一种化妆品及其原材料的检测方法
【技术领域】
[0001]本申请涉及化妆品技术领域，尤其是一种化妆品及其原材料的检测方法。
[0002]
【背景技术】
[0003]现阶段，消费者或者检测机构对化妆品及其原料进行皮肤刺激性检测，从而检测化妆品的好坏。这种检测一般是用皮肤斑贴试验，该实验从医学检测中的过敏源筛查检测演变而来。皮肤斑贴试验因其实验简单，适用范围广，被大量用于化妆品及其原材料过敏性测试。
[0004]具体方法为:随机寻找10名以上受试个体，个体要求成年健康、无特殊过敏史、无重大疾病史，性别不限，以女性为主。用生理盐水反复清洗受试个体前臂内侧，手腕上部。将0.5ml受试物均匀涂抹在斑贴纱布上，再将其贴敷在受试个体手腕上部，每个个体做两次平行试验，同时以生理盐水作为对照试验，并在贴敷后6小时、12小时各观察一次。根据观察结果，将刺激反应分为五个等级:1.“一”阴性:受试部位无任何反应；2.“土”可疑:皮肤出现瘙痒或轻微发红；3.“ + ”弱阳性:皮肤出现单纯红斑、瘙痒；4.“++”中度阳性:皮肤出现水肿性红斑、丘疹；5.“+++”强阳性:皮肤出现显著红斑、丘疹及水疱。最后将所有受试个体的反应现状进行统计评价，从而得出受试物刺激强弱。
[0005]但是，该方法以人体为直接实验对象，实验有潜在健康风险，不易做重复性测试。
[0006]
【发明内容】
[0007]本申请提供一种化妆品的检测方法，解决现有技术中化妆品检测以人体未实验对象，存在安全风险且不易重复测试的问题。
[0008]—种化妆品及其原材料的检测方法，包括以下步骤:取若干动物受精蛋胚，在蛋壳的气室端打开一个开口，向开口内加入生理盐水，再撕掉气室膜，露出绒毛尿囊膜；将四氟环贴合固定在动物受精蛋胚的绒毛尿囊膜上，处于四氟环的环内部分形成受试区域；取待测样品若干，加入到受试区域，然后在动物受精蛋胚外侧覆盖一层保鲜膜，再将动物受精蛋胚置于孵箱中；一段时间后，将动物受精蛋胚从孵箱中取出，观察并比较环内与环外绒毛尿囊膜上血管的变化，确定损伤等级，根据损伤等级确定待测样品的刺激等级。
[0009]优选的，所述观察并比较环内与环外绒毛尿囊膜上血管的变化，确定损伤等级，具体为:观察并比较环内与环外绒毛尿囊膜上血管的变化，确定血管效应值，血管效应值对应如下:血管流动正常，无血流出，血管效应值为O ;血管内无血流，血管效应值为I ;血管充血或血流增加，血管效应值为2 ;环内有1-10个出血点，血管效应值为3 ;环内出血点大于10个或者出血点不可数但覆盖面积小于环内面积的1/8，血管效应值为4 ;环内出血点不可数但覆盖面积大于或等于环内面积的1/8且小于环内面积的1/4，或者环内没有出血点但红晕覆盖面积小于环内面积的1/4，血管效应值为5 ;环内出血点不可数但覆盖面积大于或等于环内面积的1/4且小于环内面积的1/2，或者环内没有出血点但红晕覆盖面积大于或等于环内面积的1/4且小于环内面积的1/2，血管效应值为6 ;环内大量出血，出血面积大于或等于环内面积的1/2且小于环内面积的3/4，血管效应值为7 ;环内大量出血，出血面积大于或等于环内面积的3/4，或者形成结痂，血管效应值为8。
[0010]优选的，所述根据损伤等级确定待测样品的刺激等级，具体为:求取血管效应值的平均值，根据平均值确定待测样品的刺激等级，刺激等级对应如下平均值=0，为无刺激；O<平均值< 2，为应激性刺激；2 <平均值< 3，为轻微刺激；3 <平均值< 5，为中度刺激；平均值> 5，为重度刺激。
[0011 ] 优选的，动物受精蛋胚为鸡胚、鸭胚和鹅胚中的一种。
[0012]优选的，待测样品包括甲基氯异噻唑啉酮、杰马液、十二烷基硫酸钠、尼泊金甲酯丙酯和苯氧乙醇中的至少一种。
[0013]优选的，孵箱环境为温度37.5°C ±0.5°C，相对湿度50%_60%，孵化时间不低于30分钟。
[0014]优选的，取用至少十个动物受精蛋胚。
[0015]本申请的有益效果是，由于本申请使用动物受精蛋胚作为实验对象，不会作用到人体，就降低了安全风险，也便于重复测试。
[0016]同时，待测样品直接作用于绒毛尿囊膜，实验更加真实、准确。
[0017]
【附图说明】
[0018]图1为血管效应值为O时绒毛尿囊膜血管的状态图；
图2为血管效应值为I时绒毛尿囊膜血管的状态图；
图3为血管效应值为2时绒毛尿囊膜血管的状态图；
图4为血管效应值为3时绒毛尿囊膜血管的状态图；
图5为血管效应值为4时绒毛尿囊膜血管的状态图；
