氧代-7-苯基-4,7-二氢吡咯并[2,3-d]嘧啶-3-基甲基}酯(ex-142)(16mg，68％)；lc-ms.rt7.03min,analph9_meoh_qc_v1(1):；(esi⁺)m/z472.2[m+h]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):8.43(s,1h),7.87(d,j＝8.7hz,2h),7.77-7.75(m,2h),7.69(s,1h),7.55(t,j＝8.0hz,2h),7.43-7.39(m,1h),6.94(d,j＝8.7hz,2h),5.55(d,j＝11.4hz,2h),4.13-4.10(m,2h),3.69-3.66(m,2h),3.32(s,3h)。

使用与ex-142类似的程序合成以下实例：

表32

^a以双铵盐的形式分离。

(2-甲基-4-(4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)苯氧基)丁烷-2-基)磷酸二苄酯(ex-144)

将5-(4-(3-羟基-3-甲基丁氧基)苯基)-7-苯基-3,7-二氢-4h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-酮(ex-40)(60mg，0.154mmol)、二苄基n,n-异丙基亚磷酰胺(258μl，0.77mmol)和1,2,4-三唑(53.2mg，0.77mmol)在1,2-二氯乙烷(3ml)中的混合物回流加热90分钟。冷却至室温后，缓慢滴加50％过氧化氢(57μl，0.924mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后用dcm稀释，依次用水和5％硫代硫酸钠水溶液洗涤。将有机层分离、干燥(无水na2so4)，过滤并真空浓缩。粗制残留物通过硅胶柱色谱法纯化两次，先用0-5％meoh/dcm洗脱，然后用0-100％etoac/异己烷洗脱，得到呈无色胶质油状物的(2-甲基-4-(4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)苯氧基)丁烷-2-基)磷酸二苄酯(ex-144)(34mg，34％)；lc-ms.rt3.56min,analph9_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z650.4[m+h]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):12.13(s,1h),7.96(s,1h),7.93(d,j＝8.7hz,2h),7.82-7.75(m,2h),7.72(s,1h),7.56(t,j＝7.8hz,2h),7.40-7.27(m,11h),6.91(d,j＝8.7hz,2h),5.01(dd,j＝8.0,1.6hz,4h),4.09(t,j＝6.6hz,2h),2.16(t,j＝6.6hz,2h),1.51(s,6h)。

使用与ex-144类似的程序合成以下实例：

表33

2-甲基-4-(4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)苯氧基)丁烷-2-基磷酸二氢酯(ex-148)

在氮气下将10％碳载钯(3.2mg)添加到[1,1-二甲基-2-[4-(4-氧代-7-苯基-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)苯氧基]乙基]磷酸二苄酯(ex-144)(32.0mg，0.049mmol)在etoh(3ml)中的混合物中。将反应混合物在氢气氛下搅拌20小时，然后通过硅藻土垫过滤，用etoh(3×20ml)洗涤，并将有机物真空浓缩。通过反相制备型hplc-ms纯化粗制化合物，并将产物从1:1mecn/h2o中冻干得到呈双铵盐白色固体的(2-甲基-4-(4-(4-氧代-7-苯基-4,7-二氢-3h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)苯氧基)丁烷-2-基)磷酸二苄酯(ex-148)(15mg，61％)；lc-ms.rt7.10min,analph9_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z470.3；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ7.94(s,1h),7.90(d,j＝8.7hz,2h),7.78-7.74(m,2h),7.69(s,1h),7.57-7.51(m,2h),7.43-7.38(m,1h),6.93(d,j＝9.2hz,2h),4.14(t,j＝7.1hz,2h),2.08(t,j＝7.1hz,2h),1.40(s,6h)。

使用与实例ex-148类似的程序合成以下实例：

表34

^a以双铵盐的形式分离。^b使用etoac作为溶剂。

根据路线3a或路线3b合成许多式(1b)的实例：

路线3：方案3

路线3，步骤1：碘化

4-氯-7-碘-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(ch6)

