氨基酸类天然低共熔溶剂提取虾壳中虾青素的方法与流程

【技术领域】

本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种用氨基酸类天然低共熔溶剂提取虾壳中虾青素的方法。

背景技术：

虾青素是一种非维生素a衍生的酮类脂溶性胡萝卜素，呈深粉红色。广泛存在于生物界，特别是虾、蟹、鱼、藻体、酵母和鸟类的羽毛中含量较高，是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一。虾青素因其分子中含有很长的共轭双键链和不饱和α-羟基酮而具有极强的抗氧化性能。与叶黄素、维生素c、β-胡萝卜素等相比，共轭双键、羟基和酮基的存在使虾青素兼具亲水性和疏水性,能够穿越细胞膜的疏水性内部到达亲水性外部空间,而具有更优良的生物活性，能有效清除体内自由基、硫化物、二硫化物。具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、提高机体免疫力、预防心血管疾病等功效，可用于保健食品、化妆品、药品等领域中。

市场上几乎所有的虾青素都是通过复杂的步骤合成生产的，非常昂贵。此外合成虾青素含有立体异构体的混合物，比天然产物更容易被氧化。化学合成的虾青素还存在生产成本高、安全风险大等问题。因此天然虾青素具有很高的市场价值，从生物资源中获取天然虾青素的研究日益受到重视。

虾壳主要来源于海产品加工厂虾下脚料和餐桌的废弃物，来源不仅广泛，而且价格低廉，是虾青素的极佳来源。目前虾壳多被用于加工饲料或者作为废弃物处理，从中提取虾青素，既能保护环境，同时又能够带来巨大的经济效益。

然而，目前虾青素提取主要采用有机溶剂提取法。传统的有机溶剂如甲醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿等被广泛应用于植物材料中生物活性成分的提取。一般来说，大多数传统的有机溶剂具有很高的挥发性，对人类的环境具有潜在的毒性，被禁止用于人类消费的产品。因此，急需研究一种基于绿色溶剂的可持续提取方法，以避免或减少使用这些有害的挥发性有机溶剂。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供了一种用氨基酸类天然低共熔溶剂提取虾壳中虾青素的方法。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

本发明首先提供了氨基酸类天然低共熔溶剂，所述的氨基酸类天然低共熔溶剂为氢键供体与氢键受体混合加热得到，其中，氢键受体与氢键供体的摩尔比为1:1-1:10，优选为1:2-1:4；

所述的氢键供体包括：柠檬酸、甘油、木糖醇；

氢键受体包括：l-脯氨酸、l-赖氨酸；

进一步地，

本发明优选以柠檬酸作为氢键供体、以l-赖氨酸作为氢键受体的氨基酸类天然低共熔溶剂。

所述的氨基酸类天然低共熔溶剂的制备方法如下：将氢键供体与氢键受体混合，加热直至变为澄清透明溶液，即为低共熔溶剂；

本发明还提供了一种提取虾壳中虾青素的方法，采用氨基酸类天然低共熔溶剂提取，其方法如下：

将虾壳干燥粉碎、过筛，将筛选后的虾壳粉用盐酸处理，得到脱钙虾壳；将脱钙虾壳与氨基酸类低共熔溶剂混合，加入水，超声，离心，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。

测定：采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

在一些实施例中，氢键供体包括：柠檬酸、甘油、木糖醇，氢键受体包括：l-脯氨酸、l-赖氨酸；优选为柠檬酸作为氢键供体，l-赖氨酸作为氢键受体。l-赖氨酸-柠檬酸合成的低共熔溶剂很好的解决了有机溶剂提取效率低且有毒性的问题。

在一些实施例中，氢键受体与氢键供体的摩尔比为1:2-1:4。

在一些实施例中，l-赖氨酸和柠檬酸混合后加热的温度为70-90℃。

在一些实施例中，黄芩干燥粉碎后，经过30-60目筛进行筛选。

在一些实施例中，盐酸浓度为0.25-1mol/l；优选的，盐酸浓度为0.5-0.75mol/l。盐酸可以去除虾壳中的碳酸钙，释放一部分虾青素，提高虾青素的提取效率，但盐酸浓度过高会使虾青素变性，降低虾青素的提取率。

