量浓度为8 %氢氧化钠溶液，直至pH值为8.3时，停止滴加与搅拌，保温2h;待保温结束，在上述混合物中再加入混合软骨粉末质量0.8 %木瓜蛋白酶以及混合软骨粉末质量1.3 %中性微生物蛋白酶，在保持PH值为8.3的条件下，升温至45°C，酶解2h，待酶解结束，提升温度为75°C，保持5min，进行灭酶处理，待灭酶结束，静置冷却至室温，移入高速离心机中，以1100r/min速率离心分离5min，去渣，得滤液;接下来在上述得到的滤液中加入上述滤液质量8 %质量浓度为25 %的氯化钠溶液，搅拌至溶解，随后再向其中加入上述滤液质量85 %上述得到的灭菌后鸡血，静置过夜，使其分层;待上述混合物过夜分层，分离上层凝结后的鸡血，随后再用消毒后的注射器抽除中层液体，得到下层硫酸软骨素沉淀;最后将上述得到的下层硫酸软骨素沉淀放入离心机中，以4000r/min的转速离心1min，进行脱水处理，随后将脱水后的沉淀物置于真空干燥箱中，在80°C下干燥45min，即可得到一种硫酸软骨素。
[0012]本实例方法独特新颖，使用时，将本发明制得的硫酸软骨素均匀倒入药袋中，制成袋装硫酸软骨素冲剂，其中每个药袋中加入15g硫酸软骨素，食用时，取出一袋，倒入杯中，加入250mL的温开水，用勺子搅拌后服用即可，建议每天早晚用餐后食用，长期坚持食用，可以明显感觉人体抵抗力增加，尤其对于老年人，可以有效防止冠心病、心绞痛、心肌梗死、冠状动脉粥样硬化、心肌缺血等疾病。
[0013]实例2
首先采集700mL新鲜鸡血放入容器中，向其中加入鸡血质量8%质量浓度为0.4%的抗凝剂和鸡血质量4 %质量浓度为1.0 %的柠檬酸三钠水溶液，混合均匀，静置25min，待静置结束，将静置后的鸡血用45目的筛子进行粗滤，粗滤2次，再用65目的筛子进行细滤，直至去除鸡血中的凝固物及其它污物，所述的抗凝剂为乙二胺四乙酸盐;待上述鸡血中的凝固物及其它污物去除后，再向鸡血中以43滴/min的速率滴加质量浓度为10 %冰醋酸溶液，直至pH值为4.2时，停止滴加，搅拌均匀，移入紫外灯光下，静置灭菌40min，得灭菌后鸡血，在-5°C保存，备用；随后取11OOg检疫合格的牛气管，用清水洗净，放入煮锅中水煮50min，取出冷却，剔除残留的脂肪、结缔组织以及肌肉后，倒入装有4L质量浓度为85%的酒精中浸泡3h，待浸泡结束，取出，置于粉碎机中，粉碎13min，过113目筛，得混合软骨粉末，放入反应釜中；之后按固液比为1:3.5，在上述装有混合软骨粉末的反应釜中加入去离子水，搅拌均匀，其中在搅拌过程中同时以7°C/min速率程序升温至40°C，随后继续保持搅拌状态，再向其中以45滴/min滴加质量浓度为9%氢氧化钠溶液，直至pH值为8.8时，停止滴加与搅拌，保温2.5h;待保温结束，在上述混合物中再加入混合软骨粉末质量1.3%木瓜蛋白酶以及混合软骨粉末质量1.5 %中性微生物蛋白酶，在保持pH值为8.8的条件下，升温至47°C，酶解3h，待酶解结束，提升温度为80°C，保持7min，进行灭酶处理，待灭酶结束，静置冷却至室温，移入高速离心机中，以1150r/min速率离心分离8min，去渣，得滤液;接下来在上述得到的滤液中加入上述滤液质量10%质量浓度为25%的氯化钠溶液，搅拌至溶解，随后再向其中加入上述滤液质量90%上述得到的灭菌后鸡血，静置过夜，使其分层;待上述混合物过夜分层，分离上层凝结后的鸡血，随后再用消毒后的注射器抽除中层液体，得到下层硫酸软骨素沉淀；最后将上述得到的下层硫酸软骨素沉淀放入离心机中，以4300r/min的转速离心13min，进行脱水处理，随后将脱水后的沉淀物置于真空干燥箱中，在85°C下干燥50min，即可得到一种硫酸软骨素。
