专利名称：复合酶水解鸡骨泥生产富含高钙的动物水解蛋白的新工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及复合酶水解鸡骨泥生产富含高钙的动物水解蛋白(HAP)的新工艺。
背景技术：
我国是禽肉生产的大国。以鸡肉为例，2004年，我国的鸡肉产量高达988万吨，占世界鸡肉产量的14.58％，约占鸡总重25％的鸡骨产量也相当可观。但传统观念认为骨头的营养价值不如肉类，严重阻碍了鸡骨的开发和利用。事实上，鸡骨中含有丰富的蛋白质和人体所需的微量元素以及磷脂、软骨素和维生素等多种营养素，且钙、磷、铁等矿物质的含量远远大于肉类。因而对鸡骨进行深度开发，不但使鸡骨中的营养成分得到充分的利用，还可以解决目前骨头无用的被动局面，为骨泥食品的发展打开市场。
动物水解蛋白(HAP)营养丰富，易于吸收与利用，可直接制成营养补充剂，或作为新型功能性调味料的基料应用于高档调味品和汤料的生产，或作为肉味前体物质，通过热反应技术，能模拟出比植物水解蛋白(HVP)更逼真而强烈的肉香物质。
目前HAP的生产原料主要以肉为主，原料价格高；若以鸡肉加工的副产品鸡骨为原料，HAP的生产成本将显著降低，而且与肉水解产物相比，鸡骨HAP中还含有丰富的天然钙。国内由于始终无法突破鸡骨的微细化技术，因此主要集中于研究酸解法生产鸡骨HAP。众所周知，酸水解耗时而且污染环境，水解产物分子量不均，而且部分氨基酸被破坏，而酶法水解生产的HAP以低分子量的小肽和有生物活性的L型游离氨基酸为主，能很好地保存蛋白质原有的营养价值。目前我国现已采用的酶法生产动物水解蛋白技术的主要不足之处在于1.所用的反应底物成本较高，多以肉为主，因而产品的价格偏高，无法普及。
2.酶解反应不够彻底，使原料的综合利用率低。
3.酶解产物存在诸如苦味、腥味等缺陷，大多通过吸附、包埋等物理方法或通过外加香料掩盖酶解产物风味的不足。
发明内容
本发明提供了复合酶水解鸡骨泥生产富含高钙的动物水解蛋白(HAP)的新工艺，它很好地解决了原料所带有的腥味和酶解过程产生的苦味问题，通过复合酶的协同作用能对原料进行彻底水解，产品多为短肽和游离氨基酸，能直接为人体吸收，提高了产品的综合利用率，且产品具有一定的ACE(血管紧张素转化酶)抑制活性。
本发明的技术方案的特征在于包括下列工艺步骤(1)原料预处理将鸡骨进行超微粉碎，制成80-100目的骨泥，加水配制鸡骨泥悬浮液，浓度为5％-8％(w/w，重量比)，80-100℃加热20-30分钟；(2)在(1)项制得的溶液中加入复合酶进行水解；(3)对(2)项制得的溶液灭酶升高反应体系温度至85℃-90℃保持10-20分钟；(4)将(3)项灭酶后的溶液过滤采用离心机，4000-4800转/分钟离心8-15分钟；(5)浓缩取(4)项离心后的上清液，浓缩至15％-25％(w/w)，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
在本发明的工艺中，由于受热后，蛋白质变性，会使酶解位点暴露，加快水解速度，但温度过高或时间过长，蛋白质过度聚合，不利于水解，因此对原料进行预处理时，选用80-100℃下加热20-30分钟。水解后升温至85℃以上的作用在于消灭残留的蛋白酶，以免在下-个工序中继续反应，造成干扰。
与现有技术相比，本发明具有如下优点1.本发明采用价格低廉的鸡骨为原料，生产高附加值的动物水解蛋自，从而大大降低了成木。
2.本发明采用低温粉碎，不易破坏鸡骨中的营养成分，使骨骼中的营养物质得以充分利用，如产品中含钙量为1％；3.在原有基础上采用复合酶水解，酶解较彻底，产物多为短肽和游离氨基酸，易被人体直接吸收，且益于人体健康；4.水解产物风味良好，无任何苦味和异味，无需脱腥、脱苦处理，简化了酶解的工艺。
采用本发明的生产工艺，产品的水解度为25-40％，氮收率高达85-90％，含钙约为1％，能有效地消除鸡骨的腥味以及酶解产生的苦味，大大提高了产品的品质，且通过高效液相色谱，对本发明鸡骨泥的酶解产物进行检测后，初步鉴定产品具有ACE(血管紧张素转化酶)抑制活性。
具体实施例方式
本发明的特征在于包括下列工艺步骤(1)原料预处理将鸡骨进行超微粉碎，制成80-100目的骨泥，加水配制鸡骨泥悬浮液，浓度为5％-8％(w/w，重量比)，80-100℃加热20-30分钟；(2)在(1)项制得的溶液中加入酶进行水解；(3)对(2)项制得的溶液灭酶升高反应体系温度至85℃-90℃保持10-20分钟；(4)将(3)项灭酶后的溶液过滤采用离心机，4000-4800转/分钟离心8-15分钟；(5)浓缩取(4)项离心后的上清液，浓缩至15％-25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液；
(6)对(5)项浓缩后的浓缩液进行喷雾干燥，制得淡黄色粉末状成品，喷雾干燥时采用喷雾干燥器进行干燥，喷雾干燥器的喷头压力2-3kg、进气口温度280-290℃、壶温80-90℃、流速约1-1.2L/h。
在加入酶进行水解过程中，对蛋白酶的要求是水解时相互干扰低，产物的水解度高、风味好，经比较，选用Alcalase水解蛋白酶(诺维信公司商品酶)、或者Protamex复合蛋白酶(诺维信公司商品酶)、或者胰酶加入水解，或者综合考虑内切酶和外切酶的作用位点以及产品的氮收率、风味、澄清度等因素，选用Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶(诺维信公司商品酶)先后加入水解，或者选用Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶组合水解(两种酶加入后共同水解)，或者选用胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶组合水解(两种酶先后加入后共同水解)，或者选用胰酶和Protamex复合蛋白酶组合水解(两种酶先后加入后共同水解)，或者选用胰酶和木瓜蛋白酶先后加入水解。