在一些实施例中，盐酸处理时间为0.5-2.5h；优选的，盐酸处理时间为1-2h。

在一些实施例中，提取时低共熔溶剂中加入水的质量为10％-50％；优选的，提取时低共熔溶剂中加入水的质量为30-40％。加入一定的水，会降低低共熔溶剂的粘度，使脱钙虾壳均匀的分散在低共熔溶剂中，增大接触面积，提高提取效率。

在一些实施例中，脱钙虾壳与加入的低共熔溶剂的料液比为1：5-25；优选的，料液比为1:10-1:20。料液比对虾壳虾青素提取的影响为：不是料液比越高，提取出来的虾青素越多，当比值超过一个定值时，反而不利于黄酮类物质的浸出，降低虾青素的提取率。

在一些实施例中，脱钙虾壳中加入低共熔溶剂后超声提取的功率为150-250w；优选的，超声提取的功率为175w-225w。

在一些实施例中，脱钙虾壳中加入低共熔溶剂后超声提取的温度为25-45℃；优选的，超声提取的温度为40-45℃。提取的温度既影响低共熔溶剂的物理性质又影响虾青素的活性。温度升高低共熔溶剂的粘度下降，提取效率升高；当温度超过一个定值时，影响虾青素的活性，降低虾青素提取效率。

在一些实施例中，脱钙虾壳中加入低共熔溶剂后超声提取的时间为30-90min；优选的，超声提取的时间为30-45min。超声的作用是利用超声波的空化作用、机械效应和热效应等加速虾青素的释放、扩散和溶解，提高浸取速度和浸取效果。

在一些实施例中，离心的转速为3000-4200r/min，离心时间为10-30min。

在一些实施例中，虾壳虾青素的含量测定，检测步骤如下：(1)对照品溶液的制备：精密称取虾青素对照品适量，加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，即得；(2)标准曲线的制备：精密量吸取虾青素对照品溶液250μl，300μl，350μl，400μl，450μl，分别置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，以甲醇作为空白，在476nm处测定吸光度，以吸光度为横坐标，浓度为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为y＝7.893x+0.2094，r＝0.9990；(3)测定法：精密量取虾壳虾青素提取物1ml，加甲醇稀释，摇匀，以甲醇稀释的低共熔溶剂作为空白，在476nm测定吸光度。

本发明的有益效果：

本发明采用超声处理技术与氨基酸类天然低共熔溶剂相结合，实现了虾壳中虾青素的提取，达到了提取效率高、无有机溶剂污染、低毒、环境友好、产品纯度高的目的，并且操作简单、安全、成本低、适于工业化规模生产，同时也拓宽了虾壳的综合利用途径，减少了不必要的浪费，本发明的虾青素的提取率可达60μg/g以上，最高可达109.93μg/g，具有实用性，具有很好的应用前景。

【附图说明】

图1为不同种类的氨基酸类天然低共熔溶剂对虾壳虾青素的提取效率影响图

图2为不同盐酸浓度对虾壳虾青素提取效率的影响图

图3为不同盐酸处理时间对虾青素提取率的影响图

图4为不同的低共熔溶剂含水量对虾青素提取率的影响图

图5为不同的物料比对虾青素提取率的影响图

图6为不同的超声功率对虾青素提取率的影响图

图7为不同的超声温度对虾青素提取率的影响图

图8为不同的超声时间对虾青素提取率的影响图

【具体实施方式】

下面结合具体实施方式,对本发明的权利要求做进一步的详细说明,但不构成对本发明的任何限制,任何在本发明权利要求保护范围内所做的有限次修改、仍在本发明的权利要求保护范围之内。

