专利名称：通过高效液相色谱法检测盐酸艾司洛尔光学异构体的方法
技术领域：
本发明涉及通过高效液相色谱法检测盐酸艾司洛尔(Esmolol Hydrochloride)光 学异构体的方法，更具体的说是检测盐酸艾司洛尔光学异构体生产过程中或者是盐酸艾司 洛尔光学异构体产品中R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的方法。
背景技术：
盐酸艾司洛尔有一个手性中心，具有2个光学异构体，其结构式分别为 (S)-Esmolol Hydrochloride(R)-Esmolol Hydrochloride其化学名分别为4-[(2S)_2-羟基-3_(异丙氨基)丙氧基]苯丙酸甲酯盐酸盐， 4-[(2R)-2-羟基-3-(异丙氨基)丙氧基]苯丙酸甲酯盐酸盐，分子式=C16H25NO4 ·Ηα，分 子量331. 15。盐酸艾司洛尔是一种超短效的选择性P1-受体阻滞剂，不具有内在拟交感 活性和膜稳定作用。其作用机制主要作用于心脏P1受体，具有减缓静息和运动心率，降低 血压，降低心肌耗氧量的作用。很多异构体通过高效液相色谱法分离的方法是已知的，但流 动相、溶剂、柱温、色谱柱等因素对于检测结果有很大影响或不适用于目标检测物。
发明内容
本发明的目的是提供通过高效液相色谱法检测在盐酸艾司洛尔光学异构体手性 合成中所得样品的光学异构体纯度，以控制成品的质量。本发明采用纤维素酯类为固定相的手性柱进行检测，纤维素酯类结构中的空穴和 通道与光学异构体选择性的形成了异构体包合物，从而达到分离。流动相对实验结果中R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔分离度及峰形均有很大 影响，经发明人实验摸索，确定以正己烷-异丙醇-二乙胺(70 98 2 30 0.02 0.5，优选为75 90 10 25 0. 05 0. 2，更优选为80 20 0. 1)为流动相效果很 好。其中加入二乙胺可以改善峰形。溶剂的选择与R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔分离度有关。经实验确定采用 正丙醇、异丙醇、乙醇、正丁醇、甲醇作为溶解用溶剂，优选以异丙醇为溶剂。本发明提供的通过高效液相色谱法检测R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的方 法的具体条件如下
1.色谱条件色谱柱采用纤维素酯类为固定相的手性柱；流动相为正己烷-异丙 醇-二乙胺(70 98 2 30 0. 02 0. 5，优选为 75 90 10 25 0. 05 0. 2， 更优选为80 20 0. 1)；检测波长为200nm 240nm(优选为210nm 230nm，更优选为 约220nm)；柱温为20 45°C (优选为30 40°C，更优选为35°C )；流动相流速为0. 5 2. OmL/min (优选为 0. 8 1. 2mL/min,更优选为约 1. OmL/min)。2.样品溶液的配置采用有机溶剂(优选选自正丙醇、异丙醇、乙醇、正丁醇、甲 醇，更优选为异丙醇)，将样品配制为含盐酸艾司洛尔光学异构体0. 1 2. Omg/mL的溶液 (优选0. 5 2. Omg/mL,更优选为1. Omg/mL)的溶液。3.测定将溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，并进行分析。采用此色谱条件测定R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔分离度均超过1. 5，符合 中国药典要求。此色谱条件同时可用于盐酸艾司洛尔光学异构体的定量。
图1 按照实施例1的条件分离R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的高效液相色 谱图。图2 按照实施例2的条件分离R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的高效液相色 谱图。
具体实施例方式实施例1.仪器SHIMADZU LC-IOAT高效液相色谱仪，SPD-IOAvp紫外检测器，OV-IOO柱温 箱；色谱柱=CHIRALCEL OD-H 色谱柱(0. 46 X 25cm, 5 μ m)；流动相正己烷-异丙醇-二乙胺(80 20 0.1)柱温35°C 流速1· OmL/min检测波长220nm。定位溶液1的配制精密称取R-盐酸艾司洛尔适量，用异丙醇溶解并稀释成 1. Omg/mL ；定位溶液2的配制精密称取S-盐酸艾司洛尔适量，用异丙醇溶解并稀释成 1. Omg/mL ；混合样品溶液的配制精密称取R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔适量，用异丙 醇溶解并稀释成含R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔各1. Omg/mL ；测定各取定位溶液1、定位溶液2和混合样品溶液各20 μ L注入高效液相色谱 仪，记录色谱图，谱图见图1。R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的分离度为5. 1。实施例2.仪器SHIMADZU LC-IOAT高效液相色谱仪，SPD-IOAvp紫外检测器，OV-IOO柱温 箱；色谱柱:Sino-Chiral OD 色谱柱(O. 46 X 25cm，5 μ m)；流动相正己烷-异丙醇-二乙胺(85 15 0.1)
