ITlL；
[0200] 2)将从混合机出来的物料装入托盘中，每个托盘所装的物料深度为4cm，将托盘 送至烘干室立体架上，烘干室12mX12mX3m，每Ih翻动物料一次，烘干室温度控制在37 °C， 烘干时间20h，获得1. 7吨干燥后的固体功能微生物产品，外观为酸香味的粉剂产品，水分 为8. 5 %，枯草芽孢杆菌含菌量2. 17XIOsCFlVmL;产朊假丝酵母菌含菌量2. 38XIO8CFU/ mL;嗜酸乳杆菌含菌量4. 31X10sCFU/mL;总活菌数8. 86X10sCFU/mL;相比烘干前，总活菌 数降低12. 97%，重金属0. 3mg/Kg;霉菌6CFU/mL;大肠杆菌4CFU/100mL;沙门氏菌无检出。 经全自动定量包装机生产线，200袋/分钟，2Kg/袋，12袋/箱，保质期为1年，6个月时检 验菌种存活率为92. 58 %，1年时检验菌种存活率86. 23 %。
[0201] 实验例一；
[0202] 以制备实施例八所得复合型液体微生物菌肥与市售购买的其他公司生产的进行 对比试验。
[0203] 试验地点：设在济南市农业高新技术产业示范园生菜大棚
[0204] 试验时间：2014年10月08日至12月25日和2015年3月7日至5月18日。2014 年10月08日和2015年3月7日分别进行播种育苗；2014年11月2日和2015年3月31 日分别进行定植，定植密度为行、株20~25厘米；2014年12月23日和2015年5月21日 分别进行采收。
[0205] 供试生菜品种：美国大速生。
[0206] 供试菌肥：本发明实施例八所得的复合型液体微生物菌肥（菌种组合为解淀粉芽 孢杆菌、地衣芽孢杆菌，经检测活菌总数为2. 3X10sCUF/mL);华雨液体微生物菌肥（菌种 组合为解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌，经检测活菌总数为2. 27X10sCUF/mL)，来自沧州华 雨生物科技有限公司。
[0207] 试验设计：
[0208] 本发明实施例八所得的复合型液体微生物菌肥、华雨液体微生物菌肥2种供试菌 肥分别用A、B来表示，每种菌肥设置3个处理浓度，分别为1:100、1:200、1:500 (菌肥剂 量与水量之比），以清水作为对照（CK)，共计7个处理，各处理设置详见表4。每个处理小 区面积30m2,随机区组排列，3次重复。育苗前种子分别用各处理菌肥浓度浸种1.5h，在 生菜定植缓苗后开始叶面喷施微生物菌肥进行处理，每隔1星期喷施一次，喷施时间均为 下午3点，共喷施5次。喷施菌肥采用喷雾器喷施法，每小区配用15公斤待用浓度的菌 肥，然后均匀喷施至生菜叶片。
[0209] 表4各处理名称
[0210]
[0211] 测定项目及方法：
[0212] 1)生菜形态指标和产量的测定
[0213] 生菜地上部生长指标的测定：播种后3d开始记录不同微生物菌肥处理的生菜的 出苗率；定植后45天随机取30株生菜，用蒸馏水冲洗干净，吸去表面水分，测定其地上部生 长指标，包括株高、叶面积、地上部鲜重、地上部干重、亩产量。株高为根莲处至时片生长最 高点距离；地上部和地下部分别在105°C下杀青，75°C烘至恒重，测量干质量。
[0214] 2)生菜品质指标的测定
[0215] 采收期，每处理随机取30株生菜，将烂叶黄叶去除，将其他叶片剪碎混合，测定可 溶性糖、可溶性蛋白、维生素C、游离氨基酸的含量。可溶性糖含量的测定釆用蒽酮比色法； 可溶性蛋白质的测定采用考马斯亮蓝G-250染色法；维生素C采用分光光度计法测定；游 离氨基酸采用茚三酮溶液显色法测定。
[0216] 试验结果：
[0217] 1)在播种后的第10天，两种菌肥各浓度的出苗率均达到了 85%以上，表明微 生物菌肥处理后的土壤透气性和保水性均有利于生菜种子的出苗，可有效缩短育苗时间； A2(以实施例八所得的复合型液体微生物菌肥1:200清水稀释）的孔隙度最大，透气性 最好，所以对育苗影响最大，其出苗率最高达98. 53%，与清水对照组相比提高了 4.5% ; B2 (华雨液体微生物菌肥1:200清水稀释）的总孔隙率次之，相应的出苗率低于A2 (以实施 例八所得的复合型液体微生物菌肥1:200清水稀释），但也比清水对照组提高了 0. 58%。
[0218] 两种微生物菌肥不同浓度处理对生菜生长的影响有一定的差异，与清水对照组相 比，处理A2、B2均能显著增加温室生菜的株高、叶面积、地上部鲜重、地上部干重、亩产量， 且促进效果表现为A2 >B2,其中A2 (以实施例八所得的复合型液体微生物菌肥1:200的浓 度）处理效果最好，分别使株高、地上部鲜重、地上部干重、亩产量、叶面积比清水对照组增 加了 27. 21 %、22. 53%、61. 49%、23. 70%、15. 88%，B2(华雨液体微生物菌肥 1:200 清水稀 释）处理效果次之，分别使株高、地上部鲜重、地上部干重、亩产量、叶面积比清水对照组增 加了 23. 0 %、19. 87 %、52. 06 %、20. 44 %、13. 19 %，其他浓度的处理结果与清水对照组相比 差异不显著。
[0219] 实验例二：