实施例1

将l-赖氨酸与甘油按1:2的摩尔比混合，在80℃下进行磁力搅拌，直至形成透明均一的液体，最终得到天然低共熔溶剂,密封保存。

将虾壳烘干水分，粉碎，然后置于粉碎机中粉碎，再过40目网筛得到虾壳粉，密封，备用。称取粉碎后虾壳1.5g，加入圆底烧瓶瓶中，加入0.5mol/l的hcl溶液25ml，避光搅拌1h进行脱钙处理，酸处理至规定时间后，过滤洗涤，将滤饼烘干。准确称取脱钙虾壳粉0.5g，加入5ml的低共熔溶剂(含水量30％)，涡旋振荡1min，超声提取30min，功率200w，温度30℃。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

实施例2

与实施例1不同的是天然低共熔溶剂的氢键受体为l-赖氨酸，氢键供体为木糖醇。

实施例3

与实施例1不同的是天然低共熔溶剂的氢键受体为l-赖氨酸，氢键供体为柠檬酸。

实施例4

与实施例1不同的是天然低共熔溶剂的氢键受体为l-脯氨酸，氢键供体为木糖醇。

实施例5

与实施例1不同的是天然低共熔溶剂的氢键受体为l-脯氨酸，氢键供体为甘油。

实施例6

与实施例1不同的是天然低共熔溶剂的氢键受体为l-脯氨酸，氢键供体为柠檬酸。

实施例1-6的不同种类的氨基酸类天然低共熔溶剂对虾壳虾青素的提取效率影响如图1所示。当用以l-赖氨酸为氢键受体，柠檬酸为氢键供体时制备的低共熔溶剂时提取效率最高。l-脯氨酸是非极性氨基酸，l-赖氨酸是极性氨基酸。虾青素作为一种含氧类胡萝卜素在极性强的有机溶剂中的饱和溶解度高。

实施例7

将l-赖氨酸与柠檬酸按1:2的摩尔比混合，在80℃下进行磁力搅拌，直至形成透明均一的液体，最终得到天然低共熔溶剂,密封保存。

将虾壳烘干水分，粉碎，然后置于粉碎机中粉碎，再过40目网筛得到虾壳粉，密封，备用。称取粉碎后虾壳1.5g，加入圆底烧瓶瓶中，加入0.5mol/l的hcl溶液25ml，避光搅拌1h进行脱钙处理，酸处理至规定时间后，过滤洗涤，将滤饼烘干。准确称取脱钙虾壳粉0.5g，加入5ml的低共熔溶剂(含水量30％)，涡旋振荡1min，超声提取30min，功率200w，温度30℃。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

实施例8

与实施例7不同的是盐酸的浓度为0.25mol/l。

实施例9

与实施例7不同的是盐酸的浓度为0.75mol/l。

实施例10

与实施例7不同的是盐酸的浓度为1mol/l。

实施例7-10的不同盐酸浓度对虾壳虾青素提取效率的影响如图2所示。随着hcl浓度的增加，虾壳虾青素提取率升高。当酸浓度为0.5mol/l时，提取率最高。当盐酸浓度为0.5-0.75mol/l时，其虾青素提取率可达50μg/g以上，当酸浓度太高时，提取的虾青素将减少。由于虾青素和碳酸钙的结合，通过酸处理释放虾青素，从而提高了虾青素的提取率。

实施例11

将l-赖氨酸与柠檬酸按1:2的摩尔比混合，在80℃下进行磁力搅拌，直至形成透明均一的液体，最终得到天然低共熔溶剂,密封保存。

将虾壳烘干水分，粉碎，然后置于粉碎机中粉碎，再过40目网筛得到虾壳粉，密封，备用。称取粉碎后虾壳1.5g，加入圆底烧瓶瓶中，加入0.5mol/l的hcl溶液25ml，避光搅拌1h进行脱钙处理，酸处理至规定时间后，过滤洗涤，将滤饼烘干。准确称取脱钙虾壳粉0.5g，加入5ml的低共熔溶剂(含水量30％)，涡旋振荡1min，超声提取30min，功率200w，温度30℃。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

