实施例1
1、提取藻油。称取1g微绿球藻藻粉，加350mL正己烷:乙醇(l:2，v/v)的混合液，利用加速溶剂萃取仪提取藻油，提取条件为:温度75°C、萃取时间50min，重复萃取3次。萃取结束后将提取液置于真空旋转蒸发器将正己烷、乙醇蒸发，蒸发后所得剩余物即为藻油。
[0017]2、不同成分藻油的分离。色谱柱加入己烷，同时加入SOg硅胶，然后将步骤I得到的藻油加入到色谱柱中；
用500mL正己烷-乙醚洗脱色谱柱分离去除非极性组分的油脂，其中正己烷:乙醚的体积比为90:5;
用100mL正己烷-乙醚洗脱色谱柱分离获得三酰甘油，其中正己烷:乙醚的体积比为90:10。
[0018]3、富含ω-3脂肪酸的单甘脂的合成。利用上述提取的藻油的三酰甘油与乙醇混合，同时加入固定化脂肪酶A-CALA和少许水进行醇解反应制备富含ω-3脂肪酸的单甘脂，反应条件为:三酰甘油和乙醇的质量比1:3、反应温度35°C、固定化脂肪酶A-CALA的用量占三酰甘油质量的12.5%、加水量占单甘脂和乙醇的总质量的6%、反应时间46h，搅拌速度500r/min条件下反应制备富含ω-3脂肪酸的单甘脂粗品。
[0019]所述的脂肪酶(固定化脂肪酶A-CALA)购自丹麦诺维信公司。
[0020]4、富含ω-3脂肪酸的单甘脂的纯化。
[0021]将上述反应产物与食品级正己烷(1: 9，V / V )混合，经3次萃取，每次萃取时间50min，收集乙醇相，旋转蒸发去除乙醇和水后获得富含ω-3脂肪酸的单甘脂。
[0022]采用本发明专利所述的工艺条件，酶催化反应后单甘脂中ω-3脂肪酸的总含量可达92 %。
实施例2
1、提取藻油。称取1g等鞭金藻藻粉，加200mL正己烷:甲醇(l:2，v/v)的混合液，利用加速溶剂萃取仪提取藻油，萃取条件为:温度为75°C，萃取时间为45min，重复提取5次。提取结束后将提取液置于真空旋转蒸发器将有机溶解蒸发，蒸发后所得剩余物即为藻油。
[0023]2、不同成分藻油的分离。色谱柱加入己烷，同时加入SOg硅胶，然后将步骤I得到的藻油加入到色谱柱中；
用500mL正己烷-乙醚洗脱色谱柱去除非极性组分的油脂，其中正己烷:乙醚的体积比为90:5;
用100mL正己烷-乙醚洗脱色谱柱分离获得三酰甘油粗品，其中正己烷:乙醚的体积比为90:10。
[0024]3、富含ω-3脂肪酸的三酰甘油粗品的合成。利用上述萃取的藻油的三酰甘油与乙醇进行醇解反应制备富含ω-3脂肪酸的单甘脂粗品；反应条件为:三酰甘油和乙醇的质量比为1: 4、反应温度为30°C、固定化脂肪酶A-CALA的用量占三酰甘油质量的12.5%、加水量占单甘脂和乙醇的总质量的5%、反应时间为40h，搅拌速度500r/min条件下反应制备得到富含ω-3脂肪酸的单甘脂。
[0025]所述的脂肪酶(固定化脂肪酶A-CALAMQ自丹麦诺维信公司。
[0026]4、富含ω-3脂肪酸的单甘脂的纯化。
[0027]将上述反应产物与食品级正己烷(1:9，ν/ν)提取3次，收集乙醇相，每次萃取时间50min，收集乙醇相，旋转蒸发去除乙醇和水后获得富含ω-3脂肪酸的单甘脂。
[0028]采用本发明专利所述的工艺条件，酶催化反应后单甘脂中ω-3脂肪酸的总含量可达90 %。
【主权项】
1.一种富含ω -3脂肪酸单甘脂的制备方法，其特征是: 称取一定量的微藻藻粉，以有机溶剂作为萃取剂，利用加速溶剂萃取仪萃取藻油，萃取结束后将萃取液置于真空旋转蒸发器将有机溶解蒸发，剩余物即为藻油； 色谱柱加入己烷，同时加入80g硅胶，然后将步骤I得到的藻油加入到色谱柱中； 用500mL正己烷-乙醚洗脱色谱柱分离并去除非极性组分的油脂；用100mL正己烷-乙醚洗脱色谱柱分离获得富含ω-3脂肪酸的三酰甘油，其中正己烷:乙醚的体积比为90:10; 将上述提取的三酰甘油与乙醇混合，同时加入固定化脂肪酶A-CALA和少许水进行醇解反应得到富含ω -3脂肪酸的单甘脂粗品； 将得到的富含ω-3脂肪酸的反应产物单甘脂粗品与食品级正己烷混合，经3次萃取，收集乙醇相，旋转蒸发去除乙醇和水后获得纯化后的富含ω-3脂肪酸的单甘脂。2.根据权利要求1所述的一种采用脂肪酶催化法制备结构甘油酯的方法，其特征是所述的萃取条件，萃取温度为40?125°C，萃取时间25?120min，萃取次数为2?5次。3.根据权利要求1所述的一种富含ω-3脂肪酸单甘脂的制备方法，其特征是所述的有机溶剂是指氯仿、正己烷、乙醇或甲醇。4.根据权利要求1所述的一种富含ω-3脂肪酸单甘脂的制备方法，其特征是所述的微藻藻粉中加入有机溶剂，其比例为微藻藻粉(g):有机溶剂(ml)=l: 15?35。5.根据权利要求1所述的一种富含ω-3脂肪酸单甘脂的制备方法，其特征是所述的步骤2中正己烷-乙醚的配制体积比为90:5。6.根据权利要求1所述的一种富含ω-3脂肪酸单甘脂的制备方法，其特征是步骤3)所述的醇解，反应条件为:三酰甘油和乙醇的质量比1:1?4、反应温度25?55°C、固定化脂肪酶A-CALA的用量占单甘脂质量的5?12.5%、加水量占单甘脂和乙醇的总质量的2?9%、反应时间为1h?48h，揽摔速度500r/min。7.根据权利要求1所述的一种富含ω-3脂肪酸单甘脂的制备方法，其特征是步骤4)中所述的单甘脂粗品与食品级正己烷混合，是按照单甘脂粗品与食品级正己烷体积份比例1:9的进行的。
【专利摘要】本发明涉及一种富含ω-3脂肪酸单甘脂的制备方法。称取微藻藻粉，以有机溶剂作为萃取剂藻油；色谱柱加入己烷、硅胶，然后将藻油加入到色谱柱中可获得三酰甘油；将三酰甘油与乙醇混合，同时加入固定化脂肪酶A-CALA和少许水反应得到富含ω-3脂肪酸的单甘脂粗品；将单甘脂粗品与食品级正己烷按照比例混合，经3次萃取，收集乙醇相，旋转蒸发去除乙醇和水后获得纯化后的富含ω-3脂肪酸的单甘脂。采用本发明所述的工艺条件，酶催化反应后单甘脂中ω-3脂肪酸的总含量可达90%以上。
【IPC分类】C12P7/64
【公开号】CN105506008
【申请号】CN201510874165
【发明人】陈必链, 何勇锦, 郭铮
【申请人】福建师范大学
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月3日