新的联苯环辛烯型木脂素类化合物及其制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从干燥的鸡血藤中分离得到的一种具有内皮 细胞保护作用的联苯环辛烯型木脂素类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 鸡血藤是一味传统活血化瘀中药，以其藤汁红如鸡血而得名，药用历史悠久，始 见于《本草备要》，历代本草均有记载，《中国药典》规定其原植物为密花豆Spatholobus suberectus Dunn，生于山野、深谷、疏林、密林中的阴湿处，它主要分布于广西、广东。鸡血 藤又名大血藤、血藤、血风藤、三叶鸡血藤，性温，味苦、甘，归肝、肾经。鸡血藤为中医治疗血 症和风湿的重要药物，广西龙州民间长期以来取其药汤治疗风湿性关节炎，疗效优异。
[0003] 鸡血藤化学成分复杂，主要含有黄酮类、萜类、留醇类、木质素类及蒽醌类等 化学成分。目前分离得到的代表性化合物包括：表无羁砲醇（Friedelan-3 β _〇1)、 胡萝卜戒（Daucosterol)、β -谷留醇（0-sitosterol)、7-酮基-β-谷留醇 (7-0X0-β -sitosterol)、刺芒柄花素（Formononetin)、芒柄花戒（Ononin)、樱黄素 (Prunetin)、阿佛洛莫生（Afrormosin)、大豆素（Daidzein)、3, 7-二羟基-6-甲氧基二氢 黄酮醇、表儿茶精（Epicatechin)、异甘草戒元（Isoliquiritigenin)、3, 4, 2'，4' -四羟基 查耳酮、甘草查耳酮（Licochalcone)A、苜猪酸（Medicagol)、原儿茶酸（Protocatechuic acid)、9_甲氧基香豆雌酸（9-methoxycoumestrol)和木豆异黄酮（Cajanin)等。
[0004] 现代药理研究表明鸡血藤具有降血压、抗癌、抑菌、抗放射线的功效。近年来临床 上常用鸡血藤治疗贫血，各种原因（如放疗、化疗）引起的白细胞、血小板、红细胞等全血象 减少和再生障碍性贫血等疾病，且疗效较好。现代药理学研究证明，鸡血藤还具有抗病毒、 免疫调节、对酪氨酸酶双向调节、抗炎、抗氧化、镇静催眠等作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从干燥的鸡血藤中分离得到的一种具有内皮细胞保护 作用的联苯环辛烯型木脂素类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物（I )，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I )的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将干燥的鸡血藤粉碎， 用75~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱 和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤（a) 中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱10 个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤（b)中75% 乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、45:1、25:1、10:1和1:1的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体 积比为15:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤⑷中组分2 用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收 集8~12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I )。
[0010] 进一步地，所述大孔树脂为DlOl大孔吸附树脂。
[0011] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为80 %。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I )和药学上可接受的 载体。
[0013] 所述的化合物（I )在制备内皮细胞保护药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备内皮细胞保护药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I )，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物（I )结构式；
[0019] 图2为化合物（I )理论E⑶值与实验E⑶值比较。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021] 实施例1 :化合物（I )分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023] 制备方法：（a)将干燥的鸡血藤（IOkg)粉碎，用80%乙醇热回流提取（25LX3 次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和 水饱和的正丁醇（3LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（431g)和正丁 醇萃取物；(b)步骤（a)中乙酸乙酯萃取物用DlOl大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱 体积，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物 浸膏（172g) ;(c)步骤（b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(8 个柱体积）、45:1 (8个柱体积）、25:1 (8个柱体积）、10:1 (10个柱体积）和1:1 (5个柱体 积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（c)中组分4 (65g)用正相硅胶进 一步分离，依次用体积比为15:1 (8个柱体积）、10:1 (10个柱体积）和5:1 (8个柱体积）的 二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2 (37g)用十八烷基硅烷键合 的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-12个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I ) (45mg)。
[0024] 结构确证：白色无定形粉末；HR-ES頂S显示[M+Na]+为m/z 519. 2018,结合核磁 特征可得分子式为C28H32O8，不饱和度为13。核磁共振氢谱数据δ H(ppm，DMS0-d6,400MHz): Η-4(6· 66, s)，Η-6(6· 67, s)，Η-8(2· 62, m)，Η-9(2· 41，m)，Η-9(2· 67, m)，H-1U6. 41，s)， Η-17(1· 08，d，J = 7· 0)，Η-18(4· 86，s)，Η-18(5· 02，s)，Η-3'（6· 01，m)，Η-4'（I. 84，dq，J = 7· 1，L 0)，Η-5'（1· 35, s)，l-0Me(3. 51，s)，2-0Me(3. 83, s)，3-0Me(3. 85, s)，14-0Me(3. 65， s)，12, 13-0CH20(5. 86, s)，12, 13-0CH20(5. 84, s);核磁共振碳谱数据 δ c(ppm，DMS0-d6， 100MHz) :151. 2(Ca-C)，141. I (C，2-C)，151. 6(C，3-C)，109. 3(CH，4-C)，131. I (C，5-C)， 80. 4 (CH，6-C)，155. 8 (C，7-C)，33. 6 (CH，8-C)，36. 7 (CH2,9-C)，140. 0 (C，10-C)，102. 2 (CH， n-C)，148. 3 (C，12-C)，134. I (C，13-C)，140. 3 (C，14-C)，120. 7 (C，15-C)，121. 3 (C，16-C)， 18. 5 (CH3,17-C)，106. 8 (CH2,18-C)，165. 7 (C，Γ -C)，126. 8 (C，2' -C)，140. 2 (CH，3' -C)， 15. 5 (CH3,4' -C)，19. 4 (CH3, 5' -C)，60.1 (CH3,1-OMe)，60. 5 (CH3, 2-0Me)，55. 4 (CH3, 3-0Me)， 58. 6 (CH3,14-OMe)，100.1 (CH2,12, 13-0CH20);碳原子标记参见图1。表明该化合物含有羰基 (1713cm 4和苯环（1621和1463cm 4。核磁数据表明该化合物含有两个芳环，四个甲氧基， 一个甲基，一个