一种柏树菌子实体多糖提取方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物工程领域，具体涉及一种柏树菌子实体多糖提取方法。
【背景技术】
[0002]柏树菌是北方山区民间广泛应用的药用菌，是众多食用菌中的一种。柏树菌又名扁芝(elfvingia)，其含有大量对人体有保健治疗价值的有效成分，如真菌多糖、嘌呤、腺苷等，而其中真菌多糖经提纯后，能调整机体生理机能，其中多糖之一为蛋白链多糖，它可阻断各种营养物质进入肿瘤细胞，从而将肿瘤细胞困死、饿死，有效缓解肿瘤症状、减轻疼痛，恢复免疫功能，延长病人生存期，部分肿瘤病人服用灵芝柏树菌后肿瘤可缩小；糖尿病患表现为“三多一少”症状，多糖可改善这些症状，还可改善患者尿频、乏力等症状，还可降低血糖及尿糖，部分患者在用用2个月以后，空腹血糖甚至可降至7.0mmol/L以下；对慢性呼吸系统疾病患者的咳、痰及喘症状也有显著疗效，此外，它还可可提高免疫力，降血脂、降压、抗衰老，促进儿童生长发育、提高智力、活化细胞、活化组织，改善体内微循环、防制血栓病等生理活性，对人体有一个双向调节作用，从而使机体恢复生理平衡，明显提高机体抗病能力和活力。近年来，随着研宄的不断深入，人们发现柏树菌有历史医著中未曾记载的功效，灵芝柏树菌也可炖肉用以防病治病、滋补健体、扶正固本、老少皆宜。不同的配方让草到病除，离苦得乐，少量可预防未病、适量可改变已病、大量可挽救末病，它的作用是综合性的，而且其对机体没有副作用。目前，柏树菌已受到广大部门及医药科技工作者的重视与关注。
[0003]目前，多采用热水浸提、溶剂浸提或酶法浸提来提取真菌多糖，热水浸提工艺简单，但其提取的主要为胞外多糖，多糖得率低；而溶剂浸提多采用酸或碱性物质提取，对多糖的结构或生物活性可能产生影响；而酶法浸提多采用纤维素酶或果胶酶，利于提取胞内多糖，但提取成本高，产物分离困难。本发明提供一种简单高效，多糖多率高的提取方法。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是解决现有技术中存在的上述问题，提供一种工艺简单、多糖损失少的柏树菌子实体多糖提取方法。
[0005]本发明的技术方案如下:
一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，包括以下步骤:
(1)样品预处理:将柏树菌的干燥子实体5-10g采用清水清洗干净，采用高效组织切碎机切成碎片，干燥至恒重，加10-20倍体积的纯化水进行超微粉碎，提取，过滤，取滤液离心，去除沉淀物，得到预处理的样品溶液；
(2)在步骤(I)中制得的预处理的样品溶液中加入乙醇，室温静置，使之沉淀，离心去除上清，收集沉淀，冷冻干燥后制得柏树菌子实体多糖。
[0006]优选的，步骤(I)中所述的碎片的宽度为0.2-0.4cm。
[0007]优选的，步骤(I)中所述的干燥温度为60_65°C。
[0008]优选的，步骤(I)中所述的纯化水的温度为90_100°C。
[0009]优选的，步骤(I)中所述的超声波粉碎的参数为:超声波聚能工作频率为15-60KHZ，超声波功率为6000-10000W ;所述的提取温度为80_100°C。
[0010]优选的，步骤(I)中所述的粉碎时间为10-20min，提取时间为5_6h。
[0011]优选的，步骤(I)与步骤(2)中所述的离心速度为6000-12000r/min，离心温度为50-80°C，离心时间为 10-30min。
[0012]优选的，步骤(2)中所述的乙醇的体积浓度为55-70%，加入量为预处理的样品溶液体积的5-8倍。
[0013]优选的，步骤(2)中所述的静置时间为l_2h。
[0014]本发明与现有技术相比，有益效果体现在:
1.本发明先对样品采用组织切碎机进行碎片，将碎片宽度控制在0.2-0.4cm，然后进行超微粉碎、提取。随着子实体粒度的减少和碎碎，可增加扩散面积，使细胞壁破碎，可使有效成分更易萃取，但细小颗粒会使后续分离、过滤等工艺变得更复杂化，本发明将粒度大小严格控制。且操作自动化，利于工业化大规模生产。
[0015]2.随着提取温度的升高，柏树菌子实体多糖的萃取率也随之增加，随着萃取时间的延长，多糖的萃取量也随之增加，但随着粗多糖浓度降低，扩散速度减慢，粗多糖萃取量也就减少，因此，本发明将提取时间控制在5-6h，可保证其中多糖的最大限度的提取。
[0016]3.本发明先对样品进行预处理，包括清水清洗，切片粉碎、萃取，过滤、离心等操作，已经对样品中杂质进行了初步清除，在采用乙醇进行醇沉时，乙醇体积浓度越大，沉淀量越大，而同时，其他杂质沉淀量也加大，本发明在采用乙醇醇沉时，将其浓度控制在55-70%，既保证了样品中多糖的提取，也保证了杂质的清除。
【具体实施方式】
[0017]下面结合具体实施例对本发明进行详细说明:
实施例1
一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，包括以下步骤:
(1)样品预处理:将柏树菌的干燥子实体5g采用清水清洗干净，采用高效组织切碎机切成宽度为0.2cm碎片，60°C下干燥至恒重，加10倍体积温度为90°C的纯化水进行超微粉碎，提取，过滤，取滤液，以6000r/min在50°C离心lOmin，去除沉淀物，得到预处理的样品溶液；
(2)在步骤(I)中制得的预处理的样品溶液中加入5-8倍体积浓度为55%的乙醇，室温静置lh，使之沉淀，以6000r/min在50°C离心lOmin，去除上清，收集沉淀，冷冻干燥后制得柏树菌子实体多糖。
