专利名称：：微生物培养用培养基及微生物培养方法
技术领域：
：本发明涉及一种微生物培养用培养基及微生物培养方法(以下，分别简单称为"培养基"及"培养方法")，详细而言，涉及一种用于增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌的微生物培养用培养基、及增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌的微生物培养方法。
背景技术：
：已知在日本药典收载的孩i生物限度4全查法(microbiallimittest)中，在进行作为待测试样的中药生药制剂或生药中的微生物试验时，在通常的市售培养基中的培养，由于该待测试样中所含有的抗菌性物质(生长抑制物质)的存在，有可能造成目的菌的增殖差，检查法无法发挥功能。这种情况下，日本药典记载有必须通过稀释/过滤、中和或使之失活等方法去除抗菌性物质的影响，但此时，待测试样完全溶解于溶剂的制剂的情况下，可应用通过滤膜的过滤法等，但在为不溶物的情况下，仅有使之失活或稀释的方法。因此，实际上现状为除了稀释之外选择很少。而且，例如，非专利文献l中表明生药和中药提取物具有抗菌性，另外，非专利文献2中表明切开的及粉末状生药具有抗菌性，但均未提出稀释之外的去除抗菌性物质的解决方法。此外，在医药、化妆品界，为了使抗菌性物质失活，通常使用在培养基中添加卵磷脂和聚山梨醇酯的方法，预先添加有卵磷脂和聚山梨醇酯的培养基(SCDLP培养基等)也有市售，但该培养基价格昂贵，而且虽然使对羟基苯曱酸酯类和水银系等防腐剂失活的效果很高，但是多数情况下使中药生药制剂失活的效果很低。的培养基，作为特殊培养基正在销售，但在去除中药生药制剂、生药或香辛料等具有抗菌作用的食品中的抗菌性物质方面可以i兌还不充分。非专利文献l:防菌防徽Vol.25No.8,pp.467-473，1997非专利文献2:防菌防，數Vol.31No.9,pp.517-525,200
发明内容发明要解决的问题在进行中药生药制剂、生药或香辛料等具有抗菌作用的食品中的微生物限度检查法时，稀释待测试样的情况下，重复稀释意味着在试验规模同样的情况下灵敏度降低，因此无法解除由于品质保证方面的问题，即因假阴性而上市导致造成经济损失的风险。在这方面，稀释待测试样外的去除抗菌性物质的影响方法也同样存在风险。因此，本发明的目的在于提供一种能准确地增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌的微生物培养用培养基及微生物i告养方法。用于解决问题的方案本发明人等为解决上述课题进行了深入研究，结果发现通过对微生物培养用培养基或制备待测试样时使用的溶液添加酸性白土或活性白土，特别是进一步添加活性炭，能够吸附并减少中药生药制剂和生药等待测试样中的抗菌性物质，减弱抗菌性，从而完成了本发明。即，本发明的微生物培养用培养基，其特征在于，在用于4增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌的微生物培养用培养基中，微生物培养用基础培养基中含有酸性白土或活性白土。本发明的培养基中，优选在上述微生物培养用基础培养基中还含有活性炭。另外，本发明的微生物培养方法，其特征在于，在利用微生物培养用培养基来增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌的微生物培养方法中，向上述待测试样的溶液中添加酸性白土或活性白土。本发明的培养方法中，优选在上述溶液中进一步添加活性炭。发明的效果根据本发明，通过上述构成能准确地增殖中药生药制剂、生药或香辛料等具有抗菌作用的食品等具有抗菌作用的待测试样中的目的菌，结果能够容易地检测这些待测试样中含有的目的菌的微生物培养用培养基及微生物培养方法得以实现。具体实施例方式以下，就本发明的具体实施方式进行详细说明。本发明中，在增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌时，在所使用的微生物培养用培养基或待测试样的溶液中含有酸性白土或活性白土这一点很重要。由此，通过酸性白土或活性白土的吸附作用来吸附待测试样中含有的抗菌性物质，从而能够降低待测试样的抗菌性，准确地增殖目的菌，因此不使用以往的稀释等方法就可以容易地检测目的菌。该酸性白土为以蒙脱石为主的白色或灰色的白土，是具有大的比表面积和吸附能力的具有多孔性结构的物质，另外，活性白土是以酸性白土为原料，将其以无机酸处理而得到的、与酸性白土同样具有大的比表面积和吸附能力的具有多孔性结构的物质。