向4-氯-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(25.0g，162.8mmol)在thf(700ml)中的溶液中添加n-碘琥珀酰胺(40.1g，179mmol)，并在室温下搅拌所得混合物4小时，然后真空浓缩。将残留物在et2o中研磨，通过过滤收集所得固体，并用et2o洗涤。通过用20％-30％etoac/石油醚洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈黄色固体的4-氯-7-碘-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(ch6)(32.0g，70％)；lc-ms.rt2.29min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z280.0,282.0[m+h]⁺。

路线3，步骤2：chan-lam

4-氯-7-碘-5-(4-甲氧基-苯基)-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(ch7)

向4-氯-7-碘-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(150mg，0.54mmol)中，添加4-甲氧基苯基硼酸(163mg，1.07mmol)、三乙胺(150μl，1.07mmol)、吡啶(87μl，1.07mmol)、一水合乙酸铜(ii)(195mg，1.07mmol)、分子筛(～320mg)，并使其悬浮在dcm(3.6ml)中。将反应混合物在硅胶脱水保护下于室温搅拌过夜。将反应混合物蒸发至干，再悬浮于dcm中，并用edta饱和水溶液洗涤。通过过滤去除沉淀的固体，并使滤液通过相分离筒柱，并将有机相真空蒸发。粗制化合物通过反相制备型hplc-ms纯化，得到呈灰白色固体的4-氯-7-碘-5-(4-甲氧基-苯基)-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(ch7)(14.2mg，7％)；lc-ms.rt3.10min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z386.0,388.0[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.77(s,1h),8.30(s,1h),7.50(**d,j＝9.2hz,2h),7.07(**d,j＝8.8hz,2h),3.84(s,3h)。

4-氯-7-碘-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(ch8)

向4-氯-7-碘-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(ch6)(40.4g，249.55mmol)在dmf(250ml)中的溶液中添加一水合乙酸铜(ii)(49.8g，249.55mmol)和活化分子筛(1.00g)，接着添加net3(52.07ml，374.31mmol)，并将所得反应混合物在60℃下加热24小时。将反应混合物冷却至室温，并将溶剂真空浓缩。将粗制固体溶解在dcm(600ml)中，并用edta饱和水溶液(200ml)淬灭。将分离的水层干燥(无水na2so4)，过滤并真空浓缩，得到粗制固体。通过用0-5％etoac/石油醚洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈灰白色固体的4-氯-7-碘-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(ch8)(5.2g，12％)；lc-ms.rt3.08min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z356.1,358.1[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.80(s,1h),8.39(s,1h),7.64-7.54(m,5h)。

使用与ch8类似的程序，由ch6合成以下中间体(反应持续时间在75分钟至10小时之间变化：

表35

^a后处理以20％的nh4oh水溶液进行。

路线3a，步骤3：铃木-宫浦偶联

4-氯-7-[4-(3-吗啉-4-基-丙氧基)-苯基]-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶甲酸盐(cp61)

将4-氯-7-碘-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(ch8)(100mg，0.161mmol)、4-(3-吗啉代丙氧基)苯基硼酸、频哪醇酯(117.0mg，0.34mmol)(商业来源)、pd(dppf)cl2.dcm(22.9mg，0.028mmol)和k2co3(77.7mg，0.56mmol)在1,4-二噁烷:h2o(1.5ml，9:1)中的混合物用n2脱氧5分钟，然后在微波中于120℃加热2小时。将反应混合物通过硅藻土筒柱(2.5g)过滤，并用meoh(3×cv)洗涤，接着用dcm(3×cv)洗涤。将有机物真空浓缩。通过反相制备型hplc-ms纯化粗制固体，得到呈橙色油状物的4-氯-7-[4-(3-吗啉-4-基-丙氧基)-苯基]-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶甲酸盐(cp61)(63mg，45％)。lc-ms.rt2.30min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z449.3[m+h]⁺。

除非另有说明，否则使用与cp61类似的程序由氯嘧啶ch8合成以下中间体(总加热持续时间在0.5至5小时之间变化)：

表36

^≠如果没有说明，则为商用的和/或ch4。^a还在铃木偶联条件下去除了叔丁基二甲基甲硅烷基保护基。^f以甲酸盐的形式分离。

路线3a，步骤4：通过酸性水解的最终化合物

7-[4-(3-吗啉-4-基-丙氧基)-苯基]-5-苯基-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ex-84)

