2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1,2-d][1 ...的制作方法
【专利摘要】本发明涉及(2?(4?(2?(1?异丙基?3?甲基?1H?1,2,4?三唑?5?基)?5,6?二氢苯并[f]咪唑并[1,2?d][1,4]氧氮杂?9?基)?1H?吡唑?1?基)?2?甲基丙酰胺(GDC?0032,塔西利昔)的结晶性多晶型物、其使用方法及制备方法。
【专利说明】2- (4- (2- (1 -异丙基-3-甲基-1H-1 ,2,4-三唑-5-基)-5,6-二 氢苯并[f]咪唑并[1 ,2-d][1 ,4]氧氮杂罩-9-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙酰胺的多晶型物、其制备方法和药物用途
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 根据37CFR§1.53(b)提交的本非临时申请根据35USC§119(e)要求于2013年12月16 日提交的美国临时申请61 /916，657的权益，将其全部内容通过引用的方式并入本申请。
技术领域
[0003] 本发明涉及PI3K抑制剂化合物⑶C-0032,即名为2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-IH-1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[幻咪唑并[1，2-(1][1，4]氧氮杂罩-9-基)-1!1-吡唑-1-基)-2-甲基丙酰胺的多晶型物形式。本发明还涉及获得GDC-0032的多晶型物形式的方法以 及使用GDC-0032的多晶型物形式的药物组合物在体外、原位和体内诊断或治疗哺乳动物细 胞或相关病理病症的方法。
【背景技术】
[0004] 磷酸肌醇3-激酶（PI3K)为在肌醇环的3-羟基残基处使脂质磷酸化的脂质激酶 (而;[1：1]^11等人（1988)似1：1^6,332:664)。通过？13-激酶产生的3-磷酸化磷脂(？1?3)发挥募 集具有脂质结合结构域(包括普列克(Pleckstrin)同源(PH)区）的激酶(诸如Akt及磷酸肌 醇依赖性激酶-UPDKl))的第二信使的作用。Akt与膜PIP3的结合使Akt易位至质膜，使Akt 与负责活化Akt的TOKl接触。肿瘤抑制因子磷酸酶PTEN使PIP3去磷酸化且因此发挥Akt活化 的负调节剂作用。PI3-激酶Akt及PDKl在多个细胞过程(包括细胞周期调节、增殖、存活、细 胞凋亡及运动性）的调节中是重要的且为疾病诸如癌症、糖尿病和免疫炎症的分子机制中 的重要组分（Vivanco等人（2002)Nature Rev.Cancer 2:489;PhiIlips等人（1998)Cancer 83:41)〇
[0005] 癌症中的主要PI3-激酶同工型为I类PI3-激酶pll〇a(US 5824492;US 5846824;US 6274327)。心血管及免疫炎性疾病中涉及其它同工型（Workman P(2004)Biochem Soc Trans 32:393_396;Patel等人（2004)Proceedings of the American Association of Cancer Research(Abstract LB-247)95th Annual Meeting,March 27-31,Orlando , Florida , USA；Ahmadi K and Waterfield MD(2004)Encyclopedia of Biological Chemistry(Lennarz W J，Lane M D eds)Elsevier/Academic PresshPU激酶/Akt/PTEN 途径为癌症药物研发的有吸引力的靶标，这是因为预期所述调节或抑制剂可抑制增殖、逆 转对细胞凋亡的抑制并克服癌细胞对细胞毒性剂的抗性（Fo Ike s等人（ 2008 ) J.Med.Chem.51:5522_5532;Yaguchi等人（2006)Jour.of the Nat.Cancer Inst.98(8): 545-556) DPI3K-PTEN-AKT信号传导途径在众多种癌症中下调（Samuels Y，Wang Z, Bardellil A等人.High frequency of mutations of the PIK3CA gene in human cancers.(2004)Science；304(5670):554；Carpten J,Faber AL,Horn C."A transforming mutation in the pleckstrin homology domain of AKTl in cancer"（2007)Nature; 448:439-444)ο
[0006] GDC-0032,也称为塔西利昔（taselisib)、RG7604或 IUPAC 名称：2-(4-(2-( 1-异丙 基-3-甲基-1H-1，2,4-三唑-5-基）-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1，2-(1][1，4]氧氮杂罩-9-基）- 1H-吡唑-1-基）-2-甲基丙酰胺，其具有有效的PI3K活性（Ndubaku等人（2013) Jour.Med.Chem.56(11):4597-4610；W0 2013/182668；W0 2011/036280；US 8242104；US 8343955)且正在患有局部晚期或转移实体瘤的患者中加以研究（Juric等人〃 GDC-0032，a beta isoform-sparing PI3K inhibitor:Results of a first-in-human phase Ia dose escalation study^,2013(April 07)Abs LB_64American Association for Cancer Research Annual Meeting)。
[0007] 药品的多种具有不同固态性质的晶形可显示出在生物利用度、储存期及加工期间 的行为上的差异。粉末X射线衍射为按照其独特衍射图而鉴别不同晶相的有力工具。
[0008] 医药工业经常遇到相同结晶化学实体具有多种多晶型物的现象。多晶型现象通常 具有药品能以两种或更多种晶相存在的特征，所述晶相在晶格中具有不同分子排列和/或 构型，从而使晶体具有不同物理化学性质。能可靠地制备所选多晶型形式的能力为决定药 品成功的关键因素。
[0009] 全世界的管理机构均需要适当努力来鉴别药品的多晶型物并检验多晶型物互变。 由于通常无法预测多晶型物的行为及其物理化学性质的各别差异，所以必须证实相同产品 的制造批次之间的一致性。适当理解多晶型物情况及医药多晶型物的性质将有助于制造一 致性。
[0010] 对原子水平的晶体结构及分子间相互作用的了解为确立绝对构型(对映异构体）、 相鉴别、质量控制及方法研发控制及优化提供重要信息。广泛认为X射线衍射为用于医药固 体的晶体结构分析及晶形鉴别的可靠工具。
[0011]由于结构测定的速度及准确性，优选药品单晶的可用性。然而，并非总是能获得具 有适用于数据收集的大小的晶体。在所述情况下，可由通过在环境条件下和/或在可变温度 或湿度下测量获得的X射线粉末衍射数据来解析晶体结构。
【发明内容】
[0012] 本发明涉及具有以下结构的名称为2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1!1-1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1，2-(1][1，4]氧氮杂罩-9-基)-1!1-吡唑-1-基)-2-甲基丙 酰胺的 PI3K 抑制剂I (塔西利昔，GDC-0032，RG7604, CAS 登记号 1282512-48-4 ,Genentech, Inc.)的多晶型物形式：
[0013]
[0014] 及其立体异构体、几何异构体、互变异构体及药用盐。
[0015] 本发明的一方面为塔西利昔的多晶型物形式的药物组合物。
[0016] 本发明的一方面为使用塔西利昔的多晶型物形式治疗哺乳动物中过度增殖性病 症的方法。
[0017] 本发明的一方面为制备塔西利昔的结晶性多晶型物的方法。
【附图说明】
[0018] 图1显示了⑶C-0032形式A单甲醇化物溶剂化物的ORTEP图。原子表示为50 %概率 各向异性热椭圆体。
[0019] 图2显示了⑶C-0032形式A单甲醇化物的XRPD。
[0020] 图3显示了⑶C-0032形式B非溶剂化物的ORTEP图。原子表示为50 %概率各向异性 热椭圆体。
[0021]图4显示了沿结晶a轴观察到的⑶C-0032的堆积图。
[0022]图5显示了沿结晶b轴观察到的⑶C-0032的堆积图。
[0023]图6显示了沿结晶c轴观察到的⑶C-0032的堆积图。
[0024]图7显示了沿结晶c轴观察到的GDC-0032中的氢键合。
[0025] 图8显示了⑶C-0032中的表观π-堆叠相互作用。
[0026]图9显示了⑶C-0032的计算X射线粉末衍射图。
[0027] 图10显示了⑶C-0032形式B的XRTO数据。
[0028] 图11显示了⑶C-0032形式B的热数据。
[0029] 图12显示了⑶C-0032形式B的FT-IR(傅里叶变换红外光谱)数据。
[0030] 图13显示了⑶C-0032形式C异戊醇化物的XRH)数据。
[0031] 图14显示了⑶C-0032形式D单水合物的XRTO数据。
[0032]图15显示了⑶C-0032形式E (顶部)和形式B (底部)的XRH)数据的重叠。
[0033]图16显示了⑶C-0032形式F(顶部)对形式B(底部)的XRH)数据的重叠。
[0034]图17显示了⑶C-0032形式G(中间）对形式K(顶部)和形式B(底部）的XRPD数据的重 叠。
[0035]图18显示了⑶C-0032形式1(顶部)对形式G(中间）和形式B(底部）的XRPD数据的重 叠。
[0036]图19显示了⑶C-0032模式Jl (顶部)对形式B(底部)的XRH)数据的重叠。
[0037]图20显示了⑶C-0032模式J2(顶部)对形式B(底部)的XRH)数据的重叠。
[0038]图21显示了 GDC-0032模式K(顶部)对形式B(底部)的XRH)数据的重叠。
【具体实施方式】
[0039]除非另外定义，否则本文所用的所有技术及科学术语均具有与本发明所属领域的 技术人员通常所了解相同的含义，且与下文一致：
[0040] 定义
[0041] 词语"包含"和"包括"在用于本说明书及权利要求中时意在说明存在所述特征、整 数、组分或步骤，但其不排除一或多个其它特征、整数、组分、步骤或其群组的存在或增加。
[0042] 如本文所用术语"约"在涉及X射线粉末衍射图峰位置使用时是指峰的固有变异 性，其取决于(例如)所用设备的校准、用于产生多晶型物的方法、结晶材料的寿命等，取决 于所用仪器。在此情形中，仪器的测量变异性为约+-.0.2° 2-Θ。受益于本发明的本领域技术 人员可理解"约"在此情况中的使用。涉及其它所定义参数(例如水含量、Cmax、t max、AUC4^_ 溶出速率、温度及时间）的术语"约"指示(例如)测量参数或达成参数中的固有变异性。受益 于本发明的本领域技术人员可理解如使用词语约所意味的参数的变异性。
[0043] 如本文所用"多晶型物"是指不同异水合物状态的单一化合物存在不同结晶形式， 例如一些化合物及复合物的性质。因此，多晶型物为共享相同分子式的不同固体，但每一多 晶型物可具有不同物理性质。因此，单一化合物可产生多种多晶型，其中每一形式具有不同 且各异的物理性质，例如溶解度分布、熔点温度、吸湿性、颗粒形状、密度、流动性、压实性 和/或X射线衍射峰。每一多晶型物的溶解度可变，因此，鉴别医药多晶型物的存在对于提供 具有可预测溶解度分布的药物必不可少。可期望研究药物的所有固态形式(包括所有多晶 型），且可期望确定每一多晶型的稳定性、溶出及流动性质。化合物的多晶型可在实验室中 通过X射线衍射光谱及通过诸如红外光谱测定等其它方法来区分。关于多晶型物及多晶型 物的医药应用的一般综述参见G.M. Wall ,Pharm Manuf · 3 :33( 1986); J.K·Haleblian and ff.McCrone,J.Pharm.Sci.,58:911(1969)；^Polymorphism in Pharmaceutical Solids, Second Edition(Drugs and the Pharmaceutical Sciences)"，Harry G.Brittain,Ed. (2011 )CRC Press(2009);和J.K.Haleblian，J.Pharm. Sci · ,64,1269( 1975)，其均为以引用 方式并入本文中。
[0044] 缩写字"XRPD"意指X射线粉末衍射，其为使用X射线辐射的衍射测量及测定结晶物 质中的键角及距离的分析技术。XRPD数据的分析为基于关于用于收集数据的X射线衍射系 统的已知反应的所测量粉末图的一般外观。对于粉末图中可能存在的衍射峰，可使用其位 置、形状、宽度及相对强度分布来表征粉末样品中固态秩序的类型。可使用在仪器背景顶部 上的任何广泛弥散散射(光晕）的位置、形状及强度来表征固态混乱的程度及类型。对存于 粉末样品中的固态秩序及混乱的组合解释提供样品宏观结构的定性量度。
[0045] 术语"治疗"是指治疗性治疗及预防性或防范性措施，其中目标为防止或减慢(减 轻)不期望的生理变化或病症，例如癌症的生长、发展或扩散。出于本发明的目的，有益或期 望临床结果包括(但不限于)减轻症状、降低疾病程度、稳定疾病状态（即不恶化）、延迟或减 慢疾病进展、改善或缓和疾病状态及可检测或不可检测地缓解病情(部分或全部）。"治疗" 也可意指与不接受治疗的预期存活相比延长存活。那些需要治疗者包括那些已患有病症或 障碍者以及那些易患病症或障碍者或那些欲预防病症或障碍者。
[0046] 短语"治疗有效量"意指本发明化合物（i)治疗特定疾病、病症或障碍，（ii)减弱、 改善或消除特定疾病、病症或障碍的一或多种症状，或（iii)预防或延迟本文所述特定疾 病、病症或障碍的一或多种症状发作的量。在癌症情形中，治疗有效量的药物可减少癌细胞 数;减小肿瘤大小;抑制（即在一定程度上减慢且优选终止)癌细胞浸润至周围器官中；抑制 (即在一定程度上减慢且优选终止)肿瘤转移;在一定程度上抑制肿瘤生长;和/或在一定程 度上减轻与癌症相关的一或多种症状。就药物可预防现有癌细胞的生长和/或杀伤现有癌 细胞而言，其可具有细胞生长抑制性和/或细胞毒性。对于癌症疗法，可通过(例如)评估疾 病进展时间（TTP)和/或测定反应率(RR)来测量效能。
