0g/L。
[0128] 实施例8本发明防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种的栽培试验
[0129] 1.试验菌种：以本发明实施例2制备的液体菌种和市售的"龙海3号"液体菌种为 试验菌种，分为试验组和对照组；
[0130] 2.接种方法：试验组和对照组以相同的接种量和接种密度采用常规方法接种，分 别接种2000瓶；
[0131] 3.生产管理：试验组和对照组采用同样的管理方法
[0132] 3.1发菌管理
[0133] 接种后将菌瓶放在恒温培养室内，避光培养。温度控制在23°C，相对湿度70%~ 75%。此阶段用于栽培料中的养分完全分解和积累。发菌期管理的关键是保温、保湿，前期 如果温度过低，持续时间较长，会降低菌种活力，菌丝生产速度减慢。所有菌瓶菌丝浓白后 再持续培养15d，使养分彻底分解，菌丝达到生理成熟。
[0134] 3. 2开瓶、搔菌
[0135] 菌瓶后熟期过后，按常规方法进行开瓶、搔菌处理。搔菌过程中，液体菌种搔菌时 去掉表面薄薄一层即可。搔菌完成后将菌瓶移入出菇房，菌瓶倒置，使菌丝恢复生长。待 菌丝恢复后，温度控制在14°C~16°C，相对湿度为90~95%，光照500~800Lx，CO 2浓度 600~1500ppm，待现蕾出葫。
[0136] 3. 3子实体生长管理
[0137] 温度控制在15~18°0，空气湿度保持在85%~90%，0)2浓度在1500~1800??111 之间，子实体生长迅速。当菇盖基本展开，孢子尚未弹射时采收一潮菇。
[0138] 4.质量及产量指标测定
[0139] 观察记录试验组和对照组栽培瓶的菌丝浓度、菌丝颜色、发菌时间、杂菌感染状 况，观察比较子实体性状，测量子实体菌柄长度、菌盖大小和菌柄直径、单瓶产量，并统计计 算杂菌感染率、一级菇率和生物转化率，结果如表1-3 :
[0140] 生物学转化率（％)=子实体鲜品产量（g)/培养料干重（g) X 100%
[0141] 表 1
[0142]
[0143] 以上结果表明：本发明液体菌种健壮、活力高，生长速度快，菌丝产量和质量高，抗 杂菌能力强，与对照组相比发菌时间缩短22. 22%，杂菌感染率降低96. 67%。
[0144] 表 2
[0146] -以上结果表明：本发明液体菌种栽培后的子实体菌盖与菌柄生长比例合适，外观 优美，质量等级高，与对照组相比一级菇率提高5 %。
[0147] 表 3
[0149] 以上结果表明：本发明液体菌种栽培后的子实体单凭产量高，生物转化率高，具有 较好的经济效益，更加适合工厂化、规模化栽培。与对照组相比，生物转化率提高34. 79%。
[0150] 同时，本发明液体菌种菌丝球密度高为5. 5 X IO5个/L，市售液体菌种菌丝球密度 最高为2.7 X IO5个/L，与对照组相比，其生产能力为市售液体菌种2倍以上，体现了较高 的经济价值。
[0151] 需要说明的是：本发明实施例3-7制备的鲍菇液体菌种同样具有上述实验效果， 各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
【主权项】
1. 一种防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特征在于，包括如下步 骤：将保存的杏鲍菇斜面菌种经平板培养基活化后依次经液体种子培养基、摇瓶种子培养 基和种子罐培养基逐级扩大培养得到种子罐种子，首先将种子罐种子以5%接种量接种于 30L发酵罐，发酵培养基装液量15L，于30-32°C、通气量3-5L/min恒温发酵12-24h，然后 以0. 6-0. 8°C /min的速率降温至18-22°C，向发酵罐中加入8-10g包被壳聚糖和900mL种 子罐种子，在通气量6_8L/min条件下恒温发酵10_16h，最后以0. 3-0. 5°C /min的速率升温 至24-26°C，在通气量5-7L/min条件下恒温发酵45-52h即得防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇 液体菌种； 所述包被壳聚糖的制备方法包括如下步骤：取壳聚糖加入其质量30-50%的质量百分 比浓度为10-12%的a-环状糊精水溶液中，制成软材，用10-20目筛制粒，得湿颗粒，置微 波干燥机中于功率2000W、60-80°C干燥4-6min，用10-20目筛快速整粒即得包被壳聚糖。2. 如权利要求1所述的一种防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特 征在于，所述液体种子培养基组成为：葡萄糖30g/L，酵母浸出汁5g/L，蛋白胨2g/L，琼脂 2g/L，中草药提取物0. 3-0. 5g/L，磷酸二氢钾0. 5g/L，硫酸镁0. 5g/L，木肩粉0. 1-0. 3g/L， VB1 0.01g/L，余量为水，pH 值 6.0。3. 如权利要求1所述的一种防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特 征在于，所述摇瓶培养基组成为：黄豆饼粉60g/L，葡萄糖10g/L，蛋白胨5g/L，中草药提取 物 0? 