将4-氯-7-[4-(3-吗啉-4-基-丙氧基)-苯基]-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶甲酸盐cp61(62.6mg，0.126mmol)和naoac(20.7mg，0.252mmol)在acoh(256μl)中的混合物在100℃下加热4小时。将反应混合物真空浓缩。粗制残留物通过反相制备型hplc-ms纯化，得到呈灰白色固体的7-[4-(3-吗啉-4-基-丙氧基)-苯基]-5-苯基-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ex-84)(45.1mg，83％)；lc-ms.rt5.27min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z431.2[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):12.14(brs,1h),8.07-8.05(m,3h),7.98(s,1h),7.56(d,j＝8.7hz,2h),7.49(**t,j＝7.8hz,2h),7.40(t,j＝7.3hz,1h),6.97(d,j＝8.7hz,2h),4.03(t,j＝6.4hz,2h),3.58(t,j＝4.6hz,4h),2.43(t,j＝7.3hz,2h),2.40-2.35(m,4h),1.88(tt,j＝6.4,7.3hz,2h)。

使用与ex-85类似的程序合成以下实例，反应持续时间长达24小时：

表37

^f以甲酸盐形式分离。^a用etoac和水进行水性后处理。

路线3a，步骤4：通过酸性水解，接着进行碱性水解生成的最终化合物

7-[4-(2,3-二羟基丙氧基)-苯基]-5-苯基-3,5-二氢吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ex-88)

将3-[4-(4-氯-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苯氧基]-丙-1,2-二醇(cp67)(48.7mg，0.123mmol)和naoac(20.2mg，0.246mmol)在acoh(100μl)中的搅拌溶液在100℃下加热3小时。然后将反应混合物真空浓缩，并将所得残留物用水稀释，并且添加lioh.h2o(51.6mg，1.23mmol)。将所得混合物在40℃下加热30分钟。将反应混合物真空浓缩，并将粗制化合物通过反相制备型hplc-ms纯化，得到呈白色固体的7-[4-(2,3-二羟基丙氧基)-苯基]-5-苯基-3,5-二氢吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ex-88)(29.2mg，63％)；lc-ms.rt6.92min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z378.3[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):12.14(br-s,1h),8.07-8.05(m,3h),7.98(s,1h),7.56(d,j＝7.3hz,2h),7.50(**t,j＝7.3hz,2h),7.40(t,j＝7.3hz,1h),6.98(d,j＝8.7hz,2h),4.95(d,j＝5.0hz,1h),4.68(m,1h),4.02(m,1h),3.88(m,1h),3.80(m,1h),3.46(m,2h)。

使用与ex-88类似的程序制备许多实例。

表38

由cp65制备实例ex-94。

5-苯基-7-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)-苯基]-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ex-94)

将3-[4-(4-氯-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苯氧基甲基]-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(cp65)(132mg，0.26mmol)、2mnaoh(水溶液)(2ml)和1,4-二噁烷(2ml)的混合物在100℃下加热18小时。使反应混合物冷却至室温，并形成两层。取上层，真空浓缩，再溶于meoh(5ml)和4mhcl/二噁烷(2ml)的混合物中，然后在40℃下加热2.5小时。将混合物真空浓缩，通过反相制备型hplc-ms纯化，然后从mecn:h2o混合物(2ml，1:1)中冻干，得到呈白色固体的5-苯基-7-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)苯基]-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(4mg，14％)；lc-ms.rt5.48min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z387.1[m+h]⁺

由ex-94制备实例ex-95。

7-[4-(1-甲基-吡咯烷-3-基甲氧基)-苯基]-5-苯基-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ex-95)

