公知技术。本文记载内容中凡涉及到的PDA斜面培养基均指该培养基，不再赘述。
[0021]本发明中，所述三角瓶种子培养基、一级种子罐及二级种子罐的组成均为，以质量百分比计，葡萄糖1.5%，硫酸铵0.4%，磷酸二氢钾0.6%，玉米浆2%，余量为水；其制作方法均为本领域公知技术，各组分均可通过市售获得，玉米浆为自制。本文记载内容中，凡涉及到的三角瓶种子培养基、一级种子罐及二级种子罐，其组分均为上述组分，不再赘述。
[0022]本发明中，木聚糖酶的酶活力单位统一定义(U)为:在pH=4.8，50°C条件下，每分钟降解底物生成I ymoL木糖所需的酶量为I个活力单位。贝lj，aU/mL即表示每Iml木聚糖酶含a个酶活力单位。
[0023]本发明中，通气比与本领域公知的定义相同，是指每分钟内通过单位体积发酵液的空气体积比。
[0024]实施例1
下面以2m3发酵罐为例对本发明做进一步详细地说明。
[0025]本发明一种连续发酵生产木聚糖酶的方法，以绿色木霉为菌种，培养至特定阶段，以一定的流速流加新鲜培养基的同时，以同样的流速输出发酵醪，可按以下步骤进行:
I)菌种的制备及扩大培养:将绿色木霉菌株Trichoderma viride CGMCC N0.5832转接至PDA斜面培养基上，30°C，培养7天，得到斜面孢子；然后用无菌水洗涤所述斜面孢子，得到孢子洗涤液；在无菌条件下将所述孢子洗涤液接入已灭菌的三角瓶种子培养基(121~124°C，灭菌30min)中，于200r/min、30°C条件下，培养18h，得活化菌种；将所述活化菌种以0.5体积％的接种量接入一级种子罐中，于30°C，通气比1:0.6的条件下，培养18h，得到一级种子液；将所述一级种子液以10体积％的接种量接入二级种子罐，于32°C，通气比1: 0.8的条件下，培养10h，得到二级种子液； 2)补料发酵培养:在发酵罐Fl中加入600L基础培养基(以质量百分比计，葡萄糖2.4%，乳糖0.6%，玉米浆2.5%，硫酸铵0.45%，磷酸二氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，氯化钙0.05%，微量元素0.01%，余量为水)，调节pH值为4.6，于121~124°C，灭菌30min ;待基础培养基温度降至30°C，在无菌条件下，以基础培养基体积的10%的接种量接入所述二级种子液，接种后0~8h，通气比为1: 1.5，搅拌转速为100r/min，培养温度为30°C ;接种8h以后，通气比1:1.8，搅拌转速220r/min，培养温度28°C ;当还原糖浓度在0.3重量％以下时，开始连续流加补料培养基进行补料，补料速率为每小时补料量为发酵液体积的0.8%，当发酵液体积达到发酵罐容积的70%时，将发酵罐Fl中1/2体积的发酵液导入二级发酵罐F2，以与发酵罐Fl相同的补料速率连续补料培养，剩余的1/2体积的发酵液继续连续补料培养；待Fl、F2的发酵液体积分别达到发酵罐容积的75%，以0.005/h稀释率D向Fl、F2流加补料培养基，同时以与补料相同的速率，由F1、F2共同向下一级发酵罐F3连续输出发酵醪液，待F3发酵液体积与Fl、F2分别相等时，终止发酵，发酵周期为8天；
该步骤中，所述补料培养基组成为，玉米浆1.5%，硫酸铵0.7%，磷酸二氢钾0.4%，硫酸镁0.2%，氯化钙0.2%，微量元素0.1%，其余为淀粉酸解液(葡萄糖含量16重量％)，调节pH值为4.4，于121~124°C下灭菌30min ;所述微量元素的组成为，以质量百分比计，钼酸铵0.04%，硫酸锌0.2%，硫酸亚铁0.3%，硫酸锰0.1%，氯化钴0.15%，硫酸铜0.1%，余量为水；所述淀粉酸解液是通过如下制备方法获得的:用0.4重量％的盐酸溶液将淀粉配制成15重量％的淀粉浆，于115°C下酸解30min，酸解结束后用氢氧化钠调节pH值至4.5，备用；
3)木聚糖酶的提纯:发酵结束，将发酵液经板框压滤机进行过滤，所得过滤液用膜分子量为10000道尔顿的有机膜进行超滤，浓缩至所需倍数；然后加入防腐剂，其组分配比为氯化钠7g，山梨酸钾0.lg，得液体木聚糖酶产品；
