心，吸取白膜层细胞获得免疫细胞；
[0071]5)将免疫细胞等体积加入到冻存液中混匀，分装于细胞冻存管中，将细胞冻存管放置于程序冻存盒中，先于_80°C冷冻，然后转入液氮中冻存。
[0072]其中，分离液的制备方法为:在具备局部百级层流净化条件的环境下，在20°C下，将符合药用标准的右旋糖酐4.2g，海藻糖2.Sg，超低粘度海藻酸钠0.7g，泛影葡胺1.Sg，聚二烯丙基二甲基氯化铵0.12g充分溶解于灭菌注射用水配制成生理溶液100mL，再经过0.22Mi滤膜过滤至一支无菌、无内毒素的容器内。
[0073]实施例七
[0074]从骨髓中提取免疫细胞的方法，包括如下步骤:
[0075]I)采集人骨髓，用含15 %胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液5倍稀释，400g，5min离心，弃上清及脂肪层，获骨髓细胞；
[0076]2)将外周血移入离心管中，750g，10min离心，吸取上层血浆备用，下层细胞用于分离外周血淋巴细胞;骨髓细胞中加入含15 %上述上层血浆的α-ΜΕΜ培养液制成细胞悬液；
[0077]3)将含有海藻糖，超低粘度海藻酸钠和泛影酸钠的分离液加入到离心管中；
[0078]4)将细胞悬液平铺到所述离心液上，在8-25°(3，50(^-80(^，10?301^11条件下离心，吸取白膜层细胞获得免疫细胞；
[0079]5)将免疫细胞等体积加入到冻存液中混匀，分装于细胞冻存管中，将细胞冻存管放置于程序冻存盒中，先于_80°C冷冻，然后转入液氮中冻存。
[0080]其中，分离液的制备方法为:在具备局部百级层流净化条件的环境下，在20°C下，将符合药用标准的右旋糖酐4.5g，海藻糖3.4g，超低粘度海藻酸钠0.Sg，泛影葡胺1.5g，聚二烯丙基二甲基氯化铵0.12g充分溶解于灭菌注射用水配制成生理溶液lOOmL，再经过0.22Mi滤膜过滤至一支无菌、无内毒素的容器内。
[0081 ]实施例八
[0082]从骨髓中提取免疫细胞的方法，包括如下步骤:
[0083]I)采集人骨髓，用含15%胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液5倍稀释，400g，5min离心，弃上清及脂肪层，获骨髓细胞；
[0084]2)将外周血移入离心管中，750g，10min离心，吸取上层血浆备用，下层细胞用于分离外周血淋巴细胞;骨髓细胞中加入含15 %上述上层血浆的α-ΜΕΜ培养液制成细胞悬液；
[0085]3)将含有海藻糖，超低粘度海藻酸钠和泛影酸钠的分离液加入到离心管中；
[0086]4)将细胞悬液平铺到所述离心液上，在8-25°(3，50(^-80(^，10?301^11条件下离心，吸取白膜层细胞获得免疫细胞；
[0087]5)将免疫细胞等体积加入到冻存液中混匀，分装于细胞冻存管中，将细胞冻存管放置于程序冻存盒中，先于_80°C冷冻，然后转入液氮中冻存。
[0088]其中，分离液的制备方法为:在具备局部百级层流净化条件的环境下，在20°C下，将符合药用标准的右旋糖酐4g，海藻糖3g，超低粘度海藻酸钠0.7g，泛影葡胺2g，聚二烯丙基二甲基氯化铵0.13g充分溶解于灭菌注射用水配制成生理溶液100mL，再经过0.22μπι滤膜过滤至一支无菌、无内毒素的容器内。
[0089]对比例一
[0090]从骨髓中提取免疫细胞的方法，包括如下步骤:
[0091 ] I)采集人骨髓，用含15 %胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液5倍稀释，400g，5min离心，弃上清及脂肪层，获骨髓细胞；
[0092]2)骨髓细胞中加入含15 %胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液制成细胞悬液；
[0093]3)将含有右旋糖酐、羟乙基淀粉和泛影酸钠的分离液加入到离心管中；