酸性白土及活性白土均价格低廉，因此从成本的角度而言，本发明具有很大的优点。具体而言，在本发明的培养基中，微生物培养用基础培养基中含有酸性白土或活性白土。酸性白土或活性白土的添加量可根据待测试样和目的菌的种类、特性而定，但优选为培养基的1~20重量％,更优选为3~10重量％左右。酸性白土或活性白土的添加量过少的话，抗菌性的降低效果不充分，不能充分增殖目的菌，检测有可能无法恰当进行。另一方面，即使添加量过多也无法期待额外的效果。这种情况下，通过向微生物培养用基础培养基中，在添加酸性白土或活性白土的同时，进一步添加活性炭，可以进一步提高抗菌性的降低效果，进一步促进目的菌的增殖。活性炭的添加量可根据待测试样和目的菌的种类、特性而定，但优选为培养基的1重量％以上、不到5重量％,尤其优选为1~3重量％。活性炭的添加量不到1重量％的话，无法得到添加所带来的显著的增殖促进效果，另一方面，为5重量％以上的话，反而有可能会抑制目的菌的增殖。另外，本发明的培养方法中，具体而言，向具有抗菌作用的待测试样的溶液中添加酸性白土或活性白土。此时的酸性白土或活性白土的添加量可根据待测试样和目的菌的种类、特性而定，但优选为上述溶液的1~20重量％,更优选为310重量%。酸性白土或活性白土的添加量过少的话，抗菌性的降低效果不充分，不能充分增殖目的菌，检测有可能无法恰当进行。另一方面，即使添加量过多也无法期待额外的效果。这种情况下，通过向上述溶液中，在添加酸性白土或活性白土的同时，进一步添加活性炭，可以进一步提高抗菌性的降低效果，进一步促进目的菌的增殖。活性炭的添加量可根据待测试样和目的菌的种类、特性而定，但优选为上述溶液的l重量%以上、5重量％以下，尤其优选为1~3重量％左右。活性炭的添加量不到1重量％的话，无法得到添加所带来的显著的增殖促进效果，另一方面，多于5重量％的话，反而有可能会抑制目的菌的增殖。本发明中，重点仅在于通过使用酸性白土或活性白土来吸附待测试样中的抗菌性物质，从而去除待测试样中的目的菌的增殖抑制因子，其他方面可以根据常规方法适当进行，没有特别的限制。例如，本发明中使用的微生物培养用基础培养基，可以适当使用日本药典收载的培养基等根据待测试样和目的菌而通常使用的一般的培养基，例如，可以使用SCD(Soybean-CaseinDigestBroth，大豆酪蛋白消化肉汤)培养基等。可应用本发明的具有抗菌作用的待测试样，例如可以列举中药生药制剂、生药或香辛料等具有抗菌作用的食品等，本发明在对于这种用以往方法无法充分增殖的这些待测试样中的目的菌也能够准确地增殖这点上特别有用。因此根据本发明，可以容易地检测这些中药生药制剂、生药或具有抗菌作用的食品中是否含有特定的菌。这种情况下，用于将中药生药制剂、生药或具有抗菌作用的食品作为待测试样而制备溶液时的溶剂，例如可以使用磷酸緩沖液、蛋白胨食盐緩沖液、用于培养的液体培养基等。实施例(实施例1)为了确认对培养基添加酸性白土或活性白土所带来的效果，使用中药提取物制剂三物黄茶汤及大承气汤作为待测试样，在按照下述表l中分别示出的条件添加酸性白土或活性白土的大豆酪蛋白消化肉汤培养基(以下称SCD培养基)中，依据日本药典收载的微生物限度检查法中所述的"培养基的性能试验及生长抑制物质的确认试验"添力。金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276),以确认培养基的组成带来的目的菌的增殖状况，增菌培养后向Vogel-Johnson培养基进行涂抹试验，判断是否能确认金黄色葡萄球菌定性反应。(现有例l)作为现有例，在添加有活性炭的培养基中，与实施例同样进行培养试验。(比较例1-1~1-3)作为比较例，在未添加活性炭和活性白土中的任一种的培养基中，分别添加仅待测试样、仅目的菌、待测试样及目的菌两者，进行培养试验。(比较例1-4、1-5)作为比较例，在添加有代表性的离子吸附剂SEPABEADSSP-700的培养基中，与实施例同样进行培养试验。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表l所示。表lJ咅养基组成添力口量(重量％)培养结果三物黄茶汤大承气汤现有例l-l'H4SfS^)f151、；尺力n植美Jt5oo现有例l-2/"ff'l王厌、辰外/f"JJ伞刀口J^"介丞1XX现有例l-3活性炭(粉末)添加培养基5oo现有例l-41XX现有例l-5活性炭(颗粒)添加培养基5〇X现有例l-61XX实施例l-l活性白土添加培养基10o△实施例l-25o△实施例l-3酸性白土添加培养基10oX8<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>根据上述表l所示的结果可知，即使向通常的培养基中添加作为待测试样的中药提取物制剂和目的菌，也未观察到目的菌的增殖。