一种高诱导率的香蕉花药组织培养方法与流程

文档序号:11867043阅读:371来源:国知局

本发明属于香蕉组织培养技术领域,尤其涉及一种高诱导率的香蕉花药组织培养方法。



背景技术:

香蕉(学名:Musa nana Lour.)芭蕉科芭蕉属植物,又指其果实。热带地区广泛栽培食用。香蕉味香、富含营养,终年可收获,在温带地区也很受重视。植株为大型草本,从根状茎发出,由叶鞘下部形成高3~6公尺(10~20尺)的假杆;叶长圆形至椭圆形,有的长达3~3.5公尺(10~11.5尺),宽65公分(26寸),10~20枚簇生茎顶。穗状花序下垂[1],由假杆顶端抽出,花多数,淡黄色;果序弯垂,结果10~20串,约50~150个。植株结果后枯死,由根状茎长出的吸根继续繁殖,每一根株可活多年。原产亚洲东南部:中国台湾、海南、广东、广西等地区均有栽培。目前香蕉是一种广受欢迎的水果,也是部分地区的主要粮食,拥有极大市场需求量,对香蕉进行快速繁殖的研究具有一定的必要性,不仅能解决庞大的市场需求量,也能在一定程度上保存优良的香蕉品种,组织培养是香蕉快速繁殖的方法之一,然而现有的香蕉培养方法中的诱导率已经无法满足日渐增长的市场需求。

稀土元素是17种特殊的元素的统称,它的得名是因为瑞典科学家在提取稀土元素时应用了稀土化合物,所以得名稀土元素。然而稀土是历史遗留下来的名称,稀土是从18世纪末开始陆续发现,当时人们常把不溶于水的固体氧化物称为土,例如,将氧化铝称为“陶土”,氧化钙称为”碱土“等。稀土一般是以氧化物状态分离出来的,当时比较稀少,因而得名为稀土(Rare Earth,简称RE或R),然而经过大量的科学研究,在组织培养当中添加了稀土元素会大大地提高组织培养的质量。

铈是周期系第ΙΙΙ族副族镧系元素,一种稀土元素。原子序数58。稳定同位素:136、138、140、142。灰色金属,有展性。密度:正方晶体6.9,立方晶体6.7。熔点799℃,沸点3426℃。铈是一种银灰色的活泼金属,粉末在空气中易自燃,易溶于酸。铈的名称来源于小行星谷神星的英文名。铈在地壳中的含量约0.0046%,是稀土元素中丰度最高的。



技术实现要素:

基于现有技术中香蕉的需求量巨大但供给品质参差不齐,且现有培养基的诱导效率低的问题,本发明提供一种高诱导率的香蕉花药组织培养方法,其以N6培养基为基础培养基,调整了培养基中激素配方和添加了稀土元素,并在后期诱导培养中添加增强颜色光源,极大地提高了香蕉花药的诱导率,本发明具有诱导率高和成本低的优点。

一种高诱导率的香蕉花药组织培养方法,其包括以下步骤:

步骤S10,按以下配方配制培养基:以N6培养基为基础培养基,添加TDZ (噻苯隆)的浓度为0.5mg/L、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)的浓度为2.5 mg/L、活性炭的浓度为0.15 mg/L、硝酸铈的浓度为3g/L,维生素的浓度为0.3mg/L,琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L;

步骤S20,选择品质优良、健康的香蕉作为母本,除去花上的苞片和花瓣,在超净工作台中对花使用75%酒精消毒2分钟,倒掉酒精,再用0.1%升汞,另加2~3滴吐温80,消毒20~30分钟,最后用无菌水冲洗4遍;

步骤S30,将消毒完的花使用手术刀切开并取出花药,铺洒在配制好的培养基中,将组培瓶密封取出,并转移到组培室中;

步骤S40,将组培室中的环境温度调整为27℃~31℃,使用自然光培养一周,一周后调整光源为800~1000Lxs,光照时间为光照16小时/黑暗8小时;

步骤S50,在接种后一周内添加红色增强光源,一周之后增加蓝色增强光源。

其中,所述的步骤S10中还包括步骤S11,对培养基进行121℃的高温蒸汽灭菌20分钟。

其中,所述的步骤S50中的增强光源是LED灯,红色增强光源是红色LED灯,蓝色增强光源蓝色LED灯。

其中,所述的步骤S50中的红色光源是波段为650nm-670nm的红光,蓝色光源是波段为450nm-470nm的蓝光。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述。

一种高诱导率的香蕉花药组织培养方法,其包括以下步骤:

步骤S10,按以下配方配制培养基:以N6培养基为基础培养基,添加TDZ (噻苯隆)的浓度为0.5mg/L、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)的浓度为2.5 mg/L、活性炭的浓度为0.15 mg/L、硝酸铈的浓度为3g/L,维生素的浓度为0.3mg/L,琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L,然后执行步骤S11,对培养基进行121℃的高温蒸汽灭菌20分钟;

步骤S20,选择品质优良、健康的香蕉作为母本,除去花上的苞片和花瓣,在超净工作台中对花使用75%酒精消毒2分钟,倒掉酒精,再用0.1%升汞,另加2~3滴吐温80,消毒20~30分钟,最后用无菌水冲洗4遍;

步骤S30,将消毒完的花使用手术刀切开并取出花药,铺洒在配制好的培养基中,将组培瓶密封取出,并转移到组培室中;

步骤S40,将组培室中的环境温度调整为27℃~31℃,使用自然光培养一周,一周后调整光源为800~1000Lxs,光照时间为光照16小时/黑暗8小时;

步骤S50,在接种后一周内添加红色增强光源,红色光源是波段为660nm的红光LED灯,一周之后增加蓝色增强光源,蓝色光源是波段为460nm的蓝光LED灯。

将已经消毒的外植体分别接种到N6培养基中进行常规组织培养作为对照组,然后设置实验组使用本发明提供的组织培养方法,20天后统计诱导率得出对照组的诱导率为86%,实验组诱导率为98%,实验组诱导率远远高于对照组。

以上所述实施例仅表达了本发明的一种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

当前第1页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1