选用Alcalase水解蛋白酶加入时，Alcalase水解蛋白酶用量为鸡骨泥原料重量的0.75-1.5％，控制反应温度为60-65℃，调整pH为8.0-9.5，反应1-2小时；选用Protamex复合蛋白酶加入时，Protamex复合蛋白酶用量为鸡骨泥原料重量的1.0-1.5％，控制温度为50-55℃，调整pH为6.5-7.5，反应1-2小时；选用胰酶加入时，胰酶用量为鸡骨泥原料重量的0.5-1.5％，控制温度为50-55℃，调整pH为8.0-9.0，反应1-2小时；选用Alcalase和Flavourzyme复合风味蛋白酶先后加入时，Alcalase和Flavourzyme复合风味蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的0.75-1.5％和1.5-2.5％；先控制反应温度为60-65℃，调整pH为8.0-9.5，加入Alcalase；水解1小时后，控制温度为50-55℃，调整pH为6.5-7.5，加入Protamex，反应2-4小时；选用Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶组合水解(两种酶加入后共同水解)时，Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的1.0-1.5％和1.5-3.0％，控制反应温度为50-55℃，调整pH为6.5-7.5，反应2-3小时；选用胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶组合水解(两种酶先后加入后共同水解)时，胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.5-2.5％，控制反应温度为50-55℃，调整pH为8.0-9.0，反应2-3小时；选用胰酶和Protamex复合蛋白酶组合水解(两种酶先后加入后共同水解)时，胰酶和Protamex复合蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.0-1.5％，控制反应温度为50-55℃，调整pH为8.0-9.0，反应2-3小时；选用胰酶和木瓜蛋白酶先后加入时，胰酶和木瓜蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.0-2.0％；先控制反应温度为50-55℃，调整pH为8.0-9.0，加入胰酶；水解1小时后，控制温度为60-70℃，调整pH为5.5-6.5，加入木瓜蛋白酶，反应1-2小时。
通过对照实验，比较分步水解(第一种酶水解一定程度后加入第二种酶)与组合水解(两种酶先后加入后共同水解)对酶解效果的影响。
(1)分段水解Alcalase水解蛋白酶反应一段时间后再加入Flavourzyme复合风味蛋白酶；组合水解Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶先后加入后共同水解；比较结果分段水解效果更好。
(2)分段水解AS1.398中性蛋白酶反应一段时间后再加入Protamex复合蛋白酶；组合水解Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶先后加入后共同水解；比较结果两种水解方法效果相差不大，为简化工艺，选用后者。
(3)分段水解胰酶反应一段时间后再加入Flavourzyme复合风味蛋白酶；组合水解胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶先后加入后共同水解；比较结果两种水解方法效果相差不大，为简化工艺，选用后者。
(4)分段水解胰酶反应一段时间后再加入Protamex复合蛋白酶；组合水解胰酶和Protamex复合蛋白酶先后加入后共同水解；比较结果两种水解方法效果相差不大，为简化工艺，选用后者。
(5)分段水解胰酶反应一段时间后再加入木瓜蛋白酶；组合水解胰酶和木瓜蛋白酶先后加入后共同水解；比较结果分段水解效果更好。
通过比较(1)(5)选用分段水解；(2)(3)(4)选用组合水解。
进一步比较组合水解时两种酶加入的先后顺序对酶解的影响，发现Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶加入的顺序对水解效果影响不大；胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶先后加入时的水解效果更好；胰酶和Protamex复合蛋白酶先后加入时的水解效果更好。
下面通过具体实施例对本发明做进一步的说明实施例11.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(80日)。加水至底物浓度为5％(重量比)，于90℃下加热25分钟。
2.水解控制反应温度为60℃，调整pH为9.5，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量为原料重量1.0％，反应2小时。
3.灭酶85℃下保持20分钟。
4.过滤采用离心机，4000转/分钟离心15分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至20％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2kg、进气口温度290℃、壶温90℃、流速约1.2L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例21.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为8％(重量比)，于80℃下加热30分钟。
2.水解控制反应温度为65℃，调整pH为8.0，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量为原料重量0.75％，反应1.5小时。
3.灭酶90℃下保持10分钟。
4.过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2.5kg、进气口温度280℃、壶温85℃、流速约1.1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例31.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为6％(重量比)，于100℃下加热20分钟。
