每个苗盘7.5升±壤)并培养2 天。随后，将种子放置在±壤中约1cm深度处。
[0110] 播种后第4天(苗期)开始植物处理并每周重复持续最多3周。对于每种植物处理， 制备新鲜的S.na1:alensis培养液。因此，将来自Streptomycesnatalensis菌株DS73870的 冻结小瓶转移至含20ml酵母麦芽提取培养液(YME)的100ml带有挡板的锥形瓶中。将锥形瓶 在培养摇床中在28°C、180rpm下培养3-4天（G24环境培养振荡器，New化unswick ScientificCo.)。随后，将2ml培养的培养液转移至含200mlYME培养液的500ml带有挡板 的锥形瓶中。将培养基在28°C、180rpm下培养另外4天（轨道解育器，Inr200-010V, 6日11日扯日1119)。培养5.11日1日1日11313 0573870样品之后，平均细菌计数为7.1(+/-0,6)1〇邑 CFU/ml〇
[0111] 将样品运送(在冷却条件下）至溫室实验室设施中并在24小时内处理。因此，将包 含S.natalensisDS73870的培养基在饮用水中稀释100倍。通过给幼苗或茎周围的±壤诱 水，将7ml运种经稀释的培养基加入到每种植物中。在与经S.na化lensis处理的样品相同的 条件下处理对照样品，例外是:仅加入饮用水。
[0112] 每种处理重复检验4次。每次重复由含96粒种子的1个苗盘组成。根据EPP0指南PP 1/148(2)、PP1/135(3)和PP1/152(4)进行试验。将处理维持在受控制的溫室条件下并W 设定的时间间隔诱水。播种后，每周评估幼苗或植物的：萌发率和疾病严重度持续最长1个 月。
[0113] 表8(萌发率)和表9(植物疾病严重度)总结了该研究的结果。与利用无菌培养基的 处理(对照）相比，当利用Str邱tomycesnatalensisDS73870处理植物时，观察到的未受影 响植物的数目增加。此外，与经S.na化lensis处理的样品相比，对照样品中未萌发或者萌发 后死亡的窝宦植物(被归类为未出现）的量要高得多。对于植物疾病严重度，也观察到了运 种趋势，其中与对照相比，经S.natalensisDS73870处理的植物显示出明显降低（参见表 9)。
[0114] 总之，通过向植物施用产生那他霉素的S.natalensis菌株，受真菌植物病原体影 响的作物的植物生长和生命力二者均被增强。
[0115] 表1:在YME琼脂平板上在28°C下培养7天后，针对一些Str邱tomycesnatalensis 菌株检测的不同植物病原体的真菌半径
[0116]
[011引表2:在ΥΜΕ琼脂平板上在28°C下培养7天或11天后，针对一些产生那他霉素的 Streptomyces物种的菌株检测的不同植物病原体的真菌半径
[0119]
[0122] 表3 :在ΥΜΕ琼脂平板上在28°C下培养11天和25天后，针对Streptomyces 11过古31611318〇573870和0573871检测的￥61'古;!_(3；!_11;!_111113化〇-3吐11111(〔85321.91)的真菌半径
[0123]
[0124] 表4:在YME琼脂平板上在28°C下培养28天后，针对Streptomycesnatalensis DS73870和DS73871 检测的Cercosporazeae-maydis(CBS117757)的真菌半径
[0125]
[0127] 表5:在ΥΜΕ琼脂平板上在28°C下培养6天后，针对一些Streptomycessp.检测的 Colletotrichumgloeospo;rioides(CBS272.51)的真菌半径[012 引
[01巧]表6:在YME琼脂平板上在28°C下培养7天后，针对一些Streptomycessp.检测的 Fusariumoxysporumf.sp.lycopersici(CBS414.90)的真菌半径
[0130]
[0132]表7:琼脂栓塞生物检测。针对S.na化lensisATCC27448和不同比率的溶解在甲醇 (5%重量/重量）中的纯净那他霉素检测的Colletotrichumgloeospo;rioides(CBS272.51) 的真菌半径。在28°C下培养7天后，在ΥΜΕ琼脂平板上产生的结果。
[0133]
[0135] *溶解在含5%重量/重量甲醇的ΥΜΕΑ中，给出的浓度是琼脂栓塞的浓度表8:利用 StreptomycesnatalensisDS73870的植物处理对人为地用lihizoctoniasolani感染的生 长在±壤中的窝宦的萌发率的影响。
[0136]
[0137] *从播种日（第0天)开始测量
[0138] **未萌发或者萌发后死亡
[0139] 表9 :利用Str ep tomy Ce S nata1enS i SDS73870的植物处理对人为地用 化izoctonia solani感染的生长在±壤中的窝宦的植物疾病严重度的影响。
[0140]
[0141]
[0142] *从播种日（第0天)开始测量
[0143] **未萌发或者萌发后死亡
[0144] 参考文献
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[015引与被保藏的微生物相关的说明
[0159] (PCXRule13bis)
[0160]
[0161]表PCT/R0/134(1992年7 月）
【主权项】
1. 一种用于增强植物生长、作物产量或二者的方法，所述方法包括将至少一种产生那 他霉素的细菌菌株施用至植物的步骤。2. 根据权利要求1所述的方法，其中所述菌株以包含农业上可接受的载体的组合物的 形式被施用。3. 根据权利要求2所述的方法，其中所述组合物包含103-101()Cfu/g载体。4. 根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述产生那他霉素的细菌菌株选自 Streptomycesnatalensis菌株、Streptomycesgi1vosporeusl^i^^PStreptomyces chattanoogensis菌株。5. 组合物，其包含产生那他霉素的细菌菌株和农业上可接受的载体。6. 植物，其包含至少一种产生那他霉素的细菌菌株或根据权利要求5的组合物。7. -种使植物生长的方法，所述方法包括以下步骤： a) 将至少一种产生那他霉素的细菌菌株施用至植物，和 b) 使所述植物生长。8. -种生产作物的方法，所述方法包括以下步骤： a) 将至少一种产生那他霉素的细菌菌株施用至植物， b) 使所述植物生长以生产作物，和 c) 收获所述作物。9. 一种通过用至少一种产生那他霉素的细菌菌株处理产品来保护所述产品免受真菌 的方法。10. 根据权利要求9所述的方法，其中所述产品是农业产品。11. 根据权利要求10所述的方法，其中在收获前处理所述产品。12. 农业产品，其包含至少一种产生那他霉素的细菌菌株。13. 至少一种产生那他霉素的细菌菌株用于保护产品免受真菌的用途。
【专利摘要】本发明涉及用于增强植物生长和作物产量的组合物。此外，本发明涉及这些组合物的生产和这些组合物的用途。CBS 13796520140520
【IPC分类】A01N63/00
【公开号】CN105431044
【申请号】CN201480030693
【发明人】露诗·艾美莉亚·威廉敏娜·唐纳斯, 曼杰·库马尔
【申请人】帝斯曼知识产权资产管理有限公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2014年5月28日
【公告号】EP3003047A1, US20160128336, WO2014191450A1