制备P-PDCA-AuNPs溶液：用超纯水稀释上述步骤（1)中制备的含纳米金颗粒 的溶液，调节溶液中纳米金颗粒的浓度为2. 12nM;取2mL稀释后的纳米金溶液，加入0. 2mL 浓度为1.OX10 7M的木瓜蛋白酶溶液，振荡30min后，在120(K)r/min的转速下离屯、重溶，在 避光条件下静置12小时。然后加入0. 2血浓度为5. 0X10 4M的PDCA溶液，振荡30min后 在避光条件下静置6小时，得到制备好的P-PDCA-AuNPs溶液。
[0070]做特异性测定：分别配ImM的A13\Ca2\CcT、CiAFe2+、Hg2\Fe3\K\Mg2\Mn2\ NH/、Pb2\化2\化+溶液。
[0071] (4)取上述制备的P-PDCA-AuNPs溶液14份。按照实施例1的方法在上述14份 P-PDCA-AuNPs溶液中分别加入0. 2血的A13\ Ca2\ C(T、化2+、化2+、H护、化3+、K+、Mg2+、Mn2+、 NH/、Pb2+Jn2\^1 容液，形成反应系统并启动反应，反应过程中抑为6. 0。反应15分钟后， 检测各组体系的紫外可见吸收光谱。W空白作为对照超纯水代替Hg2+溶液）。 阳072]结果如图6所示，图7为根据图6中Aew/Ag2。的比值绘制的柱状图。 阳07引从图6和图7中可知：ImM的Hg21 容液在此反应体系中，该产物体系的紫外可见吸 收光谱在520nm处吸光度明显下降，并且在650nm处发生明显红移，而其它离子在ImM的浓 度下没有明显干扰作用。由于PDCA与Hg2+的结合力相对其它离子来说是最强的，它们之间 能够紧紧结合在一起，从而消除了其他离子的干扰。因此本方法得W特异性检测Hg2+。
[0074] 对比例1
[0075] 一种本发明的基于木瓜蛋白酶比色检测水中Hg2+的检测方法，包括W下步骤： 阳076] (1)按照实施例1的方法制得含纳米金颗粒的溶液。
[0077] (2)用超纯水稀释上述步骤（1)中制备的含纳米金颗粒的溶液，调节溶液中纳米 金颗粒的浓度为2. 12nM;取2mL稀释后的纳米金颗粒溶液（抑值6. 0)，加入0. 2mL浓度为 1. 0X10 7m的木瓜蛋白酶溶液，振荡30min后，在12000r/min的转速下离屯、重溶，在避光条 件下静置12小时，得到制备好的P-AuNPs溶液。
[0078] (3)取两份P-AuNPs溶液，按照实施例1的方法在上述2份P-AuNPs溶液中分别加 入0. 2mL的Cu2嘴化容液（ImM)，形成反应系统并启动反应，反应过程中抑为6. 0。反应 15分钟后，检测各体系的紫外可见光谱。
[0079] 检测结果显示，溶液颜色由红色变成深蓝色，并且紫外可见光谱发生明显红移，证 明没有PDCA存在时，化2+和化2+对检测存在干扰。
[0080] 实施例6 :
[0081] 一种本发明的基于木瓜蛋白酶比色检测水中Hg2+的检测方法，包括W下步骤：
[0082] (1)按照实施例1的方法制得含纳米金颗粒的溶液。
[0083] (2)制备P-PDCA-AuNPs溶液：用超纯水稀释上述步骤（1)中制备的含纳米金颗粒 的溶液，调节溶液中纳米金颗粒的浓度为2. 12nM;取2mL稀释后的纳米金溶液，加入0. 2mL浓度为1.OX107M的木瓜蛋白酶溶液，振荡30min后，在120(K)r/min的转速下离屯、重溶，在 避光条件下静置12小时。然后加入0. 2血浓度为5. 0X104M的PDCA溶液，振荡30min后 在避光条件下静置6小时，得到制备好的P-PDCA-AuNPs溶液。
[0084] 做精确度测定：按照表1配制已知浓度的Hg2+标准溶液，分别将0.2血上述的 Hg2+标准溶液加入P-PDCA-AuNPs溶液中，形成反应系统并启动反应，反应过程中pH为6. 0。 反应15分钟后，检测各组体系的紫外可见吸收光谱，并由此计算标准溶液中的Hg2+浓度，与 已知的浓度进行对比，W此检测本方法的精确度。同时采用传统的FAAS(火焰原子吸收） 方法（检测方法参见GB/T12687.4-1990))作对比，检测及计算结果列于表1中。 阳0财表1 :Hg2+检测结果对比
[0087] 从表1的检测结果可知，本发明的方法与传统FAAS测定方法相比，检测结果精确 度比较高，并且本方法操作简单、灵敏度高、特异性好、成本低廉，并且具有对环境无害的特 点，拓宽了其检测方法的选择范围。
[0088] W上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制。虽 然本发明已W较佳实施例掲示如上，然而并非用W限定本发明。任何熟悉本领域的技术人 员，在不脱离本发明的精神实质和技术方案的情况下，都可利用上述掲示的方法和技术内 容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此， 凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对W上实施例所做的任何简单 修改、等同替换、等效变化及修饰，均仍属于本发明技术方案保护的范围内。
