一种艾尔骨化醇中间体的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种酶拆分分离外消旋化合物以及副产物的回收方法，特别是涉及用 于制备艾尔骨化醇中间体1A的新方法。
【背景技术】：
[0002] 维生素D(vitaminD)为固醇类衍生物，具抗佝偻病作用，又称抗佝偻病维生素。目 前认为维生素D也是一种类固醇激素，维生素D家族成员中最重要的成员是VD2 (麦角钙化 醇）和VD3(胆钙化醇）。维生素D均为不同的维生素D原经紫外照射后的衍生物。美国科 学家一项为期40年的研宄发现，每天服用一剂维生素D能把罹患乳腺癌、结肠癌和卵巢癌 的风险降低一半。阳光照射在皮肤上，身体就会产生维生素D，这部分维生素D占身体维生 素D供给的90%。
[0003] 近几年来，越来越多的证据表明，缺乏维生素D可能对身体极其有害。据认为，心 脏病、肺病、癌症、糖尿病、高血压、精神分裂症和多发性硬化等疾病形成都与缺乏维生素D 密切相关。
[0004] 日本厚生省于2011年1月21日批准中外株式会社骨质疏松症治疗药物--艾 尔骨化醇上市，其有效物质艾尔骨化醇是继阿法骨化醇后又一新的用于治疗骨质疏松症的 活性维生素D3衍生物。在早期进行的临床试验中，40名健康志愿者接受口服艾尔骨化醇 (0. 1-1. 0yg/day)。观察到剂量依赖性的尿钙排出增加，但受试者并没有出现持续性的增 高到大于400mg/day，也没有出现高血妈症（大于10. 4mg/dl)，同时也观察到骨吸收标志物 剂量依赖性的抑制，但骨形成标志物（例如血清骨特异性碱性磷酸酶）并没有改变。表明艾 尔骨化醇可以抑制骨吸收，而血清osteocalcin并没有被抑制，表明骨形成得以维持。艾 尔骨化醇耐受性良好，没有观察到高钙血症或高钙尿症。
[0005] 原研厂家中外制药在科技期刊Heterocycles, 2006,vol70, 295报道路线如下， 该路线为汇聚法合成策略，A环片段化合物3与CD环片段化合物4经Wittig-Honor反应 进行偶联然后脱保护得到艾尔骨化醇，A环片段以廉价的工业原料（D)-酒石酸二乙酯为起 始原料先经11步反应制得化合物1，化合物1再经11步反应转化得到该路线的关键化合物 3〇
[0006]
【主权项】
1. 一种酶拆分制备化合物IA的方法，其特征是包含以下步骤： a) 化合物1或9在酶作用下得到化合物IA和化合物7 ; b) 化合物7在有机溶剂中，碱性条件下，选择性皂化得到化合物1B，所述的皂化的方法 和条件为本领域此类反应的常规方法和条件； c) 化合物IB在有机溶剂中和有机酸在Mitsunobu反应条件生成化合物IC ; d) 化合物IC在有机溶剂中，碱性条件下，选择性皂化得到化合物1A，所述的皂化的方 法和条件为本领域此类反应的常规方法和条件。
2. 如权利要求1所述方法，其特征是， 当起始原料为化合物1时，所述步骤a中包含以下步骤： a_l)将消旋化合物1和丙烯酸乙酯溶于溶剂中，室温下加入酶，加热条件下反应，反应 时间以HPLC取样检测异构体含量IB小于3 %为止，通常为8-24小时；本领域常规后处理 后柱层析得化合物IA和化合物7 ; 当起始原料为化合物9时，所述步骤a中包含以下步骤： a_2)将化合物9溶于溶剂中，加入酶，室温条件反应，反应时间以HPLC取样检测化合物 9S构型消失为止，通常为4-12小时，本领域常规后处理后柱层析得化合物IA和化合物7。
3. 如权利要求2所述方法，其特征是，步骤a-Ι中，所述酶为诺维信脂肪酶Novozyme 435或脂肪酶LIPASE AK AMAN0,其与化合物1的重量百分比为0.01-1 ;所述溶剂选自正己 烷，甲基叔丁基醚，正庚烷，异丙醚。
4. 如权利要求3所述方法，其特征是，所述酶与化合物1的重量百分比为0. 09-0. 1 ;所 述溶剂为正己烷。
5. 如权利要求2所述方法，其特征是，步骤a-2中，所述酶为诺维信脂肪酶Novozyme 435或者脂肪酶LIPASE AK AMAN0,其与化合物1的重量百分比为0.01-1 ;所述溶剂选自乙 腈/水的混合溶剂或二氧六环/水的混合溶剂。
6. 如权利要求5所述方法，其特征是，所述酶与化合物1的重量百分比为0. 09 - 0. 1 ; 所述溶剂为乙腈和水的混合溶剂，其中乙腈和水的体积比为2 :1。
7. 如权利要求1所述方法，其特征是，步骤b中，所述的碱可以是碳酸钠，碳酸钾，碳酸 铯，碳酸氢钠，碳酸氢钾，氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化锂，氢氧化钡所述溶剂为乙腈，DMF，二 氧六环，乙酸乙酯，甲基叔丁基醚、四氢呋喃、甲醇，或上述溶剂的任意混合；所述的反应温 度为O °c至室温。
8. 如权利要求1所述酶拆分制备化合物IA的方法，其特征是，步骤c中，所述 Mitsunobu反应包含以下步骤：化合物IB溶于有机溶剂中，低温加入偶氮二羧酸酯，有机膦 和有机酸，自然升至室温，反应时间至检测反应结束为止。
9. 如权利要求8所述的方法，其特征是，所述偶氮二羧酸酯选自偶氮二羧酸二乙酯或 偶氮二羧酸二异丙酯，所述有机膦选自三苯基膦、三正丁基膦或三甲基膦，优选三苯基膦， 所述有机酸选自苯甲酸、对硝基苯甲酸、对氯苯甲酸或乙酸。
10. 如权利要求8或9所述的方法，其特征是，所述偶氮二羧酸酯为偶氮二羧酸二乙酯， 所述有机膦为三苯基膦，所述有机酸为对硝基苯甲酸，反应溶剂为四氢呋喃，所述的反应温 度为零下5度至40度。
【专利摘要】本发明涉及一种酶拆分制备化合物1A的方法，更确切地说，这种对映体分离和回收利用方法是先用酶处理化合物1或9后，得到化合物1A和化合物7；化合物7经选择性皂化、Mitsunobu反应、再次选择性皂化得到化合物1A；达到对映体拆分，并回收利用的目的。
【IPC分类】C12P17-04, C07D317-22, C12P41-00
【公开号】CN104830943
【申请号】CN201510117649
【发明人】丁福斗, 李洪坤, 杨旭慧, 张宪恕, 高强, 郑保富
【申请人】上海皓元生物医药科技有限公司, 上海皓元化学科技有限公司
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年3月18日