载脂蛋白a2测定试剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种载脂蛋白A2测定试剂，各成分含量为：聚乙二醇6000为27～33g/L，氯化钠96～116mmol/L，Tris-HCL缓冲液90～110mmol/L，羊抗人APOA2抗体0.9～1.1ml/L，表面活性剂9～11g/L，其余的为纯化水；表面活性剂为聚氧乙烯苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚、聚氧乙烯月桂醚中的一种或几种。本发明操作简便，能适合临床实验室对载脂蛋白A2含量测定的需要。
【专利说明】载脂蛋白A2测定试剂
【技术领域】
[0001]本发明属于载脂蛋白检测【技术领域】，尤其与一种用于免疫透射比浊法测定载脂蛋白A2的试剂有关。
【背景技术】
[0002]载脂蛋白是血浆中脂蛋白的组成成分，是决定脂蛋白的结构、功能和代谢的重要脂单位。载脂蛋白A2存在于高密度脂蛋白(HDL)，其生理功能是维持HDL结构，抑制卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)的活化，激活肝脏的甘油三酯酯酶(H-TGL)，减少动脉粥样硬化的发病。载脂蛋白的测定是用于评价诊断脂质代谢紊乱，对于探讨冠心病和动脉粥样硬化的发病机理及临床诊断有重要意义。而传统测定载脂蛋白A2的方法一般采用酶联免疫法，操作繁琐，并且不能直接在全自动生化分析仪上进行检测分析，设备要求高。
【发明内容】
[0003]本发明目的旨在适应临床实验室采用免疫透射比浊法对载脂蛋白A2含量测定的需要，提供一种适用于免疫透射比浊法测定载脂蛋白A2含量的试剂。
[0004]为此，本发明采用以下技术方案:载脂蛋白A2测定试剂，其特征是:所述的试剂各成分含量为:聚乙二醇6000为27?33g/L，氯化钠96?116 mmol/L, Tris-HCL缓冲液90?110 mmol/L，羊抗人AP0A2抗体0.9?1.lml/L，表面活性剂9?llg/L，其余的为纯化水；表面活性剂为聚氧乙烯苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚、聚氧乙烯月桂醚中的一种或几种。
[0005]优选的，所述的试剂各成分含量为:聚乙二醇6000为30g/L，氯化钠106 mmol/L,Tris-HCL缓冲液100 mmol/L，羊抗人AP0A2抗体lml/L，聚氧乙烯苯基醚表面活性剂IOg/L,其余的为纯化水。
[0006]本发明用于测定载脂蛋白A2时，选用两根试管分别作为校准管⑶和样品管(U)，校准管中加入3微升已知载脂蛋白A2标准浓度的校准液，样品管中加入3微升待测标本，然后在校准管和样品管中各加入本发明所述的试剂225微升混匀，在温度37°C下孵育5分钟，使用全自动生化分析仪在主波长340nm时测定各管的吸光度AS、AU，载脂蛋白A2含量就可以通过下述公式计算而得:载脂蛋白A2 (mg/L)=标准浓度X (样品管吸光度AU /标准管吸光度AS)
使用本发明可以达到以下有益效果:能够使用全自动生化分析仪直接测定载脂蛋白A2的含量，操作简便，适合临床实验室对载脂蛋白A2含量测定的需要。
【具体实施方式】
[0007]下面结合实施例对本发明进行进行详细描述。
[0008]实施例一:
本发明试剂按下述成分和含量配置:聚乙二醇6000为27g/L，氯化钠96 mmol/L,Tris-HCL缓冲液110 mmol/L，羊抗人APOA2抗体1.lml/L，聚氧乙烯月桂醚表面活性剂9g/L,其余的为纯化水。
[0009]使用本发明测定载脂蛋白A2浓度时，使用奥林帕斯2700全自动生化分析仪，通过多点定标法来测得标本中载脂蛋白A2的浓度，主波长采用340nm，辅助波长采用700 nm,定标模式采用多点非线性，反应类型为两点终点法，反应方向正向上升，选用两根试管分别作为校准管和样品管，校准管中加入3微升校准液，样品管中加入3微升待测标本，然后在校准管和样品管中各加入本发明试剂225微升混匀，在温度37°C下孵育5分钟，测定各管的吸光度AS、AU，载脂蛋白A2含量就可以通过下述公式计算而得:载脂蛋白A2 (mg/L)=标准浓度X (样品管吸光度AU /标准管吸光度AS)。
[0010]实施例二:
本发明试剂按下述成分和含量配置:聚乙二醇6000为33g/L，氯化钠116 mmol/L,Tris-HCL缓冲液90 mmol/L，羊抗人AP0A2抗体0.9ml/L，聚氧乙烯壬基苯基醚表面活性剂
11g/L，其余的为纯化水。
[0011]使用本发明测定载脂蛋白A2浓度时，使用奥林帕斯2700全自动生化分析仪，通过多点定标法来测得标本中载脂蛋白A2的浓度，主波长采用340nm，辅助波长采用700 nm,定标模式采用多点非线性，反应类型为两点终点法，反应方向正向上升，选用两根试管分别作为校准管和样品管，校准管中加入3微升校准液，样品管中加入3微升待测标本，然后在校准管和样品管中各加入本发明试剂225微升混匀，在温度37°C下孵育5分钟，测定各管的吸光度AS、AU，载脂蛋白A2含量就可以通过下述公式计算而得:载脂蛋白A2 (mg/L)=标准浓度X (样品管吸光度AU /标准管吸光度AS)。
[0012]实施例三:
本发明试剂按下述成分和含量配置:聚乙二醇6000为30g/L，氯化钠106 mmol/L,Tris-HCL缓冲液100mmol/L，羊抗人AP0A2抗体lml/L，聚氧乙烯壬基苯基醚表面活性剂10g/L，其余的为纯化水。
[0013]使用本发明测定载脂蛋白A2浓度时，使用奥林帕斯2700全自动生化分析仪，通过多点定标法来测得标本中载脂蛋白A2的浓度，主波长采用340nm，辅助波长采用700 nm,定标模式采用多点非线性，反应类型为两点终点法，反应方向正向上升，选用两根试管分别作为校准管和样品管，校准管中加入3微升校准液，样品管中加入3微升待测标本，然后在校准管和样品管中各加入本发明试剂225微升混匀，在温度37°C下孵育5分钟，测定各管的吸光度AS、AU，载脂蛋白A2含量就可以通过下述公式计算而得:载脂蛋白A2 (mg/L)=标准浓度X (样品管吸光度AU /标准管吸光度AS)。
【权利要求】
1.载脂蛋白A2测定试剂，其特征在于:所述的试剂各成分含量为:聚乙二醇6000为27 ?33g/L,氯化钠 96 ?116 mmol/L, Tris-HCL 缓冲液 90 ?110 mmol/L,羊抗人 AP0A2抗体0.9?1.lml/L，表面活性剂9?llg/L，其余的为纯化水；表面活性剂为聚氧乙烯苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚、聚氧乙烯月桂醚中的一种或几种。
2.根据权利要求1所述的载脂蛋白A2测定试剂，其特征在于:所述的试剂各成分含量为:聚乙二醇6000为30g/L，氯化钠106 mmol/L, Tris-HCL缓冲液100 mmol/L，羊抗人AP0A2抗体lml/L，聚氧乙烯苯基醚表面活性剂10g/L，其余的为纯化水。
【文档编号】G01N21/31GK103604928SQ201310450398
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年9月29日 优先权日:2013年9月29日
【发明者】石丽萍, 夏春伟 申请人:绍兴圣康生物科技有限公司