2.水解控制反应温度为62℃，调整pH为9.0，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量为原料重量1.5％，反应1小时。
3.灭酶87℃下保持15分钟。
4.过滤采用离心机，4500转/分钟离心10分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至15％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力3kg、进气口温度300℃、壶温80℃、流速约1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例41.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为6％(重量比)，于100℃下加热20分钟。
2.水解控制反应温度为50℃，调整pH为7.5，加入Protamex复合蛋白酶，加酶量为原料重量1.5％，反应1小时。
3.灭酶90℃下保持10分钟。
4.过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至20％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2.5kg、进气口温度280℃、壶温85℃、流速约1.1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例51.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(80目)。加水至底物浓度为5％(重量比)，于90℃下加热25分钟。
2.水解控制反应温度为55℃，调整pH为6.5，加入Protamex复合蛋白酶，加酶量为原料重量1.2％，反应1.5小时。
3.灭酶87℃下保持15分钟。
4.过滤采用离心机，4500转/分钟离心10分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力3kg、进气口温度300℃、壶温80℃、流速约1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例61.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为8％(重量比)，于80℃下加热30分钟。
2.水解控制反应温度为52℃，调整pH为7.0，加入Protamex复合蛋白酶，加酶量为原料重量1％，反应2小时。
3.灭酶85℃下保持20分钟。
4.过滤采用离心机，4000转/分钟离心15分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至15％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2kg、进气口温度290℃、壶温90℃、流速约1.2L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例71.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(80目)。加水至底物浓度为5％(重量比)，于90℃下加热25分钟。
2.水解控制反应温度为53℃，调整pH为8.5，加入胰酶，酶用量为鸡骨泥原料的1.5％，反应1小时。
3.灭酶87℃下保持15分钟。
4.过滤采用离心机，4000转/分钟离心15分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2kg、进气口温度290℃、壶温90℃、流速约1.2L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例81.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为6％(重量比)，于100℃下加热20分钟。
2.水解控制反应温度为50℃，调整pH为9.0，加入胰酶，酶用量为鸡骨泥原料的1.0％，反应1.5小时。
3.灭酶90℃下保持10分钟。
4.过滤采用离心机，4500转/分钟离心10分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至20％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2.5kg、进气口温度280℃、壶温85℃、流速约1.1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例91.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为8％(重量比)，于80℃下加热30分钟。
2.水解控制反应温度为55℃，调整pH为8.0，加入胰酶，酶用量为鸡骨泥原料的0.5％，反应2小时。
3.灭酶85℃下保持20分钟。
4.过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至20％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力3kg、进气口温度300℃、壶温80℃、流速约1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例101.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为6％(重量比)，于100℃下加热20分钟。
2.水解控制反应温度为65℃，调整pH为9.5，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量为原料重量0.75％，反应1小时后，控制温度为50℃，调整pH为7.5，加入1.5％Flavourzyme复合风味蛋白酶，反应2.5小时。