与此相对，在培养基中添加有活性白土的实施例中，与使用现有的活性炭(粉末)的情况同样确认了目的菌的增殖，而且在添加有酸性白土的实施例中，因中药損::取物制剂的配方而异地部分确认了目的菌的增殖。因此，通过酸性白土或活性白土的添加，能够确认能准确地增殖具有抗菌作用中药提取物制剂中的目的菌。另外，颗粒状的活性炭及离子吸附剂中，也观察到因中药提取物制剂的配方而无法获得效果的情况。(实施例2、比较例2)为了确认改变待测试样时添加活性白土培养基的效果，分别使用中药提取物制剂五淋散及龙胆泻肝汤作为待测试样，向按照下述表2中所示的量添加有活性白土的培养基(基础培养基SCD培养基)中添力口金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276)，与上述实施例l同样进^f亍试^^和评^f介。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表2所示。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>根据上述表2所示的结果可知，对于五淋散及龙胆泻肝汤，可以确认通过向培养基中添加活性白土，抗菌作用被抑制，能够增殖目的菌。(现有例3、实施例3、比4交例3)为了确认向培养基中添加活性白土并添加活性炭时的效果，分别使用中药提取物制剂润肠汤、五淋散、龙胆泻肝汤、通导散及大承气汤作为待测试样，向按照下述表3中所示的量添加有活性白土及活性炭的培养基(基础培养基SCD培养基)中添力口金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276),与上述实施例1同样进行试验和评<介。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表3所示。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>根据上述表3所示的结果，可确认向培养基中添加了活性白土并添加有活性炭的实施例中，目的菌的增殖超过仅使用活性炭的情况，通过与活性白土一同添加活性炭，可确认待测试样的抗菌作用被更有效地抑制。(实施例4、比较例4)分别使用桂枝茯苍丸、抑肝散、大建中汤作为待测试样，向按照下述表4中所示的量添加有活性白土及活性炭的培养基(基础培养基SCD培养基)中添加金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276),与上述实施例l同样进行试—睑和评^介。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表4所示。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>根据上述表4所示的结果可知，可时常确认向培养基中添加活性白土并添加有活性炭的实施例中目的菌的良好增殖产生的定性反应，但仅使用活性炭的情况和未添加任何物质的情况下无法确认稳定的定性反应，通过与活性白土一同添加活性炭，可确认待测试样的抗菌作用被更有效地抑制，并且可得到稳定的试验结果。(实施例5、比较例5)分别使用桂枝茯茶丸、抑肝散、大建中汤作为待测试样，向按照下述表5中所示的量添加有活性白土及活性炭的培养基(基础培养基SCD培养基)中添加金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276),依据美国药典30,〈62〉非无菌食品的微生物检测控制微生物测试(MICROBIOLOGICALEXAMINATIONOFNONSTERILEPRODUCTS:TESTSFORSPECIFIEDMICROORANISMS)进行试-睑和评1"介。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表5所示。表5添加试样活性炭添加量(重量%)活性白土添加量(重量％)培养结果比较例5—100X现有例5—1桂枝茯苳丸10△实施例5—11〇比较例5—200A现有例5—2抑肝散10A实施例5-213〇比较例5—300X现有例5-3大建中汤10△实施例5-313〇根据上述表5所示的结果可知，可时常确认向培养基中添加活性白土并添加有活性炭的实施例中目的菌的良好增殖产生的定性反应，但仅使用活性炭的情况和未添加任何物质的情况下无法确认稳定的定性反应，通过与活性白土一同添加活性炭，可确认待测试样的抗菌作用被更有效地抑制，并且可得到稳定的试验结果。