增殖系数为3.03;生 根培养中，开始生根的时间为8天，生根培养结束时，每株平均根数约为4根，根长2-4cm。
[0080] 实施例9
[0081] 本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
[0082] 步骤(2)中，启动培养基的组成为:MS基本培养基，补充0.5mg/L PVP、30g/L薦糖、 6g/L琼脂；
[0083] 步骤(3)中，增殖培养基的组成为:WPM基本培养基，补充0.05mg/L 6-BA、30g/L薦 糖、6g/L琼脂；
[0084] 步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.5mg/L NAA、20g/L薦 糖、6g/L琼脂。
[0085] 本实施例中，启动培养过程中，第一个蔽芽生成的时间为15天，启动培养结束时， 蔽芽伸长2-3cm;增殖培养过程中，5-6天接种的蔽芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤， 第一个丛生芽生成的时间为10天，增殖培养结束时，丛生芽株高2-5cm，增殖系数为7-8; 生根培养中，开始生根的时间为8天，生根培养结束时，每株平均根数约为4根，根长为2- 4cm。
[0086] 实施例10
[0087] 启动培养基中生长激素成分和浓度对蔽芽生长的影响
[0088] 取生长情况一致的外植体若干，经过灭菌惊干后接种到pH值为6.0的启动培养基 上培养2-3周，培养溫度为23-27°C，光照强度为2000-2500LX，光周期为14/1化。其中启 动培养基采用MS基本培养基，补充PVP、薦糖、琼脂。在MS基本培养基、薦糖、琼脂均相同的条 件下，根据PVP的浓度进行分组，观察并记录培养基中外植体的培养情况，具体分组及培养 结果见表1。
[0089] 表1启动培养基中生长激素成分和浓度对蔽芽生长的影响结果
[0090]
[0091] 从上表可W看出，PVP为1. Omg/L时，外植体褐化情况较少，分化率高，平均蔽芽长 度也更长，为启动培养基的最适合的生长激素组成条件。
[0092] 实施例11
[0093] 增殖培养基中生长激素成分和浓度对增殖的影响
[0094] 取生长情况一致的经过启动培养的蔽芽若干，接种到增殖培养基上培养3-5周， 培养溫度为23-27°C，光照强度为2000-2500LX，光周期为16/她。其中增殖培养基采用WPM 基本培养基，补充6-BA、薦糖、琼脂。在WPM基本培养基、薦糖、琼脂相同的条件下根据6-BA的 浓度进行分组，观察并记录培养基中蔽芽的培养情况，具体分组及培养结果见表2。
[0095] 表2增殖培养基中生长激素成分和浓度对增殖的影响结果
[0096]
[0097] 从上表可W看出，6-BA为0. lOmg/L时，其增殖率高，增殖系数最大，株高也更高，为 增殖培养基的最适合的生长激素组成条件。
[0098] 实施例12
[0099] 生根培养基中生长激素成分和浓度对生根的影响
[0100] 取生长情况一致的经过增殖培养的丛生芽的单株若干，接种到增殖培养基上培养 2-3周，培养溫度为23-27°C，光照强度为2000-2500LX，光周期为16/8h。其中，生根培养 基采用1/2MS基本培养基，并补充NAA、薦糖、琼脂，在1/2MS基本培养基、薦糖、琼脂条件相同 的情况下，根据NAA的浓度进行分组，观察并记录培养基中丛生芽的单株的培养情况，具体 分组及培养结果见表3。
[0101 ]表3生根培养基中生长激素成分和浓度对生根的影响结果
[0102]
[0104] 从上表可W看出，NAA为0.20mg/L时，生根率达到95%，平均生根数和平均根长也 均较高，且长势较好，为生根培养基的最适合的生长激素条件。
[0105] W上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对 本发明的限制，本发明的保护范围应当W权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的 普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可W做出若干改进和润饰，运些改 进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于:包括以下步骤： (1) 外植体选取及灭菌:切取美国红楓带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理； (2) 启动培养:将步骤（1)处理后的外植体接种到启动培养基中培养2-3周，腋芽生成， 所述启动培养基的组成包括:MS基本培养基，补充0.1-2.0mg/LPVP，所述启动培养基的pH 值为 5.8-6.2; (3) 增殖培养:切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养3-5周，丛生芽生成， 所述增殖培养基的组成包括:WPM基本培养基，补充0.01-0.5mg/L6-BA; (4) 生根培养:将步骤(3)所得丛生芽分离成单株，接种到生根培养基中培养2-3周即 得美国红楓无菌苗，所述生根培养基的组成包括：1/2MS基本培养基，补充0.05-0.5mg/L NAA； 在步骤(2)启动培养中，切取所述外植体带芽茎段上部的可用茎段，重新接种到所述启 动培养基中培养，直至腋芽生成，将所述腋芽切下供步骤(3)增殖培养，循环2-3次。2. 根据权利要求1所述的一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于:所述外植体选取 及灭菌的具体操作为:选取美国红楓幼嫩枝条，去掉叶片，在洗涤液中浸泡5-15min，然后 在流水中冲洗20-35min;在无菌操作台上，用75%的酒精处理25-40s，无菌水冲洗2-4 次，再用0.1 %的升汞处理4一8min，无菌水冲洗5-7次，晾干，切割成长度为1一2cm的带芽 茎段即可。3. 根据权利要求1所述的一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于:所述启动培养基 的组成包括:MS基本培养基，补充0.5-2.Omg/LPVP。4. 根据权利要求3所述的一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于:所述启动培养基 的组成包括:MS基本培养基，补充1.Omg/LPVP。5. 根据权利要求1所述的一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于:所述增殖培养基 的组成包括:WPM基本培养基，补充0.05-0.5mg/L6-BA。6. 根据权利要求5所述的一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于:所述增殖培养基 的组成包括:WPM基本培养基，补充0.lmg/L6-BA。7. 根据权利要求1所述的一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于:所述生根培养基 的组成包括:1/2MS基本培养基，补充0.1-0.5mg/LNAA。8. 根据权利要求7所述的一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于:所述生根培养基 的组成包括:1/2MS基本培养基，补充0.2mg/LNAA。9. 根据权利要求1所述的一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于：所述启动培养 基、所述增殖培养基中均还补充30g/L鹿糖、6g/L琼脂;所述生根培养基中，还补充20g/L鹿 糖、6g/L琼脂。10. 根据权利要求1所述的一种美国红楓的组培快繁方法，其特征在于:所述启动培养、 增殖培养、生根培养步骤中，培养温度为23-27°C，光照强度为2000-2500Lx，所述启动培 养的光周期为14/12h，所述增殖培养和所述生根培养的光周期为16/8h。
【专利摘要】本发明公开一种美国红枫的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)外植体选取及灭菌：切取美国红枫带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理；(2)启动培养：将步骤(1)处理后的外植体接种到启动培养基中培养2—3周，腋芽生成；(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养3—5周，丛生芽生成；(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单株，接种到生根培养基中培养2—3周即得美国红枫无菌苗；所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，成活率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了人工成本，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105454048
【申请号】CN201511026125
【发明人】李飞, 赵玲
【申请人】四川禾木本业农林科技有限公司
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2015年12月30日