一种胆舒胶囊的指纹图谱检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物检测领域，具体涉及一种胆舒胶囊的指纹图谱检测方法。
【背景技术】
[0002]薄荷广泛分布于我国各地，如云南、江苏、浙江、江西等都有出产。中国是薄荷油、薄荷脑的主要输出国之一。薄荷素油(Oleum Menthae Dementholatum)是薄荷中的主要化学成分，是一种传统的中药，具有清凉止痒、抗炎镇痛、祛痰、利胆、溶石排石等药效[刘红杰等，薄荷油研究进展，山东中医药大学学报2006，30 (6) =502-505]，临床上主要用来治疗慢性胆囊炎[韩捷等，胆舒胶囊治疗慢性胆囊炎25例临床观察，中成药，2007，29⑴:说明书4附8_9]、胆结石[黄欣等，胆舒胶囊治疗胆石症的疗效观察，中国全科医学，2005,8(1):55-56]、慢性结石性胆囊炎、肠易激综合症[闻峻等，薄荷油治疗肠易激综合症的药理和临床研究，国外医药.植物药分册，2006，21 (2):50-62]、产后腹胀[张文，薄荷油湿布热敷治疗产后腹胀，J.huaihua Med.,2001,19(3):264-265]、老年术后肠功能恢复[江桂林，薄荷油湿热敷对老年术后肠功能恢复的临床观察，实用临床医药杂志(护理版)，2006，2 (4):42-43]、胆源性消化不良[黄宁新，胆舒治疗胆源性消化不良临床意义的探讨，中国基层医药，2005，12 (8):1099]等病症。
[0003]胆舒胶囊主要活性成分为薄荷素油，是根据舒肝利胆、理气止痛的中医理论研制而成的一种胶囊剂，具有舒肝理气，利胆功能，临床常用于慢性结石性胆囊炎，慢性胆囊炎及胆结石肝胆郁结，湿热胃滞证的治疗。经现代研究表明，其利胆、消食作用机制主要为:正常人的胆汁由胆汁酸、胆固醇、卵磷脂等有机成份及钠钾钙等无机离子组成，其中胆汁酸与甘氨酸或牛磺酸结合形成的钠盐或钾盐称为胆盐。胆固醇与既有亲水性又有亲脂性的胆盐和卵磷脂按一定比例[1:(11±2.5)]组合，胆盐和卵磷脂的亲水基团排列在表面，而亲脂基团包在内部，形成微胶粒，从而将胆固醇“溶解”在胆汁中。若胆汁中胆固醇含量相对或绝对增多，胆固醇便因过饱和而析出结晶，不利于胆汁的排放，而胆舒胶囊能够改善胆汁流出通道，显著松弛胆道平滑肌及Oddi氏括约肌的作用，减轻胆管因胆囊切除术后淤胆代偿性扩张，使胆汁流出量增加，从而改善胆囊切除后的右上腹胀闷不适症状。同时，其改善餐后不适综合征(ros)的临床方面也有较好应用，其机制可能与胆舒胶囊及其活性成份能够有效降低胃肠张力，改善胃肠容受性，降低胃肠对扩张刺激的敏感性，及抵御轻度焦虑症的作用有关。此外，相关研究表明，胆舒胶囊还具有一定的解痉和抗炎镇痛作用。
[0004]胆舒胶囊包含醇类、酮类、酯类、萜烯类等多种活性成分，其检测方法主要为气相检测，然而，现有的检测方法中存在检测时间长、检测到的活性成分峰个数少、分离效果不好等技术问题，因此，寻求一种能够快速、有效的胆舒胶囊检测方法对于其质量控制而言显得尤为重要。
【发明内容】
[0005]为解决现有技术中存在的检测时间长、检出成分少、分离效果差等技术问题，本发明提供一种快速、有效的胆舒胶囊的指纹图谱检测方法，其包括以下步骤:
[0006]1)样品制备方法:取胆舒胶囊内容物适量，置具塞试管中，加入有机溶剂，充分振摇或超声后滤过，取续滤液即得；
[0007]2)气相色谱条件:采用极性毛细管柱，氢火焰离子化检测器，初始温度为73°C?75°C,结束温度为160°C?200°C，采用程序升温，进样口温度为250°C，检测器温度为250。。。
[0008]3)测定:吸取步骤1)中制备得到的样品溶液注入气相色谱仪进行检测，得到指纹图谱。
[0009]上述胆舒胶囊的指纹图谱检测方法中，所述的程序升温过程优选为:初始温度保持4min，以2V.min 1的速率升温至100°C，再以6°C.min 1的速率升温至结束温度；进一步优选为:初始温度75°C，保持4min，以2°C.min 1的速率升温至100°C，再以6V.min 1的速率升温190°C。
