HbAlc) "， 并使检体稀释液中含有烷基葡糖苷类、使样本添加部中含有阴离子型表面活性剂，由此来 对烷基葡糖苷类和阴离子型表面活性剂有助于抑制由唾液成分引起的检测反应的反应性 降低的效果进行确认。
[0129] 实施例1
[0130] 按照下面的顺序制作图1 (a)和图1 (b)所示的免疫层析分析装置1。
[0131] (1)样本添加部12
[0132] 这样制作样本添加部12 :向玻璃纤维垫（彡卩步7公司制，商品名：玻璃纤维结合 垫（conjugate pad)，尺寸纵向32mm(检体处理液展开方向）、横向150mm，厚度0.43mm)上， 以60 y g/cm2的比例均匀添加十二烷基硫酸钠（SDS)，在50°C下干燥4小时。
[0133] (2)抗HbAlc抗体涂布部16、抗血红蛋白抗体涂布部17、抗IgG抗体涂布部18的 制作
[0134] 作为膜，使用了由硝化纤维素制成的片材（Sy示7公司制，商品名：HF120、 250mmX25mm)。用含有5质量％的蔗糖以及5质量％的异丙醇的10mM磷酸缓冲液（pH7.4) 将抗HbAlc单克隆抗体、抗血红蛋白单克隆抗体或抗IgG单克隆抗体稀释成0. lmg/ml的浓 度，通过抗体涂布机（BioDot公司制）将150 y L该稀释后的溶液在膜上以1mm的宽度涂布 至各自的位置，使之在50°C下干燥30分钟并在室温下干燥一晚，从而在层析介质部14上分 别设置抗HbAlc抗体涂布部16、抗血红蛋白抗体涂布部17、抗IgG抗体涂布部18。
[0135] (3)标记物溶液的制备
[0136] 向0. 5mL金胶体悬池液（田中贵金属工业株式会社制：平均粒径40nm)中，加入 0.lmL用Tris缓冲液（pH8.5)稀释为0.lmg/mL浓度的抗血红蛋白单克隆抗体，室温下静置 10分钟。然后，加入0. lml的含有0.01质量％的即6^(日本油脂株式会社制、商品名： SUNBRIGHT ME-200SH、分子量20000)的Tris缓冲液（pH8. 5)(添加后的PEG-SH浓度：0.001 质量％ )，室温下静置10分钟。然后，充分搅拌后，在8000 Xg下进行离心分离15分钟，除 去上清液后，加入0. lml的含有1质量％的牛血清白蛋白的磷酸缓冲液（pH7. 4)，从而制备 标记物溶液。
[0137] (4)免疫层析分析装置1的制作
[0138] 向220 y 1上述制备的标记物溶液中添加100 y 1的含有25质量％的海藻糖水溶 液的磷酸缓冲液（p!19. 0)，将此溶液均匀地添加至8mmX 100mm的玻璃纤维垫（彡卩步7公 司制）上以后，用真空干燥机干燥，从而制备了标记物保持部13。然后，向塑料制粘合片11 上粘合上面制备的样本添加部12、经标记物标记的标记物保持部13、层析介质部14,进一 步粘合通用的吸收部15,用切割机将宽度切为5mm，从而制作免疫层析分析装置1。此时，每 个装置含有的SDS的量为96 yg。
[0139] 以下面的配方，搅拌各成分从而制备检体稀释液。
[0140] 作为葡糖苷类的C8葡糖苷（同仁化学株式会社制，制品名：n-辛基-D-葡糖 苷）：10mM
[0141] 作为非离子型表面活性剂的1'1^〇1^-100(516嫩公司制，商品名）与1'冊61120(和 光纯药株式会社制，商品名）的质量比为1:5的混合物：1. 2质量％
[0142] 作为缓冲液的Bicine缓冲液：50mM
[0143] 作为无机盐的氯化钾：0. 6质量％
[0144] 作为添加剂的酪蛋白钠：2. 0质量％
[0145] 余量：水
[0146] 检体的采集
[0147]通过混合HbAlc浓度已知的血液（该血液通过分别刺破健康成年男性以及糖尿病 男性患者的指尖来采集），调整成HbAlc浓度为5. 5%的血液。另外，从健康成人男性采集 唾液。
[0148] 检体处理液1的制备
[0149] 将血液和唾液混合成（容量比）1:49,以前者：后者（容量比）为1:19混合 该混合物和上述检体稀释液，从而制备检体处理液1。
[0150] 检体处理液2的制备
[0151] 以前者：后者（容量比）为1:1000混合不含唾液的血液和上述检体稀释液，从 而制备检体处理液2。
[0152] 检体处理液3的制备
[0153] 将混合HbAlc浓度已知的血液（其通过分别刺破健康成年男性以及糖尿病男性患 者的指尖来采集）而调整的HbAlc浓度为6. 5%的血液1 y L和含有唾液的血液检体（从健 康成人男性的口腔内，用牙间刷刺破龈沟采集）浸渍在1. OmL的检体稀释液中并搅拌，从而 制备检体处理液3。
[0154] 免疫层析分析的实施
