专利名称：一种毛霉发酵培养增效剂及培养基的制作方法
技术领域：
本发明涉及毛霉培养技术领域，尤其是一种毛霉发酵培养增效剂及培养基。
背景技术：
毛霉又叫黑霉、长毛霉，以孢囊孢子和接合孢子繁殖，菌丝无隔、多核、分枝状，在基物内外能广泛蔓延，无假根或匍匐菌丝，其在土壤、粪便、禾草及空气等环境中存在，在高温、高湿度以及通风不良的条件下生长均很好。毛霉的用途很广，能产生多种代谢产物，被广泛应用在工业生产中，如利用其淀粉酶制曲、酿酒，利用其蛋白酶以酿制腐乳、豆豉等。毛霉活化后，在培养基内接种，培养一端时间后，将发酵液提纯可获得多种代谢产 物及其他抗生素，整个培养过程具有原料简单、价格低廉、生产工艺简单的优点。但是毛霉发酵过程中稳定性差、代谢率低、发酵时间长、所得产物不稳定等缺点限制了毛霉的进一步应用。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种增加产量、提高酶活的一种毛霉发酵培养增效剂。本发明采取的技术方案是一种毛霉发酵培养增效剂，其特征在于其原料包括按重量份数混合的以下组分
吡效議0.05 ().33份
赖氨酸0.10 0.20份
半酸駿酸0.丨U 0.25份
色过酸0.15 0. 25份
维生桌》12(},5() 1.50份
维I.:桌 [ 0.50 I. 20 粉
汉化胆碱0. 30 0. 80份
L-苏氨酸 0. 80 I. 50份 。本发明的另一个目的是提供一种含有毛霉发酵培养增效剂的培养基，其特征在于所述增效剂的添加量为培养基总重量的0. 25 1%。而且，包括麸皮、乳糖、蛋白胨、KH2PO4, NaH2PO4和水，麸皮与水的重量比为I 1.0 2.0，每升水中的乳糖添加量为0. 15 0.2g，每升水中的蛋白胨添加量为0.25 0. 5g，KH2P04添加量为固态培养基总重量的0. 05 0. 10%, NaH2P04添加量为固态培养基总重量的0. 10 0. 2%。
本发明的另一个目的是提供一种毛霉的发酵方法，其特征在于包括以下步骤(I)分别配制培养基和增效剂，培养基将麸皮、乳糖、蛋白胨、KH2PO4和NaH2PO4混合后，再与水混匀即可；增效剂将吡效隆、赖氨酸、半酰胺酸、色氨酸、维生素B12、维生素B6、氯化胆碱和L-苏氨酸混合均匀即可；将增效剂加入培养基中，混合均匀即可。
(2)活化后的菌种接种后进行培养,培养温度为30 50摄氏度,培养时间为24 48小时，即完成发酵。而且，步骤⑵所述的培养中，每4 6小时翻曲一次。本发明的优点和积极效果是本发明中，在培养基内按一定比例加入由吡效隆、赖氨酸、半酰胺酸、色氨酸、维生素B12、维生素B6、氯化胆碱、L-苏氨酸和水混合后的增效剂，使毛霉发酵时的菌丝含量相对于传统培养基有大量地增加，而且发酵产物的酶活性明显高于传统培养基，可见，采用含有增效剂的培养基后，毛霉的菌丝含量、代谢产物的活性均优于传统培养基，具有良好的经济、生态及社会效益。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。一种毛霉发酵培养增效剂，其特征在于其原料包括按重量份数混合的以下组分
0.05 0. 33份吡效隆、0. 10 0. 20份赖氨酸、0. 10 0. 25份半酰胺酸、0. 15 0. 25份色氨酸、0. 50 I. 50份维生素B12、0. 50 I. 20份维生素B6、0. 30 0. 80份氯化胆碱和
0.80 I. 50份L-苏氨酸。上述增效剂在使用时，其添加量为培养基总重量的0. 25 1%。其中培养基包括麸皮、乳糖、蛋白胨、KH2P04、NaH2P04和水，麸皮与水的重量比为I : I. 0 2. 0，每升水中的乳糖添加量为0. 15 0. 2g，每升水中的蛋白胨添加量为0. 25 0. 5g，KH2P04添加量为固态培养基总重量的0. 05 0. 10%, NaH2P04添加量为固态培养基总重量的0. 10 0. 2%。制备培养基将麸皮、乳糖、蛋白胨、KH2PO4和NaH2PO4混合后，再与水混匀即可。制备增效剂将吡效隆、赖氨酸、半酰胺酸、色氨酸、维生素B12、维生素B6、氯化胆碱和L-苏氨酸混合均匀即可。将增效剂加入培养基中，混合均匀即可。培养基配制好后，毛霉的发酵方法是将活化后的菌种接种后进行培养，培养温度为30 50摄氏度,培养时间为24 48小时,每4 6小时翻曲一次，即完成发酵。实施例I
