处理的高额费用，节能环保，充分发挥了物质的生产潜力，提高了资源的利用 率：谷胱甘肽废液成为生产功能微生物的原料，使企业不仅享有主产品（谷胱甘肽）经济效 益，也同时享有副产品（功能微生物）经济效益，提高了企业市场竞争力，使企业保持可持 续性的发展。
[0038] (二）利用谷胱甘肽废液生产的微生物既是动、植物营养调节剂，又是生物肥料和 全能型的饲料添加剂，可以广泛用于农业、畜牧业、环境保护等领域，具有巨大的社会效益 及经济效益；
[0039] (三）在种植业方面，利用谷胱甘肽废液生产的微生物能提高农作物的产量；改善 农产品品质；增强作物的抗病、抗逆能力；防止重茬使作物连续栽培；连续使用，提高土壤 肥力；降低农产品的药物残留，延长保质期，是建设有机食品（CffiDC)生产基地的理想选择。
[0040] (四）在畜牧业方面，利用谷胱甘肽废液生产的微生物发酵液含有多种微生物合 成的大量糖类，氨基酸、维生素等生理活性物质；含有多种消化酶和代谢酶，作为饲料添加 剂，能够分解饲料中的粗纤维，提高饲料的消化利用率；提高畜禽免疫力、减轻动物病害； 改善畜产品品质；提高畜禽成活率、产蛋率、产奶率，缩短出栏周期；消除畜禽粪便恶臭，改 善生态环境。
[0041] (五）环境保护方面，利用谷胱甘肽废液生产的微生物，可作为环保净化剂，用于 处理生活垃圾时，能除去垃圾臭气，净化垃圾渗流水质，降低垃圾的苍蝇密度，还可把垃圾 等废弃物发酵成生物有机肥，发展可持续农业。
[0042] (六）本发明以功能微生物为关键技术点，利用谷胱甘肽废液为原料，通过低成本 运行费用的新技术、新工艺，生产多元化的功能微生物并应用于种植业、畜牧养殖业和环保 业，对这三大关联产业将产生极大的带动作用，意义重大。
【具体实施方式】
[0043] 以具体制备实施例、实验例对本发明的谷胱甘肽废液在微生物生产中的应用及应 用方法作以下详细地说明。
[0044] 各实施例中，均以lmol/L的氢氧化钠溶液或lmol/L的盐酸溶液调节料液或培养 基pH值。
[0045] 制备实施例一：
[0046] 【原料】
[0047] 2014年9月，以取自山东金城生物药业有限公司的谷胱甘肽废液（即微生物发 酵法生产谷胱甘肽时的发酵液离心后的残液）为原料。经山东省农业科学院农业资源与 环境研究所检测，其成分组成：氮I. 51g/100mL;磷0. 10g/100mL;钾3. 05g/100mL;有机质 40. 75g/100mL;可溶性固形物含量 38. 4g/100mL，含糖量 18g/100mL，pH5. 11 ;水分 54. 34%。
[0048] 经农业部都市农业（北方）重点实验室日历L-8900高速氨基酸自动分析仪检测， 其18种氨基酸和粗蛋白含量分析见表1 :
[0049] 表1谷胱甘肽废液中的18种氨基酸和粗蛋白含量分析
[0050]
[0052]【菌种来源】
[0053] 地衣芽胞杆菌（提供形式：安瓿管冻干粉）购买至中国工业微生物菌种保藏管理 中心，编号CICC23584。
[0054]【发酵液制备】
[0055] 1)地衣芽胞杆菌菌种活化
[0056] 斜面培养基制备：蛋白胨0.5%，牛肉浸取物0.3%，NaClL5%，琼脂1.5%，调培 养基至pH7. 0,121°C，0. 103MPa，灭菌30min，无菌条件下制备斜面试管。
[0057] 活化方法：无菌条件下，将冷冻保藏管中的地衣芽胞杆菌菌种接种到斜面中，30°C 条件下活化48h，得到斜面菌种或菌种斜面。
[0058] 2)地衣芽胞杆菌三角瓶种子液制备
[0059] 三角瓶液体培养基制备：蛋白胨0.5%，牛肉浸取物0.3%，NaClL5%， MnSO4 .H2OSppm,调培养基至初始pH7. 0,121°C~125°C，0. 103MPa~0? 168MPa，灭菌 30min。
[0060] 三角瓶种子液制备方法：无菌条件下，取1~2环经步骤1)活化的地衣芽胞杆菌 斜面菌种，接入装量为30mL液体培养基的250mL三角瓶中，置于170r/min中摇床中，30°C 恒温培养24h，得到地衣芽胞杆菌三角瓶种子液。
[0061] 3)地衣芽胞杆菌种子罐培养
[0062] 种子罐液体培养基制备：谷胱甘肽废液用纯水稀释10倍，pH控制在7. 0(以Imol/ L的氢氧化钠溶液或lmol/L的盐酸溶液调节），121°C，0. 103MPa，灭菌lh，降温至30°C，备 用。
[0063] 种子罐培养过程：种子罐的体积为200L，种子罐的培养基装料量控制在种子罐公 称容积的60%，即种子罐的装料量为120L，在无菌条件下，取经步骤2)制备的地衣芽胞杆 菌三角瓶种子液（50个三角瓶的种子液共I. 5L，即接种量为种子罐装料量的I. 25% )接入 种子罐中，使发酵温度控制在30°C，发酵过程中pH控制在7. 0,搅拌转速控制在170r/min， 通气量控制在I. 5VVm[指单位时间（min)单位种子液体积（m3)通入的标准状态下的空气体 积（m3)]，培养24h，得到地衣芽胞杆菌种子罐培养液，培养结束时，测得芽孢形成率为83 %， 活菌数为10. 37X10sCFU/mL，杂菌污染率为0. 26 %。