[0014]本实例方法独特新颖，使用时，将本发明制得的硫酸软骨素均匀倒入药袋中，制成袋装硫酸软骨素冲剂，其中每个药袋中加入25g硫酸软骨素，食用时，取出一袋，倒入杯中，加入300mL的温开水，用勺子搅拌后服用即可，建议每天早晚用餐后食用，长期坚持食用，可以明显感觉人体抵抗力增加，尤其对于老年人，可以有效防止冠心病、心绞痛、心肌梗死、冠状动脉粥样硬化、心肌缺血等疾病。
[0015]实例3
首先采集800mL新鲜鸡血放入容器中，向其中加入鸡血质量10%质量浓度为0.5%的抗凝剂和鸡血质量5 %质量浓度为1.2 %的柠檬酸三钠水溶液，混合均匀，静置30min，待静置结束，将静置后的鸡血用50目的筛子进行粗滤，粗滤3次，再用70目的筛子进行细滤，直至去除鸡血中的凝固物及其它污物，所述的抗凝剂为草酸盐;待上述鸡血中的凝固物及其它污物去除后，再向鸡血中以45滴/min的速率滴加质量浓度为1 %冰醋酸溶液，直至pH值为4.5时，停止滴加，搅拌均匀，移入紫外灯光下，静置灭菌45min，得灭菌后鸡血，在一4°C保存，备用;随后取1200g检疫合格的牛气管，用清水洗净，放入煮锅中水煮55min，取出冷却，剔除残留的脂肪、结缔组织以及肌肉后，倒入装有5L质量浓度为85%的酒精中浸泡3h，待浸泡结束，取出，置于粉碎机中，粉碎15min，过115目筛，得混合软骨粉末，放入反应釜中；之后按固液比为1:4，在上述装有混合软骨粉末的反应釜中加入去离子水，搅拌均匀，其中在搅拌过程中同时以8°C/min速率程序升温至45°C，随后继续保持搅拌状态，再向其中以55滴/min滴加质量浓度为10 %氢氧化钠溶液，直至pH值为9.2时，停止滴加与搅拌，保温3h;待保温结束，在上述混合物中再加入混合软骨粉末质量1.5%木瓜蛋白酶以及混合软骨粉末质量1.8 %中性微生物蛋白酶，在保持pH值为9.2的条件下，升温至48°C，酶解4h，待酶解结束，提升温度为85°C，保持8min，进行灭酶处理，待灭酶结束，静置冷却至室温，移入高速离心机中，以1200r/min速率离心分离1min，去渣，得滤液;接下来在上述得到的滤液中加入上述滤液质量12%质量浓度为25%的氯化钠溶液，搅拌至溶解，随后再向其中加入上述滤液质量95%上述得到的灭菌后鸡血，静置过夜，使其分层;待上述混合物过夜分层，分离上层凝结后的鸡血，随后再用消毒后的注射器抽除中层液体，得到下层硫酸软骨素沉淀;最后将上述得到的下层硫酸软骨素沉淀放入离心机中，以4500r/min的转速离心15min，进行脱水处理，随后将脱水后的沉淀物置于真空干燥箱中，在90°C下干燥55min，即可得到一种硫酸软骨素。
[0016]本实例方法独特新颖，使用时，将本发明制得的硫酸软骨素均匀倒入药袋中，制成袋装硫酸软骨素冲剂，其中每个药袋中加入30g硫酸软骨素，食用时，取出一袋，倒入杯中，加入350mL的温开水，用勺子搅拌后服用即可，建议每天早晚用餐后食用，长期坚持食用，可以明显感觉人体抵抗力增加，尤其对于老年人，可以有效防止冠心病、心绞痛、心肌梗死、冠状动脉粥样硬化、心肌缺血等疾病。
【主权项】
