金霉素发酵培养基分消及应用方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物发酵领域，具体涉及一种金霉素发酵培养基分消及应用方法。
【背景技术】
[0002] 金霉素预混剂属四环类抗生素药物饲料添加剂，主要活性成分为金霉素钙盐，其 抗菌谱广，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、螺旋体、立克次体、支原体、衣原体等均有较强 的抑制作用，不仅可以预防和治疗禽畜疾病如细菌性肺炎、细菌性肠炎、钩端螺旋体病、猪 链球菌性颊部脓肿、鸡传染性滑膜炎等，而且可以促进禽畜对营养物质的吸收，提高饲料转 化率，促进禽畜生长。此外，金霉素预混剂还具有生产工艺较成熟，效价较高，使用成本相对 较低，人畜不交叉使用，避免了交叉耐药，使用安全性高，低剂量长期使用不会引起药物残 留，与其它兽药之间少有配伍禁忌，可用作基础药物与其它兽药制成复合药物饲料添加剂 等优点。
[0003] 随着畜牧业的进一步发展，近年来金霉素预混剂的市场需求量不断扩大，预计在 未来较长一段时间内也是药物饲料添加剂的主力产品之一，而国外客户对金霉素预混剂的 质量要求越来越高，且产品价格与活性成分含量直接相关，因此，有必要改进和完善金霉素 生物发酵技术，提高金霉素效价、降低生产成本。
[0004] 金霉素通用的生产方法是将金色链霉菌采用纯种二级发酵培养，培养基采用实罐 灭菌法，在整个培养过程中严格保持无菌状态并保持一定的罐温、罐压，通入无菌空气并不 断搅拌，根据发酵代谢过程中的pH和糖量变化，采用通氨和补料的方式保持一定的酸碱度 及营养，所得发酵液再经过钙化、过滤、干燥、粉碎、过筛、混合等过程，最终制得金霉素预混 剂（如CN102899377A)。其中，培养基配方比例是整个金霉素生产的核心关键技术，目前， 国内的生产企业主要将研宄集中于培养基组分和比例的调配以及原材料的替代，却忽略了 培养基的营养成分在高温灭菌过程中因理化反应而造成的损失。
[0005] 虽然也有关于培养基灭菌方面的研宄，诸如CN104001191A介绍了一种连消装置， 先将培养基输送到连消器，在连消器中对培养基加热灭菌，最后灭菌后的培养基进入发酵 罐。然而该发明涉及的连消方法存在以下缺点：对发酵消毒设备的要求高，设备投资大，需 另外设置加热、冷却装置，操作复杂，温度控制不稳定，染菌的机会较多，染菌涉及面广，不 适合含有大量固体发酵培养基的灭菌，不适合金霉素一类需要大量玉米淀粉为培养基的产 品，对蒸汽压力要求高。因此，仍旧需要深入探讨效果更佳的金霉素培养基灭菌方式。
【发明内容】
[0006] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种金霉素发酵培养基分消及应用方法，该方 法能够减少高温灭菌对发酵培养基营养成分的破坏，提高金色链霉菌对培养基成分的利用 率。
[0007] 为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0008] 金霉素发酵培养基分消及应用方法，所述方法包括如下步骤：
[0009] 将培养基中玉米浆和除pH缓冲剂外的无机组分配制成A液，将除玉米浆外的其余 有机组分、pH缓冲剂和消泡剂配制成B液，将A液和B液分别进行灭菌，灭菌完毕后冷却， 根据发酵培养基所需体积将冷却后的A液打入至少一批次的B液中，接种后进行发酵生产。
[0010] 优选的，所述其余有机组分为淀粉酶、玉米蛋白、玉米淀粉、花生饼粉、黄豆饼粉、 酵母粉以及植物油或豆油。
[0011] 优选的，所述pH缓冲剂为碳酸钙。
[0012] 优选的，所述除pH缓冲剂外的无机组分为硫酸铵、氯化钠、磷酸二氢钾、氯化钙和 硫酸镁。
[0013] 优选的，所述培养基按质量百分浓度计由以下组分组成：淀粉酶0.002-0. 02%、 硫酸铵0. 2-1. 0 %、消泡剂0. 0-0. 06 %、碳酸钙0. 4-0. 7 %、氯化钙0. 0-1. 0 %、玉米蛋 白0. 0-1. 0 %、玉米淀粉0. 0-8. 0 %、玉米浆0. 0-2. 0 %、硫酸镁0. 01-0. 3 %、花生饼粉 0. 0-4. 0%、磷酸二氢钾0. 01-0. 03%、氯化钠0. 1-0. 4%、黄豆饼粉0. 0-5. 0%、植物油或豆 油0. 0-0. 3 %、酵母粉0. 0-2. 0 %，余量为水。
[0014] 优选的，所述培养基按质量百分浓度计由以下组分组成：淀粉酶0.006%、硫酸铵 0. 88%、消泡剂0. 02%、碳酸钙0. 60%、氯化钙0. 60%、玉米蛋白0. 05%、玉米淀粉6. 05%、 玉米浆1. 0 %、硫酸镁0. 16 %、花生饼粉1. 7 %、磷酸二氢钾0. 03 %、氯化钠0. 4 %、黄豆饼粉 1. 00%、酵母粉0. 88%、植物油或豆油0. 2%，余量为水。
[0015] 优选的，发酵培养基所需体积为90m3,灭菌后的A液体积为30m3,灭菌后的B液体 积为80m3,取10m3A液打入B液中用于发酵，剩余的A液分别等体积打入另外两批次B液中 用于发酵。
[0016] 优选的，所述培养基按质量百分浓度计由以下组分组成：淀粉酶0.006%、硫酸铵 0. 75%、消泡剂0. 02%、碳酸钙0. 60%、氯化钙0. 60%、玉米蛋白0. 04%、玉米淀粉5. 95%、 玉米浆0. 9 %、硫酸镁0. 16 %、花生饼粉1. 50 %、磷酸二氢钾0. 03 %、氯化钠0. 20 %、黄豆饼 粉0. 89%、酵母粉0. 75%、植物油或豆油0. 2%，余量为水。
[0017] 优选的，发酵培养基所需体积为50m3,灭菌后的A液体积为12m3,灭菌后的B液体 积为38m3,将A液全部打入B液中用于发酵。
[0018] 需要说明的是，本发明中所述培养基成分及组成现有技术已公开，具体可参见 CN102899377A。
[0019] 需要说明的是，培养基的成分可以根据实际情况进行调整，比如，为了节约成本， 将花生饼粉或黄豆饼粉部分或全部替换为棉籽饼柏等，而成分的用量亦可根据实际情况进 行调整，上述修改方式仍旧在本发明所述的保护范围之内。
[0020] 本发明的有益效果在于：本发明通过多次实验调整，获得了金霉素发酵培养基分 消的最佳组分搭配，基本上避免了微生物发酵有机营养物质与无机盐之间发生的剧烈理化 反应，如还原糖与氨类物质之间的美拉德反应，从而可最大限度的降低高温杀菌过程中培 养基营养成分的破坏，提高了原料的利用率和发酵效价；同时由于本发明一次性灭菌的灭 菌液A可供多批次的灭菌液B使用，降低了实际生产中因为分消带来的成本上升问题，实现 了良好的经济效益。
[0021] 另外，与现有技术的连消方法相比，分消还具有以下优点：无需专用灭菌设备，所 有灭菌过程即可在发酵罐内完成，操作简单，染菌几率小，灭菌效果稳定