[0047] 术语"癌症"及"癌性"是指或阐述哺乳动物中特征通常在于细胞生长失调的生理 病症。"肿瘤"包含一或多个癌细胞。癌症的实例包括(但不限于)癌瘤、淋巴瘤、母细胞瘤、肉 瘤及白血病或淋巴样恶性肿瘤。所述癌症的更具体实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细 胞癌）；肺癌，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌（"NSCLC"）、肺腺癌及肺鳞状癌;腹膜癌;肝细 胞癌；胃癌或胃部癌症，包括胃肠癌;胰腺癌、胶质母细胞瘤、子宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱 癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾部 癌症或肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、肛门癌、阴莖癌、以及头颈癌。如本文所用 胃癌包括胃部癌症，其可在胃中任一部分发展且可扩散遍及胃且扩散至其它器官；尤其为 食管、肺、淋巴结及肝。
[0048] 术语"造血恶性肿瘤"是指在造血期间生成的癌症或过度增殖病症，其涉及诸如以 下的细胞：白细胞、淋巴细胞、天然杀伤细胞、浆细胞及骨髓细胞，例如中性粒细胞及单核细 胞。造血恶性肿瘤包括非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大造血淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、外套细胞淋 巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、急性骨髓性白血病及骨髓细胞白血病。淋巴 细胞性白血病(或"成淋巴细胞性"白血病)包括急性成淋巴细胞性白血病(ALL)及慢性淋巴 细胞性白血病(CLL)。骨髓性白血病（亦为"骨髓"或"非淋巴细胞性"白血病)包括急性髓性 (或成髓细胞性）白血病(AML)及慢性髓性白血病(CML)。
[0049] "化学治疗剂"为不论作用机制如何可用于治疗癌症的生物(大分子)或化学(小分 子)化合物。化学治疗剂包括(但不限于)5_FU、多西他赛、埃雷布林(eribulin)、吉西他滨、 GDC-0973、⑶C-0623、紫杉醇、他莫昔芬、氟维司群、地塞米松、帕妥珠单抗、曲妥单抗艾坦辛 (trastuzumab emtansine)、曲妥单抗及来曲挫。
[0050] 术语"哺乳动物"包括(但不限于)人类、小鼠、大鼠、豚鼠、猴、犬、猫、马、牛、猪及绵 羊。
[0051] 所用术语"包装说明书"是指通常包括于治疗产品的商业包装中的说明书，其含有 关于适应症、用法、剂量、给药、禁忌症和/或关于使用所述治疗产品的警告的信息。
[0052] 本申请使用的短语"药用盐"是指本发明化合物的药用有机或者无机盐。示例性盐 包括但不限于硫酸盐、枸橼酸盐、乙酸盐、草酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫 酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式枸橼酸盐、酒石酸盐、油酸 盐、鞣酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡 糖酸盐、葡糖醛酸盐、糖二酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸 盐、对甲苯磺酸盐和扑酸盐（即1，Γ-亚甲基-二-(2-羟基-3-萘甲酸盐））。药用盐可涉及另 一种分子如乙酸根离子、琥珀酸根离子或者其它抗衡离子的包合物。抗衡离子可以是稳定 母体化合物电荷的任何有机或者无机部分。此外，药用盐可在其结构中具有多于一个带电 原子。多个带电原子为药用盐的部分的情况可具有多个抗衡离子。因此，药用盐可具有一个 或者多个带电原子和/或者一个或者多个抗衡离子。
[0053]若本发明化合物为碱，则期望的药用盐可通过本领域可得的任何合适方法来制 备，例如用无机酸(如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、磷酸等)或者用有机酸（如乙酸、马 来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羟乙酸、水杨酸、吡喃糖基酸如葡萄糖 醛酸或者半乳糖醛酸、α-羟基酸如枸橼酸或者酒石酸、氨基酸如天冬氨酸或者谷氨酸、芳族 酸如苯甲酸或者肉桂酸、磺酸如对甲苯磺酸或者乙磺酸等)处理游离碱。
[0054] 若本发明化合物为酸，则期望的药用盐可通过任何合适方法来制备，例如用无机 或者有机碱(如胺(伯胺、仲胺或者叔胺）、碱金属氢氧化物或者碱土金属氢氧化物等)处理 游离酸。合适盐的示例性实例包括但不限于从以下物质得到的有机盐:氨基酸如甘氨酸和 精氨酸、氨、伯胺、仲胺和叔胺以及环状胺如哌啶、吗啉和哌嗪；以及从以下物质得到的无机 盐:钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂。
[0055] 期望的药用盐可通过本领域可得的任何合适方法来制备。例如用无机酸(如盐酸、 氢溴酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、磷酸等)或者用有机酸(如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马 酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羟乙酸、水杨酸、吡喃糖基酸如葡萄糖醛酸或者半乳糖醛酸、羟 基酸如枸橼酸或者酒石酸、氨基酸如天冬氨酸或者谷氨酸、芳族酸如苯甲酸或者肉桂酸、磺 酸如对甲苯磺酸或者乙磺酸等）处理游离碱。例如，由Ρ. Stahl等人，Cami lie G.(eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts .Properties,Selection and Use.(2002)Zurich: Wiley_VCH;S.Berge等人，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(l)l 19; P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986)33 201 217;Anderson等人，The Practice of Medicinal Chemistry(1996),Academic Press,New York;Remington's Pharmaceutical Sciences ,18th ed.,(1995)Mack Publishing Co .,Easton PA;和The Orange Book(Food&Drug Administration ,Washington，D · C ·在其网站上）讨论了通常认为 适于由碱性药用化合物形成药学上有用的或者可接受的盐的酸。将这些公开引入到本申请 作为参考。
[0056] 短语"药用的"表示所述物质或者组合物必须与制剂包含的其它成分和/或者用其 治疗的哺乳动物在化学上和/或者毒理学上是相容的。
[0057] "溶剂化物"是指一种或者多种溶剂分子与本发明化合物的缔合物或者络合物。形 成溶剂化物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMS0、乙酸乙酯、乙酸和乙 醇胺。术语"水合物"是指当溶剂分子是水时的络合物。
[0058] 术语"手性的"是指具有非重叠性镜像配偶性质的分子，而术语"非手性的"是指在 其镜像配偶上可重叠的分子。
[0059] 术语"立体异构体"是指化学组成相同，但原子或基团在空间中排列不同的化合 物。
[0060] "非对映异构体"是指具有两个或多个手性中心并且它们的分子不是彼此的镜像 的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、波谱性质和反应性。非 对映异构体的混合物可在高分辨分析操作例如电泳和色谱下分开。
[0061] "对映异构体"是指彼此为非可重叠镜像的化合物的两种立体异构体。
[0062] 本申请所使用的立体化学的定义和惯例通常采用S · P · Parker，EcL，McGraw-Hi11 Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York;和Eliel， E·and Wilen，S·，"Stereochemistry of Organic Compounds"，John Wiley&Sons，Inc·， New York，1994。本发明化合物可含有不对称中心或手性中心，并由此以不同的立体异构形 式存在。本发明化合物的所有立体异构形式意在形成本发明的部分，所述立体异构形式包 括但不限于非对映异构体、对映异构体和阻转异构体以及它们的混合物例如外消旋混合 物。许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有旋转平面偏振光的平面的能力。在描 述活性化合物中，词头D和L或R和S用于表示与其一个或多个手性中心有关的分子的绝对构 型。词头d和1或(+ )和(-)用于指示平面偏振光被化合物旋转的符号，其中（-)或1表示化合 物是左旋的。词头为(+)或d的化合物为右旋的。对于给定的化学结构，除了这些立体异构体 是彼此的镜像之外，它们是相同的。特定的立体异构体还可被称为对映异构体，并且上述异 构体的混合物常被称为对映体混合物。对映异构体的50: 50混合物被称为外消旋混合物或 外消旋体，其可发生在化学反应或流程中没有立体选择性或立体特异性时。术语"外消旋混 合物"和"外消旋体"是指两种对映体物种的等摩尔混合物，没有光学活性。
[0063]术语"互变异构体"或"互变异构形式"是指不同能量的可经低能皇相互转化的结 构异构体。例如，质子互变异构体(也被称为质子异变互变异构体)包括经质子迀移的相互 转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。价互变异构体包括通过重组某些成键电子的相互 转化。
[0064] ⑶C-0032的多晶型物
[0065] 本发明包括⑶C-OO 32的多晶型物以及用于产生⑶C-003 2的多晶型物的过程、方法 及试剂，GDC-0032显示为式I (Roche RG7604, CAS登记号 1282512-48-4):
[0066]
[0067] 且名称为：2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1H-1，2,4-三唑-5-基）-5,6-二氢苯并[f] 咪唑并[1，2-(1][1，4]氧氮杂罩-9-基）-1!1-吡唑-1-基）-2-甲基丙酰胺(1]3 8242104和￥0 2011/036280,其以引用方式明确并入）。本文所用的⑶C-0032包括其所有立体异构体、几何 异构体、互变异构体及药用盐。
[0068] ⑶C-0032形式B的三斜晶胞参数及计算体积为:a = 9· 7944( 14)，b = 10·4767(11)， C= 12.5994(17)1,α = 96.145 (10), β = 95.749 (11), β = 115.072 (9)° , V=1：149.：0(3)13； ⑶C-0032形式B的晶体结构中的不对称单元的式量为460.541amu ·(式单位Γ1且Ζ = 2,得出 计算密度为1.33g · Oif3。空间群经测定为Ρ-1(ηο.2)。晶体数据及结晶数据收集参数的概述 提供于实施例13的表8中。
[0069] 所得结构的品质为中等，如R值为0.060(6.0% )所指示。通常引用在0.02至0.05范 围内的R值用于最可靠测定的结构（Glusker ,Jenny Pickworth ; Trueblood ,Kenneth N.Crystal Structure Analysis:A Primer,2nd ed.；Oxford University press : New York，（1985)，p.87)〇
[0070] GDC-0032的ORTEP图显示于图3中。在C6处构形无序，该碳部分占据两个不同位置 (C6A为31.3 %且C6B为68.7 % )。在单晶结构的不对称单元中观察到的分子与式I分子结构 一致。图3中显示的不对称单元含有一个GDC-0032分子。
[0071] 沿a、b及c结晶轴观察到的堆积图分别显示于图4、5及6中。无溶剂可到达空隙。在 图7中观察氢键合。氢键合以酰胺N108用作氢供体且以三嗪N25用作接受体形成头-尾二聚 体(编号方案来自图3)。供体与接受体的距离为2.965(5)A且供体-氢-接受体的键角为153 (3)°。在GDC-0032二聚体中在一个分子的苯环与另一个分子的咪唑环之间亦存在表观分子 间Ji-堆叠相互作用（图8)。
[0072]图9显示了由单晶数据生成的⑶C-0032形式B的计算XRH)图。⑶C-0032形式B的实 验XRro图显示于图10中。来自单晶数据的计算粉末图及实验图分别为在150°C及约295°C获 得。由于温度差异，可能发生单位晶胞参数a、b、c及角度α、β、γ的各向异性膨胀或收缩，导 致两个图中的反射相对于彼此移位。实验图中的所有反射表示于计算图中，这表明物料可 能为单相且其与单晶为相同相。
[0073] 形式B多晶型物位置参数及其估计的标准偏差(表1)、各向异性温度因子系数(表 2)、键距(表3)、键角(表4)、氢键及角度(表5)以及扭转角(表6)显示于下文中。
[0074] 衷1⑶C-0032的位詈参数及其估计的标准偏差
[0076]加星号的原子经各向同性精修 [0077] Ueq= (1/3) EiEjUija*ia*jai.aj
[0078] _
[0079] _ (iDC-0032的各向异性温度因子系数-U's
[0081] 各向异性温度因子的形式为：
[0082] exp [ -2Jih2a*2U(I，I) +k V2U(2，2)+12c*2U(3，3)+2hkaVU (I，2) +2hIa*c*U(1，3)
[0083] +2klb*c*U(2,3)]，其中a*、b*及c*为倒易晶格常数。
[0088]括号中的数字为以最低有效数位表示的标准不确定度。