实施例12

与实施例11不同的是盐酸处理时间为0.5h。

实施例13

与实施例11不同的是盐酸处理时间为1.5h。

实施例14

与实施例11不同的是盐酸处理时间为2h。

实施例15

与实施例11不同的是盐酸处理时间为2.5h。

实施例11-15的不同盐酸处理时间对虾青素提取率的影响如图3所示。当盐酸浓度为0.5mol/l并处理1h后，虾壳中的碳酸钙可以完全除去。盐酸浓度为1-2mol/l时，虾青素的提取率可达60μg/g以上。通过对脱钙虾壳进行酸处理一定时间，可以提高虾青素的提取率，减少虾青素在盐酸溶液中的浸出。

实施例16

将l-赖氨酸与柠檬酸按1:2的摩尔比混合，在80℃下进行磁力搅拌，直至形成透明均一的液体，最终得到天然低共熔溶剂,密封保存。

将虾壳烘干水分，粉碎，然后置于粉碎机中粉碎，再过40目网筛得到虾壳粉，密封，备用。称取粉碎后虾壳1.5g，加入圆底烧瓶瓶中，加入0.5mol/l的hcl溶液25ml，避光搅拌1h进行脱钙处理，酸处理至规定时间后，过滤洗涤，将滤饼烘干。准确称取脱钙虾壳粉0.5g，加入5ml的低共熔溶剂(含水量30％)，涡旋振荡1min，超声提取30min，功率200w，温度30℃。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

实施例17

与实施例16不同的是低共熔溶剂含水量为20％。

实施例18

与实施例16不同的是低共熔溶剂含水量为40％。

实施例19

与实施例16不同的是低共熔溶剂含水量为50％。

实施例16-19中不同的低共熔溶剂含水量对虾青素提取率的影响如图4所示。随着含水量的升高，溶剂的粘度逐渐降低，扩散系数增大，虾壳在溶剂中均匀分散，增大了彼此的接触面积，使提取率增大。当含水量为30％时提取率最高。由于虾青素不溶于水，随着水量的增大，又减小了提取效率。

实施例20

将l-赖氨酸与柠檬酸按1:2的摩尔比混合，在80℃下进行磁力搅拌，直至形成透明均一的液体，最终得到天然低共熔溶剂,密封保存。

将虾壳烘干水分，粉碎，然后置于粉碎机中粉碎，再过40目网筛得到虾壳粉，密封，备用。称取粉碎后虾壳1.5g，加入圆底烧瓶瓶中，加入0.5mol/l的hcl溶液25ml，避光搅拌1h进行脱钙处理，酸处理至规定时间后，过滤洗涤，将滤饼烘干。准确称取脱钙虾壳粉0.5g，加入5ml的低共熔溶剂(含水量30％)，物料比(g/ml)为1：10涡旋振荡1min，超声提取30min，功率200w，温度30℃。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

实施例21

与实施例20不同的是虾壳与低共熔溶剂的物料比为1:5。

实施例22

与实施例20不同的是虾壳与低共熔溶剂的物料比为1:15。

实施例23

与实施例20不同的是虾壳与低共熔溶剂的物料比为1:20。

实施例24

与实施例20不同的是虾壳与低共熔溶剂的物料比为1:25。

实施例20-24中不同的物料比对虾青素提取率的影响如图5所示。由图5可以得到随着料液比的增加，含量先升高再降低，料液比为1：10-1：25时，虾青素的提取率在50μg/g以上，当其料液比为1：10-1：20时，虾壳虾青素可达60μg/g以上，当料液比为1：20时提取率最高，故实验优选料液比为1：20。

实施例25

将l-赖氨酸与柠檬酸按1:2的摩尔比混合，在80℃下进行磁力搅拌，直至形成透明均一的液体，最终得到天然低共熔溶剂,密封保存。

将虾壳烘干水分，粉碎，然后置于粉碎机中粉碎，再过40目网筛得到虾壳粉，密封，备用。称取粉碎后虾壳1.5g，加入圆底烧瓶瓶中，加入0.5mol/l的hcl溶液25ml，避光搅拌1h进行脱钙处理，酸处理至规定时间后，过滤洗涤，将滤饼烘干。准确称取脱钙虾壳粉0.5g，加入10ml的低共熔溶剂(含水量30％)，涡旋振荡1min，超声提取30min，功率200w，温度30℃。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