[0094]4)将细胞悬液平铺到所述离心液上，在8-25°(3，50(^-80(^，10?301^11条件下离心，吸取白膜层细胞获得免疫细胞；
[0095]5)将免疫细胞等体积加入到冻存液中混匀，分装于细胞冻存管中，将细胞冻存管放置于程序冻存盒中，先于_80°C冷冻，然后转入液氮中冻存。
[0096]其中，分离液的制备方法为:在具备局部百级层流净化条件的环境下，在20°C下，将符合药用标准的右旋糖酐3.6g，羟乙基淀粉1.3g和泛影葡胺9g充分溶解于灭菌注射用水配制成生理溶液100mL，再经过0.22μπι滤膜过滤至一支无菌、无内毒素的容器内。
[0097]对比例二
[0098]从骨髓中提取免疫细胞的方法，包括如下步骤:
[0099]I)采集人骨髓，用含15%胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液5倍稀释，400g，5min离心，弃上清及脂肪层，获骨髓细胞；
[0100]2)骨髓细胞中加入含15%胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液制成细胞悬液；
[0101]3)将含有右旋糖酐，超低粘度海藻酸钠和泛影酸钠的分离液加入到离心管中；
[0102]4)将细胞悬液平铺到所述离心液上，在8-25°(3，50(^-80(^，10?301^11条件下离心，吸取白膜层细胞获得免疫细胞；
[0103]5)将免疫细胞等体积加入到冻存液中混匀，分装于细胞冻存管中，将细胞冻存管放置于程序冻存盒中，先于_80°C冷冻，然后转入液氮中冻存。
[0104]其中，分离液的制备方法为:在具备局部百级层流净化条件的环境下，在20°C下，将符合药用标准的右旋糖酐3.6g，超低粘度海藻酸钠1.3g和泛影葡胺9g充分溶解于灭菌注射用水配制成生理溶液100mL，再经过0.22μπι滤膜过滤至一支无菌、无内毒素的容器内。
[0105]对比例三
[0106]从骨髓中提取免疫细胞的方法，包括如下步骤:
[0107]I)采集人骨髓，用含15 %胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液5倍稀释，400g，5min离心，弃上清及脂肪层，获骨髓细胞；
[0108]2)骨髓细胞中加入含15%胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液制成细胞悬液；
[0109]3)将含有葡聚糖，羟乙基淀粉和泛影酸钠的分离液加入到离心管中；
[0110]4)将细胞悬液平铺到所述离心液上，在8-25°(3，50(^-80(^，10?301^11条件下离心，吸取白膜层细胞获得免疫细胞；
[0111]5)将免疫细胞等体积加入到冻存液中混匀，分装于细胞冻存管中，将细胞冻存管放置于程序冻存盒中，先于_80°C冷冻，然后转入液氮中冻存。
[0112]其中，分离液的制备方法为:在具备局部百级层流净化条件的环境下，在20°C下，将符合药用标准的葡聚糖T50020g，羟乙基淀粉2g，泛影葡胺2.5g，聚二烯丙基二甲基氯化铵0.1g和聚乙烯吡咯烷酮2.5g充分溶解于灭菌注射用水配制成生理溶液lOOmL，再经过
0.22μπι滤膜过滤至一支无菌、无内毒素的容器内。
[0113]对比例四
[0114]从骨髓中提取免疫细胞的方法，包括如下步骤:
[0115]I)采集人骨髓，用含15%胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液5倍稀释，400g，5min离心，弃上清及脂肪层，获骨髓细胞；
[0116]2)骨髓细胞中加入含15%胎牛血清的α-ΜΕΜ培养液制成细胞悬液；
[0117]3)将常规Ficoll 400分离液加入到离心管中；
[0118]4)将细胞悬液平铺到所述离心液上，在8-25°(3，50(^-80(^，10?301^11条件下离心，吸取白膜层细