建固定化养殖平台：
[0066] 在长X宽为ImX lm、厚为5cm的有机玻璃板上平铺无纺布，无纺布的面积为有机 玻璃板面积的1/3,以该无纺布作为支撑层；然后将该有机玻璃板连同其上的无纺布竖直 放置（同时采取措施防止无纺布脱落），在无纺布与有机玻璃板之间、从两者上部不断滴加 培养基，培养基自另一端留下，落入位于有机玻璃板下方的水槽内，该水槽为培养基储存容 器，设置潜水泵以及循环管线，构成培养基输送装置，使得培养基能够循环浸润无纺布（实 验组和对照组各设置一套上述固定化养殖平台）。
[0067] (2)接种小球藻细胞与形成第一沟道：
[0068] 实验组：无纺布上铺放10条与培养基流向一致（在重力方向上由上到下）的棉 线，然而后将一定浓度的小球藻藻液（包括小球藻细胞和培养基）喷洒在无纺布上，使得小 球藻细胞接种在无纺布上，待无纺布上形成小球藻细胞层后，将10条棉线连同附着在其上 的小球藻细胞取下，在小球藻细胞层中形成10条第一沟道。
[0069] 对照组：将一定浓度的小球藻藻液（包括小球藻细胞和培养基）喷洒在无纺布上， 使得小球藻细胞接种在无纺布上，在无纺布上形成小球藻细胞层。
[0070] (3)培养小球藻细胞与形成第二沟道：
[0071] 将实验组和对照组中附着有小球藻细胞层的无纺布置于同一培养体系内，在水槽 中的培养基内通入二氧化碳与空气的混合气体，其中二氧化碳的体积分数为2 %，并通过曝 气石对该混合气体进行分散，促进混合气体的溶解，采用荧光灯进行对附着于无纺布表面 的小球藻细胞层进行持续光照；
[0072] 实验组：在培养至小球藻细胞层厚度为1mm以上时，采用塑料片在小球藻细胞层 中划出多个同心圆状的第二沟道，第二沟道与原第一沟道交叉，且第二沟道环绕小球藻细 胞层中细胞较为密集的区域；将第二沟道形成过程中脱落的小球藻细胞接种于无纺布上， 继续进行小球藻细胞的固定化培养。
[0073] 对照组：不进行特别处理，继续进行固定化培养。
[0074] 实验组以及对照组各自分别进行4天的固定化培养后，分别采收各自产出的小球 藻细胞，将其烘干，并测定烘干后的小球藻细胞的质量。
[0075] 实验结果
[0076] 实验组中附着于无纺布上的小球藻细胞层中形成有第一沟道和第二沟道，对照组 中附着于无纺布上的小球藻细胞层中未形成有沟道。参照表2,实验组的产量比对照组产量 高25 %。该结果说明，通过在小球藻细胞层中形成第一沟道和第二沟道，使得在小球藻细胞 的固定化培养过程中，即使小球藻细胞层的厚度逐渐变大导致表层细胞距离支撑层较远， 也能够通过第一沟道和第二沟道中储存的培养基，使得表层细胞在单位时间内获得较多的 培养基，从而使得小球藻细胞培养的平均产量得到提高。
[0077] 表 2
[0078]
[0079] 在上述实施方式的描述中，具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多 个实施例或示例中以合适的方式结合。各个实施例均采用递进的方式描述，各个实施例之 间相同或相似的部分互相参见即可，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之 处。
[0080] 以上所述，仅为本发明的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何 熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵 盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。
【主权项】
1. 一种细胞的固定化培养方法，用于在支撑层上对细胞进行培养，其特征在于，所述细 胞的固定化培养方法包括： 将所述细胞接种在所述支撑层上，形成附着在所述支撑层上的细胞层； 向所述支撑层提供培养基，所述培养基浸润所述支撑层及所述细胞层； 其中，所述细胞层中形成有多条第一沟道，各所述第一沟道中储存有所述培养基。2. 根据权利要求1所述的细胞的固定化培养方法，其特征在于，至少有一条所述第一 沟道的延伸方向与所述细胞层中培养基的流动方向一致。3. 根据权利要求1所述的细胞的固定化培养方法，其特征在于，至少有一条所述第一 沟道的两端与所述细胞层的相对的两侧边连通。4. 根据权利要求1所述的细胞的固定化培养方法，其特征在于，所述第一沟道的深度 为d，所述细胞层的厚度为t，则d和t满足如下关系^ d ^ 0. 5t。5. 根据权利要求1所述的细胞的固定化培养方法，其特征在于，在所述细胞层中形成 多条所述第一沟道的方法包括： 在所述将所述细胞接种在所述支撑层上，形成附着在所述支撑层上的细胞层后，在所 述细胞层中划出多条所述第一沟道；或 在所述将所述细胞接种在所述支撑层上，形成附着在所述支撑层上的细胞层前，在所 述支撑层上设置多个可取下的条状物，在所述将所述细胞接种在所述支撑层上后，取下所 述条状物以及接种在所述条状物上的所述细胞，在所述细胞层中形成多条所述第一沟道。6. 根据权利要求1-5任一项所述的细胞的固定化培养方法，其特征在于，在所述向所 述支撑层提供培养基，所述培养基浸润所述支撑层及所述细胞层后，所述细胞的固定化培 养方法还包括： 当所述细胞层的厚度达到时、或各所述第一沟道被从所述细胞层脱落的所述 细胞填满时，在所述细胞层中形成多条第二沟道，各所述第二沟道中储存有所述培养基。7. 根据权利要求6所述的细胞的固定化培养方法，其特征在于，所述第二沟道与所述 第一沟道交叉设置。8. 根据权利要求6所述的细胞的固定化培养方法，其特征在于，所述在所述细胞层中 形成多条第二沟道后，所述细胞的固定化培养方法还包括： 当各所述第一沟道和各所述第二沟道被从所述细胞层脱落的所述细胞填满时，在所述 细胞层中形成多条第三沟道，各所述第三沟道中储存有所述培养基。9. 根据权利要求8所述的细胞的固定化培养方法，其特征在于，所述第二沟道的宽度 大于所述第一沟道的宽度，所述第三沟道的宽度大于所述第二沟道的宽度。10. 根据权利要求8所述的细胞的固定化培养方法，其特征在于，平行且相邻的所述第 一沟道之间的距离、平行且相邻的所述第二沟道之间的距离、平行且相邻的所述第三沟道 之间的距离、平行且相邻的所述第一沟道和所述第二沟道之间的距离、平行且相邻的所述 第一沟道和所述第三沟道之间的距离、以及平行且相邻的所述第二沟道和所述第三沟道之 间的距离为2cm-50cm。
【专利摘要】本发明公开一种细胞的固定化培养方法，涉及细胞培养技术领域，用于增加细胞层中的表层细胞在单位时间内获得的培养基，进而提高细胞的固定化培养的产量。所述细胞的固定化培养方法包括：将所述细胞接种在所述支撑层上，形成附着在所述支撑层上的细胞层；向所述支撑层提供培养基，所述培养基浸润所述支撑层及所述细胞层；其中，所述细胞层中形成有多条第一沟道，各所述第一沟道中储存有所述培养基。本发明提供的细胞的固定化培养方法用于藻类、真菌及细菌的培养等。
【IPC分类】C12N5/00
【公开号】CN104974976
【申请号】CN201510381397
【发明人】冯倩, 刘敏胜
【申请人】新奥科技发展有限公司
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2015年7月2日