一种基于氧化锌的纳米药物组合物及其制备方法和应用
【专利摘要】本发明涉及一种基于氧化锌的纳米药物组合物及其制备方法和应用，所述组合物的制备方法包括以下步骤：(1)将氢氧化钠和/或氢氧化钾?醇溶液与乙酸锌?醇溶液混合，得到氧化锌胶体反应液；(2)另取乙酸锌?醇溶液，将其与含有药物分子的氢氧化钠和/或氢氧化钾?醇溶液共同或分先后加入步骤(1)得到的氧化锌胶体反应液中；(3)对步骤(2)得到的混合溶液进行离心，除去上清液，经洗涤、纯化和干燥，即得；本发明中所述氧化锌与药物的复合是直接利用了二者自身的性质，无需引入聚合物，合成方法简单有效；制备得到的组合物具有较好的分散性，水合粒径为40?90nm，具有生物利用度高且低毒可降解的特点。
【专利说明】
一种基于氧化锌的纳米药物组合物及其制备方法和应用
技术领域
[0001 ]本发明涉及纳米颗粒药物制剂技术领域，具体涉及一种纳米药物组合物及其制备 方法和应用，尤其涉及一种基于氧化锌的纳米药物组合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 无机纳米粒子具备尺寸、形貌容易控制的特点，一些材料具有独特的光、电、磁等 性质赋予其具有潜在的成像显影等功能。近年来，无机纳米材料，如磁性纳米粒子、介孔二 氧化娃、碳材料、金颗粒和量子点等，作为纳米药物载体的研究越来越多，然而无机纳米材 料的毒理学评价、体内代谢过程仍然存在疑问，一些潜在的风险毒性(如细胞毒性、基因毒 性、生殖毒性等)限制了无机纳米材料在临床上的应用。
[0003] 目前一些pH响应型的无机纳米药物载体的设计期待能够解决这个问题，这些无机 纳米颗粒能够在肿瘤部位酸性条件下得以分解，降低了无机材料残留体内的风险。因此，亟 需开发出一种具备pH响应降解并且低毒特性的无机纳米药物输运体系，利用肿瘤部位的低 pH值的特点，提高针对肿瘤组织的特异性药物释放，促进抗癌药物分子进入肿瘤细胞，从而 减少抗肿瘤对正常组织细胞的损伤。具备这些优良特性的纳米载药系统将有着十分广阔的 应用前景。
[0004] CN103622920A公开了一种包含抗癌药物的纳米颗粒、其制备方法和应用。所述纳 米颗粒呈棒状，所述纳米颗粒通过如下工艺制备:将疏水性抗癌药物分子通过溶剂交换法 制备成前驱纳米颗粒悬乳液，再将双亲性表面活性剂水溶液加入所述前驱纳米颗粒悬乳 液，并超声处理得到的外面包覆双亲性表面活性剂的纳米颗粒;CN103550776A公开了一种 疏水性药物纳米颗粒、其制备方法和应用，所述疏水性药物纳米颗粒呈球形或近似球形，所 述疏水性药物纳米颗粒同样是将疏水性药物分子通过溶剂交换法制备成前驱纳米颗粒悬 乳液，再将双亲性表面活性剂水溶液加入所述前驱纳米颗粒悬乳液，并超声处理得到的外 面包覆双亲性表面活性剂的纳米颗粒。上述药物纳米颗粒都具有生物利用度高且载药量高 的特点，然而其在药物释放率和生理代谢方面还存在着缺陷。
[0005] 张正勇等研究了基于金量子点、氧化锌量子点的纳米功能材料制备及其在细胞成 像、药物控释方面的应用基础探究(参见张正勇，"基于金量子点、氧化锌量子点的纳米功能 材料制备及其在细胞成像、药物控释方面的应用基础探究"，2013年，中国博士学位论文）， 尽管其成功将氧化锌和阿霉素复合制备得到纳米组合物，然而，其形成的是氧化锌量子点， 粒径约为3nm;而且制备过程中需引入聚合物形成ZnOOpolymer，最终去包载阿霉素等药物， 合成方法较复杂，不具备逆转肿瘤耐药的特性。
【发明内容】
[0006] 为解决现有技术的上述问题，本发明提供了一种基于氧化锌的纳米药物组合物及 其制备方法和应用。本发明提供的基于氧化锌的纳米药物组合物能在酸性pH值条件下特异 性降解，克服了常规无机纳米药物载体潜在的风险毒性，提高了针对肿瘤组织的特异性药 物释放，促进了抗癌药物分子进入肿瘤细胞的逆转肿瘤耐药。
[0007] 第一方面，本发明提供了一种基于氧化锌的纳米药物组合物的制备方法，其包括 以下步骤：
[0008] (1)将氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液与乙酸锌-醇溶液混合，得到氧化锌胶体反 应液；