在室温下向5-苯基-7-[4-(吡咯烷-3-基甲氧基)-苯基]-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮ex-94(20mg，0.05mmol)在dcm(5ml)中的悬浮液中添加在h2o(20μl，0.25mmol)中的37重量％甲醛溶液，接着添加三乙酰氧基硼氢化钠(16mg，0.08mmol)。将混合物在室温下搅拌90分钟。再添加一等份的甲醛(20μl，0.25mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(11mg，0.05mmol)，并将反应混合物在室温下再搅拌45分钟。将混合物用dcm(10ml)稀释，用h2o(10ml)分配，使其通过相分离器，真空浓缩，通过反相制备型hplc-ms纯化，然后从mecn:h2o混合物(2ml，1:1)中冻干，得到呈白色固体的7-[4-(1-甲基-吡咯烷-3-基甲氧基)-苯基]-5-苯基-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ex-95)(1mg，4％)；lc-ms.rt5.42min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z401.2[m+h]⁺

根据路线3b，步骤5-酸性水解制备许多式(ib)的实例

7-溴-5-苯基-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ch10)

向7-溴-4-氯-5-苯基-5h-吡咯并[3,2-d]嘧啶(840mg，2.72mmol)(商业来源)在acoh(13.6ml)中的溶液中添加naoac(447mg，5.44mmol)，并将反应混合物在100℃下加热18小时。将反应混合物冷却至室温，用h2o稀释并分离各层(相分离器)，并将有机相真空蒸发。通过用0-10％meoh/dcm洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，获得呈灰白色固体的7-溴-5-苯基-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ch10)(341mg，43％)；lc-ms.rt2.72min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z290.2,292.2[m+h]⁺。

使用与ch10类似的程序制备以下中间体(反应持续时间在3-8小时之间变化)：

表39

路线3b，步骤6-铃木宫浦偶联

3-(4-氧代-5-苯基-4,5-二氢-3h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸乙酯(ex-96)

将在1,4-二噁烷:h2o(4:1，1.2ml)中的7-碘-5-苯基-3,5-二氢-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ch11)(85mg，0.23mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-苯甲酸乙酯(75mg，0.27mmol)、k2co3(62mg，0.45mmol)、pd(dppf)cl2.dcm(10mg，0.011mmol)添加到微波小瓶中，并用n2脱氧。将反应混合物在微波反应器中于120℃加热1小时。使反应混合物通过2gsi-硫醇筒柱，用dcm(2×cv)和meoh(2×cv)洗脱，并将滤液蒸发至干。使残留物悬浮在dcm(10ml)中并用h2o(10ml)洗涤，分离有机相(相分离器)并蒸发至干。通过反相制备型hplc-ms纯化粗制化合物，得到呈灰白色固体的3-(4-氧代-5-苯基-4,5-二氢-3h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸乙酸乙酯(25mg，30％)；lc-ms.rt8.21min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z360.3[m+h]⁺。

使用与ex-96类似的程序合成以下实例：

表40

路线3b，步骤6：使用pdxphosg3和k3po4作为碱通过铃木偶联生成的最终化合物

5-(4-(3-羟基-3-甲基丁氧基)苯基)-7-苯基-3,5-二氢-4h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ex-163)

将在1,4-二噁烷:h2o(3ml，4:1)中的5-(4-(3-羟基-3-甲基丁氧基)苯基)-7-碘-3,5-二氢-4h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ch18)(150mg，0.341mmol)、苯基硼酸(62.4mg，0.512mmol)、k3po4(145mg，0.682mmol)、pdxphosg3(14.4mg，0.017mmol)用n2脱氧5分钟，然后在微波反应器中于90℃加热1小时。将反应混合物通过si-硫醇筒柱(1g)过滤，并用meoh(3×cv)洗涤，接着用dcm(3×cv)洗涤。将滤液蒸发至干，并将粗制残留物通过用0-5％meoh/dcm洗脱的硅胶柱色谱法纯化，接着进行反相制备型hplc纯化，得到呈白色固体的5-(4-(3-羟基-3-甲基丁氧基)苯基)-7-苯基-3,5-二氢-4h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-4-酮(ex-163)(46mg，35％)；lc-ms.rt8.20min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z390.3[m+h]⁺；¹hnmr(400mhz,dmso-d6):12.13(br-s,1h),8.15-8.13(m,2h),8.07(s,1h),7.97(s,1h),7.46(d,j＝8.7hz,2h),7.42-7.37(m,2h),7.25-7.22(m,1h),7.02(d,j＝8.7hz,2h),4.43(s,1h),4.15(t,j＝7.1hz,2h),1.88(t,j＝7.1hz,2h),1.19(s,6h)。

