专利名称：白花葛种苗组织培养技术工厂化生产的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及豆科葛属植物的组织培养工厂化生产种苗的工艺，具体的说是 以葛属植物新发掘的品种白花葛为对象的组织培养无性快速繁殖工厂化生产种 苗的工艺。
技术背景葛是我国传统的药食兼用植物，其中甘葛的研究最多，取得成果也较大， 开发研究较深入的也是甘葛，野葛根细长产量低，其淀粉含量也很低只作为药 用开发利用，在葛属植物研究中新品种发掘和开发研究则甚少。在开发利用中，有葛粉作葛食品的开发研究，这方面日本研究较多，但其原料主要从我国获取；有用葛叶葛渣作饲料、造纸、绳缆的原料和食用菌栽培 的基质等开发研究，也有用葛藤作桌、椅等家具的研究报道，但均未产业化， 市面上也未见其工业产品的销售；葛花是制成蛇、虫咬伤、解毒、治痈疮、疖 肿和醒酒的良药，市面上也未见药剂产品销售；葛花虽曾有消酒凉茶研制的报 道，但因消酒机理不明，无科学理论(药理)的支撑和花原料馈乏而流产，市 面上也未见该产品的销售，更无白葛花解酒保健茶研制的报道。但以上的开发 研究都有发展趋势和开发前景。2002年9~10月间在福建省武夷山区发现一种开白花的葛，是世界上唯一的 新品种(其它的葛都是开紫红花，或白紫相嵌的杂色花)，以白花葛为对象的工 厂化育苗工艺研究，国内外未见同类相关报道。白花葛的发掘、保存、繁育、 驯化、定向诱导培育和优选的系统研究也未见报导，更无采用生物技术、生物 化学和生物物理学技术，结合栽培技术对白花葛的定向诱导培育成白花葛新品 种的研究报道。白花葛的花是蝶形花、纯白素心、芳香、甘甜、富含贵重的医疗保健的显效成分异黄酮等，是极有开发前景的新药用植物。为了使其尽早地走向产业化 服务于人类，运用植物组织培养无性快速繁殖技术工厂化生产白花葛优质种苗 工艺的研究发明已是当务之急。 发明内容为了使新近发掘的新品种白花葛尽快走向产业化服务于人类，克服现有技 术的空缺，本发明的目的旨在提供一条低成本，快速繁育又能保持种性不变的工厂化育苗工艺。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是 一种白花葛组织培养工厂化 生产种苗的工艺，其特征是采取白花葛茎段带一潜伏芽的繁殖途径和应用正 交方法筛选1、 诱导培养2、 芽增殖培养3、 发根培养所述的诱导培养条件选择具有一个潜伏芽的茎段作外植体——经70%酒精18S——1%甲基托布津5min——10%漂白粉上清液10min——0.1%升荥 15rnin消毒——无菌水冲洗三次一接入诱导培养基——先在25t:，暗培养2 天后在1200LX、 12h/d诱导培养所述的诱导培养基配方(mg/l): FS+6"BA1+NAA0.6+IAA0.5;所述的芽增殖培养条件26"， 1300LX， 13h/d;所述的芽增殖培养基配方(mg/l): FS+6-BA0. 8+NAA0.5+IAA0.4;所述的发 根培养条件25'C， 1200LX， 12h/d;所述的发根培养基配方FS+NAA0.3mg/l+IAA0.5mg/l+O.P/。活性炭。白花葛种苗工厂化生产的工艺流程由附图给出。本发明生产的白花葛种苗与栽培的甘葛(即粉葛)种苗在相同立地条件和栽 培管理水平下对白花葛施以生物技术和生物化学技术的定向诱导培育驯化，冬 至后挖起块根进行农艺性状和内部结构的镜检、描述及淀粉和异黄酮含量的分析测定，并结合白花葛的生物学特性的考察，如此连续五年的重复实验研究， 结果选育成的白花葛新品种适应性和抗逆性都强、易栽培，块根比野生型的大、 薄壁细胞也多、贮藏的淀粉也提高，黄酮类化合物比甘葛的含量高2倍，表明: 白花葛已从野生型转为栽培型，培育成了产量和质量一体化的新品种。 