3.灭酶85℃下保持20分钟。
4.过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至20％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2kg、进气口温度290℃、壶温90℃、流速约1.2L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例111.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为7％(重量比)，于80℃下加热30分钟。
2.水解控制反应温度为60℃，调整pH为8.5，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量为原料重量1.0％，反应1小时后，控制温度为55℃，调整pH为7.0，加入2.0％Flavourzyme复合风味蛋白酶，反应3小时。
3.灭酶87℃下保持15分钟。
4.过滤采用离心机，4500转/分钟离心10分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至15％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2.5kg、进气口温度280℃、壶温85℃、流速约1.1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例12
1.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(80目)。加水至底物浓度为5％(重量比)，于90℃下加热25分钟。
2.水解控制反应温度为62℃，调整pH为8.0，加入Alcalase水解蛋白酶，加酶量为原料重量1.5％，反应1小时后，控制温度为53℃，调整pH为6.5，加入2.5％Flavourzyme复合风味蛋白酶，反应2小时。
3.灭酶90℃下保持10分钟。
4.过滤采用离心机，4000转/分钟离心15分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力3kg、进气口温度300℃、壶温80℃、流速约1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例131.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为8％(重量比)，于80℃下加热30分钟。
2.水解控制反应温度为55℃，调整pH为7.0，加入Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶，酶用量分别鸡骨泥原料的1.5％和1.5％，反应2.5小时。
3.灭酶90℃下保持10分钟。
4.过滤采用离心机，4000转/分钟离心15分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至20％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2kg、进气口温度290℃、壶温90℃、流速约1.2L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例141.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(80目)。加水至底物浓度为5％(重量比)，于90℃下加热25分钟。
2.水解控制反应温度为50℃，调整pH为7.5，加入Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶，酶用量分别鸡骨泥原料的1.2％和2.0％，反应3小时。
3.灭酶85℃下保持20分钟。
4.过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2.5kg、进气口温度280℃、壶温85℃、流速约1.1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例151.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为6％(重量比)，于100℃下加热20分钟。
2.水解控制反应温度为53℃，调整pH为6.5，加入Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶，酶用量分别鸡骨泥原料的1.0％和3.0％，反应2小时。
3.灭酶88℃下保持15分钟。
4.过滤采用离心机，4500转/分钟离心10分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至15％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力3kg、进气口温度300℃、壶温80℃、流速约1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例161.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(80目)。加水至底物浓度为5％(重量比)，于90℃下加热25分钟。
2.水解控制反应温度为52℃，调整pH为9.0，先后加入胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶，酶用量分别鸡骨泥原料的1.5％和1.5％，反应2小时。
3.灭酶85℃下保持20分钟。