使用与化合物ex-163类似的程序制备以下式()的化合物，反应持续时间在1-2.5小时之间变化：

表41

^ak3po4以水溶液形式添加，ex-101由ex-96合成。

3-(4-氧代-5-苯基-4,5-二氢-3h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸(ex-101)

向3-(4-氧代-5-苯基-4,5-二氢-3h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸乙酯(ex-96)(24mg，0.07mmol)中，添加在thf:meoh3:1混合物(1.4ml)中的lioh.h2o(8.4mg，0.2mmol)，并将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用dcm(2ml)稀释并蒸发至干。将dmso(1ml)添加到粗制化合物中，随之从溶液中沉淀出固体。通过过滤收集固体，并将滤液真空浓缩，然后通过反相制备型hplc-ms纯化。从mecn/h2o混合物(1:1)中冻干产物和发现为纯净的所需产物的沉淀固体，得到呈白色固体的3-(4-氧代-5-苯基-4,5-二氢-3h-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-苯甲酸(10mg，42％)；lc-ms.rt7.40min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z332.3[m+h]⁺。

使用与ex-101类似的程序合成以下实例：

表42

根据路线4合成许多式(ia)的实例

路线4：方案4

3-碘-4-甲氧基-1-苯基-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶(ch20)

向在dcm(18ml)中的3-碘-4-甲氧基-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶(1.01g，3.68mmol)、苯基硼酸(719mg，5.9mmol)、2,2'-联吡啶(1.15g，7.4)、三乙胺(7.7ml，55.2mmol)和分子筛(1g)中添加cu(oac)2(1.34g，7.4mmol)。将烧瓶抽空并用空气吹扫(x2)。密封烧瓶，并将填充有p2o5的注射器置于螺纹塞(subaseal)中，并将反应在室温下搅拌过夜。使反应混合物通过硅藻土筒柱(10g)，并用meoh(2×cv)和dcm(2×cv)洗涤该筒柱，并将滤液蒸发至干。将残留物溶解在meoh中，并使其通过scx-2筒柱(25g)，用meoh(2×cv)和dcm(2×cv)洗涤。用0.7mnh3/meoh从柱上洗脱化合物，并真空去除溶剂。通过用6％-10％etoac/异己烷洗脱的硅胶柱色谱法纯化粗制化合物，得到呈黄色油状物的3-碘-4-甲氧基-1-苯基-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶(ch20)(688mg，53％)，将其静置结晶；lc-ms.rt3.40min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z351.1[m+h]⁺.¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ7.79(s,1h),7.78(s,1h),7.59-7.49(m,4h),7.46-7.39(m,1h),7.10(d,j＝6.0hz,1h),3.96(s,3h)

3-碘-1-苯基-1,5-二氢-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(ch21)

向在mecn(10.5ml)中的3-碘-4-甲氧基-1-苯基-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶(ch20)(451mg，1.29mmol)和碘化钠(502mg，3.35mmol)中滴加氯三甲基硅烷(1.63ml，12.9mmol)，并将反应混合物在50℃下加热5小时。将反应混合物添加到nahco3(50ml，饱和水溶液)中，并用etoac(2×50ml)萃取混合物。分离有机层，用盐水(100ml)洗涤，并通过相分离器，并真空去除溶剂。粗制化合物通过用dcm0-5％meoh/dcm洗脱的硅胶柱色谱法纯化，得到呈浅黄色固体的3-碘-1-苯基-1,5-二氢-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(ch21)(337mg，78％)；lc-ms.rt2.84min,analph2_meoh_4min(1)；(esi⁺)m/z337.1[m+h]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ11.00(d,br,j＝5.0hz,1h),7.60-7.39(m,6h),7.08-6.99(m,1h),6.31(d,j＝7.3hz,1h)。

3-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-1-苯基-1,5-二氢-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(ex-172)