[0092] CMOS N104 N103 103.98(19) 07 C6A H6A1 104.20 C107 N108 1118! 125.8(19) C5 C6A II6A1 104.20 Cl07 N108 H182 117(2) 07 C6A H6A2 104.20 11181 N108 11182 117(3) C5 C6A 116A2 104.20 C3 C2 NI 110.21(19) H6A1 C6A H6A2 105.50 C3 Cl C2I 126.6(2) 07 C(SB C5 120.0(5) NI (：2 C21 123.07(19) 07 (；6B H6B\ 107.30 Cl C3 N4 106.07(19) C5 C(SB H6Bi 107.30 C2 (；3 H 3 127.00 07 (；6B H6B2 !07.30 N4 C3 H 3 127.00 C5 C(SB H6B2 107.30 C6A CS N4 I 14.3(5) H6B1 C6B H6B2 !0().90 C6A C5 C6B 41.7(6) Cl 02 ClOI C105 103.3(2) N4 C5 C6B 115.413) C102 ClOi CIO 127.5(2) C6A CS H5A !08.70 C105 ClOl CIO 120.2(2) N4 CS HiA 108.70 NM 03 Cl 02 ClOl 108.3(2) C6B C5 H5A 69.40 N103 Cl02 H102 125.90 C6A C5 H5B 108.70 ClOl C102 H102 125.90 N4 CS H5B 108.70 NM 04 C105 ClOl 113.1(2) C6B C5 H5B 134.30 N104 C105 H105 123.50 H5A C5 H5B 107.60 ClOl C105 H105 123.50 07 CS C9 114.9(2) N 1103 C106 CllO 109.1(2) 07 CS Ci3 124.5(2) N103 C106 C107 !11.43(19) C9 CS C13 !20.5(2) CllO C106 C107 109.1(2) CIO CO CS 122.7(2) NM 03 C106 CKW 100.4(2) CIO CV H9 118.70 CllO C106 C109 110.4(3) CS CV H 9 I 18.70 Cl 07 C106 Cl 09 107.4(2) C9 CIO CU 117.1(2) 0107 Cl 07 N108 123.7(3) C9 CIO ClOi 121.8(2) 0107 C107 Cl 06 118.7(2) CU CIO CiOi 121.1(2) N108 C107 C106 117.5(2) C12 CU CIO 120.7(2) C106 C109 HlOA 109,50 Cl 2 CU Hll 119.70 C106 C109 HlOB 109.50 CIO CU Hll 119.70 HlOA C109 HlOB 109.50 CU C12 C13 123.1(2) C106 C109 HiOC 109.50 HlOA C109 HlOC 109.50 N22 (:222 C221 110.4(3) HlOB Cl 09 HlOC 109.50 C223 C222 H222 107.50 C106 CIiO HlIA 109.5() N22 C222 H222 107.50 Cl 06 Cl 10 HllB 109.50 C221 C222 H222 107.50 HI IA CllO HllB 109.50 C222 C223 H22D 丨 09,50 C106 Cl IO HllC !09.50 ('222 C223 H22E 109.50 HllA CHO HllC 109.50 H22D C223 H22E 109.50 HllB CMlO HlIC !09.50 C222 C223 H22F 109.50 C222 C221 H22A 109.?0 H22D C223 H22F 109.50 C222 C22i H22B 109.50 H22E C223 H22F 109.50 H22A C221 H22B 109.50 C24 C24I H24A 109,50 C222 C221 H22C 109.50 C24 C241 H24B 109.50 H22A (:221 H22C 109.50 H24A C241 H24B 109.50 H22B C221 H22C 109.50 C24 C241 H24C 109.50 C223 C222 N22 109.2(2) H24A C24i H24C： 109.50 C223 C222 C22i 114.4(3) H24B C24i H24C 100.50
[0093] 括号中的数字为以最低有效数位表示的标准不确定度。
[0094] _
[0095] 產&⑶C-0032的氢键距离(埃)及角度(°)
[0096] DH Λ D1H A1H D1A D-H-A N108 H181 .Ν25 0.84(3) 2.18(3) 2.956(5) 153(3)
[0097] 括号中的数字为以最低有效数位表示的标准不确定度。
[0098] _
[0099] ^6 ⑶ C-0032 的扭转角（。） 原子1 原子2 原子3 原子4 角度 C6A 07 CH C9 -159.00(0.%) C6A 07 C8 C13 18.03(1.02) C6B 07 CS C9 146.90(0.43) C6B 07 C8 C13 -36.07(0.55) C8 07 Γ6Λ C5 -56.21(1.75) C8 07 C6A C6B -!00.44(0.73) C6B 07 C6A C5 44.23(1.18) Γ8 07 C6B C5 76.44(0,66) C8 07 C6B C6A 110.82(0.79) C6A 07 C6B C5 -34.38(0.79) C14 NI C2 C3 1.11(0.26} Ci 4 NI C2 C2I -17^.14(0.20) C2 W C14 N4 -1,08(0.25) C2 NI C14 CI3 178.22(0.19) C5 N4 C3 C2 -173.93(0.25) C14 N4 C3 (：2 ?.04(?.27 ? C3 N4 C5 C6A 150.91(0.77) Γ3 N4 C 5 CiSB -162.96(0.36) CI4 N4 C5 C6A -21.69(0.85) Cl 4 N4 C 5 C6B 24.44(0.51) C3 N4 C14 NM 0-67(0.26) L 」C3 N4 CM C13 -178.57(0.22) C5 N4 C14 NI 174,23((127) C5 N4 C14 C13 -5.02(0.41} C21 N22 N23 C24 -0.77(0.26) C222 N22 N23 C24 177.11(0.23) N23 N22 C21 N25 0.72(0.26) N23 N22 C21 Γ2 179.54(0.21) C222 N22 C21 N25 -176.89(0.23) C222 N22 C2i C2 K93(0.39) Ν23 Ν22 C222 C221 -37.09(0.36) Ν23 Ν22 C222 C223 89.49(0.32) C21 Ν22 C222 C22I 14029(0,31) C21 Ν22 C22.2 C223 -93.13(0.34) Ν22 -Ν23 C24 Ν25 0.59(0.29) Ν22 Ν23 C24 C241 -177.71(0.24} C24 Ν25 C21 \22 -0.34(0.25) C24 Ν25 C21 C2 -179.20(0.21) C2I Ν25 C24 N 23 -0.17(0.29) C21 Ν25 C24 C241 178.12(0,24) (?02 N103 N104 C105 -0.66(0.28) Cl 06 N103 Nt 104 C "!05 -178.91(0.24) N104 N103 C102 ClOl 0,71(0,31) C106 N103 C102 CiOi 178.83(0.25) N104 N103 C106 Cl07 iOI.41iO.27) N104 NI03 C106 C109 -17.21(0.34) N104 N103 Cl 06 Cl 10 -138.10(0.26) C102 N103 Cl 06 C107 -76.54(0.33) C102 N103 C106 Cl 09 164.84(0.27) C102 N103 Cl 06 Cl 10 43.95(0.39) N103 N104 C105 CIOl 0.37(0.31) NI C2 C3 N4 -0.71(0.27) Γ21 Cl C 3 !75.38(0.21) NI Cl C21 N22 -238(035) NI C2 C21 N25 i 76.28( 0.21) C3 C2 C21 N22 -178.00(0.24) C? C2 C21 N25 0.66(0.37) N4 C5 C6A 07 58.13(1.55) N4 CS C6A C6B 101.57(0.73) C6B C5 C6A 07 -43.44(1.12) N4 C5 C6B 07 -64.58(0,61) N4 C 5 C6B C6A -98.72(0.88) C6A C5 C6B 07 34.15(0.87) 07 CS C9 CiO 178.08(0.27) C13 CS C9 CIO 0.93(0.44) 07 CS Cl 3 CI2 -179.58(0.26) 07 C8 C13 C14 -3.02(0.42) C9 C 8 C13 C12 -2.71(0.38) C9 CS Cl 3 CI4 173.85(0.24) L0101」 CS C9 CIO Cl I 1,38(0.43) C8 CO CIO CIO! -177,56(0.27) C9 CU) CU C12 -1.78(().42) CiOi CIO CU CM2 177.17(0.27) C9 CIO ClOl C102 152.07(0.31) C9 CIO CIOi C105 -25.95(0.47) Cl I ClO ClOl Cl02 -26.83(0.46) Cl I CIO ClOi Cl05 155.14(0.31) CIO CU C12 C!3 -0,10(0,46) CU C12 Cl 3 CS 2.35(0.39) Cl I Cl2 CH CM -174.60(0.25) CH C13 C14 NI -169.74(0.23) CS C13 CM M4 9.44(0.38) C12 C13 C14 NI 6.80(0.32) C12 Cl 3 C14 N4 -174,02(0,23) 07 (?6Λ C6B C5 147.30(0.64) C5 C6A C6B 07 _|47,30(0.64) CU) ClOi CIO?. N103 -17S,87(0,27) Cl 05 ClOI Cl 02 N103 -0.44(032) CiO ClOl Cl 05 N104 178.43(0.28} C102 CIOl C105 N104 (6).04(0.32) NM 03 C106 C107 0107 163.74(0.24) N103 C106 C107 N108 -20.22(036) Cl 09 C106 Cl 07 O i 07 -76.40(0.33) C109 Cl 06 Cl 07 NlOS 90.64(0.32) Cl 10 C106 C107 0107 43.24(0.37)
[0102] CilO Cl 06 Cl 07 N108 -140,72(030)
[0103] 括号中的数字为以最低有效数位表示的标准不确定度。
[0104] _
[0105] 物理形式筛选导致表征⑶C-0032的不同晶相、多晶型物、水合物及溶剂化物。GDC-0032的溶解度为在两种不同温度下在23种溶剂/溶剂混合物中测定（实施例2)。表征GDC-0032的多个多晶型物，包括(但不限于）以下：
[0106] 形式A甲醇化物
[0107]在含有甲醇的实验中观察到形式A。首先通过来自手工实验的固体分析对其进行 表征。形式A为结晶材料，如由PLM及XRPD(图2)所测定。在水中浆化形式A，产生可能混合的 水合物-甲醇化物。针对形式A收集的热数据(TGA)指示截至125 °C时6.5 %的重量损失，此与 1摩尔甲醇的损失一致(单甲醇化物的理论重量损失:6.5 % ) ASC显示在105-125°C的吸热 (max)，与TGA中的重量损失一致，之后显示在257°C的吸热，这归因于恪化物，如通过热台显 微镜所确认。在氮气或真空下使甲醇化物经热去溶剂化导致形成形式B，即使粒度减小。在 50 °C在水存在下浆化形式A，产生形式D单水合物。在室温的水浆液实验在干燥后产生形式A 与形式D的混合物。尚未明确潮湿材料为多种形式的混合物或混合的水合物-甲醇化物溶剂 化物。另外，部分去溶剂化形式A含有0.6摩尔甲醇。对由甲醇结晶的固体的单晶结构测定确 认形式A为单甲醇化物。图1显示GDC-0032形式A单甲醇化物溶剂化物的ORTEP图式。
[0108] 形式B非溶剂化物
[0109] 形式B为由多种溶剂衍生的且通过使多种溶剂化物去溶剂化得到的非溶剂化形 式。形式B也已鉴别为形式II。根据XRPD(图10)且根据PLM(偏振光显微术），形式B为结晶。图 11显示形式B的热分析(TGA)指示在高达200°C重量损失极少或无。在200°C与270°C之间观 察到较小重量损失(通常少于0.5%)，这可能与晶体中包括结晶溶剂有关。DSC分析指示在 257°C存在归因于熔化物的单一吸热事件。形式B的DVS数据显示低动态吸湿性，其中在95% RH增重低于0.3%。在解吸循环中观察到极小滞后。在DVS实验后，材料仍为形式B。在水中使 用或不使用吐温80浆化形式B，不导致转化为水合物。形式B在40 °C及75%RH进行加速稳定 性测试后未改变。图12显示形式B的FT-IR光谱。单晶结构测定确认形式B未经溶剂化或水 合。
[0110] 基于包括以下的准则，选择形式B多晶型物用于研发:形成与假多晶型物相反的多 晶型物的倾向、结晶度、热分析数据(例如熔点）、吸湿性、物理稳定性、固态化学稳定性、溶 解度、机械应力、粉末性质、大规模可制造性及配制方面。
[0111] 形式c单异戊醇化物溶剂化物
[0112] 形式C仅衍生自异戊醇且首先于5°C形成。其仅在结晶载体研究期间被观察到。根 据XRPD(图13)及PLM，其为结晶。关于未干燥湿润样品的TGA数据显示15%的总重量损失。将 此重量损失分为两个宽的步骤：由环境温度至l〇5°C观察到5.2%重量损失，且由105-1251： (异戊醇的bp: 130°C )观察到另外9.8%重量损失。单溶剂化物的理论重量损失为16.1 %且 半溶剂化物的理论重量损失为8.7%。形式C的晶体结构在Basel解析。形式D为单异戊醇化 物。在真空及60°C使形式C去溶剂化产生非溶剂化形式B 13DSC数据指示在109°C的强急剧吸 热，之后为在257°C大概由于形式B的熔化物所引起的强吸热。尚未获知在109 °C的吸热是否 为溶剂化物的不一致熔化物和/或并行转化为形式B。使用形式B在纯异戊醇中进行的浆液 互变实验表明形式B在约20°C或更高温度是优选的。在15°C或更低温度有利于溶剂化物形 式c。
[0113] 形式D单水合物
[0114]形式D为衍生自高水活度的水性溶剂的水合物。在纯水、含有吐温的水存在下或通 过在环境温度或60°C在水存在下温和研磨材料未由形式B观察到形式D。根据XRPD(图14)及 PLM，形式D为结晶。热数据（TGA)指示在高达100 °C的3.7 %的重量损失（单水合物理论值 3.3%)。进行一系列等温TGA试验以降低潜在湿法制粒问题的风险。在TGA中的脱水在KKTC 在15分钟内完成且在60 °C在40分钟内完成。DSC数据指示在94°C (开始）的吸热，对应于TGA 中的重量损失。分别在137°C及150°C观察到表观重叠熔化物重结晶，之后在257°C的可能是 形式B的熔化。未进行表征这些转变的进一步工作。进行单晶结构测定且确认形式D为单水 合物。