4.过滤采用离心机，4000转/分钟离心15分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至20％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2kg、进气口温度290℃、壶温90℃、流速约1.2L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例171.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为7％(重量比)，于100℃下加热20分钟。
2.水解控制反应温度为50℃，调整pH为8.0，先后加入胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶，酶用量分别鸡骨泥原料的0.5％和2.5％，反应3小时。
3.灭酶87℃下保持15分钟。
4.过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2.5kg、进气口温度280℃、壶温85℃、流速约1.1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例181.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为8％(重量比)，于80℃下加热30分钟。
2.水解控制反应温度为55℃，调整pH为8.5，先后加入胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶，酶用量分别鸡骨泥原料的1.0％和2.0％，反应2.5小时。
3.灭酶85℃下保持20分钟。
4.过滤采用离心机，4500转/分钟离心10分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至15％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力3kg、进气口温度300℃、壶温80℃、流速约1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例191.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为7％(重量比)，于100℃下加热20分钟。
2.水解控制反应温度为50℃，调整pH为8.0，先后加入胰酶和Protamex复合蛋白酶，酶用量分别鸡骨泥原料的0.5％和1.5％，反应3小时。
3.灭酶87℃下保持15分钟。
4.过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2.5kg、进气口温度280℃、壶温85℃、流速约1.1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例20原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(80目)。加水至底物浓度为5％(重量比)，于90℃下加热25分钟。
水解控制反应温度为52℃，调整pH为9.0，先后加入胰酶和Protamex复合蛋白酶，酶用量分别鸡骨泥原料的1.0％和1.0％，反应2小时。
灭酶85℃下保持20分钟。
过滤采用离心机，4000转/分钟离心15分钟。
浓缩取离心的上清液，浓缩至20％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2kg、进气口温度290℃、壶温90℃、流速约1.2L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例211.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为8％(重量比)，于80℃下加热30分钟。
2.水解控制反应温度为55℃，调整pH为8.5，先后加入胰酶和Protamex复合蛋白酶，酶用量分别鸡骨泥原料的1.5％和1.3％，反应2.5小时。
3.灭酶85℃下保持20分钟。
4.过滤采用离心机，4500转/分钟离心10分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至15％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力3kg、进气口温度300℃、壶温80℃、流速约1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例22
1.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(90目)。加水至底物浓度为6％(重量比)，于100℃下加热20分钟。
2.水解控制反应温度为50℃，调整pH为8.5，加入胰酶，加酶量为原料重量0.75％，反应1小时后，控制温度为65℃，调整pH为6.5，加入1.5％木瓜蛋白酶，反应2小时。
3.灭酶85℃下保持20分钟。
4.过滤采用离心机，4000转/分钟离心15分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至20％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2kg、进气口温度290℃、壶温90℃、流速约1.2L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例231.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(100目)。加水至底物浓度为8％(重量比)，于80℃下加热20分钟。
2.水解控制反应温度为52℃，调整pH为8.0，加入胰酶，加酶量为原料重量0.5％，反应1小时后，控制温度为60℃，调整pH为6.0，加入1.0％木瓜蛋白酶，反应1.5小时。
3.灭酶87℃下保持15分钟。
4.过滤采用离心机，4500转/分钟离心10分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力3kg、进气口温度300℃、壶温80℃、流速约1L/h，制成淡黄色粉状成品。