图6为血管效应值为5时绒毛尿囊膜血管的状态图；
图7为血管效应值为6时绒毛尿囊膜血管的状态图；
图8为血管效应值为7时绒毛尿囊膜血管的状态图；
图9为血管效应值为8时绒毛尿囊膜血管的状态图。
[0019]
【具体实施方式】
[0020]下面通过【具体实施方式】结合附图对本发明作进一步详细说明。
[0021]由于绒毛尿囊膜血管与人眼结膜血管组成较为相似，而人体粘膜，如眼结膜、生殖器、嘴唇、肛门、鼻腔等，对外界刺激的敏感度远远大于皮肤的敏感度，尤其是人眼结膜的敏感度最高，因此，本申请使用未孵化的动物受精蛋胚，动物受精蛋胚可选用鸡胚、鸭胚、鹅胚等中的一种，这种实验结果更为真实、准确。
[0022]如图1所示，将四氟环20贴合固定在动物受精蛋胚上，处于四氟环20的环内部分形成受试区域11，取待测样品加入到受试区域11，从而在受试区域11进行实验。其中，四氟环20可以选用聚四氟乙烯环、四氟垫、四氟密封圈或四氟带。
[0023]观察并比较环内与环外绒毛尿囊膜上血管的变化，确定每个鸡胚的血管效应值，环内绒毛尿囊膜上血管的变化与血管效应值对应如下:
如图1所示，血管流动正常，无血流出，血管效应值为O。图2中，血管内无血流，血管效应值为I。图3中，血管有充血或血流增加的现象，血管效应值为2。图4中，环内有1-10个出血点31，血管效应值为3。图5中，环内出血点31大于10个，血管效应值为4。图6中，环内出血点31的数量难以统计但覆盖面积大于或等于环内面积的1/8且小于环内面积的1/4，血管效应值为5。图7中，环内出血点31数量更多，具体也不可数，但覆盖面积大于或等于环内面积的1/4且小于环内面积的1/2，血管效应值为6。图8中，环内已大量出血，形成红晕32，出血面积大于或等于环内面积的1/2且小于环内面积的3/4，血管效应值为7。图9中，环内出血量更大，出血面积已大于或等于环内面积的3/4，血管效应值为8。
[0024]根据血管效应值的平均值确定待测样品的刺激等级。刺激等级对应如下:平均值=0，为无刺激<平均值< 2，为应激性刺激；2 <平均值< 3，为轻微刺激；3 <平均值< 5，为中度刺激；平均值> 5，为重度刺激。
[0025]实施例1:
取10个孵化10天的鸡胚，用手捻钻在鸡胚气室端上开一个小孔，进而用锯齿镊小心扩大鸡胚上的小口，最终将开口扩大至整个气室区域。然后将生理盐水滴满整个气室端，充分润湿气室膜，然后用锯齿镊小心撕掉气室膜，使鸡胚绒毛尿囊膜CAM暴露出来。
[0026]将四氟环20贴合固定在CAM上，CAM处于四氟环20的环内部分形成受试区域11。将红石榴面膜用无菌水制成透明悬液，取一定量的悬液加入到受试区域11。然后在鸡胚外侧覆盖一层保鲜膜，防止鸡胚水分流失，并将鸡胚置于孵箱环境中，孵箱环境为温度37 °C，相对湿度50%。
[0027]—段时间后，将鸡胚从孵箱中取出，观察并比较环内与环外绒毛尿囊膜上血管的变化，测得10个鸡胚的血管效应值分别为:0，O, O, O, O, O, O, O, O, O0去除一个最高值和一个最低值之后，求得平均值为0，则红石榴面膜对人体无刺激，对人体皮肤无害。
[0028]实施例2:
取5个孵化10天左右的鸡胚，用手捻钻在鸡胚气室端上开一个小孔，进而用锯齿镊小心扩大鸡胚上的小口，最终将开口扩大至整个气室区域。然后将生理盐水滴满整个气室端，充分润湿气室膜，然后用锯齿镊小心撕掉气室膜，使鸡胚绒毛尿囊膜CAM暴露出来。
[0029]将四氟环20贴合固定在CAM上，CAM处于四氟环20的环内部分形成受试区域11。将“百雀羚水嫩倍现盈彩精华面膜”用无菌水制成透明悬液，取一定量的悬液加入到受试区域11。然后在鸡胚外侧覆盖一层保鲜膜，防止鸡胚水分流失，并将鸡胚置于孵箱环境中，孵箱环境为温度37°C，相对湿度50%。
[0030]—段时间后，将鸡胚从孵箱中取出，观察并比较环内与环外绒毛尿囊膜上血管的变化，测得10个鸡胚的血管效应值分别为:5，6，6，6，3。去除一个最高值和一个最低值之后，求得平均值为4.6，则“百雀羚水嫩倍现盈彩精华面膜”对人体为中度刺激。
[0031]实施例3:
取5个孵化10天左右的鸡胚，用手捻钻在鸡胚气室端上开一个小孔，进而用锯齿镊小心扩大鸡胚上的小口，最终将开口扩大至整个气室区域。然后将生理盐水滴满整个气室端，充分润湿气室膜，然后用锯齿镊小心撕掉气室膜，使鸡胚绒毛尿囊膜CAM暴露出来。
[0032]将四氟环20贴合固定在CAM上，CAM处于四氟环20的环内