【主权项】
1. 重金属汞的检测方法，其特征在于，将待测溶液加入到含有纳米金颗粒、木瓜蛋白酶 和2, 6-吡啶二羧酸的反应体系中进行反应，根据紫外可见吸收光谱检测的吸光度变化和 反应体系中颜色的变化对待测溶液中的重金属汞进行定量和定性检测。2. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述反应体系的制备方法为：将含纳 米金颗粒的溶液与木瓜蛋白酶在避光条件下混合得到混合溶液，将所述混合溶液离心重溶 后加入2, 6-吡啶二羧酸，振荡后在避光条件下静置，形成反应体系。3. 根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶溶液的浓度为 1.0 X 10 5M~1.0 X 10 8M ;所述含纳米金颗粒的溶液中纳米金颗粒的浓度为2nM~IOnM ;所 述2, 6-吡啶二羧酸的浓度为5 X 10 3M~5 X 10 5M。4. 根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述反应体系中，所述纳米金颗粒、 木瓜蛋白酶、2, 6-吡啶二羧酸的摩尔比为2 : 100 : 5. OX 105。5. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述纳米金颗粒采用以下方法制备 得到：将氯金酸溶液与柠檬酸三钠溶液在沸腾状态下搅拌，直至所得溶液颜色由初始的淡 黄色转为清亮酒红色时停止加热，继续搅拌15min~20min，制得纳米金颗粒溶液。6. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述反应的条件为：温度30°C~ 60°C，pH 值 6. 0 ~9. 0,反应时间 15 ~25min。7. 根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述定性检测方法为： 根据反应体系中颜色变化来判断Hg2+是否存在，当待测溶液中含有Hg 2+时，随着Hg 2+的浓 度逐渐升高，反应体系的颜色由红色逐渐变为浅紫色、深紫色、蓝色；当待测溶液中不含有 Hg 2+时，反应体系的颜色为红色。8. 根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述定性检测方法为： 根据纳米金颗粒的紫外吸收峰是否发生红移，判断待测溶液中Hg 2+是否存在，当待测溶液 中含有Hg2+时，纳米金颗粒的紫外吸收峰发生红移；当待测溶液中不含有Hg 2+时，纳米金颗 粒的紫外吸收峰不发生红移。9. 根据权利要求1至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述定量检测方法为： 将已知浓度的Hg2+配制成梯度浓度，加入到所述反应体系中，通过紫外可见吸收光谱检测 520nm以及650nm处的吸光度变化，根据A 65qA52。的比值及Hg 2+的浓度建立线性回归方程： y = 0.0252x+0. 1139 ； 其中，y为紫外可见吸收光谱中650nm和520nm处的吸光度的比值A6M/A 52()，x为所述待 测溶液中Hg2+的含量，单位为yM。10. 根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述线性回归方程中，Hg2+的线性检 测范围为〇? 01 U M~14 y M。
【专利摘要】本发明公开了一种重金属汞的检测方法，将待测溶液加入到含有纳米金颗粒、木瓜蛋白酶和2,6-吡啶二羧酸的反应体系中进行反应，根据紫外可见吸收光谱检测的吸光度变化和反应体系中颜色的变化对待测溶液中的重金属汞进行定量和定性检测。本发明采用纳米金颗粒、木瓜蛋白酶和2,6-吡啶二羧酸构成反应体系，反应体系与Hg2+通过共价键结合起来，通过520nm处的纳米金粒子表面等离子体共振吸收峰是否发生红移，对重金属汞进行检测，具有灵敏度高、选择性好、快速简单等优势。
【IPC分类】G01N21/31, G01N21/78
【公开号】CN105115963
【申请号】CN201510423401
【发明人】秦蕾, 赖萃, 曾光明, 刘云国, 黄丹莲, 张辰, 陈明, 许飘, 王荣忠, 王漫漫, 唐泽恒
【申请人】湖南大学
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年7月17日