实施例26

与实施例25不同的是超声功率为150w。

实施例27

与实施例25不同的是超声功率为175w。

实施例28

与实施例25不同的是超声功率为225w。

实施例29

与实施例25不同的是超声功率为250w。

实施例25-29中不同的超声功率对虾青素提取率的影响如图6所示。当超声功率为175-225w时虾壳虾青素提取率最高。

实施例30

将l-赖氨酸与柠檬酸按1:2的摩尔比混合，在80℃下进行磁力搅拌，直至形成透明均一的液体，最终得到天然低共熔溶剂,密封保存。

将虾壳烘干水分，粉碎，然后置于粉碎机中粉碎，再过40目网筛得到虾壳粉，密封，备用。称取粉碎后虾壳1.5g，加入圆底烧瓶瓶中，加入0.5mol/l的hcl溶液25ml，避光搅拌1h进行脱钙处理，酸处理至规定时间后，过滤洗涤，将滤饼烘干。准确称取脱钙虾壳粉0.5g，加入10ml的低共熔溶剂(含水量30％)，涡旋振荡1min，超声提取30min，功率70w，温度30℃。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

实施例31

与实施例30不同的是超声温度为25℃。

实施例32

与实施例30不同的是超声温度为35℃。

实施例33

与实施例30不同的是超声温度为40℃。

实施例34

与实施例30不同的是超声温度为45℃。

实施例30-34中不同的超声温度对虾青素提取率的影响如图7所示。温度越高粘度越低，虾壳能够更好的低共熔溶剂中分散提高萃取效率，但温度过高会影响虾青素的稳定性，导致虾青素的提取效率降低。所以当超声温度为40-45℃时虾壳虾青素提取率最高。

实施例35

将l-赖氨酸与柠檬酸按1:2的摩尔比混合，在80℃下进行磁力搅拌，直至形成透明均一的液体，最终得到天然低共熔溶剂,密封保存。

将虾壳烘干水分，粉碎，然后置于粉碎机中粉碎，再过40目网筛得到虾壳粉，密封，备用。称取粉碎后虾壳1.5g，加入圆底烧瓶瓶中，加入0.5mol/l的hcl溶液25ml，避光搅拌1h进行脱钙处理，酸处理至规定时间后，过滤洗涤，将滤饼烘干。准确称取脱钙虾壳粉0.5g，加入10ml的低共熔溶剂(含水量30％)，涡旋振荡1min，超声提取30min，功率175w，温度40℃。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

实施例36

与实施例35不同的是超声时间为45min.

实施例37

与实施例35不同的是超声时间为60min.

实施例38

与实施例35不同的是超声时间为75min.

实施例39

与实施例35不同的是超声时间为90min.

实施例35-39中不同的超声时间对虾青素提取率的影响如图8所示。由图8可以得到随着提取时间的增加，虾青素提取率也是先升高再降低，当提取时间为40-45min时，虾青素提取率最高。

实施例40

将l-赖氨酸与柠檬酸按1:2的摩尔比混合，在80℃下进行磁力搅拌，直至形成透明均一的液体，最终得到天然低共熔溶剂,密封保存。

将虾壳烘干水分，粉碎，然后置于粉碎机中粉碎，再过40目网筛得到虾壳粉，密封，备用。称取粉碎后虾壳1.5g，加入圆底烧瓶瓶中，加入0.5mol/l的hcl溶液25ml，避光搅拌1h进行脱钙处理，酸处理至规定时间后，过滤洗涤，将滤饼烘干。准确称取脱钙虾壳粉0.5g，加入10ml的低共熔溶剂(含水量30％)，涡旋振荡1min，超声提取45min，功率175w，温度40℃。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

对比例1

传统溶剂的提取液的制备：精确称取约0.5g脱钙虾壳粉末，加10ml丙酮，涡旋1min，在功率为250w，温度为30℃时超声提取30min。以4200r/min离心15min，取上清液，即为虾壳虾青素提取物。采用紫外可见分光光度法下测定虾壳虾青素的含量。