[0115] 形式E单三氟乙醇化物
[0116] 形式E衍生自含有2，2，2-三氟乙醇的溶剂系统且通过XRPD测定为结晶。在图15中 形式E的XRro数据与形式B叠加。形式E的热数据指示在高达160°C的温度的18.1%的重量损 失(单三氟乙醇化物的理论重量损失：17.8% )。该重量损失通过TG-MS鉴别为2，2，2-三氟乙 醇。DSC指示在122°C存在与去溶剂化有关的宽吸热以及在257°C存在急剧强吸热。假定但并 未证实的是，在257°C的吸热是由于形式B熔融所致。单晶结构解析确认形式E为单三氟乙醇 化物。
[0117] 形式F单乙腈溶剂化物
[0118]形式F衍生自乙腈及含乙醇的乙腈。如通过XRH)所示，形式F为结晶。在图16中形式 F的XRro数据与形式B叠加。TGA指示在高达240 °C的温度的7.7%的重量损失(单乙腈溶剂化 物的理论重量损失:8.2 % )。该重量损失通过TG-MS鉴别为乙醇及乙腈。DSC分析指示在124 °C与了6六中的重量损失有关的宽吸热，之后为在252°C的强吸热。假定但并未证实的是，在 252°C的吸热为由于形式B的熔融所引起。单晶结构解析确认形式F为单乙腈溶剂化物。详细 内容将单独报告。尽管基于单晶数据将形式F指定为单乙腈溶剂化物，但TG-MS数据指示可 能存在同型混合的乙醇-乙腈溶剂化物。
[0119] 形式G单乙醇化物
[0120] 形式G衍生自乙醇且通过XRPD显示为结晶且与形式E及形式K基本上同型（图17)。 热数据（TGA)指示在高达160 °C的温度的9.6 %的重量损失（单乙醇化物的理论重量损失： 9.1 % )。该重量损失通过TG-MS鉴别为乙醇。DSC分析指示在117 °C与乙醇损失有关的宽吸 热，之后为在256 °C的强吸热。在单独实验中证实形式G在减压加热后转化为形式B。形式G为 ⑶C-0032的单乙醇化物且与已确定晶体结构的三氟乙醇溶剂化物形式E同型。
[0121] 形式H单氯仿溶剂化物
[0122] 形式H为⑶C-0032的单氯仿溶剂化物。此形式仅通过单晶结构解析来鉴别。未收集 到表征数据。氯仿分子占据结构中的通道。
[0123] 形式I单四氢呋喃溶剂化物
[0124] 形式I衍生自四氢呋喃（THF)且通过XRH)发现为结晶且与形式E及形式G基本上同 型（图18)。热数据(TGA)指示在高达180 °C的温度的15.0%的重量损失(单THF溶剂化物的理 论重量损失：13.5% )。该重量损失通过TG-MS鉴别为THF ADTA指示在约130°C与重量损失及 形式转化有关的可能的吸热/放热组合，之后为在252°C大概由于形式B的熔化物所引起的 强吸热(max)。形式I为四氢呋喃溶剂化物且与形式E及形式G基本上同型。
[0125] 模式 J
[0126] 模式J材料衍生自由丙酮(模式Jl )、由丙酮-水(模式J2)及由THF(模式J3)的冷却 蒸发。根据XRPD，模式J材料为结晶（图19及20)。模式J2及模式J3同型。由于粉末图中的无序 及认定所述材料表示部分去溶剂化结构，已对所述材料指定模式。另外，尚未明确形式I与 模式J3之间的关系。模式Jl的热数据(TGA)指示在高达240°C的温度的6.8%的重量损失(半 丙酮溶剂化物的理论重量损失:5.9%，单丙酮溶剂化物的重量损失：11.2%)且大部分重量 损失出现在120 °C以下。该重量损失通过TG-MS鉴别为丙酮。模式J2的TGA指示在高达140 °C 的温度的4.7%的重量损失(半丙酮溶剂化物的理论重量损失:5.9%，单丙酮溶剂化物的重 量损失：11.2%)且大部分重量损失出现在100°C以下。该重量损失通过TG-MS鉴别为丙酮。 SDTA指示两种模式在252°C的强吸热(max)。模式J2的SDTA中的基线因存在过多噪音而无法 得出关于潜在形式转化的结论。模式J3由水性THF分离。未收集到表征数据。可能存在含有 THF的模式J的同型溶剂化物(混合溶剂化物）。模式J材料可由部分丙酮溶剂化物及潜在部 分THF溶剂化物构成。
[0127] 模式 K
[0128] 模式K由2，2，2-三氟乙醇分离。根据XRPD，该材料为结晶，但结晶度似乎低于其它 形式（图21)。可能存在少量形式E。另外，可能存在无定形或缺陷的相。因此，尚未将此材料 指定为一种形式。TGA数据指示在高达240°C的温度的19.8 %的重量损失且大部分重量损失 出现在140 °C之前。大部分材料通过TG-MS鉴别为主要为2,2，2_三氟乙醇（单三氟乙醇化物 的理论重量损失：17.8% ) JDTA数据指示在约125°C存在与重量损失有关的宽吸热且在252 °C存在大概由于形式B的熔化物所引起的强吸热(max)。该材料似乎由单三氟乙醇溶剂化物 构成。
[0129] 模式 L
[0130]模式L材料由异丙醇分离。XRI3D数据指示此材料与形式E、形式G及形式I基本上同 型。
[0131] 模式 M
[0132] 模式M材料由1，2_二氯乙烷(DCE)-硝基甲烷浆液及甲基乙基酮-庚烷蒸发以及使 用2-甲基四氢呋喃(2-MeTHF)-庚烷的冷却而分离。在粉末图之间略有差异，但尚未得知所 述差异是否表示数据的质量或所述差异是否表示固体结构之间的差异。另一衍生自1-丙 醇-DCE的材料具有与硝基甲烷-DCE衍生的材料类似的粉末图。通过TGA及DSC分析来自1，2-二氯乙烷-硝基甲烷的模式M材料。TGA指示截至132 °C发生的10.7 %的重量损失。未鉴别溶 剂性质（半二氯乙烷溶剂化物的理论值:9.7%，硝基甲烷溶剂化物的理论值：11.7% ) ASC 显示在115°C与TGA中的重量损失有关的宽吸热及在257°C可能与形式B的熔化物有关的强 吸热。还通过DSC分析由1-丙醇制备的材料。DSC数据指示在93°C存在宽吸热，之后在254°C 存在强吸热。宽吸热可能与重量损失有关，但未收集TGA数据。使用DCE及2-Me-THF进行单独 实验。DCE浆液的DSC数据指示在75°C (开始）的极宽吸热且在85°C及104°C具有两个可能最 大值，之后为在256 °C的强吸热。来自2-MeTHF的DSC数据指示在254°C的强吸热。在基线可能 存在弱转变，但由于样本大小极小所引起的不确定性，尚未标记出潜在转变。DCE的宽吸热 可能与重量损失有关，但未对任一样品进行TGA分析。模式M材料可表示一系列易于去溶剂 化的溶剂化物。
[0133] 模式 N
[0134] 在由乙醇-α，α，α-三氟甲苯(BTF)及1，2_二甲氧基乙烷-庚烷蒸发的自动化筛选中 观察到模式N材料。根据XRPD，所述材料为结晶。二甲氧基乙烷数据可能表示形式B粉末图。 对乙醇-BTF浆液进行热分析。TGA指示在高达200°C的极小重量损失。DSC分析指示在258°C 的单一吸热。尚未明确热数据表示来自与乙醇-BTF蒸发实验的粉末数据相同的材料的数 据。
[0135] X射线单晶和粉末衍射分析
[0136] 用市售分析软件对X射线粉末衍射(XRPD)图进行分析。XRH)可用于对不同晶相、多 晶型物、水合物或溶剂化物通过其独特衍射图进行指纹分析。沿横坐标(水平轴)绘制所谓 的2Θ值即入射束与衍射束之间的一系列角度。纵坐标(垂直轴)记录通过检测器暂存的散射 X射线的强度。一组峰用作结晶物质内的结晶单位晶胞的独特指纹。结晶单位晶胞为最小原 子级3D片段，其在整个晶体中的三个尺寸中周期性重复。所有结晶物质均通过其结晶单位 晶胞(且因此峰位置)来区分。通过比较所测量峰位置与数据库中保存的峰位置，可独特地 鉴别结晶物质。对于纯物质，所有峰的位置一般为界定构成结晶单位晶胞的基本平行六面 体的三个参数a、b、c及三个角度α、β、γ的函数。
[0137] 药物组合物和制剂
[0138] 式I的⑶C-0032的多晶型物形式可按照标准制药规范来配制以用于治疗哺乳动物 (其包括人）中过度增殖性病症的治疗性处置(其包括预防性治疗）的治疗性组合。本发明提 供了包含GDC-0032与一种或者多种药用载体、助流剂、稀释剂或者赋形剂的药物组合物。
[0139] 合适的载体、稀释剂、助流剂和赋形剂是本领域技术人员公知的，并且包括以下物 质，如碳水化合物、蜡、水溶性聚合物和/或者溶胀性聚合物、亲水性物质或者疏水性物质、 明胶、油、溶剂、水等。
[0140] 制剂可使用常规溶出和混合操作制备。通常将本发明化合物配制成提供容易可控 制药物的剂量且使患者能够依从所给出的方案的药物剂型。
[0141] 取决于用于给药药物的方法，用于施用的药物组合物(或者制剂)可按多种方式包 装。一般地，用于分配的物品包括容器，容器内存放有适当形式的药物制剂。合适的容器是 本领域技术人员公知的，并且包括以下物质，如瓶(塑料的和玻璃的）、小袋、安瓿、塑料袋、 金属圆筒等。容器还可包括防止不慎重取得包装中的内含物的的防干扰装置。此外，在容器 上具有描述容器中的内含物的标签。所述标签还可包括适当的注意事项。
[0142] 可制备⑶C-0032的多晶型物形式的药物制剂用于多种给药途径和类型，其与药用 稀释剂、载体、赋形剂、助流剂或者稳定剂(Remington's Pharmaceutical Sciences( 1995) 181±6(1;[1:;[011，]\&1〇1^?11131.(]〇.3381:〇11，？4)以冻干制剂、磨细的粉末剂或者水溶液剂形式 混合。配制可如下进行：在环境温度在适当的pH以及在适当的纯度与生理学可接受的载体 (即在采用的剂量和浓度下对受体是无毒性的载体)混合。制剂的PH主要取决于具体用途和 化合物的浓度，但范围可为约3至约8。
[0143] 所述药物制剂优选为无菌的。特别地，用于体内给药的制剂必须为无菌的。所述灭 菌通过滤过经无菌滤膜容易地完成。
[0144] 药物制剂通常可储存为固体组合物、片剂、丸剂、胶囊、冻干制剂或者水溶液剂。
[0145] 所述药物制剂将按照与良好医学实践一致的方式（即量、浓度、时间表、过程、媒介 物和给药途径)来确定剂量和给药。在此背景下考虑的因素包括所治疗的具体病症、个体患 者的临床情况、病症的起因、药物的递送位点、给药方法、给药的时间表和医学实践者已知 的其它因素。
[0146] 可接受的稀释剂、载体、赋形剂和稳定性在所用的剂量和浓度下对受体是无毒性 的，并且包括缓冲剂如磷酸盐、枸橼酸盐和其它有机酸;抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸； 防腐剂(如十八烷基二甲基苄基氯化铵;氯化六甲双铵;苯扎氯铵、苄索氯胺;苯酚、丁醇或 者苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，如对羟基苯甲酸甲酯或者对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯 二酚;环己醇;3-戊醇和间甲酚）；低分子量(少于约10个残基)多肽;蛋白质，如血清白蛋白、 明胶或者免疫球蛋白；亲水性聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮;氨基酸，如甘氨酸、谷氨酰胺、天 冬酰胺、组氨酸、精氨酸或者赖氨酸;单糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或 者糊精;螯合剂，如EDTA;糖如蔗糖、甘露醇、海藻糖或者山梨醇;成盐的抗衡离子，如钠;金 属络合物（例如Zn-蛋白质络合物）；和/或者非离子型表面活性剂，如TWEEN?包括吐温80、 PLUR0NICS?或者聚乙二醇(PEG)包括PEG400。活性药物成分还可包埋在通过例如凝聚技术 或者通过界面聚合制备的微胶囊中，例如在胶体药物递送系统(例如脂质体、白蛋白微球、 微乳液、纳米颗粒和纳米胶囊）中或者在巨乳液中，分别为羟基甲基纤维素或者明胶微胶囊 和聚甲基丙稀酸甲酯)微胶囊。所述技术披露于Remington' s Pharmaceutical Sciences 18th edition，（ 1995)Mack Publ · Co · ,Easton，PA。药物制剂的其它实例可于Liberman， H.A.and Lachman，L.,Eds.,Pharmaceutical Dosage Forms1Marcel Decker,Vol 3,2nd Ed. ,New York,NY中找到。
[0147] 药用助流剂可选自二氧化硅、粉状纤维素、微晶纤维素、硬脂酸金属盐、铝硅酸钠、 苯甲酸钠、碳酸钙、硅酸钙、玉米淀粉、碳酸镁、无石棉滑石、Stearowet C、淀粉、淀粉1500、 月桂基硫酸镁、氧化镁和其组合。
[0148] 所述药物制剂包括适于本申请详述的给药途径的制剂。制剂可适宜地以单位剂量 形式存在并可通过药学领域公知的任何方法制备。技术和制剂通常参见Remington's Pharmaceutical Sciences 18th Ed. (1995)Mack Publishing Co. ,Easton,PA。所述方法包 括使活性成分与构成一种或者多种助剂的载体结合的步骤。通常制剂如下制备:使活性成 分与液态载体或者微细分散的固态载体或者与这两种载体同时均匀和紧密的结合，然后必 要时，对产品进行成型。
[0149] 药物组合物可呈无菌注射制剂，如无菌注射水性混悬剂或者油性混悬液制剂形式 存在。该混悬液可使用上文已提及的合适的分散剂或者润湿剂和助悬剂根据本领域已知方 法配制。无菌注射制剂还可以是于无毒性的肠胃外可接受的稀释剂或者溶剂中的无菌注射 溶液或者混悬液，如于1，3_ 丁二醇中的溶液，或者制备为冻干粉末。可使用的可接受媒介物 和溶剂包括水、林格溶液和等张氯化钠溶液。此外，无菌不挥发性油通常可用作溶剂或者助 悬介质。出于该目的，可采用任何温和的不挥发性油，包括合成性甘油一酯或者甘油二酯。 此外，脂肪酸如油酸同样可用于制备注射剂。
[0150] 药物组合物的给药
[0151] 本发明的药物组合物可通过任何适于所要治疗病症的途径给药。适合的途径包括 口服途径、肠胃外途径(其包括皮下、肌内、静脉内、动脉内、吸入、皮内、鞘膜内、硬膜外和输 注技术）、经皮途径、直肠途径、鼻途径、局部途径(其包括口腔含服和舌下途径）、阴道途径、 腹膜内途径、肺内途径和鼻内途径。局部给药还可涉及经皮给药如经皮贴剂或者离子电渗 疗法装置的使用。药物的制剂在Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. ,(1995) Mack Publishing Co. ,Easton,PA中有讨论。药物制剂的其它实例可在Liberman,H.A.and Lachman,L·,Eds·,Pharmaceutical Dosage Forms,Marcel Decker,Vol 3,2nd Ed.,New York, NY中找到。对于局部免疫抑制性治疗，可通过损害内给药给予所述化合物，其包括在 移植前用所述抑制剂灌注或者以其它方式接触移植物。应当理解的是，优选的途径可随着 (例如)接受者的情况而变化。口服给予所述化合物时，它可以与可药用的载体、助流剂或者 赋形剂一起配制为丸剂、胶囊剂、片剂等。肠胃外给予所述化合物时，如下文详述，它可与可 药用的肠胃外媒介物或者稀释剂一起并以单位剂量可注射的形式配制。