[0220] 以制备实施例十得到的复合型微生物粉剂饲料添加剂进行对比实验。
[0221] 试验方法：试验选用产期、胎次、品种相同、肤色相近的50日龄杜长大三元杂交 断奶仔猪75头，试验时间125天，随机分为三组，每组25头，平均分为三圈饲养，每组的仔 猪体重无明显差异（P> 0.05)。三组仔猪饲养于同一幢猪舍内，环境条件相同，预饲期两 周，预饲期内完成去势、驱虫、防疫注射；试验设对照、添加制备实施例十得到的复合型微生 物粉剂饲料添加剂处理组、添加华牧微生物饲料添加剂粉剂产品（购自哈尔滨禾牧科技有 限公司）三个处理，对照组：全价料；试验组：全价料+0. 3 %华牧微生物饲料添加剂粉剂产 品；
[0222] 自由采食，计量不限量，自动饮水器饮水。
[0223] 指标统计：准确记录日增重、料重比、蛋白消化率、有机物消化率、腹泻发生率、腹 泻复发率，对试验数据行比较。
[0224] 应用效果：全价料+0. 3%制备实施例十得到的复合型微生物粉剂饲料添加剂效 果最好，全价料+〇. 3%华牧微生物饲料添加剂粉剂产品次之，其中制备实施例十得到的 复合型微生物粉剂饲料添加剂日增重比对照组提高8. 25%，料重比试验组比对照组降低 5. 32 % ;腹泻发生率明显低于对照组，低23. 1 %，而且腹泻发生率0 %，而对照组复发率为 23%。差异均极显著P< (0.01);蛋白消化率比对照组提高7%，有机物消化率比对照组提 高 6. 32%。
[0225] 本发明实施例十得到的复合型微生物粉剂饲料添加剂无毒、无副作用、无污染、安 全可靠，添加到肥育猪日粮中。一方面，该添加剂能有效提高饲料的利用率，可以增加日增 重，这除了固体型功能微生物产品本身含有大量的活菌，被动物摄取利用，起到使饲料中部 分不易吸收利用的物质得以降解外，还与固体型功能微生物产品中的部分活性营养物质有 关；另一方面，该添加剂有明显的增强畜禽机体对疫病的抵抗力的作用，特别是肠道细菌性 疾病，这可能由于固体型功能微生物产品中有益菌与肠道内的有益菌一起并形成了优势菌 群，大量繁殖，通过竞争性抑制使有害菌的繁殖受到抑制，阻止了细菌性疫病的发生，从而 达到增强抗病力的作用。
【主权项】
1. 谷胱甘肽废液在微生物生产中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述谷胱甘肽废液为微生物发酵法生产 谷胱甘肽过程中发酵液离心后的残液。3. 谷胱甘肽废液在微生物生产中的应用方法，其特征在于：在微生物生产中，以谷胱 甘肽废液作为种子培养基有效成分使用。4. 根据权利要求3所述的应用方法，其特征在于：将谷胱甘肽废液加纯水稀释5~20 倍，在 PH5.5 ~7.2，121°C ~125°C，0. 103MPa ~0? 168MPa 条件下灭菌 0.5 ~lh，降温至 27~36 °C后作为种子培养基使用。5. 根据权利要求4所述的应用方法，其特征在于：利用种子培养基进行种子罐培养时， 种子罐的培养基装料量控制在种子罐公称容积的50 %~75%，接种量控制在种子罐实际 装料量的〇. 5%~2%，在适当温度、pH值、通气量及搅拌速度下发酵一定时间，得到种子罐 培养液。6. 谷胱甘肽废液在微生物生产中的应用方法，其特征在于：在微生物生产中，以谷胱 甘肽废液作为发酵培养基有效成分使用。7. 根据权利要求6所述的应用方法，其特征在于：将谷胱甘肽废液加纯水稀释5~20 倍，在 PH5.5 ~7.2，121°C ~125°C，0. 103MPa ~0? 168MPa 条件下灭菌 0.5 ~lh，降温至 27~36°C后作为发酵培养基使用。8. 根据权利要求7所述的应用方法，其特征在于：利用发酵培养基进行发酵罐培养时， 发酵罐的培养基装料量控制在发酵罐公称容积的50%~75%，接种量控制在发酵罐实际 装料量的3%~6.0%，在适当温度、pH值、通气量及搅拌速度下发酵一定时间，得到发酵 液。9. 根据权利要求3、4、5、6、7或8所述的应用方法，其特征在于，所述谷胱甘肽废液为微 生物发酵法生产谷胱甘肽过程中发酵液离心后的残液。10. 根据权利要求9所述的应用方法，其特征在于，所述微生物包括地衣芽胞杆菌、产 朊假丝酵母菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、德式乳杆菌保加利亚亚种、苏云金芽孢杆菌、解 淀粉芽孢杆菌。
【专利摘要】本发明公开了一种谷胱甘肽废液在微生物生产中的应用及应用方法，属于微生物领域。本发明将谷胱甘肽废液作为种子罐培养基和/或发酵罐培养基的有效成分，应用于微生物生产中，不仅具有良好的社会价值及经济价值，还能得到性能更好的微生物制剂，具有极其广泛的应用价值。
【IPC分类】C12R1/07, C12R1/125, C12R1/10, C12R1/72, C12N1/16, C12N1/20, C12R1/23
【公开号】CN105087432
【申请号】CN201510487030
【发明人】常钟, 钱朋智, 史晓洁, 蔡洋, 赵传涛, 侯大彬
【申请人】济南益邦生物科技有限公司
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年8月10日