[0155] 向如上所述制作的免疫层析分析装置1的样本添加部12上供给110 y 1检体处理 液1，展开10分钟后通过免疫层析阅读器（浜松水卜二夕只（株）社制，制品名）测定检 测部的发色的程度。关于通过免疫层析阅读器得到的测定值，在各实施例和比较例中重复 3次试验。
[0156] 以同样的方法对检体处理液2实施免疫层析分析。
[0157] 含有唾液的血液检体（检体处理液1)和血液检体（检体处理液2)的发色度变化 率的评价
[0158] 由下式求得的发色度变化率在表1以及图2中示出。
[0159] 发色度变化率（％ ) = 100 X (检体处理液1的平均测定值）八检体处理液2的平 均测定值）
[0160]100%表示没有变化，数值越小表示对含有唾液的检体的灵敏度降低越大。
[0161] 实施例2
[0162] 除了将实施例1中检体稀释液中的烷基葡糖苷类从C8葡糖苷变为C12葡糖苷的 n-十二烷基-0-D-葡糖苷（花王株式会社制，制品名：卜''一少12)以外，重复实施例 1。结果在表1以及图2中不出。
[0163] 实施例3
[0164] 除了将实施例1中检体稀释液中的烷基葡糖苷类从C8葡糖苷变为C10葡糖苷的 n-癸基-0-D-葡糖苷（花王株式会社制，制品名：卜''一少10)以外，重复实施例1。结 果在表1以及图2中不出。
[0165] 实施例4
[0166] 除了将实施例1中样本滴加部中所含的阴离子型表面活性剂从SDS变为SDBS(关 东化学株式会社制，制品名：十二烷基苯磺酸钠）以外，重复实施例1。结果在表1以及图2 中示出。
[0167] 实施例5
[0168] 除了将实施例1中检体稀释液中的烷基葡糖苷类从C8葡糖苷变为C12麦芽苷（花 王株式会社制，制品名彳卜''一少12)以外，重复实施例1。结果在表1以及图2中示出。
[0169] 比较例1
[0170] 除了在实施例1中在检体稀释液中不含烷基葡糖苷类并且在样本滴加部中不含 SDS以外，重复实施例1。结果在表1以及图2中示出。
[0171] 比较例2
[0172] 除了在实施例1中在检体稀释液中不含C8葡糖苷以外，重复实施例1。结果在表 1以及图2中示出。
[0173] 比较例3
[0174] 除了在实施例1中在样本滴加部中不含SDS以外，重复实施例1。结果在表1以及 图2中示出。
[0175] 比较例4
[0176] 除了在实施例1中在检体稀释液中含有10mM与C8葡糖苷同为非离子型表面活性 剂的Briji35(ICI Americas Inc公司制）代替C8葡糖苷以外，重复实施例1。结果在表2 以及图3中示出。
[0177] 比较例5
[0178] 除了在实施例1中在检体稀释液中含有10mM与C8葡糖苷同为非离子型表面活性 剂的NP-40 (于力歹 < 亍只夕株式会社制，制品名：y二r 7卜（注册商标）P-40)代替C8 葡糖苷以外，重复实施例1。结果在表2以及图3中示出。
[0179] 比较例6
[0180] 除了在实施例1中在检体稀释液中含有10mM与C8葡糖苷同为非离子型表面活性 剂的MEGA-10 (株式会社同人化学研宄所制，n-癸酰基-N-甲基-D-葡糖胺）代替C8葡糖 苷以外，重复实施例1。结果在表2以及图3中示出。
[0181][表1]
[0183][表2]
[0185]从表1以及表2所示实施例的结果，可以知道通过在检测部的展开方向上游含有 烷基葡糖苷类以及阴离子型表面活性剂，抑制了由于血液检体中含有唾液而导致的检测灵 敏度的降低。
[0186] 另外，在比较例1和2中，在不含烷基葡糖苷类的情况下，含有或不含阴离子型表 面活性剂，发色度的变化率均没有差别。
[0187]另一方面，可以知道，在比较例3和实施例1中，在含有烷基葡糖苷类的情况下，含 有阴离子型表面活性剂的一方抑制了检测灵敏度的降低。
[0188] 因此可知，通过烷基葡糖苷类以及阴离子型表面活性剂两者的存在，可以协同作 用，从而抑制由于血液检体中含有唾液而导致的检测灵敏度的降低。
[0189] 另外，关于表2和图3中示出的比较例4~6的结果，含有与烷基葡糖苷类同为非 离子型表面活性剂的Briji35、NP-40、MEGA-10代替实施例1的烷基葡糖苷类的情况下，与 实施例1相比发色度变化率明显变低。由该结果可以明确，本申请发明中，由于在非离子 型表面活性剂中特别使用了烷基葡糖苷类，因此即使是含有唾液的血液检体中的被检测物 质，也能明显地以良好的灵敏度进行检测。
[0190]〈试验例2>
[0191] 在试验例2中，将试验例1中的被检测物质改为"含有唾液的血液检体中的糖化蛋 白质"以外的物质进行试验，并确认通过将被检测物质设为"含有唾液的血液检体中的糖化 蛋白质"得到了本申请发明特有的显著的效果。在本试验中，将被检测物质设为腺病毒抗原 进行试验。
[019