[0018]步骤(I)中所述的超声波粉碎的参数为:超声波聚能工作频率为15KHz，超声波功率为6000W ;所述的提取温度为80°C。
[0019]实施例2
一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，包括以下步骤:
(I)样品预处理:将柏树菌的干燥子实体1g采用清水清洗干净，采用高效组织切碎机切成宽度为0.4cm碎片，650C下干燥至恒重，加20倍体积温度为100°C的纯化水进行超微粉碎，提取，过滤，取滤液，以12000r/min在80°C离心30min，去除沉淀物，得到预处理的样品溶液；
(2)在步骤(I)中制得的预处理的样品溶液中加入8倍体积浓度为70%的乙醇，室温静置2h，使之沉淀，以12000r/min在80°C离心30min，去除上清，收集沉淀，冷冻干燥后制得柏树菌子实体多糖。
[0020]步骤(I)中所述的超声波粉碎的参数为:超声波聚能工作频率为60KHz，超声波功率为10000W ;所述的提取温度为-100°c。
[0021]实施例3
一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，包括以下步骤:
(1)样品预处理:将柏树菌的干燥子实体Sg采用清水清洗干净，采用高效组织切碎机切成宽度为0.3cm碎片，62°C下干燥至恒重，加15倍体积温度为95°C的纯化水进行超微粉碎，提取，过滤，取滤液，以9000r/min在65°C离心20min，去除沉淀物，得到预处理的样品溶液；
(2)在步骤(I)中制得的预处理的样品溶液中加入5-8倍体积浓度为60%的乙醇，室温静置1.5h，使之沉淀，以9000r/min在65°C离心20min，去除上清，收集沉淀，冷冻干燥后制得柏树菌子实体多糖。
[0022]步骤(I)中所述的超声波粉碎的参数为:超声波聚能工作频率为35KHz，超声波功率为8000W ;所述的提取温度为90°C。
[0023]上述实施例仅为本发明的优选实施方式，并不应理解为对本发明的限定，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)样品预处理:将柏树菌的干燥子实体5-10g采用清水清洗干净，采用高效组织切碎机切成碎片，干燥至恒重，加10-20倍体积的纯化水进行超微粉碎，提取，过滤，取滤液离心，去除沉淀物，得到预处理的样品溶液； (2)在步骤(I)中制得的预处理的样品溶液中加入乙醇，室温静置，使之沉淀，离心去除上清，收集沉淀，冷冻干燥后制得柏树菌子实体多糖。2.根据权利要求1所述的一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，步骤(I)中所述的碎片的宽度为0.2-0.4cm。3.根据权利要求1所述的一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，步骤(I)中所述的干燥温度为60-65°C。4.根据权利要求1所述的一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，步骤(I)中所述的纯化水的温度为90-100°C。5.根据权利要求1所述的一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，步骤(I)中所述的超声波粉碎的参数为:超声波聚能工作频率为15-60KHZ，超声波功率为6000-10000W ；所述的提取温度为80-100°C。6.根据权利要求1所述的一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，步骤(I)中所述的粉碎时间为10-20min，提取时间为5_6h。7.根据权利要求1所述的一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，步骤(I)与步骤(2)中所述的离心速度为6000-12000r/min，离心温度为50_80°C，离心时间为10_30min。8.根据权利要求1所述的一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，步骤(2)中所述的乙醇的体积浓度为55-70%，加入量为预处理的样品溶液体积的5-8倍。9.根据权利要求1所述的一种柏树菌子实体多糖提取方法，其特征在于，步骤(2)中所述的静置时间为l_2h。
【专利摘要】本发明涉及一种柏树菌子实体多糖提取方法，所述的提取方法包括以下步骤：先对样品进行清洗，碎片，干燥至恒重，加纯化水进行超微粉碎，提取，过滤，取滤液离心，去除沉淀物；再加入乙醇，室温静置，沉淀，离心去除上清，收集沉淀，冷冻干燥。本发明先对样品采用组织切碎机进行碎片，将碎片宽度控制在0.2-0.4cm，然后进行超微粉碎、提取，并且将提取时间控制在5-6h，可使有效成分更易萃取，且操作自动化，利于工业化大规模生产。本发明先对样品进行的一系列预处理，可对杂质进行了初步清除，在采用55-70%的乙醇进行醇沉时，既保证了样品中多糖的提取，也保证了杂质的清除。
【IPC分类】C08B37/00
【公开号】CN104987425
【申请号】CN201510349204
【发明人】郭狄
【申请人】中山鼎晟生物科技有限公司
【公开日】2015年10月21日
【申请日】2015年6月19日