[0152] 治疗人类患者的剂量可以为约Img至约IOOmg的⑶C-0032的多晶型物形式，诸如约 3mg至约20mg的所述化合物。取决于包括所述具体化合物的吸收、分布、代谢和排泄的药代 动力学(PK)和药效学(PD)性质，可每日一次(QD)、每日两次(BID)或者更频繁地给予剂量。 除此之外，毒性因素可影响剂量和给药用量方案。当口服给药时，所述丸剂、胶囊剂或者片 剂可每日两次、每日一次或者更不频繁地(如对于具体的时间周期，每周一次或者每两周或 者三周一次)摄入。所述用药方案可重复多个治疗周期。
[0153] 治疗方法
[0154] GDC-0032的多晶型物的不同之处可在于其体内生物利用度性质。因此，本文所披 露的多晶型物可用于制备具有不同特征的药物以用于治疗诸如癌症等过度增殖病症。这将 容许产生具有显著不同的吸附程度且C max值为约0.0ng/ml至5.0μg/ml的⑶C-0032制剂。这 导致制备由经历治疗的受试者极小吸收至显著吸收的GDC-0032组合物。本发明的一个实施 方案为通过选择适用于治疗患者的多晶型形式或该形式的混合物来调节GDC-0032的治疗 作用。举例而言，最具生物利用性的GDC-0032的多晶型形式可选自本文所披露的那些，这是 因为其对于经历治疗的受试者可更安全。
[0155] 本发明方法可用于用⑶C-0032的多晶型物治疗哺乳动物(例如人类）的过度增殖 病症诸如癌症。举例而言，所述方法可用于诊断、监测及治疗哺乳动物(例如人类)的多发性 骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌和/或结肠直肠癌。
[0156] 本发明方法可用于用⑶C-0032的多晶型物抑制异常细胞生长。
[0157] (1)GDC_0032的多晶型物与（2)化学治疗剂的治疗组合可用于治疗疾病、病症和/ 或障碍，包括(但不限于)特征为活化PI3激酶途径的那些。因此，本发明的另一方面包括可 通过抑制脂质激酶(包括PI3)来治疗疾病或病症的方法。在一个实施方案中，治疗实体肿瘤 或造血恶性肿瘤的方法包括将治疗组合作为组合制剂或交替给药于哺乳动物，其中该治疗 组合包含治疗有效量的GDC-0032及治疗有效量的一或多种选自以下的化学治疗剂:5-FU、 多西他赛、埃雷布林、吉西他滨、GDC-0973、⑶C-0623、紫杉醇、他莫昔芬、氟维司群、地塞米 松、帕妥珠单抗、曲妥单抗艾坦辛、曲妥单抗和来曲唑。可采用（I )GDC-0032的多晶型物与 (2)化学治疗剂的治疗组合来治疗过度增殖疾病或病症，包括造血恶性肿瘤、肿瘤、癌症及 肿瘤性组织以及癌前及非肿瘤性或非恶性过度增殖病症。在一个实施方案中，人类患者为 经治疗组合及药用载体、辅料或媒介物治疗，其中该治疗组合的GDC-0032或其代谢物以可 检测地抑制PI3激酶活性的量存在。
[0158] 造血恶性肿瘤包括非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大造血淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、外套细 胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、AML及MCL。
[0159] 本发明的另一方面提供用于治疗患有本文所述疾病或病症的哺乳动物（例如人 类)的该疾病或病症的药物组合物或治疗组合。还提供药物组合物在制备用于治疗患有本 文所述疾病及病症的温血动物(例如哺乳动物，例如人类)的该病症的药物中的用途。
[0160] 本发明的另一方面提供如本文所述药物组合物用于治疗选自以下的过度增殖病 症：多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌及结肠直肠 癌。
[0161] 本发明的另一方面提供如本文所述药物组合物用于治疗选自以下的过度增殖病 症的用途:多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌及结 肠直肠癌。
[0162] 本发明的另一方面提供如本文所述结晶性多晶型物作为治疗活性物质的用途。
[0163] 本发明的另一方面提供如本文所述结晶性多晶型物用于治疗选自以下的过度增 殖病症:多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌及结肠 直肠癌。
[0164] 本发明的另一方面提供如本文所述结晶性多晶型物用于制备用于治疗选自以下 的过度增殖病症的药物：多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺 癌、胰腺癌及结肠直肠癌。
[0165] 本发明的另一方面提供如本文所述结晶性多晶型物在治疗选自以下的过度增殖 病症中的用途:多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌 及结肠直肠癌。
[0166] 本发明的另一方面提供如上文所述的发明。
[0167] 组合疗法
[0168] ⑶C-0032的多晶型物可与某些化学治疗剂组合用于治疗过度增殖病症，包括实体 肿瘤或造血恶性肿瘤以及癌前及非肿瘤性或非恶性过度增殖病症。在某些实施方案中，将 GDC-0032的多晶型物与化学治疗剂在单一制剂中以用于同时给药组合的单一片剂、丸剂、 胶囊或溶液形式进行组合。在其它实施方案中，GDC-0032的多晶型物及化学治疗剂根据剂 量方案或疗程在单独制剂中以用于先后给药GDC-0032的多晶型物及选自以下的化学治疗 剂的单独片剂、丸剂、胶囊或溶液形式给药：5-FU、多西他赛、埃雷布林、吉西他滨、GDC-0973、GDC-0623、紫杉醇、他莫昔芬、氟维司群、地塞米松、帕妥珠单抗、曲妥单抗艾坦辛、曲 妥单抗和来曲唑。化学治疗剂具有抗过度增殖性质或可用于治疗过度增殖病症。GDC-0032 的多晶型物与化学治疗剂的组合可具有协同性质。药物组合制剂或给药方案中的化学治疗 剂优选具有与GDC-0032的多晶型物互补的活性，且使得其不会对彼此造成不利影响。治疗 组合中的所述化合物可以有效用于既定目的的量给药。在一个实施方案中，本发明药物制 剂包含GDC-0032及例如本文所述的化学治疗剂。在另一实施方案中，治疗组合为通过给药 方案来给药，其中治疗有效量的GDC-0032的多晶型物以每天两次至每三周一次(q3wk)的范 围给药，且治疗有效量的化学治疗剂为以每天两次至每三周一次的范围分开交替给药。
[0169] 本发明的治疗组合包含GDC-0032的多晶型物及选自以下的化学治疗剂:5-FU、多 西他赛、埃雷布林、吉西他滨、⑶C-0973、GDC-0623、紫杉醇、他莫昔芬、氟维司群、地塞米松、 帕妥珠单抗、曲妥单抗艾坦辛、曲妥单抗和来曲唑，其为分开、同时或先后用于治疗过度增 殖病症。
[0170] 所述组合疗法可作为同时或者先后用药方案给药。当先后给药时，所述组合可以 在两次或者更多次给药中给予。所述组合给药包括使用分开制剂的共同给药，以及以任一 次序的连续给药，其中优选有两种(或者所有)活性剂同时发挥它们生物学活性的时间段。
[0171] 任何上述共同给药药物的适合剂量为目前所使用的剂量并且可由于新近鉴定的 药物和其它化学治疗剂或者治疗组合作用(协同作用)而降低，如增加治疗指数或者减轻毒 性或者其它副作用或者后果。
[0172]在抗癌疗法的具体实施方案中，治疗组合可与作为辅助治疗的手术疗法和放射疗 法组合。本发明的组合疗法包括给药GDC-0032的多晶型物及一或多种其它癌症治疗方法或 模式。为了实现期望的组合治疗效应，应选择GDC-0032的多晶型物形式和其它一种或者多 种化学治疗剂的量和给药的相对时机。
[0173] 制品
[0174] 在本发明的另一个实施方案中，提供了用于治疗上述疾病和病症的含有⑶C-0032 的多晶型物的制品或者"试剂盒"。在一个实施方案中，所述试剂盒包含容器和GDC-0032的 多晶型物。所述试剂盒还可包含附在容器上或者容器中的标签或者包装说明书。术语"包装 说明书"用来指通常包括在治疗产品的市售包装中的说明书，其含有关于适应症、用法、剂 量、给药、禁忌症和/或者注意事项的信息，这些信息涉及所述治疗产品的使用。合适的容器 包括，例如，瓶、小瓶、注射器、发泡包装等。容器可从多种材料(如玻璃或者塑料)形成。容器 可装有有效治疗所述病症的GDC-0032或其制剂，并可具有无菌入口（例如容器可为静脉注 射溶液袋或者具有可由皮下注射针头刺穿的塞子的小瓶）。在组合物中至少一种活性药物 是GDC-0032的多晶型物形式。标签或者包装说明书指示所述组合物用于治疗选择的病症如 癌症。在一个实施方案中，标签或者包装说明书指示包含式I的化合物的组合物可用于治疗 起因于异常细胞生长的病症。标签或者包装说明书还可指示所述组合物可用于治疗其它病 症。可供选择地或者另外地，所述制品还可包含第二种容器，所述容器包含药用缓冲液，如 抑菌性注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲生理盐水、林格溶液和葡萄糖溶液。试剂盒还可包括从 商业和使用者角度看是期望的其它物质，包括其它缓冲液、稀释剂、滤器、针头和注射器。
[0175] 试剂盒还可包含给药⑶C-0032的多晶型物形式以及第二种药物制剂（如果存在） 的说明。例如，若试剂盒包含第一种组合物(含有GDC-0032)和第二种药物制剂，则试剂盒还 可包含将第一种和第二种药物组合物同时、先后或者分开给予需要所述制剂的患者的说 明。
[0176] 在另一实施方案中，试剂盒适于递送固态口服形式的⑶C-0032的多晶型物形式， 如片剂或者胶囊剂。这样的试剂盒优选包括多个单位剂量。所述试剂盒可以包括针对预期 用途为目的的剂量卡片。这样的试剂盒的一个实例是"泡罩包装"。泡罩包装在包装工业中 是公知的，并且广泛用于包装药物单位剂量形式。如果期望的话，可提供记忆辅助装置，其 可呈例如数字、字母或者其它标记形式，或者具有日历插入物，所述记忆辅助装置指定在可 对所述剂量进行给药的治疗时间表中的天数。
[0177] 根据一实施方案，试剂盒可包含(a)在其中含有⑶C-0032的多晶型物形式的第一 个容器；以及任选地(b)在其中含有第二种药物制剂的第二个容器，其中所述第二种药物制 剂包含具有抗过度增殖活性的第二种化合物。可供选择地或者另外地，所述试剂盒还可包 含第三个容器，其包含药用缓冲液，如抑菌性注射用水(BWFI )、磷酸盐缓冲生理盐水、林格 溶液和葡萄糖溶液。其还可包括从商用和使用者角度来看是期望的其它物质，包括其它缓 冲液、稀释剂、滤器、针头和注射器。
[0178] 在试剂盒包含⑶C-0032的多晶型物形式和第二种治疗药物（即化学治疗剂）的组 合物的某些其它实施方案中，所述试剂盒可包含用于容纳分开的组合物的容器，如分开的 瓶或者分开的箱包装，然而，分开的组合物还可容纳在单一的未分开的容器中。典型地，试 剂盒包含给药分开的组分的说明。当分开的组分优选以不同剂量形式(例如口服和肠胃外） 给药时，当以不同剂量间隔给药时，或者当对联用的单独组分进行滴定对主治医师是期望 之时，试剂盒形式是特别有益的。
[0179] 实施例
[0180] 实施例1⑶C-0032的分离和理化特征
[0181] GDC-0032根据US 8242104和2013年3月 13 日提交的〃PROCESS FOR MAKING BENZOXAZEPIN⑶MP0UNDS〃，US 61/779619来制备，其各自以引用方式并入本申请。将 1.151^、2.50摩尔粗的2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1!1-1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并 [f]咪唑并[1，2-(1][1，4]氧氮杂草-9-基)-1!1-吡唑-1-基)-2-甲基丙酰胺(60(：-0032，式1) 于Me0H(6L，5vol)中的浆液加入至50L玻璃反应器中。将额外MeOH(24L，21 vol)添加于混合 物中，然后将其加热至65°C。获得均匀混合物。经添加埠将Si-thiol (Silicycle，Inc.， 0.23kg，20%wt)添加至溶液中且将混合物搅拌3小时。然后经Aurora过滤器(夹套温度=60 °C)将其热过滤，精致过滤并直接转移至具有减压的第二50L反应器中。然后将溶液加热回 到65 °C内部温度（IT)。使均匀溶液冷却至54°C并在向反应器施加减压的情况下添加 GDC-0032晶种（128，1%￥〇/]\^0!1(501^)。然后使混合物经16小时冷却至20°(：。然后经41^〇瓜过 滤器过滤固体并在80 °C干燥72小时，得到92 Ig、80 %产率的呈甲醇化物溶剂化物(根据XRPD 为形式A)的⑶C-0032并将其转移至预称重的Charge-point袋中。
[0182] 在分离器中将固体在IPAc(8L，7vol)中浆化并转移至干净10L反应器中。将混合物 在60°C(IT)搅拌lh。然后将固体经Aurora系统过滤并在80°C (夹套)干燥96h。取出⑶C-0032 样品并通过GC分析（IPAc=l%)。为尝试更有效的干燥，将API转移至分离器中的两个玻璃 托盘并用干燥袋密封，之后在设定为l〇〇°C的真空烘箱中干燥161ι<^ε(ΙΡ(： :〇1269〇ν2)显示 仍存在1 %溶剂。该方法提供760g(68%校正产率，68%wt，99.9%纯度(经LC))白色固体(根 据XRI3D为形式B )。
[0183] 将粗的⑶C-0032(340.7g)加入至2L HDPE瓶中并用0.8L异戊醇（IAA)浆化。将浆液 转移至20L反应器中并用6.7L圆底烧瓶（总计22vol)稀释。加热白色浆液直至观察到溶液 (内部温度上升至118°C，然后冷却至109°C)。将溶液精致过滤(0.2μΜ过滤器）。烧瓶配备有 顶置搅拌器并将滤液在异戊醇（344mL，21vol)中浆化。使混合物温热至95°C (内部)直至固 体溶解。加入炭（10?1:%，0.168)及3;[1;^5^16 1:11；[01(10￥1:%，0.168)于异戊醇（1￥01，161]11^) 中的浆液并将混合物在9〇-95°C搅拌lh，然后过滤(经Celite li'垫）。使透明琥珀色溶液冷却 至73°C (种晶温度范围=70±5°C)并添加⑶c-0032晶种（10wt%，0.16g)。关闭加热套的温 度并使混合物在搅拌(200rpm)下冷却至室温过夜。在17hr后，过滤白色固体，以缓慢重力过 滤开始，然后施加真空。将固体抽吸干燥并混合20min直至获得自由流动的粉末。在烘箱干 燥前的粗重量=16g。将固体在100°C烘箱干燥24h，然后采样用于测试。继续在KKTC再干燥 NMR(DMS0 d6)58.38(t) ,8.01(s) ,7.87(s) ,7.44,7.46(d) ,7.36(s) ,7.18(br s), 6.81(br s),5.82(m),3.99(s),2.50(s),2.26(s),1.75(s),1.48,1.46(d).