1.一种硫酸软骨素制备过程中沉淀分离的方法，其特征在于具体操作步骤为: (1)采集600?800mL新鲜鸡血放入容器中，向其中加入鸡血质量5?10%质量浓度为.0.3?0.5 %的抗凝剂和鸡血质量3?5 %质量浓度为0.8?1.2 %的柠檬酸三钠水溶液，混合均匀，静置20?30min，待静置结束，将静置后的鸡血用40?50目的筛子进行粗滤，粗滤I?3次，再用60?70目的筛子进行细滤，直至去除鸡血中的凝固物及其它污物，其中所述的抗凝剂为肝素、乙二胺四乙酸盐、草酸盐中任一种； (2)待上述鸡血中的凝固物及其它污物去除后，再向鸡血中以40?45滴/min的速率滴加质量浓度为10 %冰醋酸溶液，直至pH值为3.8?4.5时，停止滴加，搅拌均匀，移入紫外灯光下，静置灭菌30?45min，得灭菌后鸡血，在一 6?一 4°C保存，备用； (3)取1000?1200g检疫合格的牛气管，用清水洗净，放入煮锅中水煮45?55min，取出冷却，剔除残留的脂肪、结缔组织以及肌肉后，倒入装有3?5L质量浓度为85%的酒精中浸泡3h，待浸泡结束，取出，置于粉碎机中，粉碎10?15min，过110?115目筛，得混合软骨粉末，放入反应Il中； (4)按固液比为1:3?1:4，在上述装有混合软骨粉末的反应釜中加入去离子水，搅拌均匀，其中在搅拌过程中同时以5?8°C/min速率程序升温至38?45°C，随后继续保持搅拌状态，再向其中以35?55滴/min滴加质量浓度为8?10%氢氧化钠溶液，直至pH值为8.3?9.2时，停止滴加与搅拌，保温2?3h; (5)待保温结束，在上述混合物中再加入混合软骨粉末质量0.8?1.5%木瓜蛋白酶以及混合软骨粉末质量1.3?1.8%中性微生物蛋白酶，在保持pH值为8.3?9.2的条件下，升温至45?48°C，酶解2?4h，待酶解结束，提升温度为75?85°C，保持5?8min，进行灭酶处理，待灭酶结束，静置冷却至室温，移入高速离心机中，以1100?1200r/min速率离心分离5?1Omin，去渣，得滤液； (6)在上述得到的滤液中加入上述滤液质量8?12%质量浓度为25 %的氯化钠溶液，搅拌至溶解，随后再向其中加入上述滤液质量85?95%上述步骤(2)得到的灭菌后鸡血，静置过夜，使其分层； (7)待上述混合物过夜分层，分离上层凝结后的鸡血，随后再用消毒后的注射器抽除中层液体，得到下层硫酸软骨素沉淀； (8)将上述得到的下层硫酸软骨素沉淀放入离心机中，以4000?4500r/min的转速离心.10?15min，进行脱水处理，随后将脱水后的沉淀物置于真空干燥箱中，在80?90°C下干燥.45?55min，即可得到一种硫酸软骨素。
【专利摘要】本发明公开了一种硫酸软骨素制备过程中沉淀分离的方法，属于硫酸软骨素制备技术领域。本发明将处理后的鸡血添加入到碱提酶解得到的滤液中，随后通过过夜分层，得到硫酸软骨素结晶析出的沉淀，之后再通过将硫酸软骨素结晶析出的沉淀离心脱水并干燥，从而得到硫酸软骨素制备过程中沉淀分离的方法。实例证明，本发明不仅操作简单，原料易得，具有生产时间短、变废为宝的特点，而且在制备过程中析出的沉淀晶体不易结块、粘稠，且在脱水干燥的过程中溶剂残留量极少，最终使得产品产率提高至75％以上，硫酸软骨素纯度提升至90％以上。
【IPC分类】A61P9/10, A61K31/737, C08B37/08
【公开号】CN105524190
【申请号】CN201610076019
【发明人】周丽花, 张帆
【申请人】常州市鼎日环保科技有限公司
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2016年2月3日