实施例40与对比例1中采用丙酮提取虾壳虾青素的提取率为12.321μg/g，采用低共熔溶剂提取虾壳虾青素的提取率为109.93μg/g。而且在本发明范围内的实施例41-47的方法提取的虾壳虾青素的提取率均在60μg/g以上，明显优于对比例1。而且利用丙酮进行提取，具有一定的毒性，对化学成分的提取效率也较低，很容易导致有效成分的损失，产生一定的废物。

试验例

氨基酸类天然低共熔溶剂及传统溶剂提取液体体外抗氧化活性研究

1)溶液配制

准确称取8mgdpph·,加入100ml容量瓶中，用甲醇进行定容，得到浓度为0.2mmol/l的dpph·溶液。

准确称取0.1489g邻二氮菲，加入100ml容量瓶中，用95％乙醇进行定容，得到浓度为7.5mmol/l邻二氮菲溶液配制。

称取na2hpo4.12h2o晶体7.16g溶解，用100ml容量瓶定容，得到浓度为0.2mol/l的na2hpo4溶液，称取nah2po4.2h2o晶体3.12g溶解，用100ml容量瓶定容，得0.2mol/l的nah2po4溶液。取0.2mol/l的na2hpo4溶液81ml，再取0.2mol/l的nah2po4溶液19ml混合，即得ph7.4的0.2mol/l磷酸缓冲液。

量取30％h2o2溶液1ml，加入10ml容量瓶中，用去离子水定容。取3.35ml上述溶液加入到100ml容量瓶中，用去离子水定容即得0.1％的h2o2溶液。

准确称取0.1163gfeso4，加入到100ml容量瓶中，用去离子水定容，即得浓度为7.5mmol/l的feso4溶液。

2)dpph自由基清除试验

精确量取3ml的浓度为0.2mmol/l的dpph溶液加入0.5ml的低共熔溶剂或者丙酮溶液，即为空白组，记为a0。精确量取3ml的浓度为0.2mmol/l的dpph溶液加入0.5ml的低共熔溶剂提取液或者丙酮溶液，即为记为ai。精确量取3ml甲醇溶液加入0.5ml的低共熔溶剂提取液或丙酮提取液，记为aj。将以上3组避光反应30min，在517nm下测定吸光度。清除率计算公式如下：

i(％)＝[1-(ai-aj)/a0]*100％

3)羟基自由基清除试验

取1ml7.5mmol/l邻二氮菲溶液置于10ml离心管中，加入2ml的ph7.4的pbs,加入1ml低共熔溶剂或丙酮溶液，混匀后加入1ml7.5mmol/l的feso4溶液，充分混匀后加入1ml0.1％h2o2溶液混匀，在37℃水浴下反应1h后，在536nm波长下测定吸光度a损害。

取1ml7.5mmol/l邻二氮菲溶液置于10ml离心管中，加入2ml0.2mol/lph7.4的pbs，加入1ml低共熔溶剂或者丙酮溶液，混匀后加入1ml7.5mmol/l的feso4溶液，充分混匀后加入1ml去离子水混匀，在37℃水浴下反应1h后，以536nm波长下测定吸光度a未损害害。

取1ml7.5mmol/l邻二氮菲溶液置于10ml离心管中，加入2ml0.2mol/lph7.4的pbs，加入低共熔溶剂提取液或丙酮提取液1ml后，混匀后加入1ml7.5mmol/l的feso4溶液，混匀加入h2o21ml，测536nm时的吸收值，即得a样。

oh清除率(s％)＝(a样-a损害)/(a未损害-a损害)×100％

将低共熔溶剂提取液稀释至与丙酮提取液相同的浓度，得到丙酮提取液dpph自由基清除率为29.50％，羟基自由基清除率为9.70％。

低共熔溶剂提取液dpph自由基清除率为30.81％，羟基自由基清除率为18.96％。采用低共熔溶剂提取虾壳中虾青素能够更好的保留虾青素的抗氧化活性。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述各实施方案所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。