将在1,4-二噁烷:h2o(0.9ml，4:1)中的3-碘-1-苯基-1,5-二氢-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(58mg，0.17mmol)、2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(72mg，0.26mmol)、k3po4(74mg，0.35mmol)、pdxphosg3(17mg，0.02mmol)用n2脱氧5分钟，然后在微波反应器中于90℃加热1小时。将反应混合物通过si-硫醇筒柱(1g)过滤，并用dcm(2×cv)洗涤，接着用meoh(2×cv)洗涤。粗制固体通过硅胶色谱法纯化，用5％-95％dcm/异己烷洗脱，然后用dcm-65％etoac/dcm和0.2％acoh洗脱。合并各级分，真空蒸发并从mecn:h2o(1:1)中冻干，得到呈浅黄色固体的3-[4-(2-甲氧基-乙氧基)-苯基]-1-苯基-1,5-二氢-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮(ex-172)(44mg，72％)；lc-ms.rt7.95min,analph2_meoh_qc_v1(1)；(esi⁺)m/z361.2[m+h]⁺；¹h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ10.93(brd,j＝6.0hz,1h),7.79(d,j＝8.7hz,2h),7.62-7.52(m,4h),7.50(s,1h),7.47-7.38(m,1h),7.05(t,j＝6.4hz,1h),6.94-6.75(m,2h),6.35(d,j＝7.3hz,1h),4.14-3.88(m,2h),3.76-3.42(m,2h),3.29(s,3h)。

使用与ex-172类似的程序合成以下实例：

表43

map4k4受心脏死亡信号激活并促进心肌细胞死亡

为了确定在心脏细胞死亡中抑制map4k4的科学案例，首先探讨了三种生物学环境：患病的人心脏组织、小鼠模型和大鼠心肌细胞(图1-图4)。相对于健康的供体心脏(n＝10；图1)，在不同病因引起的慢性心力衰竭中，人心脏map4k4的激活较为普遍(n＝26)。map4k4激活与活性(裂解的)半胱天冬酶-3(一种凋亡介体)(图1中a)及其map3k中介tak1的激活(图1中b)同样相关，后者本身可以驱动心脏细胞死亡(zhang等人，2000)。在成年小鼠心肌中，map4k4受缺血/再灌注损伤、生物力学负荷(主动脉缩窄，tac)和心肌细胞限制的肿瘤坏死因子-α或g蛋白gαq的表达激活，所有这些都会促进心肌细胞死亡，图1中c。同样，在培养的大鼠心肌细胞中，map4k4被以下确定的死亡信号激活：心脏毒性药物阿霉素；神经酰胺，一种包括缺血/再灌注和tnfα在内的凋亡信号的介体(suematsu等人，2003)；和h2o2，一种氧化应激的替代物(brown和gridling，2015)(图1中d)。因此，经证实在体外和体内，map4k4激活伴随心肌细胞死亡。

接下来，通过在大鼠心肌细胞中进行病毒基因转移来模拟map4k4活性的增加(图2中a)，但要注意的是，在上述环境中激酶活性而不是表达增加。确认了外源map4k4的促凋亡作用(图2中b)，可能涉及tak1(图2中c)、jnk(图2中d、图2中e)和线粒体死亡途径(图2中e、图2中f)。在成年小鼠中，心肌细胞限制的map4k4使心肌对原本亚致死的死亡信号(tac和低拷贝数myh6-gnaq)敏感，从而增强了心肌细胞损失、纤维化和功能障碍(图3)。与野生型map4k4的促凋亡作用形成鲜明对比，培养的大鼠心肌细胞不仅受到显性干扰突变(图4中a)而且受到map4k4shrna的至少50％保护(图4中b-d)。总的来说，尽管非人类模型存在固有的局限性，但这些功能获得、显性阴性和功能丧失研究表明map4k4在心肌细胞死亡中起着关键作用。

人干细胞来源的心肌细胞中的map4k4靶标确证

为了确定在人心肌细胞中是否也存在对map4k4的等效需求，研究了map4k4在源自人诱导多能干细胞的心肌细胞中的作用。人干细胞来源的心肌细胞(hipsc-cm)被视为用于心脏药物发现的非常有利的工具。在已经获得行业和监管机构认可为人类平台的充分表征的、纯化的、市售hipsc-cm中测试了map4k4功能(blinova等人,2017；rana等人,2012；sirenko等人,2013)，并开始使用icell心肌细胞进行研究(ma等人,2011)。

