专利名称：乳酸菌的一种高密度培养方法
技术领域：
本发明涉及乳酸菌的一种高密度培养方法，属于微生物发酵工程领域。
背景技术：
乳酸菌是人和动物正常微生物群或区系的组成部分。由于其特殊的 生理功能被广泛应用于食品、医药及饲料等许多行业上。乳酸菌是生产 发酵乳制品、泡菜、干酪、发酵香肠等传统发酵食品，赋予其特殊质地、 风味和口感的重要微生物菌群；乳酸菌在家畜饲养和饲料中有重要的 作用，特别是在青贮饲料的发酵过程中起主导作用，能够有效地改善青 贮饲料的发酵品质，提高动物的生产性能。乳酸菌菌剂的活性与其数量密切相关，因此为推进其应用，最关键 的是解决菌剂的高密度培养问题。由于乳酸菌生长的营养要求较高，需要一些特殊的营养组分；同时，乳酸菌在生长过程中分泌有机酸类代谢产物，使培养液中的pH值不断下降，当pH值降至4.10以下时，菌体的生 长繁殖就会受到抑制，因此采用传统的菌种生产工艺，菌种质量得不到 保证，而且生产成本高。高密度培养技术广泛地应用于各种微生物的生 产中，它是指采用一定的工艺技术，保证微生物生长的适宜条件，延长 微生物的指数增殖过程，从而得到高浓度的细胞。乳酸菌的高密度培养增加了单位体积培养液中的菌体数量，降低了生产成本，从而提高产 品在市场上的竞争力。对于加速乳酸菌制剂的商品化进程，更好地满足 市场需求，具有重要的意义。 发明内容本发明提供了乳酸菌的一种高密度培养技术，通过使用专门的培养 基(以下称乳酸菌培养基)，其基础配方包括3%大豆蛋白胨、2%酵母浸提粉、0.5%乙酸钠、复合微量元素液、复合维生素液等，并在培养过 程中流加碱以调节培养液的pH值，延长乳酸菌对数生长期，获得高活 性、高浓度的培养液，培养液中乳酸菌活菌数达到 9.0xl09-1.0xl01()cfo/ml。培养的乳酸菌可应用于饲料青贮、乳制品接种、 其它食品添加剂(如奶酪制作、葡萄酒脱酸)及医用等。
具体实施方式
本发明以植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、乳酸片球菌为菌种，经常 规方法活化后、接种于乳酸菌培养基，调节起始pH值为7.0-7.2;在培 养过程中流加碱使培养液的pH值稳定在6.0-6.8。实施例1:挑取活化的植物乳杆菌于MRS液体培养基中，37。C培养12h，以 6%的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养基起始pH值为 7.0，当pH值低于6.6时流加30%Na2CO3溶液，保持培养液pH值稳定 在6.7土0.1， 37。C培养30h。 实施例2:挑取活化的植物乳杆菌于MRS液体培养基中，37。C培养12h，以 6%的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养液起始pH值为 7.0，当pH值低于6.6时流加20%NaOH溶液，保持培养液pH值稳定 在6.7±0.1， 37。C培养30h。实施例3:挑取活化的保加利亚乳杆菌于MRS液体培养基中，37。C培养12h， 以10%的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养液起始pH值 为7.2，当pH值低于6.0时流加20WKOH溶液，保持培养液pH值稳定 在6.2 ±0.2。 42。C培养24h。 实施例4:挑取活化的保加利亚乳杆菌于MRS液体培养基中，37。C培养12h， 以10%的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养液起始pH值 为7.2，当pH值低于6.0时流加氨水，保持培养液pH值稳定在6.2 ±0.2。 42。C培养24h。 实施例5:挑取活化的乳酸片球菌于MRS液体培养基中，32"C培养12h，以 6%的接种量接种到含乳酸菌培养基的发酵罐中，培养液起始pH值为 7.2，当pH值低于6.4时流加30。/。Na2CO3溶液，保持培养液pH值稳定 在6.5±0.1， 32。C培养30h。
权利要求
1. 乳酸菌的一种高密度培养方法，以植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、乳酸片球菌为菌种，采用乳酸菌培养基，调节起始pH值为7.0-7.2；并在培养过程中流加碱使培养液的pH值稳定在6.0-6.8。
2、 根据权利要求1所述的乳酸菌的一种高密度培养方法，其特征 在于乳酸菌培养基的基础配方包括3%大豆蛋白胨、2%酵母浸提粉、 0.5%乙酸钠、复合微量元素液、复合维生素液等。
3、 根据权利要求1所述的乳酸菌的一种高密度培养方法，其特征 在于在培养过程中流加的碱为30%Na2CO3、 20%KOH、 20%NaOH或氨 水。
全文摘要
本发明涉及乳酸菌的一种高密度培养方法，以植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌和乳酸片球菌为菌种，使用专门的乳酸菌培养基，其基础配方包括3％大豆蛋白胨、2％酵母浸提粉、0.5％乙酸钠、复合微量元素液、复合维生素液等，调节起始pH值为7.0-7.2；并在培养过程中流加Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>、KOH、NaOH或氨水使培养液的pH值稳定在6.0-6.8。解除了自身代谢产物对其生长的抑制，获得高活性、高浓度的乳酸菌培养液，培养液中乳酸菌活菌数达到9.0×10<sup>9</sup>-1.0×10<sup>10</sup>cfu/ml。
文档编号C12N1/20GK101245324SQ20071000494
公开日2008年8月20日 申请日期2007年2月13日 优先权日2007年2月13日
发明者丁之铨, 林爱玉 申请人:丁之铨;林爱玉