成份吡效降FiEclpFliZlTE^ii维 11 IS 7R I miM l
__(K/i.) ig/l) (tf/I.) Sk IJ B12(g/I.) B6 (g/1.) (g/1.) (g/1.)
用!|i 0. 05 0. 20 0. 25 0. 25I. o1. 20. 80I. 5进行毛霉的发酵培养I.配制增效剂和培养基，然后将二者混合，增效剂的添加量为培养基总重量的1%。2.毛霉选用亮色毛霉，活化后接种至培养基内，培养温度为30摄氏度，培养时间为36小时,每4小时翻曲一次。3.将步骤2的发酵液进行提纯，分离出的产物进行酶活测试。在步骤I 3进行的同时，选用相同的毛霉在传统培养基中培养相同的时间，分离出的产物同样进行酶活测试。实施例2
权利要求
1.ー种毛霉发酵培养增效剂，其特征在于其原料包括按重量份数混合的以下组分 吡效隆O. 05 O. 33份 赖氣酸0.10 O. 20份 半酰胺酸O. IO O. 25份 色氣酸0.15 O. 25份 维生素B12O. 50 I. 50份 维生素B6O. 50 L 20份 氣化胆碱O. 30 O. 80份 L-苏氣酸 O. 80 I. 50份 α
2.ー种含有权利要求I所述的毛霉发酵培养增效剂的培养基，其特征在于所述增效剂的添加量为培养基总重量的O. 25 1%。
3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于包括麸皮、乳糖、蛋白胨、KH2P04、NaH2P04和水，麸皮与水的重量比为I : I. O 2. O,姆升水中的乳糖添加量为O. 15 O. 2g,姆升水中的蛋白胨添加量为O. 25 O. 5g，KH2P04添加量为固态培养基总重量的O. 05 O. 10%，NaH2P04添加量为固态培养基总重量的O. 10 O. 2%。
4.ー种使用如权利要求2或3所述的培养基的发酵方法，其特征在于包括以下步骤 (1)分别配制培养基和增效剂， 培养基将麸皮、乳糖、蛋白胨、KH2PO4和NaH2PO4混合后，再与水混匀即可； 增效剂将吡效隆、赖氨酸、半酰胺酸、色氨酸、维生素B12、维生素B6、氯化胆碱和L-苏氨酸混合均匀即可； 将增效剂加入培养基中，混合均匀即可； (2)活化后的菌种接种后进行培养，培养温度为30 50摄氏度，培养时间为24 48小时，即完成发酵。
5.根据权利要求4所述的发酵方法，其特征在干步骤(2)所述的培养中，每4 6小时翻曲一次。
全文摘要
本发明涉及一种毛霉发酵培养增效剂，其原料包括按重量份数混合的以下组分0.05～0.33份吡效隆、0.10～0.20份赖氨酸、0.10～0.25份半酰胺酸、0.15～0.25份色氨酸、0.50～1.50份维生素B12、0.50～1.20份维生素B6、0.30～0.80份氯化胆碱和0.80～1.50份L-苏氨酸。本发明中，在培养基内按一定比例加入由吡效隆、赖氨酸、半酰胺酸、色氨酸、维生素B12、维生素B6、氯化胆碱、L-苏氨酸和水混合后的增效剂，使毛霉发酵时的菌丝含量相对于传统培养基有大量地增加，而且发酵产物的酶活性明显高于传统培养基，可见，采用含有增效剂的培养基后，毛霉的菌丝含量、代谢产物的活性均优于传统培养基，具有良好的经济、生态及社会效益。
文档编号C12R1/785GK102676443SQ20121016770
公开日2012年9月19日 申请日期2012年5月25日 优先权日2012年5月25日
发明者刘鼎阔, 张俊霞, 张凤洪, 张勇, 王立红, 董惠峰 申请人:鼎正动物药业(天津)有限公司