首先，确证了心肌细胞特异性标志物和map4k4蛋白的表达(图5中a、图5中b)。针对人map4k4的三种shrna中的两种使表达降低>60％，而对最密切相关的基因mink/map4k6和tnik/map4k7没有任何外来作用(图5中c)。通过高含量分析(图5中d)将细胞死亡量化为成功转导的(gfp⁺)hipsc-cm(myh6-rfp⁺)中的膜完整性损失(draq7摄取)。两种有效shrna中的每一种均赋予针对h2o2的保护作用：心肌细胞损失减少了多达50％(图5中e)。相比之下，对map4k4几乎没有影响的shrna未赋予保护作用。因此，基因沉默的结果强烈暗示在人心肌细胞死亡中需要内源性map4k4。

map4k4的新型抑制剂

map4k4的小分子抑制剂经鉴定具有足够的效力和选择性。一种这样的化合物是已知的化合物f1386-0303(5,7-联苯基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-醇)。

相对于用该化学系列的早期成员发现的选定脱靶命中，筛选了本发明的化合物对map4k4的抑制活性。map4k4激酶活性使用cisbiohtrftranscreeneradp测定法进行监测，这是一种竞争性免疫测定法，可重现z'>0.6。在检测步骤中，内源性adp和d2标记的adp竞争结合经eu³⁺穴状化合物标记的抗adp单克隆抗体。在665和620nm下使用比率荧光读数。反应在存在1％dmso的情况下进行，其中含有以km(10μm)添加的atp、0.5nm人map4k4激酶结构域(英杰公司(invitrogen))、1μm作为底物的生物素-髓磷脂碱性蛋白(英杰公司(invitrogen))，并且反应时间延长到2小时。在greiner小体积板中进行测定，最终反应体积为10μl。下表33中提供了选定的本发明化合物的map4k4抑制数据。数据已经根据化合物的ic50值分类为“a”、“b”或“c”。ic50：a≤100nm；100nm<b≤1μm；1μm<c；nd＝未测定。

表33

表34中提供了其他13种蛋白激酶的map4k4抑制数据和比较数据。表34中的数据还提供了相对于所测试的激酶而言有利于map4k4的两种化合物的倍数选择性。倍数选择性示于括号中。与已知化合物f1386-303相比，ex-58代表map4k4的高度选择性抑制剂。

表34

对map4k4的药理学抑制会抑制人心肌细胞死亡

为了证实这一假设，即对map4k4的药理学抑制会赋予人心肌细胞对细胞死亡的抗性，接下来使用hipsc-cm评估细胞保护作用。f1386-0303的药理学抑制作用具有保护性，在icell心肌细胞中即使在测试的最低浓度1.25μm下(draq7摄取：图7中b)也使人心肌细胞死亡减少50％，与通过基因沉默所实现的益处相当。在心室肌细胞富集程度更高的第二独立细胞系即corv.4u心肌细胞中证实了人心肌细胞的保护作用。在10μm时，对h2o2或甲萘醌的保护作用几乎完全(发光细胞活力测定，图7中c；人心肌肌钙蛋白测定，图7中d)。因此，f1386-0303是一种有效的、选择性map4k4抑制剂，在本研究中首次被鉴定并且成功地保护人干细胞来源的心肌细胞免受致死性氧化应激。

然而，f1386-0303在小鼠中的生物利用度不足以用于体内概念验证研究：它被迅速清除，并且在小鼠中口服给药时仅积聚到低水平(图6；表35)。制备本发明的化合物以改善已知化合物的特性。本发明的化合物ex-58显示出高10倍的效力(ic503相对于34nm)，同时保留了高选择性(表34、表35)。由于其清除率降低，ex-58的游离血浆浓度在50mgkg-1口服剂量后1小时和10小时分别为334和8nm，比早期化合物提高了80倍以上(图6；表35)。因此，将ex-58用于人心肌细胞和小鼠中进行详细测试。在两种活力测定中，使用corv.4u细胞作为靶标，h2o2和甲萘醌作为死亡触发物，证实了对人心肌细胞的保护作用(图7中c、图7中d)。该化学系列的其他不同成员，包括dmx-51、40、54、107、123、128，也赋予了同等程度的人心肌细胞保护作用，ec50<1um。在h9c2心肌细胞中，这七种新型map4k4抑制剂全部优于先前报道的心脏保护药物环孢菌素a、艾塞那肽(exenatide)、坏死性凋亡抑制素(necrostatin)和sb203580。