4)发酵液残渣的处理:将经过板框压滤机所得的发酵液残渣作为原料用于沼气发电。
[0026]本实施例所得木聚糖酶的酶活力为29240.35U/mL，单批发酵液总量4.5吨；相比对比例I，木聚糖酶的酶活力提高7.4倍，生产效率提高20%，单位酶活力发酵成本降低10%。
[0027]实施例2
下面以20m3发酵罐为例对本发明做进一步详细地说明。
[0028]本发明一种连续发酵生产木聚糖酶的方法，以绿色木霉为菌种，培养至特定阶段，以一定的流速流加新鲜培养基的同时，以同样的流速输出发酵醪，可按以下步骤进行:
1)菌种的制备及扩大培养:将绿色木霉菌株Trichodermaviride CGMCC N0.5832转接至PDA斜面培养基上，30°C，培养7天，得到斜面孢子；然后用无菌水洗涤所述斜面孢子，得到孢子洗涤液；在无菌条件下将所述孢子洗涤液接入已灭菌的三角瓶种子培养基(121~124°C，灭菌30min)中，于220r/min，28°C条件下，培养20h，得活化菌种；将所述活化菌种以0.4体积％的接种量接入一级种子罐中，于30°C，通气比1:0.8的条件下，培养20h，得到一级种子液；将所述一级种子液以8体积％的接种量接入二级种子罐，于30°C，通气比I: 0.8的条件下，培养12h，得到二级种子液；
2)补料发酵培养:在发酵罐Fl中加入12000L发酵基础培养基(以质量百分比计，葡萄糖2.8%，乳糖0.8%，玉米浆3.0%，硫酸铵0.4%，磷酸二氢钾0.2%，硫酸镁0.1%，氯化钙0.08%，微量元素0.01%，余量为水)。调节pH值为4.8，于121~124°C，灭菌30min ;待培养基温度降至30°C，在无菌条件下，以发酵培养基体积的10%的接种量接入所述二级种子液，接种后0~8h，通气比为1: 1.5，搅拌转速为100r/min，培养温度为30°C ;接种8h以后，通气比1:2.0，搅拌转速200r/min，培养温度28°C ;当还原糖浓度在0.3重量％以下时，开始连续流加补料培养基进行补料，补料速率为每小时补料量为发酵液体积的的0.9%，当发酵液体积达到发酵罐容积的80%时，将发酵罐Fl中1/2体积的发酵液导入二级发酵罐F2，以与发酵罐Fl相同的补料速率连续补料培养，剩余的1/2体积的发酵液继续连续补料培养；待Fl、F2的发酵液体积分别达到发酵罐容积的70%，以0.008/h稀释率D向Fl、F2流加补料培养基，同时以与补料相同的速率，由F1、F2共同向下一级发酵罐F3连续输出发酵醪液，待F3发酵液体积与Fl、F2分别相等时，终止发酵，发酵周期为7天；
在该步骤中，所述补料培养基组成为，玉米浆1.7%，硫酸铵0.6%，磷酸二氢钾0.5%，硫酸镁0.2%，氯化钙0.1%，微量元素0.1%，其余为淀粉酸解液(葡萄糖含量重量17%)，调节pH值为4.4，于121~124°C下灭菌30min ;微量元素的组成与实施例1相同，不再赘述；所述淀粉酸解液是通过如下制备方法获得的:用0.5重量％盐酸溶液将淀粉配制15重量％淀粉浆，于115°(:下酸解301^11，酸解结束后用氢氧化钠调节？!1值4.8，备用；
3)木聚糖酶的提纯:发酵结束，将发酵液经板框压滤机进行过滤，所得过滤液用膜分子量为10000道尔顿的有机膜进行超滤，浓缩至所需倍数；然后加入防腐剂，其组分配比为氯化钠10g，山梨酸钾0.lg，得液体木聚糖酶产品；
4)发酵液残渣的处理:将经过板框压滤机所得的发酵液残渣作为原料用于沼气发电。
[0029]本实施例所得木聚糖酶的酶活力为32360.75U/mL，单批发酵液总量50吨；相比对比例1，木聚糖酶的酶活力提高8.3倍，生产效率提高25%，单位酶活力发酵成本降低12%。
[0030]实施例3
下面以60m3发酵罐为例对本发明做进一步详细地说明。
[0031]本发明一种连续发酵生产木聚糖酶的方法，以绿色木霉为菌种，培养至特定阶段，以一定的流速流加新鲜培养基的同时，以同样的流速输出发酵醪，可按以下步骤进行:
1)菌种的制备及扩大培养:将绿色木霉菌株Trichodermavir