一种新的杂萜化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从马齿苋的干燥地上部分中分离得到的一种 杂帖化合物，含其的药物组合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 马齿苋（/fertoJacaoJeraceaL.)又名蚂蚱菜、长命菜、马舌菜等，为马齿苋科植 物全草，多以其干燥地上部分入药，生于山区潮湿肥沃的地方，盛产于四川，遍布全国。性味 酸寒，具有清热解毒、凉血止血之功效。主治热痢脓血、热淋、带下、痛肿恶毒、丹毒。药理研 究表明，马齿苋具有降血脂、降血糖、抗动脉粥样硬化等功效。马齿苋可入药，又可食用，是 我国卫生部划定的78种药食同源的野生植物之一，曾被列入2008北京奥运会菜谱。
[0003] 国内外研究人员对马齿苋的化学成分做了大量研究，结果表明，马齿苋中 富含有机酸、黄酮、萜类、留体类、香豆素类、花色苷类以及挥发油等多种类型的化 学成分。目前，分离得到并且结构经过鉴定的香豆素类主要有6, 7-二羟基香豆素 (6, 7-dihydroxycoumarin)、东莨菪亭（scopoletin)、佛手柑内酯（bergapten)、异茴香内 酯（isopimpinellin)、lonchocarpicacid、lonchocarpenin和大叶桉亭（robustin)。
[0004] 现代药理研究表明，马齿苋药理作用广泛，包括：抗菌、抗病毒作用；兴奋平滑肌 的作用；肌肉松弛作用；剂量依赖性地增加心肌收缩力度、速度，且可被心得安完全阻断； 降血脂、抗动脉粥样硬化作用；降血糖作用；抗肿瘤作用；抗衰老作用；增强免疫作用；抗过 敏反应等。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从马齿苋的干燥地上部分中分离得到的一种杂帖化合 物，含其的药物组合物及其制备方法和应用。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的： 具有下述结构式的化合物（I):
[0007] 所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将马齿苋的干燥地上部分 粉碎，用70~80%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤 (a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用5%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇洗脱8 个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤（b)中70%乙醇洗脱 浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为50:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到4个组分；（d)步骤（c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1、5:1 和2:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2用十八烷基硅烷 键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积 洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)。
[0008] 进一步地，步骤（a)中，用75%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0009]进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0010] 药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的载体。
[0011] 所述的化合物（I)在制备心肌保护的药物中的应用。
[0012] 所述的药物组合物在制备心肌保护的药物中的应用。
[0013]本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0014]该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0015]所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0016]说明书附图 图1为化合物（I)结构式； 图2为化合物（I)计算ECD和实验ECD图。
【具体实施方式】
[0017]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0018]主要材料、试剂来源及仪器类型： 乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限公 司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0019] 实施例1 :化合物（I)分离制备及结构确证 (a)将马齿苋的干燥地上部分（8kg)粉碎，用75%乙醇热回流提取（30LX3次)，合并提 取液，浓缩至无醇味（6L)，依次用石油醚（6LX3次)、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁 醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（375g)和正丁醇萃取物；（b) 