[0009] (2)另取乙酸锌-醇溶液，将其与含有药物分子的氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液 共同或分先后加入步骤（1)得到的氧化锌胶体反应液中，得到含有负载药物的纳米颗粒混 合溶液；
[0010] (3)对步骤(2)得到的混合溶液进行离心，除去上清液，经洗涤、纯化和干燥，得到 所述基于氧化锌的纳米药物组合物。
[0011] 本发明是以氧化锌作为药物载体，表面带负电荷;该药物载体能在酸性条件降解 Zn2+离子，而Zn2+离子也正是人体所必需的微量元素之一，可以被人体吸收，并且氧化锌已 经被FDA列为安全物质之一。
[0012] 本发明中所述氧化锌与药物的复合是直接利用了二者自身的性质，本发明所合成 的氧化锌纳米颗粒表面带负电荷，能与带正电荷的药物通过静电吸附直接复合。制备过程 中无需引入聚合物，而聚合物的引入很可能会增加药物载体本身的毒性，并且会增加药物 组合物制备的难度和成本。本发明所述的氧化锌纳米药物组合物制备方法简单有效；制备 得到的组合物具有较好的分散性，水合粒径为40-90nm，具有生物利用度高且低毒可降解的 特点。
[0013]本发明的制备原理反应过程如下：
[0014] Zn2++20H^Zn(0H)2|(I)
[0015] Zn (OH) 2+20H--Zn (OH) 42- (II)
[0016] Zn (OH) 42--ZnO+2H2〇+20H- (III)
[0017] 通过第一步反应，形成氧化锌(ZnO)内核，之后继续添加Zn2+离子和20IT离子，同时 引入药物分子，在继续形成氧化锌纳米颗粒生长的过程中，负载药物分子，最终形成负载药 物分子的纳米颗粒。
[0018] 根据本发明，步骤（1)所述氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液的制备是将氢氧化钠 和/或氢氧化钾加入醇溶液中，经超声溶解而得到。其中，该步骤所述在醇溶液中溶解氢氧 化钠和/或氢氧化钾的方法为本领域技术人员所公知。除了使用超声溶解的方法，还可以使 用搅拌溶解的方法，具体溶解方法没有限制。
[0019] 根据本发明，步骤（1)所述氢氧化钠和/或氢氧化钾与醇溶液的质量体积比为1: (2-6)，例如可以是1:2、1:2.8、1:3、1:3.2、1:3.5、1:3.8、1:4、1:4.2、1:4.5、1:5、1:5.5或1: 6,优选为1: (2.5-4.5)，其中质量体积比可以是mg/mL或g/L。
[0020] 根据本发明，步骤（1)所述乙酸锌-醇溶液的制备是将乙酸锌加入醇溶液中，经回 流、搅拌至溶解而得到。
[0021] 根据本发明，步骤（1)所述回流的温度为40-80 °C，例如可以是40 °C、42 °C、45 °C、46 。(：、48。(：、50。(：、52。(：、55。(：、60。(：、65。(：、70。(：、75。(：、80。(：，优选为45-60。(：。
[0022] 根据本发明，步骤（1)所述搅拌的时间为1 _4h，例如可以是1 h、1.2h、1.5h、1.8h、 211、2.111、2.511、2.811、311、3.211、3.511、3.811或411，优选为2-411。
[0023]根据本发明，步骤（1)所述乙酸锌与醇溶液的质量体积比为1: (2-6)，例如可以是 1: 2、1:2.2、1:2.6、1:2.8、1:3、1:3.2、1:3.5、1:3.8、1:4、1:4.6、1:5、1:5.5或1:6,优选为1: (2-4)，其中质量体积比可以是mg/mL或g/L。
[0024]根据本发明，步骤(2)所述乙酸锌-醇溶液的制备方法与步骤（1)所述乙酸锌-醇溶 液的制备方法相同，在此不做赘述。
[0025]根据本发明，步骤(2)所述含有药物分子的氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液的制 备是将氢氧化钠和/或氢氧化剂和药物加入醇溶液中，经超声溶解而得到。