实施例241.原料预处理取1Kg鸡骨剔肉、清洗，进行粉碎(80目)。加水至底物浓度为5％(重量比)，于90℃下加热25分钟。
2.水解控制反应温度为55℃，调整pH为9.0，加入胰酶，加酶量为原料重量1.5％，反应1小时后，控制温度为70℃，调整pH为5.5，加入2.0％木瓜蛋白酶，反应1小时。
3.灭酶90℃下保持10分钟。
4.过滤采用离心机，4800转/分钟离心8分钟。
5.浓缩取离心的上清液，浓缩至25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
6.喷雾干燥以麦芽糊精为载体，用喷雾干燥器干燥，控制条件为喷头压力2.5kg、进气口温度280℃、壶温90℃、流速约1.2L/h，制成淡黄色粉状成品。
权利要求
1.复合酶水解鸡骨泥生产富含高钙的动物水解蛋白的新工艺，其特征在于包括下列工艺步骤(1)原料预处理将鸡骨进行超微粉碎，制成80-100目的骨泥，加水配制鸡骨泥悬浮液，浓度为5％-8％，80-100℃加热20-30分钟；(2)在(1)项制得的溶液中加入复合酶进行水解；(3)对(2)项制得的溶液灭酶升高反应体系温度至85℃-90℃保持10-20分钟；(4)将(3)项灭酶后的溶液过滤采用离心机，4000-4800转/分钟离心8-15分钟；(5)浓缩取(4)项离心后的上清液，浓缩至15％-25％，制得棕褐色、半透明状的浓缩液。
2.根据权利要求1所述的复合酶水解鸡骨泥生产富含高钙的动物水解蛋白的新工艺，其特征在于将制得的浓缩液进行喷雾干燥，制得淡黄色粉末状产品。
3.根据权利要求2所述的复合酶水解鸡骨泥生产富含高钙的动物水解蛋白的新工艺，其特征在于喷雾干燥时采用喷雾干燥器进行干燥，喷雾干燥器的喷头压力2-3kg、进气口温度280-300℃、壶温80-90℃、流速约1-1.2L/h。
4.根据权利要求1、或2、或3所述的复合酶水解鸡骨泥生产富含高钙的动物水解蛋白的新工艺，其特征在于在加入复合酶进行水解过程中，选用Alcalase水解蛋白酶加入水解，或者选用Protamex复合蛋白酶加入水解，或者选用胰酶加入水解，或者选用Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶先后加入水解，或者选用Protamex复合蛋白酶和ASl.398中性蛋白酶加入后共同水解，或者选用胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶先后加入后共同水解，或者选用胰酶和Protamex复合蛋白酶先后加入后共同水解，或者选用胰酶和木瓜蛋白酶先后加入水解。
5.根据权利要求4所述的复合酶水解鸡骨泥生产富含高钙的动物水解蛋白的新工艺，其特征在于选用Alcalase水解蛋白酶加入时，Alcalase水解蛋白酶用量为鸡骨泥原料重量的0.75-1.5％，控制反应温度为60-65℃，调整pH为8.0-9.5，反应1-2小时；选用Protamex复合蛋白酶加入时，Protamex复合蛋白酶用量为鸡骨泥原料重量的1.0-1.5％，控制温度为50-55℃，调整pH为6.5-7.5，反应1-2小时；选用胰酶加入时，胰酶用量为鸡骨泥原料重量的0.5-1.5％，控制温度为50-55℃，调整pH为8.0-9.0，反应1-2小时；选用Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶先后加入水解时，Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的0.75-1.5％和1.5-2.5％；先控制反应温度为60-65℃，调整pH为8.0-9.5，加入Alcalase水解蛋白酶；水解1小时后，控制温度为50-55℃，调整pH为6.5-7.5，加入Flavourzyme复合风味蛋白酶，反应2-3小时；选用Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶加入后共同水解时，Protamex复合蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的1.0-1.5％和1.5-3.0％，控制反应温度为50-55℃，调整pH为6.5-7.5，反应2-3小时；选用胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶先后加入后共同水解时，胰酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.5-2.5％，控制反应温度为50-55℃，调整pH为8.0-9.0，反应2-3小时；选用胰酶和Protamex复合蛋白酶先后加入后共同水解时，胰酶和Protamex复合蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.0-1.5％，控制反应温度为50-55℃，调整pH为8.0-9.0，反应2-3小时；选用胰酶和木瓜蛋白酶先后加入水解时，胰酶和木瓜蛋白酶用量分别为鸡骨泥原料重量的0.5-1.5％和1.0-2.0％；先控制反应温度为50-55℃，调整pH为8.0-9.0，加入胰酶；水解1小时后，控制温度为60-70℃，调整pH为5.5-6.5，加入木瓜蛋白酶，反应1-2小时。
全文摘要
本发明涉及一种复合酶水解鸡骨泥生产富含高钙的动物水解蛋白的新工艺，其特征在于，包括下列制备过程将鸡骨进行超微粉碎，制成骨泥，配制鸡骨泥悬浮液，在80－100℃下加热预处理20－30分钟，冷却至酶反应的最适温度，调整pH，加入复合酶，反应一定时间后，升温到85℃－90℃保持10－20分钟灭酶，产品为棕褐色、半透明状的浓缩液或淡黄色粉状物，具有良好的风味。本发明很好地解决了原料所带有的腥味和酶解过程产生的苦味问题，通过复合酶的协同作用能对原料进行彻底水解，产品多为短肽和游离氨基酸，能直接为人体吸收，提高了产品的综合利用率，且产品具有一定的ACE(血管紧张素转化酶)抑制活性。
文档编号A23J3/34GK1802982SQ20061001832
公开日2006年7月19日 申请日期2006年1月23日 优先权日2006年1月23日
发明者倪莉, 丁小燕, 张雯, 饶平凡 申请人:福州大学