步骤（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔树脂除杂，先用5%乙醇洗脱6个柱体积，再用70% 乙醇洗脱8个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物（129g) ;(c)步骤 (b)中70%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为50:1 (8个柱体积)、30:1(8 个柱体积)、15:1(8个柱体积)和5:1 (10个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个 组分；（d)步骤（c)中组分4(27g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1(8个柱 体积)、5:1 (10个柱体积)和2:1(8个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分； (e)步骤（d)中组分2 (15g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70% 的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I) (38mg)〇
[0020] 结构确证：HR-ES頂S显示[M+Na]+为m/z345. 1306,结合核磁特征可得分子式为 C17H2206,不饱和度为 7。核磁共振氢谱数据 (ppm，DMS〇-成，600MHz):H-2 (6.40，s)，H-5 (3.74，d，^15.1)，H-5(3.44，d，^15.1)，H-7(5.33，t，^8.3)，H-8(2.41，m)，H-8(1.96，overlap)，H-9 (2. 16，dd，方 13. 2,6. 6)，H-9 (1. 02，t，方 13. 2)，H-11 (4. 05，s)，H-15 (1. 67， s)，H-16 (1.30,s)，l-〇H(12. 05,s)，4-0H(7.55,s)，10-0H(5.09,s)，ll-〇H(6.18,s)， 3-0CH3 (3.86，s);核磁共振碳谱数据 (ppm，DMS〇-成，125Hz):158.4 (C，l-C)，98.4 (CH， 2-C)，153.9 (C，3-C)，138.5 (C，4-C)，29.3 (CH2,5-C)，135.9 (C，6-C)，124.0 (CH，7-C)， 22.2 (CH2,8-C)，37.1 (CH2,9-C)，63.3 (C，l〇-C)，62.8 (CH，11-C)，200.1 (C，12-C)，114. 5 (C，13-C)，123.5 (C，14-C)，20.5 (CH3，15-C)，15.5 (CH3，16-C)，55.6 (CH3,3-0CH3);碳原 子标记参见图1。红外光谱表明该化合物含有羟基基团（3440cm 此外在372和291nm有 紫外吸收说明该化合物存在多共辄结构。IDNMR谱，以及HSQC谱，显示有17个碳共振，分 别为三个甲基(包括一个甲氧基)，三个亚甲基，三个次甲基(包括两个烯碳）以及八个季碳。 另外，一个烯烃质子信号8册.40(1札8，11-2)，以及六个烯碳信号6(：158.4((：，1-〇,98.4 (CH，2-C)，153.9 (C，3-C)，138.5 (C，4-C)，114.5 (C，13-C)和 123.5 (C，14-C)，表明存在 一个五取代的苯环结构。HMBC谱中，羟基质子（SH12. 05,s，l-〇H)与C-l，C-2,C-13以及 SC200. 1 (s，12-C)的相关性表明羰基碳（C-12)与苯环的C-13相连，372和291nm的紫外 吸收也验证了这一结论。HMBC谱中，羟基质子SH7. 55(lH，s，4-0H)与SC138. 5(C，4-C)， 153.9 (C，3-C)和 123.5 (C，14-C);甲氧基质子SH3.86 (s，3-0CH3)与C-3;以及H-2 与 C-3的相关性表明甲氧基和羟基分别位于C-3和C-4位上。剩余的10个碳原子(去除苯环 和甲氧基的七个碳）形成了一个十元环单萜结构。1H-iCOSY谱中，H-7 (5.33,t，方8. 3) 与H-8相关性表明C-6 (SC135. 9)和C-7 (SC124. 0)之间存在双键。HMBC谱中H-7与 C-5 (SC29. 3)，C-8 (SC22. 2)和C-9 (SC37. 1)的相关性验证了上述推论。综合氢谱、 碳谱、HMBC谱和R0ESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定该化合物如图1所 示，立体构型进一步通过E⑶试验确定，理论值与实验值基本一致（图2)。
[0021] 实施例2 :化合物（I)药理作用试验 一、材料和仪器 新生1~3天SD大鼠乳鼠（SPF级)，雌雄不拘，由广西医科大学实验动物中心提供(试验 动物生产许可证：SCXK桂2009-0002)。化合物（I)(纯度彡98%)为自制。胎牛血清购于 HyClone公司，DMEM培养基购于GIBC0公司，二甲基亚砜（DMS0)、0. 25%胰酶(含EDTA)购于 Solarbio公司，5-溴脱氧尿苷（5-Brdu)、四甲基偶氮唑盐（MTT)购于美国Sigma公司，LDH 测试盒购于南京建成生物工程研究所，N0S试剂盒(分型）南京建成生物工程研究所，ATP酶 试剂盒(南京建成生物工程研究所)，cTnI酶联免疫吸附测试试剂盒、CK-MB酶联免疫吸附测 试试剂盒购于武汉优尔生。
[0022] C02培养箱（ThermoForma)，CKX41 相差显微镜（OLUMPUS)，Model450 自动酶