[0026]根据本发明，步骤（1)和步骤(2)所述醇溶液为乙醇溶液、异丙醇溶液或乙二醇溶 液中的任意一种或至少两种的混合物。
[0027] 根据本发明，步骤(2)中所述药物分子、氢氧化钠和/或氢氧化钾与醇溶液的质量 体积比为(1-3):1:(2.5-4.5)。
[0028] 根据本发明，所述药物分子为阿霉素、柔红霉素或表阿霉素中的至少一种。
[0029] 根据本发明，步骤(1)所述氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液与乙酸锌-醇溶液的体 积比为(2-4):1，例如可以是 2:1、2.2:1、2.3:1、2.5:1、2.8:1、3:1、3.2:1、3.5:1、3.8:1、4: 1，优选为(2-3): 1。通过控制该体积比，能够快速获得后续合成氧化锌纳米药物组合物所需 的氧化锌胶体，没有过多的副产物生产，综合成本相对较低。
[0030] 根据本发明，步骤(2)所述乙酸锌-醇溶液、含有药物分子的氢氧化钠和/或氢氧化 钾溶液与氧化锌胶体反应液的体积比为(1-3): 1: (2-5)，优选为(1-2): 1: (2.5-4)。
[0031 ]示例性地，所述基于氧化锌的纳米药物组合物的制备方法包括以下步骤：
[0032] (1)将氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液和乙酸锌-醇溶液置于回流搅拌装置中以 2-4:1的体积比，40-60°C条件下回流，剧烈搅拌l_4h，得到氧化锌胶体反应液；
[0033] (2)另取乙酸锌-醇溶液，加入步骤(1)得到氧化锌胶体反应液中；将含有药物分子 的氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液以缓慢加入上述反应液中，速度为l_50mL/h，优选为5-20mL/h;上述溶液在70-90°C条件下回流，剧烈搅拌，反应时间为5-15h，优选为8-12h;之后， 室温冷却，获得含有负载药物的纳米颗粒混合溶液；
[0034] (3)对步骤(2)得到的混合溶液进行离心，除去上清液，使用无水乙醇洗涤，纯化的 样品在真空干燥箱干燥过夜，得到基于氧化锌的纳米药物组合物。
[0035]根据本发明，步骤（1)中所述回流搅拌装置可以为本领域公知的常规装置。其中， 乙酸锌-醇溶液的制备是将乙酸锌加入醇溶液中，40-80 °C搅拌回流至溶解。
[0036] 根据本发明，步骤(2)中，相对于每重量份的所述药物载体，所述混合药物分子的 用量为0.5-2.5重量份。其中，所述氧化锌药物载体的重量可根据添的加乙酸锌与生成氧化 锌药物载体之间的摩尔比关系换算而来。
[0037] 根据本发明，步骤(3)中，对于步骤(2)中获得的含有负载药物纳米颗粒的混合溶 液，可通过反复多次洗涤和离心的方法获得纯度高的载药纳米颗粒;其中，所述干燥的方法 为本领域技术人员所公知，除了使用真空干燥箱的方法对所得样品进行干燥以外，还可以 参照药剂学(人民卫生出版社，2007年出版)采用真空旋蒸的方法进行干燥处理。
[0038] 本发明中，对于药物活性成分没有特别限制，可为医药领域人员所熟知的其他带 正电荷药物分子，如阿霉素、柔红霉素和表阿霉素等。
[0039]第二方面，本发明还提供了如上所述制备方法制备得到的基于氧化锌的纳米药物 组合物。
[0040] 本发明提供的药物组合物在正常生理pH值下(如pH值为7.5左右)具有较低的药物 释放量，而在酸性pH值下(如pH值为5.0左右)药物组合物纳米结构遭到破坏，生成人体所需 微量元素Zn 2+并释放药物。
[0041] 本发明中所述氧化锌与药物的复合是直接利用了二者自身的性质，无需引入聚合 物，该组合物具有较好的分散性，水合粒径为40-90nm，具有生物利用度高且低毒可降解的 特点。
[0042]第三方面，本发明还提供了如上所述纳米药物组合物在制备用于治疗肿瘤的药物 组合物中的应用。
[0043] 与现有技术相比，本发明至少具有以下有益效果：
[0044] (1)本发明是直接利用了氧化锌与药物自身的性质，直接将其进行复合制备得到 基于氧化锌的纳米药物组合物，其在制备过程中，无需聚合物的引入；