柱温35°C流速L0mL/min检测波长220nm。
定位溶液1的配制精密称取R-盐酸艾司洛尔适量，用异丙醇溶解并稀释成 1. Omg/mL ；定位溶液2的配制精密称取S-盐酸艾司洛尔适量，用异丙醇溶解并稀释成 1. Omg/mL ；混合样品溶液的配制精密称取R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔适量，用异丙 醇溶解并稀释成含R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔各1. Omg/mL ；测定各取定位溶液1、定位溶液2和混合样品溶液各20 μ L注入高效液相色谱 仪，记录色谱图，谱图见图2。R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔的分离度为4. 9。
权利要求
通过高效液相色谱法检测盐酸艾司洛尔光学异构体的方法，具体如下1)色谱条件色谱柱采用纤维素酯类为固定相的手性柱；流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺，比例为70～98∶2～30∶0.02～0.5；检测波长为200nm～240nm；柱温为20～45℃；流动相流速为0.5～2.0ml/min；2)样品溶液的配制采用有机溶剂将样品配制成为含盐酸艾司洛尔0.1～2.0mg/mL的溶液，所述有机溶剂选自正丙醇、异丙醇、乙醇、正丁醇、甲醇；3)测定将溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述流动相正己烷_异丙醇_二乙胺比例 为 75 90 10 25 0.05 0.2。
3.根据权利要求1和2所述的方法，其特征在于所述流动相正己烷_异丙醇_二乙胺 比例为 80 20 0.1。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于检测波长为210nm 230nm。
5.根据权利要求1和4所述的方法，其特征在于检测波长为220nm。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于柱温为30 40°C。
7.根据权利要求1和6所述的方法，其特征在于柱温为35°C。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于流动相流速为0.8 1. 2mL/min。
9.根据权利要求1和8所述的方法，其特征在于流动相流速为1.OmL/min。
10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于样品溶液的配制中采用的有机 溶剂为异丙醇。
11.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于将样品溶液配制为含盐酸艾司 洛尔光学异构体0. 5 2. Omg/mL的溶液。
12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于将样品溶液配制为含盐酸艾司洛尔光学 异构体1. Omg/mL的溶液。
全文摘要
本发明提供了通过高效液相色谱法检测盐酸艾司洛尔光学异构体的方法，具体如下(1)色谱条件色谱柱采用纤维素酯类为固定相的手性柱；流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺；检测波长为200nm～240nm。(2)采用有机溶剂将样品配制为含盐酸艾司洛尔0.1～2.0mg/mL的溶液。(3)测定，记录色谱图。本发明测定方法的R-盐酸艾司洛尔、S-盐酸艾司洛尔分离度均超过1.5，符合中国药典要求。本发明提供方法同时可用于盐酸艾司洛尔光学异构体的定量。
文档编号G01N30/02GK101881755SQ20091003129
公开日2010年11月10日 申请日期2009年5月4日 优先权日2009年5月4日
发明者倪桃, 冒宜兰, 冯明声, 姚晓敏, 张璐, 曹于平, 郁博媛, 郑文艳 申请人:南京海辰药业有限公司