本发明的有益效果是1、 产量和质量一体化的白花葛育成，为葛属植物增添了新的成员，在新品 种发掘和定向培育中，没有仅仅停留在传统的形态分类学和产量上，而提高到 人类社会的进步、生活质量提高的高度上，从营养和医疗保健功能俱佳的理想 上去发掘和培育葛的新品种，具有新颖性和自主创新精神。2、 运用生物技术、生物化学技术结合栽培技术等对白花葛进行驯化和定向 诱导培育，促进白花葛从野生型转为栽培型并提高其产量和质量，最后选育出 产量和质量一体化的理想葛新品种的系统研究，是个创造性的研究发明。该技术可作为其它块根、块茎类作物走向高产优质研究的借鉴。3、 由于本发明的培养基(包括诱导培养基、增殖培养基和发根培养基)的 配方是最佳配方、工厂化生产白花葛种苗的工艺是成熟可靠的，因此本工艺使 白花葛走向产业化服务于人类成为可能。4、 白花葛全身是宝，适宜综合开发利用。花是解酒保健茶研制的上好原料， 也是消酒、治疗酒疾、肠风下血等症的良药；叶是研制牲畜饲料或饲料添加剂 的极好原料。本发明揭示白花葛叶作兔粮，兔不生病，肉的营养保健功能大大 提高，有成为超级高档保健兔的希望；根是传统的心血管疾病防治和解肌体各 种大毒、开胃下食、排瘀血、通小肠，散郁火、治糖尿病等症的良药。具有极 大的社会效益、经济效益和广阔的开发前景。
图1是本发明的白花葛种苗工厂化生产的工艺流程。
具体实施方式
实施例l:优选白花葛作外植体的母本1、 诱导培养取具有一潜伏芽的茎段作外植体——经70%酒精18S——1% 甲基托布津5min——10%漂白粉上清液10min——0.1%升汞15min消毒——无 菌水冲洗三次——^S入诱导培养基——先在25°C,暗培养2天后在1200LX、 12h/d诱导培养。诱导培养基配方(mg/l): FS+6BA1+NAA0.6+IAA0.5;结果诱导成功率高达80%以上。2、 芽增殖培养培养条件26'C, 1300LX， 13h/d。增殖培养基配方(mg/l): FS+6BA0. 8+NAA0.5+IAA0.4。结果芽增殖率高达5~6倍/28~30天3、 发根培养培养条件25*€， 1200LX， 12h/d;发根培养基配方(mg/l): FS+NAA0.3mg/l+IAA0.5mg/l+O.P/。活性炭o结果10天左右即发根，根多而粗壮。 实施例2:在武夷山市和浦城县的山地和农地分别栽培本工艺生产的白花葛，共6670 多M2，生长发育良好，且都如期(栽培2年)白花绽放，未见其它颜色的花(以后则每年均 在9月至10月初开花)，其块根的有效成分测定均高于其野生种，证明本发明的培养基配方 是最佳的，工艺是成熟可靠的。实施例3:本实例为本发明的工艺流程，请参阅图1的工艺流程。从白花葛发现并采用组织培养快速繁殖技术进行种质保存后，即开始为其 走向产业化必备的白花葛优质种苗工厂化生产工艺的研究，经一年研究建立了 快繁工艺，然后开始以提高功效、降低成本为宗旨的工艺革新研究。据曰本研究报到和本研究所的实践均表明应用植物组织培养无性快速繁 殖技术生产种苗的生产成本，70%消耗在人工费用上。因此工艺革新势在必行。 经一年多的几十次工艺革新实验，终于完就了本工艺流程，其实施效果是1、工艺流畅，能实现室内外、各车间工作专业化，但分工不分家，工作紧 张，但工作有序、忙而不乱，不出现窝工、误工现象，功效提高一倍。