[0045] (2)本发明通过上述制备方法得到的纳米药物组合物，其具有良好的分散性，水合 粒径在40-90nm之间，并具有生物利用度高且低毒可降解的特点。
[0046] (3)本发明通过上述制备方法得到的纳米药物组合物，其能在肿瘤酸性微环境下 特异性降解释放药物，减少抗肿瘤药物对正常组织的杀伤，同时其还具有逆转肿瘤耐药的 特性，有效杀伤耐药肿瘤。
【附图说明】
[0047] 图1是本发明实施例1制备的阿霉素氧化锌纳米颗粒的粒径分布图。
[0048] 图2是本发明实施例1制备的阿霉素氧化锌纳米颗粒的Zeta电位分析图。
[0049] 图3是本发明实施例1制备的阿霉素氧化锌纳米颗粒在不同pH条件下的透射电镜 图和扫描电镜图。
[0050] 图4是本发明实施例1制备的阿霉素氧化锌纳米颗粒细胞毒性实验结果图。
【具体实施方式】
[0051] 以下结合附图对本发明的【具体实施方式】进行详细说明。应当理解，此处所描述的
【具体实施方式】仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
[0052] 对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化，凡在本发明的精神 和原则之内，所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。下 述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法;所用的实验材料，如无特殊说明，均 为自常规生化试剂厂商购买得到的。
[0053]以下通过实施例进一步详细说明本发明。
[0054] 实施例1
[0055]本实例通过包括如下步骤的方法制备阿霉素氧化锌纳米颗粒。
[0056] (1)将27.4mg的乙酸锌(购自Aladdin公司，货号Z110780)加入72mL无水乙醇中，并 转移至回流搅拌装置中50°C搅拌回流至溶解制得乙酸锌乙醇溶液;将8mg的氢氧化钠加入 28mL无水乙醇中，超声使其溶解制得氢氧化钠乙醇溶液;将氢氧化钠乙醇溶液加入乙酸锌 乙醇溶液中，55°C条件下回流，剧烈搅拌2h，得到氧化锌胶体反应液。
[0057] (2)另取27.4mg的乙酸锌在如上条件下溶于72mL无水乙醇中，之后加入上述lOOmL 氧化锌胶体反应液中，另将含有8mg氢氧化钠和20mg阿霉素(购自北京华奉联博科技有限公 司）的28mL无水乙醇溶液以1 OmL/h的速度缓慢加入上述反应液中，上述溶液在80 °C条件下 回流，剧烈搅拌l〇h;之后，室温冷却，获得含有阿霉素氧化锌纳米颗粒混合溶液。
[0058] (3)对上述混合溶液进行离心，除去上清液，使用无水乙醇洗涤，纯化的样品在真 空干燥箱干燥过夜，得到含有本发明阿霉素氧化锌纳米颗粒的干粉。
[0059] 作为对比例，单纯药物载体氧化锌纳米颗粒的制备方法与上述制备步骤相似，区 别仅在于在制备过程中不引入药物分子阿霉素。
[0060] 实施例2
[0061 ]本实例通过包括如下步骤的方法制备阿霉素氧化锌纳米颗粒。
[0062] (1)将20mg的乙酸锌(购自Aladdin公司，货号Z110780)加入72mL无水乙醇中，并转 移至回流搅拌装置中60°C搅拌回流至溶解制得乙酸锌乙醇溶液；将7mg的氢氧化钠加入 28mL无水乙醇中，超声使其溶解制得氢氧化钠乙醇溶液;将氢氧化钠乙醇溶液加入乙酸锌 乙醇溶液中，50°C条件下回流，剧烈搅拌1.5h，得到氧化锌胶体反应液。
[0063] (2)另取20mg的乙酸锌在如上条件溶于72mL无水乙醇，之后加入上述lOOmL氧化锌 胶体反应液中，另将含有12mg氢氧化钠和10mg阿霉素(购自北京华奉联博科技有限公司）的 28mL无水乙醇溶液以6mL/h的速度缓慢加入上述反应液中，上述溶液在90°C条件下回流，剧 烈搅拌8h;之后，室温冷却，获得含有阿霉素氧化锌纳米颗粒混合溶液。
[0064] (3)对上述混合溶液进行离心，除去上清液，使用无水乙醇洗涤，纯化的样品在真 空干燥箱干燥过夜，得到含有本发明阿霉素氧化锌纳米颗粒的干粉。