[0184] ⑶C-0032API为白色至灰白色固体。如由其XRH)图的尖峰所确认，其为结晶且熔点 为258°C。迄今已鉴别出⑶C-0032游离碱的若干种物理形式，包括无水形式(形式B)、水合物 及若干种溶剂化物。形式B的熔点范围为256°C至258°C。迄今已在API方法中一致地产生形 式B。在高湿度中暴露至少6个月时，形式B不显示出任何形式变化。另外，由API的持续稳定 性研究未观察到物理形式转化。因此，确定形式B为用于进一步研发的最适宜结晶形式。在 API合成及稳定期间监测结晶形式的再现性及稳定性。GDC-0032为不吸湿性的，其在动态吸 湿实验中在95 %RH增重少于0.2 %。⑶C-0032为弱碱，其pKa值为3.19且log P为2.5，如由电 位滴定所测定。
[0185]实施例2溶解度评估
[0186]在不同缓冲剂及制剂媒介物中汇总了作为pH函数的⑶C-0032API的溶解度特征。
[0188] 实施例3⑶C-0032制剂和制片
[0189] 通过碾压法(He等人（2007) Jour · of Pharm· Sci ·，96(5): 1342-1355)用包括乳糖、 微晶纤维素（AVICEL' PH 01，FMC BioPolymer, 50 μΜ颗粒）、交联羧甲基纤维素钠（ Ac-T>i-S〇l?，FMC BioPolymer)及硬脂酸镁的赋形剂将经纯化的2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲 基-1H-1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1，2-(1][1，4]氧氮杂罩-9-基)-1!1-吡 P坐-1-基)-2_甲基丙酰胺1(⑶C-0032)以片剂形式进行干法制粒配制。
[0190] ^7 ⑶C-0032片剂3mg API的配方
[0192] a (?C-0032的量根据API的效力来调节。
[0193] lIt晶纤维素的量基于⑶C-0032的实际量来调节。
[0194] 实施例4⑶C-0032的结晶
[0195] ⑶C-0032的溶解度在23种溶剂/溶剂混合物中在两种不同温度测定:无水乙醇、甲 醇、异丙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、四氢呋喃、2-丁酮、甲醇/水(50/50)、2,2,2_三氟 乙醇（TFE)、2-丁酮、TFE/乙酸乙酯（50/50)、TFE/丙酮（50/50)、TFE/水（50/50)、乙腈、乙腈/ 水（50/50)、丙酮/水（50/50)、叔丁基甲基醚、正庚烷、乙醇/乙酸乙酯（50/50)、乙醇/丙酮 (50/50)、甲醇/水(90/10)、乙醇/乙腈(50/50)。除了乙酸乙酯、乙酸异丙酯、四氢呋喃、叔丁 基甲基醚及正庚烷之外，GDC-0032在所有上述溶剂/溶剂混合物中均可溶。
[0196] 对于每一实验，在40mL小瓶中称量约5-1 Omg材料。在2，2，2-三氟乙醇(TFE)的情形 中，由于GDC-0032在此溶剂中的高溶解度，使用约40mg。在每一小瓶中，以50yL的步幅将溶 剂添加至固体直至溶解或直至达到〇.2mg/mL的最小浓度。在两个温度即室温(RT)及较高温 度(选择T max = 50或70°C以使得溶剂的沸点高于Tmax)目测评估溶解。通过HPLC测量悬浮液的 溶解度。
[0197] 实施例5结晶筛选
[0198] 进行高通量结晶筛选。在65 °C将⑶C-0032溶解于N，N-二甲基甲酰胺中。将DMF溶液 分配至4个96孔板中。蒸发溶剂并用16种不同纯溶剂及80种溶剂混合物替代。溶剂混合物通 过添加水、乙醇、1，2-二氯乙烷或庚烷的梯度来产生。典型比例为800: 0、640:160、480:320、 320:480、160:640、0:800。使一个板在氮气及室温蒸发(蒸发）。将作为抗溶剂的环戊基甲基 醚添加至第二板的孔中（析出）。将两个板加热至65°C并使一个板经12小时冷却至10°C (冷 却板)且将第二板在65 °C保持1周（浆液在65 °C板）。弃去溶剂并通过偏振光显微术(PLM)分 析所得固体。通过X射线粉末衍射（XRPD)分析根据PLM呈现结晶的固体。然后通过拉曼 (Raman)光谱法分析具有不同粉末图的材料。
[0199] 单晶:获得形式A、形式B、形式C、形式E及形式K的单晶结构解析。
[0200] ⑶c-0032在有机溶剂中的热循环:在8mL小瓶中称量约60mg起始材料。在TFE/乙酸 乙酯（50/50)、甲醇、乙醇及丙酮中制备4种浆液。使浆液在60°C与20°C之间或在50 °C与20°C 之间进行热循环。冷却及加热速率为l〇°C/hr且在每一温度的保持时间为30min。将该循环 重复约5次。在热循环结束时，观察到不充足固体并蒸发溶剂。通过XRPD及数字成像测量固 体。
[0201 ] 种晶实验:使用10 % w/w及20 % w/w晶种的实验以8mL规模使用60mg起始材料来进 行。在TFE/乙酸乙酯（50/50)及甲醇中制备两种浆液并将其加热至60°C。在1小时平衡时间 后，在60 °C过滤浆液。随后在60 °C将晶种添加至滤液并使混合物以5 °C /h的冷却速率冷却至 5°C且在该温度陈化10小时。分离并干燥固体且蒸发母液。通过XRH)及数字成像分析所有固 体。
[0202]使用热过滤的冷却-蒸发实验:在50°C在乙醇及丙酮中制备两种浆液且在1小时平 衡时间后，在相同温度过滤浆液。随后使饱和溶液以5 °C /h的冷却速率冷却至5 °C并在此温 度陈化过夜。在陈化后未观察到固体并蒸发溶剂。通过XRro及数字成像分析所获得的固体。
[0203] ⑶c-0032在高温在甲醇中的溶解度:测量⑶c-0032在45 °C及55 °C在甲醇中的溶解 度。用约15mg起始材料及500mL甲醇制备两种浆液。随后将浆液置于两个各自为45°C及55°C 的烘箱中。在24小时的平衡后，目测检查两种浆液。在两种情形中溶解均不完全。由母液分 离固体且以湿法及干法两种方式收集以用于XRro及数字成像。蒸发母液且也通过XRro及数 字成像分析固体。
[0204]在6种溶剂中进行在种晶的情形下GDC-0032在有机溶剂中的热循环，其中饱和溶 液在60°C (就丙酮而言所施加的最高温度为50°C)制备。在数小时平衡时间后，在Tmax过滤浆 液。在过滤后，将数mg起始材料添加至各饱和溶液中，然后以5°C/h的冷却速率由T max热循环 至20 °C并以10 °C /h的加热速率回到Tmax且在Tmax及20 °C的保持时间为15min。对所述实验不 施加搅拌。将所述循环重复13次至17次。在实验中施加热循环后，将溶液在5°C陈化3天。在 实验结束时，认为析出的固体不足以进行分析且决定缓慢蒸发溶剂。通过XRPD、数字成像、 Ma I vern粒度分析仪及显微术分析所得固体。
[0205]在种晶的情况下使用3种溶剂及3种抗溶剂进行向GDC-0032溶液中的蒸汽扩散。对 于这些实验，在室温在3种溶剂中制备3种饱和溶液。在数小时平衡时间后，在室温在SmL小 瓶中过滤浆液。将数mg起始材料添加至这些饱和溶液中（晶种）。然后将具有晶种的SmL小瓶 置于含有3mL抗溶剂的40mL小瓶中。将溶液在抗溶剂蒸汽中暴露两周。在实验结束时，认为 析出的固体不足以进行分析且决定缓慢蒸发溶剂。通过XRH)及数字成像分析所得固体。 [0206] 形式A的制备:将2mL甲醇添加至189mg GDC-0032中。将悬浮液加热至65°C并保持 30分钟，然后使其冷却至:TC并搅拌过夜。经过滤收集固体且在仍用溶剂润湿时分离。
[0207] 形式A的制备:将含有585.4mg化合物(批号978822,形式B)及IOmL甲醇的悬浮液在 封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动6天。通过离心使产物沉降并用移液管移除母液。在湿的 阶段分析晶体。
[0208] 形式B单晶的制备:GDC-0032的适于单晶结构确定的晶体通过将⑶C-0032溶解于 乙酸乙酯中且随后使用戊烷进行蒸汽扩散来获得。
[0209] 形式C的制备:将⑶C-0032(103.8mg)在90°C部分溶解于热异戊醇(5mL)中。使悬浮 液缓慢冷却至5°C并在5°C浆化2天。通过过滤收集固体并在密封的X射线保持器中在用溶剂 润湿时分析。
[0210]形式C的制备:在封闭的玻璃小瓶中使4.98g化合物(批号BS1302SA01，形式B)在95 °C溶解于166.7g异戊醇中。在搅动下通过将小瓶浸至水/冰浴中快速冷却澄清溶液。将所得 悬浮液在5 °C搅动9天。通过过滤分离晶体并在环境条件下干燥4天。
[0211] 形式D的制备:将⑶C-0032(98.7mg)在正丁醇水溶液（l:lv:v，lmL)中浆化3天。在 密封的容器中经过滤器通过微量离心收集固体。在样品仍用溶剂润湿时收集其XRH)分析。 [0212]形式D的制备:在封闭的玻璃小瓶中将388.7mg化合物(批号978822,形式B)在75°C 溶解于7.4mL正丙醇/水混合物（10% v/v水）中。在8h内将澄清溶液线性冷却至22°C。在选取 用于单晶X射线分析的晶体后，搅动剩余悬浮液，之后通过过滤分离晶体并在40°C/400毫巴 干燥16h。
[0213]形式E的制备:在封闭的玻璃小瓶中将521. Img化合物(批号978822,形式B)在75°C 溶解于1.5mL三氟乙醇中。在受控冷却后，将澄清溶液于10°C储存。在8天后获得单晶。在选 取用于单晶X射线分析的晶体后，在环境温度搅动剩余悬浮液过夜，之后打开小瓶以容许溶 剂在环境条件下完全蒸发。晶体不经进一步加工即进行分析。
[0214]形式￡的制备：将0)(：-〇032(59.611^)于2,2,2-三氟乙醇（11^)及乙酸乙酯（11^)中 的浆液加热至60°C并在该温度保持1小时。趁热过滤浆液，添加⑶C-0032形式B (6mg)且使悬 浮液以5 °C /小时的速率冷却至5 °C并在该温度保持10小时。收集固体并通过XRH)分析。 [0215] 形式F的制备：通过在60°C在乙腈（7mL)中浆化GDC-0032形式B(30mg)而在60°C制 备⑶C-0032于乙腈中的饱和溶液。在数小时平衡时间后，在T maxS滤浆液。在过滤后，将数mg ⑶C-0032添加至各饱和溶液中，然后以5°C/h的冷却速率由1"?热循环至20°C并以10°C/h的 加热速率回到T max且在Tmax及20°C的保持时间都为15min。对这些实验不施加搅拌。循环13 次。在实验中施加热循环后，将溶液在5°C陈化3天。在实验结束时，认为析出的固体不足以 进行分析且决定缓慢蒸发溶剂。通过XRPD、数字成像、Malvern粒度分析仪及显微术分析所 得固体。
[0216] 形式F的制备:将含有400.2mg化合物(批号978822，形式B)及7.2mL乙腈的悬浮液 在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动24天。通过离心沉降产物并用移液管移除母液。将晶 体在50 °C/5毫巴干燥2天。
[0217] 形式G的制备:将GDC-0032形式B(11.9mg)溶解于无水乙醇（5.5mL)中并在真空及 室温蒸发。
[0218] 形式H的制备:将⑶C-0032(20.5mg)在室温溶解于氯仿(600yL)中。使溶液静置6个 月同时缓慢蒸发溶液，得到适于结构分析的晶体。
[0219] 形式H的制备:将含有385.8mg化合物(批号978822,形式Β)及6.9mL氯仿的悬浮液 在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动24天。通过离心使产物沉降并用移液管分离母液。使 母液在环境条件下完全蒸发。晶体不经进一步加工即进行分析。
[0220] 形式J的制备:将含有457.6mg化合物(批号978822,形式B)及8.2mL二噁烷的悬浮 液在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动24天。通过离心使产物沉降并用移液管移除母液。 将晶体在50 °C /5毫巴干燥15分钟。
[0221] 形式K的制备:在封闭的玻璃小瓶中将302.7mg化合物(批号978822,形式B)在环境 温度溶解于5.4mL乙酸中。向澄清溶液中添加4.2mL正庚烷。将所得悬浮液在环境温度搅动 过夜。通过离心使产物沉降并用移液管移除母液。通过离心使产物沉降并用移液管移除母 液。在湿的阶段分析晶体。
[0222] 形式L的制备:在封闭的玻璃小瓶中将199.7mg化合物(批号978822,形式B)在90 °C 溶解于12.OmL异丙醇中。在8h内将澄清溶液线性冷却至22°C。在选取用于单晶X射线分析的 晶体后，将剩余悬浮液在环境温度搅动过夜。晶体不经进一步加工即进行分析。
[0223] 形式M的制备:将含有470.5mg化合物(批号978822，形式B)及8.5mL二氯甲烷的悬 浮液在封闭的玻璃小瓶中在5°C搅动15天。通过离心使产物沉降并用移液管移除母液。将晶 体在环境条件下干燥过夜。
[0224] 形式N的制备:将含有389.5mg化合物(批号978822，形式B)及7. OmL硝基乙烷的悬 浮液在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动24天。通过离心使产物沉降并用移液管移除母 液。将晶体在50 °C /5毫巴干燥2天。
[0225] 形式0的制备:将含有480.7mg化合物(批号978822，形式B)及8.7mL四氯化碳的悬 浮液在封闭的玻璃小瓶中在60°C搅动14天。通过离心使产物沉降并用移液管移除母液。将 晶体在50 °C /5毫巴干燥17h。
[0226] 形式P的制备:将含有469.8mg化合物(批号978822，形式B)及8.5mL丙腈的悬浮液 在封闭的玻璃小瓶中在60°C搅动14天。通过离心使产物沉降并用移液管移除母液。将晶体 在50°C/5毫巴干燥17h。
[0227] 形式Q的制备:将含有488.6mg化合物(批号978822，形式B)及8.8mL2-甲氧基乙醇/ 水85/15(v/v)的悬浮液在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动24天。通过离心使产物沉降并 用移液管移除母液。将晶体在50 °C /5毫巴干燥15分钟。
[0228] 形式R的制备:将含有389.5mg化合物(批号978822，形式B)及7. OmL硝基乙烷的悬 浮液在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动24天。通过离心使产物沉降并用移液管移除母 液。将晶体在50 °C /5毫巴干燥2天。
[0229] 形式S的制备：将含有387.2mg化合物（批号978822,形式B)及7. OmLl，2_二氯乙烷 的悬浮液在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动24天。通过离心使产物沉降并用移液管移除 母液。在环境条件下干燥晶体。
[0230] 形式T的制备:将含有397.5mg化合物(批号978822，形式B)及7.2mL正丙醇的悬浮 液在封闭的玻璃小瓶中在5°C搅动6周。通过离心使产物沉降并用移液管移除母液。将晶体 在正丙醇存在下在40 °C/400毫巴干燥5h。
[0231] 形式U的制备:在封闭的玻璃小瓶中将235.6mg化合物(批号978822，形式B)在85°C 溶解于9.4mL异丁醇中。在8h内将澄清溶液线性冷却至40°C。在选取用于单晶X射线分析的 晶体后，将剩余悬浮液在环境温度储存4天。使溶剂在环境条件下完全蒸发并将晶体在50 °C/5毫巴干燥27h。
[0232] 形式V的制备:将含有498. Img化合物(批号978822，形式B)及9.0mL2-甲基四氢呋 喃的悬浮液在封闭的玻璃小瓶中在20°C搅动6周。通过离心过滤收集晶体并在湿的状态下 分析。
[0233] 形式W真多晶型物的制备:将含有330mg化合物(批号978822,形式B)及6. OmL二噁 烷/水l/l(v/v)的悬浮液在封闭的玻璃小瓶中在20至25°C搅动5周。通过离心过滤分离晶体 并在70°C/5毫巴干燥2天。
[0234] 形式X水合物的制备:将含有498.9mg化合物(批号978822,形式B)及IOmL甲醇的悬 浮液在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动4天。通过离心使产物沉降并用移液管移除母液。 将晶体在50°C/5毫巴干燥2天。
[0235] 形式Y: X半水合物的制备:将含有498.9mg化合物(批号978822，形式B)及IOmL甲醇 的悬浮液在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动4天。通过离心使产物沉降并用移液管移除 母液。将晶体在50 °C/5毫巴干燥2天，然后在环境温度在水性LiCl悬浮液上（11 %RH)储存20 天。在分析期间，将周围湿度保持在11 %RH。
[0236] 形式Z的制备:将含有488. Img化合物(批号978822，形式B)及8.8mL二异丙基酮的 悬浮液在封闭的玻璃小瓶中在5°C搅动15天。通过离心使产物沉降并用移液管移除母液。在 环境条件下干燥晶体。
[0237] 形式AA二噁烷半溶剂化物的制备：将含有426. Omg化合物(批号978822,形式B)及 7.7mL二噁烷/水I /1 (v/v)的悬浮液在封闭的玻璃小瓶中在环境温度搅动5周。通过离心使 产物沉降并用移液管移除母液。将晶体在环境温度/500毫巴干燥30分钟。
[0238]形式AB真多晶型物的制备：在封闭的玻璃小瓶中将4.98g化合物（批号 BS1302SA01，形式B)在95°C溶解于166.7g异戊醇中。在搅拌下通过将小瓶浸至水/冰浴中快 速冷却澄清溶液。将所得悬浮液在5°C搅动9天。通过过滤分离晶体并在50Γ/5毫巴干燥2 天。
[0239] 形式AC的制备:在封闭的玻璃小瓶中将200.8mg化合物(批号978822,形式B)在75 °C溶解于7.7mL四氢呋喃中。在IOh内将澄清溶液线性冷却至20°C。在选取用于单晶X射线分 析的晶体后，将剩余悬浮液在环境温度搅动过夜。晶体不经进一步加工即进行分析。
[0240] 实施例6 XRPD分析方法
[0241]表8⑶C-0032的晶体数据和数据采集参数
[0244] aOtwinowski Z.&Minor，W.Methods Enzymol.，（1997)，276,307.