[0010]上述胆舒胶囊的指纹图谱检测方法中，所述的气相色谱条件中进样量优选为1.0 μ 1，分流比优选为40:1。
[0011]上述胆舒胶囊的指纹图谱检测方法中，所述样品制备方法中有机溶剂优选乙醇、无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、环己烷、三氯甲烷、乙醚，进一步优选无水乙醇。
[0012]上述胆舒胶囊的指纹图谱检测方法中，所述色谱条件中极性毛细管柱优选聚乙二醇毛细管柱、改性聚乙二醇毛细管柱，进一步优选聚乙二醇毛细管柱。
[0013]上述胆舒胶囊的指纹图谱检测方法中，所述样品制备方法优选为，取胆舒胶囊内容物0.72g，置具塞试管中，加入无水乙醇10ml，充分振摇或超声后滤过，取续滤液即得；
[0014]本发明所提供的胆舒胶囊指纹图谱检测与现有技术相比，存在以下优势:
[0015]1、本发明提供胆舒胶囊指纹图谱检测方法检出成分多、各组分分离度好，能够为胆舒胶囊质量控制提供有效的标准。
[0016]2、本发明提供的胆舒胶囊指纹图谱检测方法在20min内出峰完毕，整体检测时间短，大大减少了检测时间和节约检测成本，更利于工业生产应用。
[0017]本申请发明人考察了不同溶剂提取胆舒胶囊内容物对于检测结果的影响，发现采用30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、90%乙醇、无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、环己烷、三氯甲烷、乙醚提取时均能够有效检出各组分，且分离度较好，其中采用无水乙醇提取时，效果最佳。
【附图说明】
[0018]图1为实施例1中气相色谱图
[0019]图2为实施例2中气相色谱图
[0020]图3为实施例3中气相色谱图
[0021]图4为实施例4中气相色谱图
[0022]图5为实施例5中气相色谱图
【具体实施方式】
[0023]下面通过实施例对本发明进一步说明，但不能限制本发明的保护范围。
[0024]本发明中涉及的实验仪器和药品、试剂如下:
[0025]实验仪器:安捷伦7890A气相色谱仪；气相色谱柱:OPTIMA-WAXplus (柱长为30m，内径为0.32mm，膜厚度为0.25 μ m，德国Macherey Nagel公司)；检测器:氢火焰离子化检测器。
[0026]实验药品及试剂:胆舒胶囊(四川济生堂药业有限公司，121008、121009、121010)，柠檬烯对照品(来源:中检院、批次:100470-200801)，桉油精对照品(来源:中检院、批次:10788-201105)，薄荷酮对照品(来源:中检院、批次:111705-201105)，胡薄荷酮(来源:中检院、批次:111706-201205)，薄荷脑(来源:中检院、批次:110728-200506)，无水乙醇(AR，成都金山化学试剂有限公司，20130506)。
[0027]实施例一胆舒胶囊气相色谱检测
[0028]样品制备方法:取胆舒胶囊内容物0.72g，置具塞试管中，加入无水乙醇10ml，充分振摇或超声后静置20min，滤过，取续滤液即得；
[0029]对比色谱条件:初始温度60°C，保持4min，以2°C.min 1的速率升温至100°C，再以100°C-min 1的速率升温230°C，进样口温度为250°C，FID检测器，检测器温度为250°C，进样量为Ι.Ομ 1，分流比为10:1，载气:Ν2，流速20ml*min、
[0030]按照上述方法制备样品溶液，进行气相色谱检测，检测结果如图1所示，其检测得到的色谱峰为13个，保留时间分别为0.60min、0.76min、1.10min、3.44min、4.40min、
5.08min、5.59min、7.63min、8.05min、9.35min、10.lOmin、11.27min、13.61min,其中梓樣烯和桉油精两个成分峰堆积在一起(1.lOmin)，未能得到分离，其他色谱峰分离多数也不能满