[0065] 作为对比例，单纯药物载体氧化锌纳米颗粒的制备方法与上述制备步骤相似，区 别仅在于在制备过程中不引入药物分子阿霉素。
[0066] 实施例3
[0067] 本实例通过包括如下步骤的方法制备阿霉素氧化锌纳米颗粒。
[0068] (1)将35mg的乙酸锌(购自Aladdin公司，货号Z110780)加入72mL无水乙醇中，并转 移至回流搅拌装置中50°C搅拌回流至溶解制得乙酸锌乙醇溶液;将10mg氢氧化钠加入28mL 无水乙醇中，超声使其溶解制得氢氧化钠乙醇溶液;将氢氧化钠乙醇溶液加入乙酸锌乙醇 溶液中，60°C条件下回流，剧烈搅拌4h，得到氧化锌胶体反应液。
[0069] (2)另取35mg的乙酸锌在如上条件溶于72mL无水乙醇，之后加入上述100mL氧化锌 胶体反应液中，另将含有15mg氢氧化钠和20mg阿霉素(购自北京华奉联博科技有限公司）的 28mL无水乙醇溶液以5mL/h的速度缓慢加入上述反应液中，上述溶液在70°C条件下回流，剧 烈搅拌12h;之后，室温冷却，获得含有阿霉素氧化锌纳米颗粒混合溶液。
[0070] (3)对上述混合溶液进行离心，除去上清液，使用无水乙醇洗涤，纯化的样品在真 空干燥箱干燥过夜，得到含有本发明阿霉素氧化锌纳米颗粒的干粉。
[0071] 作为对比例，单纯药物载体氧化锌纳米颗粒的制备方法与上述制备步骤相似，区 别仅在于在制备过程中不引入药物分子阿霉素。
[0072] 实施例4
[0073] 与实施例1相比，除将无水乙醇替换为异丙醇溶液外，其它与实施例1相同。
[0074] 实施例5
[0075] 与实施例1相比，除将无水乙醇替换为乙二醇溶液外，其它与实施例1相同。
[0076] 实施例6
[0077]与实施例1相比，除将无水乙醇替换为异丙醇和乙二醇溶液外，其它与实施例1相 同。
[0078] 实施例7
[0079] 与实施例1相比，除将氢氧化钠替换为氢氧化钾外，其它与实施例1相同。
[0080] 实施例8
[0081] 与实施例1相比，除将氢氧化钠替换为氢氧化钠和氢氧化钾外，其它与实施例1相 同。
[0082] 实施例9
[0083]与实施例1相比，除将阿霉素替换为柔红霉素外，其它与实施例1相同。
[0084] 实施例10
[0085] 与实施例1相比，除将阿霉素替换为表阿霉素外，其它与实施例1相同。
[0086] 测试实施例1
[0087] 通过Mai vern公司的激光粒度仪按照其说明书中的方法，对实施例1制备的阿霉素 氧化锌纳米颗粒进行动态光散射(ZetasizerNanoZS)测定，测得实施例1制备的纳米颗粒的 平均粒径为68nm，且具有如图1所示的粒径分布。图1的结果说明所制备的纳米颗粒粒径分 布较为均一。
[0088] 通过Mai vern公司激光粒度仪按照其说明书中的方法，对实施例1中制备的纳米颗 粒进行Zeta-电位分析，测得实施例1中制备的纳米颗粒平均电荷为-7.63mV(如图2)，表明 其带有微弱的负电荷。
[0089] 对实施例2-10制备的药物组合物进行如上相同的测试，其结果如表1所示。
[0090] 表 1
[0092]测试实施例2
[0093] 分别使用Hitachi公司的S4800扫描电子显微镜和FEI公司的Tecnai G20 S-TWIN 透射电子显微镜按照其说明书中的方法，观察实施例1制备的阿霉素氧化锌纳米颗粒分别 在中性条件PH7.5和酸性条件pH5.0时的形貌特征，如图4所示，中性条件pH7.5时纳米颗粒 形貌呈圆形颗粒，而在酸性条件PH5.0时，纳米颗粒结构遭到破坏，完整的纳米颗粒很难被 找到。结果表明，上述包含阿霉素的氧化锌纳米颗粒能够在PH5.0时达到迅速释放，释放速 度和释放量远远高于在PH7.5的条件下，因而上述包含阿霉素的氧化锌纳米颗粒具有pH敏 感的药物释放特性。
[0094] 对实施例2-10制备的药物组合物进行如上相同的测试，得到与如上基本相同的检 测结果，本发明在此不再赘述。
[0095] 测试实施例3