[0064] 4)发酵罐发酵
[0065] 发酵罐液体培养基制备：谷胱甘肽废液用纯水稀释10倍，pH7. 0,121 °C， 0? 103MPa，灭菌0? 5h，降温至30°C，备用。
[0066] 发酵罐培养方法：发酵罐的体积为5m3,发酵罐实际装料量为3m3,在无菌条件下， 取经步骤3)制备的地衣芽胞杆菌种子罐培养液全部接入发酵罐中，经计算，接种量体积发 酵罐实际装料量体积的4%，发酵温度控制在30°C，发酵过程中pH控制在7. 0,搅拌转速控 制在170r/min，通气量控制在I. 5Wm，保持发酵24h，得到发酵液。
[0067] 发酵液指标：pH7. 02 ;地衣芽胞杆菌含菌量12. 61X10sCFU/mL;芽孢含量73%，重 金属2. 3mg/Kg;霉菌数8CFU/mL;大肠杆菌4CFU/100mL;沙门氏菌无检出。
[0068] 制备实施例二：
[0069]【原料】
[0070] 同制备实施例一。
[0071]【菌种来源】
[0072] 嗜酸乳杆菌（提供形式：安瓿管冻干粉）购买至中国工业微生物菌种保藏管理中 心，编号CICC6074)。
[0073]【发酵液制备】
[0074]1)嗜酸乳杆菌菌种活化
[0075] 斜面培养基制备：酪蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母粉0.5%，葡萄糖0.5%，乙酸钠 〇? 5 %，柠檬酸二铵 0? 2 %，Tween80 0? 1 %，K2HPO4O. 2 %，MgSO4 ? 7H20 0? 02 %，CaC032 %，琼 脂I. 5%，调培养基的pH5. 8,121°C，0. 103MPa，灭菌30min，无菌条件下制备斜面试管。
[0076] 活化方法：无菌条件下，将冷冻保藏管中的嗜酸乳杆菌接种到斜面中，36°C条件下 活化36h，得到斜面菌种或菌种斜面。
[0077]2)嗜酸乳杆菌三角瓶种子液制备
[0078] 三角瓶液体培养基制备：酪蛋白胨1%，牛肉膏1%，酵母粉0.5%，葡萄糖0.5%， 乙酸钠0.5%，柠檬酸二铵0.2%，Tween80 0.1%，K2HPO4 0.2%，MgSO4，7H20 0.02%， CaC032%，pH5. 8,121。(：，0. 103MPa，灭菌30min。
[0079] 三角瓶种子液制备方法：无菌条件下，取一环经步骤I)活化的嗜酸乳杆菌菌斜面 菌种，接入装量为IOOmL液体培养基的500mL三角瓶中，置于150r/min中摇床中，36°C封口 培养30h，得到嗜酸乳杆菌菌三角瓶种子液。
[0080] 3)嗜酸乳杆菌种子罐培养
[0081]种子罐液体培养基制备：谷胱甘肽废液用纯水稀释8倍，pH5. 8,121°C，0.103MPa， 灭菌Ih，降温至36 °C，备用。
[0082] 种子罐培养过程：种子罐的体积为250L，种子罐的装料量控制在种子罐公称容积 的60%，即种子罐的装料量为150L，取经步骤2)制备的嗜酸乳杆菌三角瓶种子液（12个三 角瓶的种子液共I. 2L)接入种子罐中，即接种量为种子罐实际装料量的0. 8%，发酵温度控 制在36°C，pH控制在5. 8,搅拌转速控制在150r/min，不通气，培养30h，得到嗜酸乳杆菌种 子罐培养液，培养结束时测得活菌数为20. 64X10sCFU/mL，杂菌污染率为0. 37 %。
[0083] 4)发酵罐发酵
[0084]发酵罐液体培养基制备：谷胱甘肽废液用纯水稀释8倍，pH5. 8,121°C，0.103MPa， 灭菌Ih，降温至36 °C，备用。
[0085] 发酵罐培养方法：发酵罐的体积为5m3,装料量为3m3,在无菌条件下，取经步骤 3)制备的嗜酸乳杆菌种子罐培养液全部接入发酵罐中，经计算，接种量为发酵罐装料量的 5 %，发酵温度控制在36°C，pH控制在5. 8,搅拌转速控制在150r/min，不通气，培养30h，得 到发酵液。
[0086] 发酵液指标：pH5. 76;嗜酸乳杆菌含菌量25. 86X10sCFU/mL;重金属I. 67mg/Kg; 霉菌数llCFU/mL;大肠杆菌7CFU/100mL;沙门氏菌无检出；外观、气味具有酸香味的深棕色 液体。
[0087] 制备实施例三：
[0088]【原料】
[0089] 2014年12月，以取自山东金城生物药业有限公司的谷胱甘肽废液（即微生物发 酵法生产谷胱甘肽时的发酵液离心后的残液）为原料。经山东省农业科学院农业资源与 环境研究所检测，其成分组成：氮I. 53g/100mL;磷0. 097g/100mL;钾3. 04g/100mL;有机 质 40. 97g/100mL;可溶性固形物含量 38. 33g/100mL，含糖量 17. 78g/100mL，pH5. 22 ;水分 53. 94% 〇
[0090] 经农业部都市农业（北方）重点实验室日历L-8900高速氨基酸自动分析仪检