[0245] ^ OTC-0032形式A的晶体数据和数据采集参数
[0246] 晶群 单斜 分子式 C25H32Ns03(C24H 28N802+CH3DH) 式量 492.59 空间群 P I 21/c l(No. 14) a, A 16.1478(8) b, A 1().9()55(4) c, A !4.9317(7) γ,° 103.399(3) V, A3 2557.9(2) Z 4 d;!'.，g*cm') 1.279 晶体K寸，mm 0.20x0.20x0.08 温度,K 295. 辐射(波长,A) Cu K"(l.54184) 单色仪 共焦光学 线性吸收系数,mirf1 0.714 采用的吸收校正 经验 逢射因子，min, max 0.81. 0.94 衍射仪 Rigaku RAP丨D-Ii h，l<, 1范別 -丨8至17,-丨2至0, 0盖17 別范:韦]，° 5.63-126.63 马赛克性,° 0.42 使用的程序 SHELXTL Fooo I ()48.0 加权 l/[a2(Fo2)+i0.0715P)2+0.8020F] 其中 P=(Fo2+2Fc2)/3 采集的数据 25557 独特的数据 4138 Rinl 0.035 精制中使用的数据 4138 R因子计算中使用的截止值 ΡΛ2,〇σ(Ρ。2) 具有1>2.0(1)的数据 3504 变量数目 343 最终循环中的最大移位/esd 0.00 R(F0)^ 0.047 Rw(Fa") 0.126 拟合优度 1.042
[0247] ^lO⑶C-0032形式D的晶体数据和数据采集参数
[0248] 分子式 C24H3nNx〇3(C 24H2SNs〇2+H2:〇> 式量 478.56 空间群 P I 2i/c I (No. L4) a" A 5.80760(10) b, A 20.2279(4) c, A 20.9696(15) b, ° 91.265(6) V, 2462.82(19) Z 4 d ；： , g*cnv 1.291 晶体尺寸，mm 0.20x0.18x0.13 温度，K ] 50. 辐射(波长，A) Cu K?(1.54184) 单色仪 共焦；4学 线性吸收系数，mm_1 0.727 采用的吸收校正 经验 透射因子，min, max 0.80, 0.91 衍射仪 RigakuRAPID-II h, k,丨范围 -6 至 6,-23 至 24,-23 至 24 2q 范围，。 4.21-133.16 马赛克性,° 1.25 使用的程序 SHELXTL F000 1 0 1 6.0 加权 1/[s2(Fo:)+(0.0724P)2+0,9585P] 其中 I)=(Fo2+2Fc:)Z3 采集的数据 22410 独特的数据 4322 Rin 0.024 精制中使用的数据 4322 R因子计算中使用的截止值 Fc2>2,0s(F。2).. 具有I>2.0s(I)的数据 3631 精制的消光系数 0.0048 变量数目 338 最终循环中的最大移位/esd 0.00 R(F0) 0.051 Rw(Fcr) 0.135 拟合优度 1.094
[0249] GDC-0032形式E的晶体的晶体数据和结构精制 经验式 c24h2Snxo2*c 2h3f ;0 式量 560.59 T[K] 296(2) Γ ? λ[Α] 1.540596
[_ 单斜 空间群 P21/c 晶胞尺寸 a[A] 13.22417(50) b[A] 14.89733(56) c[A] 13.81589(34) β[°] 90.7722(18} V[A'] 2721.55 Z ， 4 D^g/crn'] 1.,36.7 9.07021(53)
[0251] F(OOO) 1176 毛细管大小[mm2] 8.〇χ〇.5 数据采集的Θ范围 2-25 Rexp 0.57 Rw 4.34 Rp 2.72 RBragg 2.22 GOF 7.64
[0252] ^12形式F的晶体数据和结构精制 经验式 C^H2sNsOfC2H 3N Fvv 501.60 T[K] 296(2) λ[Α] 0.71073 晶系 玉斜 空间群 P-I 晶J包尺寸 a[A] 10.345(2) b[A] I 1.444(2) c[A] 12.189(3) α[?] 75.216(7) β[°] S3.063(7) γ[°] 69.876(9) V[A;] 1309.2(5) 7 2
[0253] , D0[g/cm ] 1.272 0.086 F(OOO) 532 晶体尺寸[mnr;] 0.4〇χ().25χ〇.20 数据采集的θ范围[。] 3.3-->30 收集的反射 .1.162.8 独立的反射 7543[Rim=0.0236] 至θ=30°的完全性[%] 98.8 max.和 min.遗射 0.9831 和0.9666 数据/限制/参数 7543/0/429 对F2的拟合优度 1.031 最终R指数[丨>2σ(Ι)] RI =0,0596, wR2=0.1477 R指数(所有数据） RI =0,0809, wR2=0.1661 消光系数 0.022(12)
[0254] ^13⑶C-0032形式H的晶体数据和数据采集参数 Pn9t-J--I 分子式 C24.93H28.93CI2.8QN8O2 _]式量 571.80 空间群 P I 21/c 1(Νο· 14) a, A 14.8758(5) KA 14.8513(5) c, A 13.6694(6) b, 。 1Π .253(8) V, A3 2814,53(18) Z 4 d. i_，g*cm..' 1.349 品体尺寸，mni 0.20x0.12x0.04 温度,K 2%. 辐射(波长,A) Cu Κα( 1.54184) 单色仪 石墨 线性吸收系数,mm-1 3.128 采用的吸收校正 经驗a 透射因子，min, max 0.48, 0.88 衍射仪 Nomus Kappa(XI) h, k,丨范围 -12至 17,-17至17,-13至 16 Γ ? 2Θ 范围，。 13.02-133.25
[_马赛克性,。 0.90 使用的程序 SHELXTL F000 1208,0 加权 I /[S2(IV)十(()· 12U8I))?H-2.3344P] 其中 P=(Fo2+2Fc2)/3 采集的数据 21992 独特的数据 3804 Rim 0.042 精制中使用的数据 3804 R因子计算中使用的截止值 匕2>2.〇8斤。2；) 具有I>2.0s(I)的数据 2942 精制的消光系数 0.0014 变量数目 362 最终循环中的最大移位/esd 0.00 R(F0) 0.071 Rtt(F〇") 0.209 拟合优度 1.136
[0257] ^14⑶C-0032形式L的晶体数据
[0258] 分子式 CrHiK1NxCh(C24H2xNfiO 2C3HsO) 式量 520.64 空间群 P I 21/c 1(Νο· 14) a, A 13,224(3) b, A 14.797(3) c, A 13.603(3) b，° 90.52(3) V, A1 2661.7(9)) Z 4 d ! , g'ciir' I 299
[0259] 温度,K 89. 辐射(波长,A) 同步加速器(0.7000) h, k,丨范围 -14至丨4, -15至丨5, -15至15 Θ 范围， 1.54-23.3 使用的程序 SHELX97 F_ 1016.0 加权 1/[s2(Fo：2)+(0.0724P)2+0.9585P] 其中 P=(Fo2+2Fc2)/3 I /[s'2(Fo2)+(0.0493P):+ 1.25.39P] 其中 P=(Fo2+2Fc2)/3， 采集的数据 24329 独特的数据 3700 Rint 0.024 精制中使用的数据 3700 R因子计算中使用的截止值 Fq2>2.0s(Fu2> 具有I>2.0s⑴的数据 3700 精制的消光系数 0.0123(10) 变量数目 363 最终循环中的最大移位/esd 0.00 R(F0) 0.036 Ru(IV) 0.094 拟合优度 1.052
[0260] 实施例7粉末X射线衍射(PXRD)
[0261 ]样品的粉末X射线衍射图使用Rigaku MiniFlexlf5粉末X射线衍射仪获得。辐射源 在30kV电压及15mA电流下操作。将各样品置于铝样品架的槽中且用载玻片刮平以呈现良好 表面纹理并插入样品架中。所有样品均以介于2°与40°之间的2Θ角范围以2°/min的扫描速 率及0.02°的步长来测量。
[0262] XRPD分析使用PANalytical X'Pert:Pr〇?衍射仪来进行。Cu Ka福射fl.54057A) 的入射束使用Optix长细焦源产生。使用椭圆渐变多层镜来使该来源的Cu KaX射线聚焦穿 过样品且到达检测器上。将管电压及安培数分别设定为45kV及40mA。扫描范围为1.01至 39.98° 2Θ，使用〇. 〇 17° /分钟的步长，扫描速率为3.3° /分钟，总收集时间为718秒。分析硅标 准品以检验仪器校准。XRPD图由尖峰构成，这表明样品为结晶。代表性光谱显示于图2、10、 13-21 中。
[0263] Rigaku Rapid II影像板衍射仪配备有MicroMax002+高强度铜X射线源。
[0264] 实施例8差示扫描量热法(DSC)
[0265] 使用具有机械冷却器及标准品小室（结构与样品盘相同）的TA Instruments差式 扫描量热计(Q100型)来测量粉末样品的热学性质。将各样品加载至具有含有0至1个针孔的 无皱褶盖的封闭铝盘中并置于差示扫描量热法(DSC)小室中。用以约50cm 3/min流动的氮气 吹扫该小室。使小室与样品在20°C平衡。然后将小室以10.00°C/min加热至250-350 °C同时 监测空的参比盘与样品盘之间的热流差异。
[0266] 实施例9热重量分析(TGA)
[0267] 通过TGA测定作为温度的函数的重量变化。在TGA仪器(TA Instruments，Q500型） 中加热期间监测样品重量，获得重量对温度曲线。将0.1-2毫克样品置于位于样品架上的 DSC盘中。将样品架在TGA中以10°C · HiirT1的加热速率由25°C加热至300°C。使用干燥氮气吹 扫。通过以l〇°C/min将样品加热至期望温度且然后将样品在该温度保持至少200分钟来进 行等温实验。
[0268] 实施例 10 FT-IR
[0269] 在ThermoFisher Scientific FT_IR:Nicolet 6700上记录FTIR光谱。
[0270]实施例11动态蒸汽吸附(DVS)
[0271]在TA Instruments Q5000SA蒸汽吸附分析仪上收集自动化蒸汽吸附数据。使用 NaCl及PVP作为校准标准品。在分析之前不干燥样品。在25°C在5至95 %RH的范围以10 %RH 增量在氮气吹扫下收集吸附及解吸数据。将样品在相应的RH保持1小时，之后移至下一 RH范 围。样品初始水分含量的数据未经校正。
[0272] 实施例12 HPLC分析方法
[0273] HPLC分析使用配备有UV及MS检测器的Agilent 1200SL HPLC系统按照下文呈现的 条件来进行： HPLC 仪器: LC-MS 制造商： Agilcnl HPLC: HPl 100 U V-检测器： HPDAD MS-4含测器： HPl 100 AP丨-ES MSD VL 型 柱： Waters SunnrcliC 18(100y4.()mm: 3·5μηι). 柱温： 35 °C:
[0274] 流动相： 梯度模式 流动相A: IOmM乙酸铵 流动相B: 100%乙腈 流'速： l，0mL/min 梯度： 时间[min]: 洗脱(剂A: 洗脱剂B: 0 90% 10% 5 10% 90% 6 10% 90% 7 90% 10% 8 90% 10% UV-检测器: PAD 范围： 200-400nm 波长： 220nm 带宽： 4nm
[0275] 时间： O-IOmin MS-检测器: MSD 扫描： 阳性 质量范围： 70-1000 裂解电压： 70 时间： 0-10 mi. η
[0276] 自动采样器: 温度： 10°C 注射模式： 回路
[0277] 注射体积： 5μ1 洗针： 2/3; ACN/H20(v/v) 稀释溶剂： 甲醇
[0278] 化合物完整性表示为峰面积百分比，其由色谱图中各峰的面积(除了 "注射峰"以 外)及总峰面积来计算。采用所研究的化合物的峰面积百分比来指示样品中该组分的纯度。 [0279]实施例13形式B多晶型物的数据采集
[0280] 将⑶C-0032(GmH28N8O2)的尺寸为约0.20 X0.11 X0.08mm的无色针状物以随机取 向安置在纤维上。在配备有共焦光学的Rigaku Rapidn?:上用Cu Ka辐射(1.54184A)进行初 步检查及数据收集。在LINUX PC上使用SHELX97'进行精制（Sheldrick，G.M. Acta Cryst.，（2008)，A64,112)。用于数据采集的小室常数为由最小二乘法精制使用18706个反 射在4〈q〈70°范围内的设定角获得。来自DENZO/SCALEPACK的精制马赛克性(mosaicity)* 0 · 56°，这表明中等晶体质量（Z. Otwonowski和W.Minor ,Methods Enzymol (1997)276:307)。 空间群通过程序XPREP[1]来测定。无系统消光；空间群经测定为P-l(2号）。在150(1)K的温 度采集数据。采集数据至140.65°的最大2q。
[0281] 数据简化：将框架与DENZ0-SMN整合（Sheldrick，G.M.Acta Cryst.，2008，A64, 112)。收集总计18706个反射，其中4029个为独特的。对数据应用洛伦兹及偏振校正。Cu Ka 辐射的线性吸收系数为7.25/mm。采用使用SCALEPACK的经验吸收校正。透射系数在0.90至 0.94的范围内。对等效反射的强度取平均值。基于强度针对平均值的吻合因子为4.2%。三 斜晶胞参数及计算体积为:3 = 9.7944(14)々=10.4767(11)，(；=丨2.5994(丨7)/\,(1 = 96.145 (1〇)，0 = 95.749(11)，0=115.〇72(9)。，￥=丨149.〇(3)入:'。对于2 = 2和卩1=46〇.54，计算 密度为 1.331g/cm3〇