[0096] 选用人源耐药型乳腺癌细胞MCF-7R和敏感型乳腺癌细胞MCF-7S分别检测实施例1 中制备的包含阿霉素氧化锌纳米颗粒的细胞毒性。按照文献(《细胞培养》，司徒镇强，世界 图书出版公司，1996年）中的方法将上述细胞进行培养，而后加入实施例1制备的包含阿霉 素氧化锌纳米颗粒，加药48h后按照文献(《细胞培养》，司徒镇强，世界图书出版公司，1996 年）中的方法(MTT法)检测细胞存活率，此为纳米颗粒实验组。阳性对照为含相同浓度的游 离阿霉素药物组，阴性对照为不含抗癌药物的空白培养基，其中以阴性对照组中细胞的存 活率按100 %计算。实施例1中的纳米颗粒以及阳性对照对MCF-7R细胞和MCF-7S细胞的杀伤 情况分别如图4所示。结果显示，实施例1中的纳米颗粒对MCF-7R细胞和MCF-7S细胞的杀伤 效果均高于阳性对照，尤其在耐药型乳腺癌细胞MCF-7R上表现更为突出，体现出阿霉素氧 化锌纳米颗粒具有逆转耐药的特性。加入药物的浓度以阿霉素的浓度计，分别为0.001、 0.01、0.1、1、10和100yg/mL;纳米颗粒对于MCF-7R细胞的半数存活浓度（IC 5Q = 0.42yg/mL) 明显低于游离阿霉素的半数存活浓度（IC5Q>100yg/mL)。在MCF-7S细胞中，纳米颗粒的IC 50 为0.47yg/mL，明显低于游离阿霉素的IC5Q值2.58yg/mL。
[0097] 对实施例2-10制备的药物组合物进行如上相同的测试，其分别在MCF-7S细胞和 MCF-7R细胞中，纳米颗粒的IC5Q结果如表2-3所示。
[0102] 以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中 的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这 些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0103] 另外需要说明的是，在上述【具体实施方式】中所描述的各个具体技术特征，在不矛 盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可 能的组合方式不再另行说明。
[0104] 此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本 发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
【主权项】
1. 一种基于氧化锌的纳米药物组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 将氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液与乙酸锌-醇溶液混合，得到氧化锌胶体反应 液； (2) 另取乙酸锌-醇溶液，将其与含有药物分子的氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液共同 或分先后加入步骤（1)得到的氧化锌胶体反应液中，得到含有负载药物的纳米颗粒混合溶 液； (3) 对步骤(2)得到的混合溶液进行离心，除去上清液，经洗涤、纯化和干燥，得到所述 基于氧化锌的纳米药物组合物。2. 如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)所述氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液的制备是将氢氧化钠和/或氢氧化钾加入醇溶液中，经超声溶解而得到； 优选地，所述氢氧化钠和/或氢氧化钾与醇溶液的质量体积比为1: (2-6)，优选为1: (2.5-4.5)； 优选地，所述醇溶液为乙醇溶液、异丙醇溶液或乙二醇溶液中的任意一种或至少两种 的混合物。3. 如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)和(2)所述乙酸锌-醇溶液的 制备是将乙酸锌加入醇溶液中，经回流、搅拌至溶解而得到； 优选地，所述回流的温度为40-80°C，优选为45-60°C ; 优选地，所述乙酸锌与醇溶液的质量体积比为1: (2-4); 优选地，所述醇溶液为乙醇溶液、异丙醇溶液或乙二醇溶液中的任意一种或至少两种 的混合物。