13(比较例6、实施例6、现有例6)为了确认在按照5重量％向培养基中仅添加活性炭(粉末)的情况下和在按照5重量％向培养基中仅添加活性白土的情况下对微生物生育的影响，分别准备SCD培养基和向其中各添加5重量％活性白土或活性炭的培养基，依据日本药典收载的微生物限度检查法中所述的"培养基的性能试验及生长抑制物质的确认试验"，确认了目的菌的增殖状况。使用的菌种为金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276)及绿脓杆菌(PseudomonasaeruginosaIFO13275),增菌培养后金黄色葡萄球菌向Vogel-Johnson培养基进行涂抹并培养，绿脓杆菌向NAC琼脂培养基进行涂抹并培养，判断是否能确认金黄色葡萄球菌或绿脓杆菌的定性反应。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。对于各实施例、比较例及现有例，各进行10个试样的试验。得到的结果如下述表6所示。表6比较例6—1比较例6—2实施例6—1实施例6—2现有例现有例6—2仅培养基培养基+活性白土培养基+活性炭金黄色葡萄球菌绿脓杆菌金黄色葡萄球菌绿脓杆菌金黄色葡萄球菌绿脓杆菌No.lo〇〇〇△ONo.2〇〇〇〇〇〇No.3〇〇〇o〇〇No.4ooQ△oNo.5〇〇〇O厶oNo.6〇〇o〇△〇No.7〇〇〇〇△0No.8〇〇〇〇〇〇No.9oo〇〇〇No.10o〇〇〇根据上述表6所示的结果可知，添加有5重量％活性炭的培养基中，存在金黄色葡萄球菌的菌落产生减弱的试样。这可认为是由于活性炭的添加量过多，产生培养基成分的吸附，因此对增殖造成了恶性影响。另一方面，对于活性白土，即使在添加量增加到10重量％的情况下也未观察到恶性影响。(实施例7、比较例7、现有例7)为了更详细地确认活性炭及活性白土对于培养基的影响，分别准备SCD培养基和向其中按照下述表7中所示的设定量添加有活性白土及/或活性炭的培养基，依据日本药典收载的微生物限度检查法，在24小时振荡培养后进行培养基中的菌浓度测定。作为目的菌，使用金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276)或绿脓杆菌(PseudomonasaeruginosaIFO13275),添加约100cfu的菌数作为初始菌。得到的结果如下述表7所示。另外，下述表中的"％"表示"重量％"。表715<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>根据上述表7所示的结果可知，同时添加有3重量％活性炭和5重量％活性白土这两者的培养基，对于金黄色葡萄球菌及绿脓杆菌任意一种，试验菌的增殖能力均与未添加的培养基大致相同。对此，由于仅添加有活性炭的培养基中，尤其是金黄色葡萄球菌的增殖能力降低，因此可以确认通过添加活性白土，能够抑制由于添加活性炭而造成的增殖能力的降低。(实施例8、比较例8)使用桂枝茯茶丸作为待测试样，设定为美国药典收载的微生物限度检查法的情况，分别准备向SCD培养基中添加3重量％活性炭及5重量％活性白土的培养基(ISCD)、无添加的SCD培养基、向SCD培养基中添加0.5重量％卵磷脂及4.0重量％聚山梨醇酯20的培养基(LPSCD培养基)，将它们用作试样溶解溶液，依据美国药典28，〈61〉孩i生物限度4全查法(MICROBIALLIMITTESTS)进行试验，比较定型菌落的生成。培养时试样浓度为0.01g/mL，作为目的菌使用金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusATCC6538)。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表8所示。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>根据上述表8所示的结果可知，使用美国药典中示例的非活化培养基即LPSCD培养基作为试样溶解溶液，再在其中实施培养的情况下，未观察到定型菌落，无法抑制由于抗菌性物质造成的影响，与此相对，其中使用了添加有活性白土及活性炭的ISCD培养基的情况下，定型菌落形成，确认了抗菌性物质的影响受到抑制。(实施例9、比4交例9)使用桂枝茯茶丸作为待测试样，在按照下述表9中所示的量添加有活性白土及活性炭的培养基(基础培养基SCD培养基)中添力口阿邦尼沙门氏菌(Salmonellaentericaspp.entericaserotypeabonyACM5080),依据美国药典30,〈62〉非无菌食品的微生物检测控制微生物测试(MICROBIOLOGICALEXAMINATIONOFNONSTERILEPRODUCTS:TESTSFORSPECIFIEDMICROORANISMS)进行试-验和评价。