离体诱导百合异源四倍体的方法与流程

文档序号:11781030阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种离体诱导百合异源四倍体的方法,其特征在于,具体步骤如下:

1)预培养:组培新铁炮百合远缘杂种得到小鳞茎,将小鳞茎的鳞片切片,接种到不定芽诱导培养基上预培养,得到预培养后的鳞片切片;

2)秋水仙素溶液配制:将秋水仙素用二甲基亚砜助溶后配制成质量百分含量0.05-0.1%的溶液,高压灭菌,得到秋水仙素溶液;

3)多倍体诱导:将1)所述预培养后的鳞片切片清洗后浸泡于2)所述秋水仙素溶液中进行诱导处理,得到诱导后的鳞片切片;

4)纯合四倍体的诱导和培养:将3)所述诱导后的鳞片切片清洗后,接种于不定芽诱导培养基中循环继代培养得到再生植株,转入丛生芽生长培养基中培养,得到长大的再生植株;

5)鳞茎膨大培养:将4)所述长大的再生植株接种于高糖培养基培养,得到鳞茎膨大植株;

6)生根培养:将5)所述鳞茎膨大植株接种到生根培养基上培养,得到生根的鳞茎膨大植株;

7)倍性鉴定:鉴定染色体倍性挑选四倍体,至此得到完整的百合异源四倍体。

2.如权利要求1所述一种离体诱导百合异源四倍体的方法,其特征在于,步骤1)所述新铁炮百合远缘杂种,为新铁炮百合远缘杂交后进行胚拯救得到杂交组培苗。

3.如权利要求2所述一种离体诱导百合异源四倍体的方法,其特征在于,步骤1)所述新铁炮百合远缘杂种为‘回归’。

4.如权利要求1所述一种离体诱导百合异源四倍体的方法,其特征在于,步骤1)所述预培养的时间为7-25天。

5.如权利要求1所述一种离体诱导百合异源四倍体的方法,其特征在于,步骤1)所述预培养的时间为7天。

6.如权利要求1所述一种离体诱导百合异源四倍体的方法,其特征在于,所述秋水仙素溶液质量百分含量0.05%。

7.如权利要求1所述一种离体诱导百合异源四倍体的方法,其特征在于,步骤3)所述诱导处理的时间为18-36小时。

8.如权利要求1所述一种离体诱导百合异源四倍体的方法,其特征在于,步骤3)所述诱导处理的时间为24小时。

9.如权利要求1所述一种离体诱导百合异源四倍体的方法,其特征在于,具体步骤如下:

1)预培养:组培新铁炮百合远缘杂种得到小鳞茎,将小鳞茎的鳞片切片,接种到不定芽诱导培养基上预培养7天,得到预培养后的鳞片切片;

2)秋水仙素溶液配制:将秋水仙素用二甲基亚砜助溶后配制成质量百分含量0.05%的溶液,高压灭菌,得到秋水仙素溶液;

3)多倍体诱导:将1)所述预培养后的鳞片切片清洗后浸泡于2)所述秋水仙素溶液中进行诱导处理24小时,得到诱导后的鳞片切片;

4)纯合四倍体的诱导和培养:将3)所述诱导后的鳞片切片清洗后,接种于不定芽诱导培养基中循环继代培养得到再生植株,转入丛生芽生长培养基中培养,得到长大的再生植株;

5)鳞茎膨大培养:将4)所述长大的再生植株接种于高糖培养基培养,得到鳞茎膨大植株;

6)生根培养:将5)所述鳞茎膨大植株接种到生根培养基上培养,得到生根的鳞茎膨大植株;

7)倍性鉴定:鉴定染色体倍性挑选四倍体,至此得到完整的百合异源四倍体。

10.权利要求1-9任一项所述的一种离体诱导百合异源四倍体的方法在百合育种中的应用。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1