2、 人工费用大大降低主要由功效和工作质量提高带来的效益，其中功效 又取决各车间工作的专业化、分工不分家、工作有序，忙而不乱；工作质量则 主要取决于各车间人员专业化后的素质提高带来产品质量的提高，包括培养 基的制备、污染率的降低、试管苗培养苗壮、移栽成活率的提高等。3、 通过培养基贮备室把培养基制备车间和种苗繁育车间联系了起来，实现 了互相促进又相互监督，成为共同生产种苗的有机整体；通过培养室又把种苗 繁育车间与种苗移栽车间联系了起来，形成室内外统一整体，作为工厂化生产种苗质量的验收车间(试管苗移栽房)从移栽成活率可检验室内每一批生产的 种苗是否茁壮、有无污染。而种苗繁育车间则可以通过试管苗移栽的成活率检 测种苗移栽车间人员的工作质量，实现互相监督共同提高、劲往一处使(即生 产优质种苗)之目的。
权利要求
1、一种白花葛种苗组织培养技术工厂化生产的工艺，其特征是采取白花葛茎段的繁殖途径和应用正交方法筛选1)诱导培养；2)芽增殖培养；3)发根培养。
2、 根据权利要求1所述的一种白花葛种苗组织培养技术工厂化生产的工艺， 其特征是所述的诱导培养条件选择具有潜伏芽的茎段作外植体——经70%酒精18S——P/。甲基插托布津5min——10%漂白粉上清液10min——0.1%升泵 15min消毒一无菌水冲洗三次一接入诱导培养基一先在25"C,暗培养2 天后在1200LX、 12h/d诱导培养。
3、 根据权利要求1所述的一种白花葛种苗组织培养技术工厂化生产的工艺， 其特征是所述的诱导培养基配方mg/h FS+6-BAI+NAA0.6+LAA0.5。
4、 根据权利要求1所述的一种白花葛种苗组织培养技术工厂化生产的工艺， 其特征是所述的芽增殖培养培养条件26'C， 1300LX， Bh/d。
5、 根据权利要求1所述的一种白花葛种苗组织培养技术工厂化生产的工艺， 其特征是所述的芽增殖培养基配方mg/h FS+6-BA0. 8+NAA0.5+LAA0.4。
6、 根据权利要求1所述的一种白花葛种苗组织培养技术工厂化生产的工艺， 其特征是所述的发根培养条件25'C， 1200LX， 12h/d。
7、 根据权利要求1所述的一种白花葛种苗组织培养技术工j化生产的工艺， 其特征是所述的发根培养基配方mg/h FS+NAA0.3mg/l+LAA0.5mg/l+0.m活 性炭。
8、 白花葛组织培养工厂化生产种苗的工艺流程，其特征是葛种苗工厂化 生产工艺，分为室外和室内二个部份室外有试管苗移栽房(车间)；室内(1)有培养基生产线(车间)一培养基母液配制室一生产培养基配 制室一高压灭菌房和洗涤房一培养基贮备室一缓冲室；(2)有种苗繁會车间；一缓冲室一接种室一培养室一室外生产。
全文摘要
本发明公开了一种白花葛种苗组织培养技术工厂化生产的工艺，属豆科葛属植物的组织培养工艺。本工艺采取白花葛茎段繁殖途径和应用正交实验法筛选诱导培养、增殖培养和发根培养的最佳培养基配方和培养条件，实验证明本工艺是一种快速实现产业化的途径，又可保持其种性不变，是成熟可靠的工厂化生产葛种苗的工艺。利用本工艺繁育的白花葛可研制众多的医疗保健产品，具极大的社会效益和经济效益。运用生物技术和生物化学技术等，结合栽培技术，对白花葛进行驯化和定向诱导培育，促进白花葛从野生型转为栽培型并提高其产量和质量，最后选育出产量和质量一体化的理想葛新品种的系统研究，也是个创造性的发明，是本发明工厂化生产白花葛种苗的前提。
文档编号A01H4/00GK101331850SQ20071000976
公开日2008年12月31日 申请日期2007年11月9日 优先权日2007年11月9日
发明者兰章廉, 范子南 申请人:福州市仓山区珍奇生物工程研究所