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表9所示。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>根据上述表9所示的结果可知，向培养基中添加活性白土并添加有活性炭的实施例中，目的菌的增殖被确认，但仅使用活性炭的情况下无法确认增殖，通过与活性白土一同添加活性炭，可确认待测试样的抗菌作用纟皮更有效地抑制。(实施例10、比4交例10)为了确认将食品中的山嵛菜或茶用作待测试样并通过培养基培养时目的菌的培养状况，向蛋白胨緩冲液中分别以10g、1g、O.lg添加管状山嵛菜或茶(为了防止杂菌的干扰，已通过高压蒸气灭菌器灭菌)，并制备成溶液量为100mL,制成10倍、100倍、IOOO倍的待测试样溶液。向SCD培养基、添加有卵磷脂和聚山梨醇酯的SCD培养基(SCDLP培养基)、添加有3重量％活性炭及5重量％活性白土的SCD培养基(ISCD培养基)各90mL中添加试样溶液10mL,依据日本药典收载的《敬生物限度检查法中所述的"培养基的性能试验及生长抑制物质的确认试验"，确认试验菌的增殖状况。使用的菌种为金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276),与上述实施例l同样进行试一睑和评^介。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表10所示。比较例10-1比较例10-2实施例IOSCD培养基SCDLP培养基ISCD培养基试山嵛菜10倍溶液XX〇样山嵛菜100倍溶液o〇〇溶山嵛菜1000倍溶液o〇〇液茶10倍溶液XX〇茶100倍溶液〇〇茶1000倍溶液〇〇〇根据上述表10所示的结果可知，SCD培养基及SCDLP培养基中，山脊菜及茶任一种的高浓度的10倍溶液均未生成目的菌18的菌落，无法抑制抗菌性物质的影响，与此相对，添加有活性白土及活性炭的ISCD培养基中，全部浓度的溶液均有菌落生成，可以确认抗菌性物质的影响被抑制。由此可确认，本发明的培养基中，不仅中药生药制剂，对于山嵛菜或茶中含有的抗菌性物质也可吸附并降低，可抑制抗菌性，也能够应用于食品微生物试验的改良中。(实施例11、比4交例11)为了确认使用食品的干燥香辛料作为待测试样时通过培养基培养时目的菌的培养状况，进行以下的试验。分别称取姜黄粉、胡椒粉、干燥罗勒(basil)叶10g、5g、0.5g,并制备成溶液量为100mL,制成1(H咅、20倍、20(H咅的^寺测试才羊溶液。分别将10mL该待测试样溶液添加入日本药典收载的生药的微生物限度检查法中所述的添加7.5%食盐的SCD培养基、向添加7.5%食盐的SCD培养基中添加3重量％活性炭及5重量％活性白土的培养基(添加7.5。/。食盐的SCDAA培养基)、向添加7.5%食盐的SCDB培养基中添加5重量％活性白土的培养基(添加7.5%食盐的SCDA培养基)各90mL中，依据日本药典收载的生药的微生物限度检查法中所述的"培养基的性能试验及生长抑制物质的确认试验"，确认试验菌的增殖状况。使用菌种为金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276),与上述实施例l同样进^f亍试-险和评1"介。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表ll所示。表ll<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>根据上述表11所示的结果可知，在添加7.5%食盐的SCD培养基中，姜黄粉、胡椒粉、干燥罗勒叶任一个的高浓度的10倍溶液、20倍溶液均未生成目的菌的菌落，无法抑制抗菌性物质的影响，与此相对，在添加有活性白土及活性炭的添加7.5%食盐的SCDAA培养基中，全都试样的全部浓度的溶液，均生成菌落，可以确认抗菌性物质的影响被抑制；在添加有活性白土的添加7.5%食盐的SCDA培养基中对于干燥罗勒叶全部浓度的溶液，均生成菌落，可以确认抗菌性物质的影响^皮抑制。由此可确认，本发明的培养基中，不仅中药生药制剂，即使是干燥香辛料中含有的抗菌性物质也可吸附并降低，可抑制抗菌性，也能够应用于食品微生物试验的改良中。