本发明属于食品
技术领域：
，具体涉及一种总多酚含量检测方法。
背景技术：
：自由基是由氧化反应而产生的对身体有害物质。它几乎攻击体内的所有细胞。造成人体组织、器官遭到破坏，加速机体衰老和致病。自由基过多可引起心、脑、血管疾病，诱发肿瘤，引起老年性痴呆、白内障、糖尿病、肝病、帕金森氏病、免疫力低下等。多酚是在植物性食物中发现的,具有潜在促进健康作用的化合物。当前被称为“第七类营养素”。由于多酚结构本身有多个共轭双键，即使某些位置的电子被自由基抢走，靠共轭效应分子结构稳定从而保护细胞，具有清除多种自由基功能。因此总多酚含量的检测对食品生产开发均有重要意义。总多酚含量的测定方法有高锰酸钾法、酒石酸分光光度法、氨基安替比林比色法、紫外分光光度法等。其中高锰酸钾法在氧化酚类物质的同时，一些酚类衍生物和非酚类物质也可以被高锰酸钾氧化，测定结果的重复性差；酒石酸分光光度法多用来检测烟叶中酚类物质含量，适用范围小；氨基安替比林比色法常常应用挥发酚的测定上，因此此方法酚的提取步骤比较麻烦，实验过程繁杂、费时。技术实现要素：根据以上现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提出一种总多酚含量检测方法，通过分光光度计进行吸光度测定，根据没食子酸标准曲线进行计算得样品总多酚含量，缩短了检测时间，降低了检测要求，解决了其他检测方法仪器要求高，样品处理繁琐的问题。为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种总多酚含量检测方法，通过使样品中多酚类化合物在碱性溶液中，与福林酚试剂中的钨钼酸在避光条件下进行定量氧化反应，而钨钼酸自身则被还原生成蓝色化合物，所述的蓝色化合物的深浅程度与含酚基团的数目成正比，对反应后的样品进行吸光度测定，根据没食子酸标准曲线计算出样品中总多酚含量。优选的，所述的碱性溶液为Na2CO3溶液，其中Na2CO3与蒸馏水的质量比为12:88。优选的，所述的没食子酸标准曲线为没食子酸标准溶液的浓度与吸光度的线性关系曲线。优选的，所述的定量氧化反应的反应时间为2h。优选的，所述的没食子酸标准溶液中没食子酸标准品与蒸馏水的质量体积比为1:10mg/mL。一种总多酚含量检测方法，包括如下步骤：步骤一：检测采用紫外分光光度计，测定条件设为：波长765nm，检测前开机预热30min；步骤二：空白溶液的制备：于试管中加入福林酚试剂1mL及质量百分数为12％的碳酸钠溶液2mL，并用水定容至25ml，得空白溶液，在室温下避光反应2h，反应后的空白溶液在765nm波长处对分光光度计进行调零；步骤三：没食子酸标准溶液的配制：称量没食子酸标准品25mg，用水溶解后定容于250mL容量瓶中，得到0.1mg/mL的没食子酸标准溶液；步骤四：标准曲线的制定：分别移取没食子酸标准溶液0.00、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50mL置于试管中并分别加入福林酚试剂1mL，摇匀后再分别加入质量百分数为12％的Na2CO3溶液2mL，用水定容至25mL，摇匀，室温下避光反应2h后，在765nm波长下测定反应物的吸光度；步骤五：标准曲线的绘制：以没食子酸标准溶液的浓度为横坐标，以反应物的吸光度为纵坐标，制作标准曲线，计算得标准曲线公式；步骤六：样品的测定：取1mL样品于试管中，并加入福林酚试剂1mL及质量百分数为12％的碳酸钠溶液2mL，用水定容至25mL，在室温下避光反应2h后测定样品的吸光度；步骤七：样品中总多酚含量的计算：将样品的吸光度带入标准曲线公式中计算出样品中总多酚含量。优选的，步骤二、步骤四、步骤六中所述的试管为具塞试管。优选的，步骤六中所述1mL样品的量是用移液管进行量取。本发明有益效果是:本发明总多酚含量检测方法通过分光光度计进行吸光度测定，根据没食子酸标准曲线进行计算，缩短了检测时间，降低了检测要求，解决了其他检测方法仪器要求高，样品处理繁琐的问题。附图说明图1为没食子酸标准溶液的浓度与吸光度的关系曲线图。具体实施方式下面通过对实施例的描述，对本发明作进一步详细的说明，以帮助本领域技术人员对本发明的发明构思、技术方案有更完整、准确和深入的理解。一种总多酚含量检测方法，包括如下步骤：步骤一：检测采用紫外分光光度计，测定条件设为：波长765nm，检测前开机预热30min；步骤二：空白溶液的制备：于具塞试管中加入福林酚试剂1mL及质量百分数为12％的碳酸钠溶液2mL，并用水定容至25ml，得空白溶液，在室温下避光反应2h，反应后的空白溶液在765nm波长处对分光光度计进行调零；步骤三：没食子酸标准溶液的配制：称量没食子酸标准品25mg，用水溶解后定容于250mL容量瓶中，得到0.1mg/mL的没食子酸标准溶液；步骤四：标准曲线的制定：分别移取没食子酸标准溶液0.00、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50mL置于具塞试管中并分别加入福林酚试剂1mL，摇匀后再分别加入质量百分数为12％的Na2CO3溶液2mL，用水定容至25mL，摇匀，室温下避光反应2h后，在765nm波长下测定反应物的吸光度；步骤五：标准曲线的绘制：以没食子酸标准溶液的浓度为横坐标，以反应物的吸光度为纵坐标，制作标准曲线，计算得标准曲线公式；步骤六：样品的测定：用移液管进行量取1mL样品于具塞试管中，并加入福林酚试剂1mL及质量百分数为12％的碳酸钠溶液2mL，用水定容至25mL，在室温下避光反应2h后测定样品的吸光度；步骤七：样品中总多酚含量的计算：将样品的吸光度带入标准曲线公式中计算出样品中总多酚含量。下表1为采用上述实验方法测定的没食子酸标准溶液的浓度与吸光度的值：表1标准曲线浓度吸光度0.000.0000.250.1340.500.2630.750.3801.000.4841.250.5861.500.680当前第1页1 2 3