表35

map4k4抑制改善人心肌细胞功能

在有或无ex-58的情况下，在急性氧化应激(15μm甲萘醌，持续2小时)后，在corv.4uhipsc-cm中监测线粒体功能的关键方面(图8中a)。甲萘醌使最大氧化能力(线粒体呼吸的量度)降至对照水平的15％，残留活性通过10μmex-58提高了5倍(图8中a，左)。同样，10μmex-58在很大程度上挽救了细胞外酸化率，这是糖酵解功能的量度(图8中a，右)。抑制剂浓度较低时，未见显著益处。

钙循环(心脏表型的标志)同样易受氧化还原和磷酸化依赖性异常的影响。为了确定map4k4抑制是否可以保持钙稳态，使用细胞内钙指示剂fura-2对hipsc-cm进行评估(图8中b)。在测试的条件下，表现出钙循环的孔的百分比对氧化应激高度敏感，而循环培养物中的搏动速率和钙瞬变动力学则不敏感。在甲萘醌为50μm时，自发钙振荡仅在24种培养物中的8种中持续(33.3％)，而在接受10μmex-58的24种中的21种中持续(87.5％；p<0.001)。

因此，在急性氧化应激的情况下，map4k4抑制保持了hipsc-cm中的线粒体功能和钙循环。而且，与未来潜在安全性考虑有关，没有发现ex-58对任何功能参数有不利影响。

map4k4抑制减小小鼠的梗塞面积

为了测试hipsc-cm中的靶标确证和化合物开发是否可以预测在整个动物环境中的成功，用ex-58或媒介物对照处理经历实验性心肌梗塞的小鼠(图9)。基于药代动力学结果，小鼠通过强饲法相隔10小时接受50mgkg^-1两次，达到超过化合物ec50的覆盖范围，持续近一天(图9中a)。在图9中b、图9中c中指出了测定的终点。在缺血前20分钟(图9中d)或再灌注损伤后1小时(图9中e、图9中f)开始处理，后者与潜在临床益处具有更大的相关性。在两项研究中均证实对心肌细胞死亡的抑制，实现梗塞面积占缺血风险区域的比例分别减少50％和60％以上。另外，在损伤后研究中进行了tunel染色，证明梗塞本身和被危及的邻近心肌内的心肌细胞凋亡分别被抑制了39％和52％。对于化学系列的其他新型化合物，也证明了小鼠中梗塞面积的减小(实例54)。相对于ex-58，后一种化合物在肝细胞微粒体(heps)中表现出优异的血浆蛋白结合(ppb)或降解抗性。

表36

前药

设想本发明的化合物可以作为前药递送，其中在体内通过所述前药的水解产生活性物质。设想前药可以是在化合物的双环核的nh上有-ch2op(＝o)(oh)2取代(置换h)的化合物。替代性地，前药可以是其中游离oh被-op(＝o)(oh)2置换的化合物。

可以充当前药的化合物的实例以及由所述前药产生的化合物的实例示于下表37中

已使用了各种体外系统研究化合物在人体中的代谢，例如微粒体、肝细胞和肝脏s9级分。s9级分由微粒体和胞质溶胶两者组成，并且含有人肝脏中存在的大多数代谢酶。将1μm的表37中描述的前药与人s9肝脏级分一起孵育120分钟，并且相对于1μm所述化合物的标准品，通过质谱法对相应map4k4抑制剂的释放进行定量。该实验证明本文所述类型的前药可以在人体内水解产生相应的map4k4抑制剂。图10和图11示出了前药水解成相应化合物的速率。

还在大鼠体内对几种前药进行了测试，并且证实这些前药迅速水解成相应的map4k4抑制剂。在此类实验中，将前药给予雌性sd大鼠，并通过质谱法监测前药和原料药的水平。图12和图13中示出了数据。

表37

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