(实施例12、比较例12)为了确认使用抗生素作为待测试样时通过培养基培养时目的菌的培养状况，进行以下的试验。将氯霉素以250mg/L、50mg/L、5mg/L、0.5mg/L、0.05mg/L的浓度分别添加于日本药典收载的微生物限度检查法中所述的SCD培养基、向SCD培养基中添加3重量％活性炭及5重量％活性白土的培养基(ISCD培养基)、乳糖肉汤培养基(以下称LB培养基)、向LB培养基中添加3重量％活性炭及5重量％活性白土的培养基(ILB培养基)中。依据日本药典收载的微生物限度检查法中所述的"培养基的性能试验及生长抑制物质的确认试验"，确认试验菌的增殖状况。使用菌种为如下SCD培养基及ISCD培养基中使用金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusIFO13276)，在LB培养基及化B培养基中使用大肠杆菌(EscherichiacoliIFO3972)，增菌培养后向Vogel-Johnson培养基(金黄色葡萄^求菌)及向麦康凯琼脂(MacConkeyAgar)培养基(大肠杆菌)进行涂抹并培养，判断是否能确认定性反应。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表12所示。另外，下述表中的"％"表示"重量o/o"。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>根据上述表12所示的结果可知，对于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，与通常的SCD培养基及LB培养基相比，ISCD培养基及ILB培养基中即使在含有IOO倍高浓度的抗生物质的培养基中培养，也有菌落生成及出现定性反应，可以确认抗菌性物质的影响被抑制。由此可确认，本发明的培养基中，不仅中药生药制剂，对于含有抗生物质的试样也可以抑制抗菌性，也能够应用于一般医药品微生物试验的改良中。(实施例13)为了确认在混合有活性白土和活性炭的培养基中，相对于5%活性白土混合1%或2%活性炭时的微生物培养效果，分别使用中药提取物制剂润肠汤、五淋散、龙胆泻肝汤、通导散及大承气汤作为待测试样，按照实施例3所述的方法进行试验和评价。结果中，产生菌落且具有定性反应的情况用o表示，仅产生菌落或具有弱定性反应的情况用A表示，不产生菌落的情况用x表示。得到的结果如下述表13所示。表13<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>根据上述表13所示的结果可知，向培养基中添加5重量％活性白土的情况下，即便活性炭的配合量为1重量％也可充分确认目的菌的增殖，可确认待测试样的抗菌作用被更有效地抑制。权利要求1.一种微生物培养用培养基，其特征在于，在用于增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌的微生物培养用培养基中，微生物培养用基础培养基中含有酸性白土或活性白土。2.根据权利要求l所述的微生物培养用培养基，其中，所述微生物培养用基础培养基中还含有活性炭。3.根据权利要求1或2所述的微生物培养用培养基，其中，所述具有抗菌作用的待测试样选自于中药生药制剂、生药及具有抗菌作用的食品构成的组。4.一种微生物培养方法，其特征在于，在利用微生物培养用培养基来增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌的微生物培养方法中，向所述待测试样的溶液中添加酸性白土或活性白土。5.根据权利要求3所述的微生物培养方法，其中，向所述溶液中进一步添加活性炭。6.根据权利要求4或5所述的微生物培养方法，其中，所述具有抗菌作用的待测试样选自于中药生药制剂、生药及具有抗菌作用的食品构成的组。全文摘要本发明提供一种微生物培养用培养基及微生物培养方法，其能准确地增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌。在用于增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌的微生物培养用培养基中，微生物培养用基础培养基中含有酸性白土或活性白土。在利用微生物培养用培养基来增殖包含在具有抗菌作用的待测试样中的目的菌的微生物培养方法中，向待测试样的溶液中添加酸性白土或活性白土。优选与酸性白土或活性白土同时并用活性炭。文档编号C12N1/20GK101522888SQ200780036130公开日2009年9月2日申请日期2007年9月25日优先权日2006年9月28日发明者山本博章申请人:株式会社津村