[0282] 结构解析及精制：通过直接方法使用SIR2004解析结构（M.C.Burla等人， J.Appl .Crystalogr.，（2005)38:381)。其余原子定位于后续差值傅里叶合成中。氢原子包 括于精制中但受限于附在其所键结的原子上。在全矩阵最小二乘法中精制结构，其中将函 数最小化。
[0283] 精制在LINUX PC上使用SHELX-97进行。
[0284] Ew( I Fo I2-1 Fe I2)2
[0285] 加权 w 定义为 1/[s2(Fo2) + (0.0810P)2+0.5152P]，其中 P=(Fo2+2Fc2)/3。
[0286] 散射因子取自"International Tables for Crystallography"("International Tables for CrystalIography^,Vol.CjKluwer Academic Publishers ,Utrecht, The Netherlands，（1992)，表4.2.6.8和6.1.1.4.)。在精制中使用4029个反射。然而，在Rl计算 中仅使用3257个F Q2>2〇(F。2)的反射。精制的最终循环包括330个可变参数并用以下未加权 及加权吻合因子收敛(最大参数移位为其估计标准偏差的〈〇. 01倍）：
[0287] R=E |F〇-Fc|/EF〇 = 0.060
[0288]
[0289] 拟合优度参数为1.061。最终差值傅里叶中的最高峰的高度为0.41e/A3。最小负峰 的高度为_〇.33e/A 3。
[0290] 计算X射线粉末衍射（XRPD)图：使用Mercury 2.3(Mercury CSD2.3(Build RC4), I⑶D，2009)以及来自单晶数据的原子坐标、空间群及单位晶胞参数产生Cu辐射的计算XRPD 图。由于单晶数据在低温（150K)采集，预计在计算与实验粉末衍射图之间出现一定移位。通 常此移位为2Θ的函数，但由于晶体的热收缩未知，此移位可能并非如此。
[0291] ORTEP及堆积图：使用PLATON(Spek，A.L.PLATON.Molecular Graphics Program.Utrecht University,Utrecht,The Netherlands,(2008)；Spek,A.L, J · Appl · Crystalogr · (2003), 36:7)软件包内的 ORTEP III (Johnson, C · K · ORTEPIII, Report 0RNL-6895,Oak Ridge National Laboratory,TN,U.S.A.(1996).0PTEP-3for Windows Vl .05,Farrugia,L.J. ,J.Appl .Crystalogr · (1997) ,30:565)程序制备。原子表示为50%概 率各向异性热椭圆体。堆积图使用Mercury可视化软件来制备。氢键合表示为虚线。
[0292] X射线粉末衍射（XRPD) :XRH)图在Aptuit的分部SSCI使用PANalytical X'Pert Pro衍射仪来收集。试样使用利用Optix长细焦源产生的Cu辐射来分析。使用椭圆渐变多层 镜来使该来源的Cu KaX射线聚焦穿过试样并到达检测器上。将试样夹在3微米厚的膜之间， 在透射几何中分析并旋转以优化取向统计学。使用射线挡块及短的抗散射件来使空气散射 产生的背景最小化。使用Soller狭缝用于入射束与衍射束以最小化轴向发散。衍射图使用 定位于距试样240mm的扫描位置敏感性检测器(X'Celerator)来收集。衍射图的数据采集参 数显示于数据部分中的图影像上方。在分析前，分析硅试样(NIST标准参照材料640c)以验 证硅111峰的位置。
[0293] 表15以° 2Θ表不的反射分布:
[0294] 形式 A: 5.62、9· 88、10.14、14.09 和 16.26
[0295] 形式B: 9 · 40、10 · 84、16 · 72、18 · 7 和26 · 60
[0296] 形式(：:6.16、8.56、13.76、18.52和（21.66或26.82)
[0297] 形式 D: 12 · 08、15 · 36、17 · 48、17 · 66 和 19 · 44
[0298] 形式E: 6 · 70、8 · 96、13 · 66、15 · 94和18 · 72
[0299] 形式卩:7.52、9.13、13.99、15.07和18.30
[0300] 形式出6.39、8.74、13.54、13.82和19.23
[0301] 形式了：5.12、8.74、10.82、14.62和17.42
[0302] 形式 1(:10.99、17.01、20.28、22.56和25.92
[0303] 形式L: 6 · 61、8 · 90、15 · 92、18 · 42 和 25 · 76
[0304] 形式M: 7 · 47、8 · 88、14 · 95、17 · 78 和 20 · 01
[0305] 形式~7.48、9.22、14.98、18.48和24.34
[0306] 形式0:6 · 28、13 · 48、13 · 90、18 · 02、18 · 64 和 25 · 68
[0307] 形式卩：7.46、8.89、14.96、17.82和24.18
[0308] 形式9:9.82、17.70、20.76、20.96和24.08
[0309] 形式 1?:7.36、8.84、14.72、17.71和24.1
[0310] 形式S:8.79、10.63、13.26和26.25
[0311] 形式T: 6 · 54、8 · 85、13 · 53、17 · 98 和 25 · 70
[0312] 形式 1]:6.36、8.69、13.48、20.12和25.70
[0313] 形式 ￥:6.18、8.60、13.84、17.38和18.47
[0314] 形式 1:5.96、7.60、11.92、22.80和26.52
[0315] 形式父：10.12、14.14、16.28、20.59和23.24
[0316] 形式 Υ:6· 01、10.12、14.24、16.30 和 20.40
[0317] 形式Z: 5 · 76、8 · 29、13 · 25、13 · 62 和 25 · 94
[0318] 形式 AA: 12.02、16.65、18 ·92、21· 13 和 26.39
[0319] 形式厶8:5.82、6.54、9.38和26.34
[0320] 形式厶(：：6.32、8.74、13.58、13.88和25.84
[0321] 尽管已出于清楚理解的目的通过示例说明及实施例相当详细地描述上述发明，但 所述描述及实施例不应理解为限制本发明的范围。因此，可认为所有适当的修改及等价内 容均在随附权利要求限定的本发明范围内。本文所引用的所有专利及科学文献的公开的全 部内容均以引用方式明确并入本申请。
【主权项】
1. (2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1H-1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1， 2-(1][1，4]氧氮杂罩-9-基)-1!1-吡唑-1-基)-2-甲基丙酰胺的指定为形式8多晶型物的结晶 性非溶剂化多晶型物，其显示出具有以°2Θ表示的在约10.7、14.0、16.4、18.6、22.1和26.4 的特征峰的X射线粉末衍射图。2. 权利要求1的形式Β多晶型物，其特征在于在图10中所示的X射线粉末衍射图。3. (2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1Η-1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1， 2-(1][1，4]氧氮杂章-9-基)-1!1-吡唑-1-基)-2-甲基丙酰胺的指定为形式4多晶型物的结晶 性单甲醇化物多晶型物，其显示出具有以°2Θ表示的在约10.1、11.2、14.0、18.3、20.2和 22.0的特征峰的X射线粉末衍射图。4. 权利要求3的形式Α多晶型物，其特征在于在图2中所示的X射线粉末衍射图。5. (2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1H-1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1， 2_d][l，4]氧氮杂蕈-9-基)-1Η-吡唑-1-基)-2-甲基丙酰胺的指定为形式C多晶型物的结晶 性异戊醇多晶型物，其显示出具有以°2Θ表示的在约6.2、14.1、17.2、18.3、21.9和26.7的特 征峰的X射线粉末衍射图。6. 权利要求5的形式C多晶型物，其特征在于在图13中所示的X射线粉末衍射图。7. (2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1Η-1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1， 2-(1][1，4]氧氮杂罩-9-基)-1!1-吡唑-1-基)-2-甲基丙酰胺的指定为形式0多晶型物的结晶 性单水合物多晶型物，其显示出具有以°2Θ表示的在约12.2、17.5、17.7、18.3、20.1、21.3、 22.8和26.0的特征峰的X射线粉末衍射图。8. 权利要求7的形式D多晶型物，其特征在于在图14中所示的X射线粉末衍射图。9. 一种药物组合物，其包含治疗有效量的（2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1Η-1，2，4-三 唑-5-基)-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1，2-(1][1，4]氧氮杂罩-9-基)-1!1-吡唑-1-基)-2-甲基 丙酰胺的结晶性多晶型物以及药用载体、助流剂、稀释剂或赋形剂。10. 权利要求9的药物组合物，其为片剂的形式。11. 权利要求9的药物组合物，其中所述治疗有效量为1至1 OOmg。12. 权利要求9的药物组合物，其中所述结晶性多晶型物为形式B多晶型物，其显示出具 有以° 2Θ表示的在约10.7、14.0、16.4、18.6、22.1和26.4的特征峰的X射线粉末衍射图。13. 治疗哺乳动物中过度增殖性病症的方法，所述方法包括给予权利要求9的药物组合 物，其中所述过度增殖性病症选自多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细 胞癌、肺癌、胰腺癌及结肠直肠癌。14. 权利要求13的方法，其中所述治疗有效量为lmg至1 OOmg。15. 权利要求13的方法，其中所述药物组合物包含形式B结晶性多晶型物，所述形式B结 晶性多晶型物显示出具有以°20表示的在约1〇.7、14.〇、16.4、18.6、22.1和26.4的特征峰的 X射线粉末衍射图。16. 权利要求12的方法，其还包括给予化学治疗剂，所述化学治疗剂选自5-FU、多西他 赛、埃雷布林、吉西他滨、GDC-0973、⑶C-0623、紫杉醇、他莫昔芬、氟维司群、地塞米松、帕妥 珠单抗、曲妥单抗艾坦辛、曲妥单抗和来曲唑。17. 制备结晶性多晶型物的方法，所述方法包括加热（2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1H- 1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[幻咪唑并[1，2-(1][1，4]氧氮杂:掌-9-基)-1!1-吡唑-1-基)-2-甲基丙酰胺的浆液，将(2-(4-(2-(1-异丙基-3-甲基-1H-1，2,4-三唑-5-基)-5,6-二 氢苯并[f]咪唑并[1，2-(1][1，4]氧氮杂草-9-基)-1!1-吡唑-1-基)-2-甲基丙酰胺在异戊醇 中重结晶并冷却混合物，由此形成形式B结晶性多晶型物，所述形式B结晶性多晶型物显示 出具有以° 2Θ表示的在约10.7、14.0、16.4、18.6、22.1和26.4的特征峰的X射线粉末衍射图。18. 权利要求9的药物组合物，其用于治疗选自以下的过度增殖性病症:多发性骨髓瘤、 淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌及结肠直肠癌。19. 权利要求9的药物组合物在治疗选自以下的过度增殖性病症中的用途:多发性骨髓 瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌及结肠直肠癌。20. 权利要求1-8中任一项的结晶性多晶型物作为治疗活性物质的用途。21. 权利要求1-8中任一项的结晶性多晶型物，其用于治疗选自以下的过度增殖性病 症：多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌及结肠直肠 癌。22. 权利要求1-8中任一项的结晶性多晶型物在治疗选自以下的过度增殖性病症中的 用途:多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌及结肠直 肠癌。23. 权利要求1-8中任一项的结晶性多晶型物，其用于制备治疗选自以下的过度增殖性 病症的药物:多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、肺癌、胰腺癌及 结肠直肠癌。24. 如本申请所述的本发明。
【文档编号】C07D498/04GK105829323SQ201480068672
【公开日】2016年8月3日
【申请日】2014年12月15日
【发明人】J·斯塔尔茨
【申请人】豪夫迈·罗氏有限公司