4. 如权利要求1-3之一所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)所述氧化锌胶体的制备 是将氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液与乙酸锌-醇溶液混合，经回流、搅拌而得到； 优选地，所述回流的温度为40-90°C，优选为45-65Γ ; 优选地，所述搅拌的时间为l_4h，优选为2-4h; 优选地，所述氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液与乙酸锌-醇溶液的体积比为1: (2-4)。5. 如权利要求1-4之一所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述含有药物分子的氢 氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液的制备是将氢氧化钠和/或氢氧化钾和药物加入醇溶液中， 经超声溶解而得到； 优选地，所述药物分子、氢氧化钠和/或氢氧化钾与醇溶液的质量体积比为（1-3): 1: (2.5-4.5)； 优选地，所述药物分子为阿霉素、柔红霉素或表阿霉素中的至少一种。6. 如权利要求1-5之一所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述负载药物的纳米颗 粒混合溶液的制备是将含有药物分子的氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液加入氧化锌胶体 反应液，经回流、搅拌而得到； 优选地，所述回流的温度为70-90°C，优选为75-85°C ; 优选地，所述搅拌的时间为5-15h，优选为8-12h; 优选地，所述含有药物分子的氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液加入速度为l_50mL/h， 优选为5-20mL/h; 优选地，所述含有药物分子的氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液与氧化锌胶体反应液的 体积比为1:( 2-4)。7. 如权利要求1-6之一所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 将氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液和乙酸锌-醇溶液置于回流搅拌装置中以（2-4):1的体积比，40-60°C条件下回流，搅拌l_4h，得到氧化锌胶体反应液； (2) 另取乙酸锌-醇溶液，先将其加入步骤（1)得到的氧化锌胶体反应液中；再将含有药 物分子的氢氧化钠和/或氢氧化钾-醇溶液以l_50mL/h的速度加入上述反应液中；在70-90 °C条件下回流，搅拌，反应5-15h，经室温冷却，获得含有负载药物的纳米颗粒混合溶液； (3) 对步骤(2)得到的混合溶液进行离心，除去上清液，使用无水乙醇洗涤、纯化，并干 燥过夜，得到所述基于氧化锌的纳米药物组合物。8. 如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述乙酸锌-醇溶液与氧化锌胶 体反应液的体积比为1: (3-5); 优选地，步骤(3)所述纯化后样品干燥方法采用真空旋蒸或真空干燥箱干燥。9. 如权利要求1-8之一所述的制备方法得到的基于氧化锌的纳米药物组合物;优选地， 所述纳米药物组合物的水合粒径为40_90nm。10. 如权利要求9所述的纳米药物组合物在制备用于治疗肿瘤的药物组合物中的应用。
【文档编号】A61K9/16GK105853373SQ201610191876
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年3月30日
【发明人】梁兴杰, 钟林, 柳娟, 马晓溦
【申请人】国家纳米科学中心