5-1. Og/L，磷酸二氢钾 0? 5g/L，硫酸镁 0? 5g/L，木肩粉 0? 2-0. 4g/L，VB1 0? 01g/L，余量 为水，pH值6.0。4. 如权利要求1所述的一种防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特 征在于，所述种子罐培养基组成为：黄豆饼粉60g/L，葡萄糖10g/L，蛋白胨5g/L，中草药提 取物 0? 8-1. 2g/L，磷酸二氢钾 0? 5g/L，硫酸镁 0? 5g/L，木肩粉 0? 3-0. 5g/L，VB1 0? 01g/L，余 量为水，pH值6.0。5. 如权利要求1所述的一种防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特 征在于，所述发酵培养基的组成为：黄豆饼粉60g/L，葡萄糖10g/L，蛋白胨5g/L，中草药提 取物 2. 1-2. 3g/L，木肩粉 L 1-1. 3g/L，磷酸二氢钾 0? 5g/L，硫酸镁 0? 5g/L，VB1 0? 01g/L，余 量为水，pH值6.0。6. 如权利要求2-5任一所述的一种防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种的发酵方 法，其特征在于，所述中草药提取物的制备方法，包括如下步骤：按重量份数计，称取黄芪 30份，干姜30份，陈皮30份，牛黄25份，丹皮25份，甘草20份，知母18份，金银花18份， 鱼腥草17份，赤芍15份，黄芩15份，川芎10份，当归8份；置盛有0. 2%碳酸氢钠溶液的 超声波清洗机中于200W、30KHz清洗12min，沥干，将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下， 置容器中均匀混合并添加5倍重量的水，得混合物料，控制温度80°C保持3h，接着降温至 45°C，用乳酸调节pH值为4,在功率200W条件下进行微波提取12min，同时在功率250W，频 率35KHz条件下进行超声波辅助提取；然后加入混合物料总重量1. 0 %的混合酶进行酶解， 用乳酸调节PH值为6. 2,酶解3h，最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，乙醇和 丙醇混合的质量比为1:2,控制温度至70°C保持3. 5h，过滤，得第一滤液；添加滤渣2倍重 量的水，控制温度90°C保持2h，然后降温至30°C，过滤，得第二滤液；将第一滤液和第二滤 液按照质量比3:2合并，滤液真空浓缩后冷冻干燥、粉碎即得中草药提取物； 所述混合酶为葡聚糖酶、木聚糖酶、戊聚糖酶、果胶酶按质量比3:2:2:1均匀混合。7. 如权利要求2-5任一所述的一种防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种的发酵 方法，其特征在于，所述木肩粉的制备方法包括如下步骤：将无发霉、无病虫锯木末或废木 肩除去杂物，置于装有质量百分比浓度0.5%的碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、 30KHz清洗lOmin，冲洗、沥干，放入蒸汽Il中于0. 3-0. 4MPa蒸煮20-30min,取出，沥干， 与植物油按质量比100:1均匀混合，然后将混合物置微波干燥机于2000W、120°C微波辐照 5min，最后超微粉碎至粒径0. 3-0. 5mm,密封包装即得木肩粉。8. 如权利要求7所述的一种防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种的发酵方法，其特 征在于，微波干燥时微波辐照10s，停留10s。9. 如权利要求1-8任一所述的发酵方法制得的防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌 种。10. 如权利要求9所述的防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种在杏鲍菇栽培中的应 用。
【专利摘要】本发明公开了一种防止栽培时杂菌感染的杏鲍菇液体菌种及其发酵方法，属于杏鲍菇栽培技术领域，在液体种子、摇瓶种子、种子罐种子及发酵罐液体菌种各阶段培养基中科学复配可提高菌种抗冷、热应激性、免疫性和抗杂菌能力的中草药提取物，同时科学复配了既具有原料适应性，又具有消泡剂功能的木屑粉，并且采用追加接种和分段变温发酵的方式，缩短了菌种菌龄及增殖代数差距，适时流加包被后的具有特殊功能的壳聚糖，培养出发酵菌丝粗壮、活性高、菌丝球直径小、密度大、分布均匀的液体菌种，其菌丝球密度为4.5-5.5ⅹ105个/L，菌丝球直径为0.5-0.7mm，菌丝球干重为90-100g/L，萌发时间为4-5h，胞外多糖为3.0-3.5g/L。
【IPC分类】C12N1/14, C12R1/645, A01G1/04
【公开号】CN104946540
【申请号】CN201510317145
【发明人】李建树
【申请人】天津中天精科科技有限公司, 李建树
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年6月11日