专利名称：：阿维菌渣在阿维菌素发酵培养基中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及抗生素发酵菌渣的再生循环利用。特别是涉及阿维菌素发酵菌渣用于阿维菌素发酵作为培养基的营养成分。具体地说，是将阿维菌渣经过微生物发酵处理后，作为阿维菌素发酵的营养成分添加于阿维菌素发酵培养基中。
背景技术：
：阿维菌素是阿佛麦链霉菌(Streptomycesavermitilis)经液体深层发酵生产的农用抗生素，主要用于驱杀动物体内外寄生虫及农业害虫。由于其具有广谱高效安全的抗虫活性，目前已成为需求量最大的农用抗生素。在阿维菌素发酵生产过程中，阿佛麦链霉菌将繁殖产生大量的菌丝体，菌丝体内的阿维菌素被提取后，这些菌丝体和极少量的未利用完的培养基合称为阿维菌素发酵菌渣，简称为阿维菌渣。据不完全统计，我国阿维菌素年产量已达千口屯以上，同时排放阿维菌渣约万吨以上(折干计)。阿维菌渣虽然含有少量的阿维菌素(0.1-0.2%),但由于其用于动物驱虫会导致动物腹泻、呛毛等副作用，现已被国家禁止使用。生产厂家大都将其焚烧或直接排放到环境中，造成严重的环境污染和资源浪费。分析表明，阿维菌渣内含总氮6%左右，是理想的氮素来源。本发明对其研究发现，该废渣可在阿维菌素发酵培养基中使用，作为氮源代替部分豆饼粉、酵母粉、酵母膏等，而且还会使发酵过程中阿维菌素的效价有所提高。因此，阿维菌渣是一种阿维菌素发酵培养基中理想的营养成分，可以在阿维菌素发酵中循环使用，解决该废渣对环境污染和再生利用问题，实现清洁生产目标。
发明内容本发明的目的在于提供用阿维菌渣为原料制成的回用于阿维菌素发酵培养基中的产品和制备该产品的方法；本发明的目的还在于提供阿维菌渣作为阿维菌素发酵培养基中营养成分的用途。本发明的目的是按以下技术方案实现的一种阿维菌渣的应用，具体是将阿维菌渣经过微生物发酵后作为阿维菌素发酵培养基的营养成分。阿维菌渣发酵选用酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeMcycncxHansen),产朊假丝酵母菌(Candidauti1is(henneberg)LodderKreger-vanRij)，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)作为优选菌种。应用微生物发酵法处理阿维菌渣的具体方法是将固体状态的阿维菌渣投入到发酵装置中，补充1_8%的碳源，加水3-10倍配制成液态或半固态，接入上述单一或复合菌种进行发酵，发酵条件为温度25-37°C，进行有氧发酵，发酵周期为24-72小时，当菌丝完全溶解后发酵终止，其发酵物可以直接用于阿维菌素的液体发酵培养基中，也可以将该发酵物经固液分离，液相浓缩制成膏状或发酵物经干燥制成粉状产品，用于阿维菌素的液体发酵培养基中。上述阿维菌渣的发酵产物，不论是固态或液态、膏状或粉状产品，在阿维菌素发酵培养基中的加入量均以其折合成总氮量计算，其加入的总氮量应占培养基的0.05-0.5%。上述阿维菌渣发酵选用的各菌种均购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC);菌种活化培养基分别为酵母菌培养基选用麦芽汁液体培养基，枯草芽孢杆菌培养基选用营养肉汤培养基；几种菌复合培养用以下培养基碳源0.1—10%、氮源0.1-5°/。、氯化钠G.02-1°/。。上述技术方案中所述的碳源主要选自葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、糖蜜、红糖、糊精、淀粉等；所述的氮源选自蛋白胨、酵母膏、酵母粉、牛肉膏、各种蛋白粉、豆饼分、花生饼粉，铵盐、硝酸盐等。本发明具有以下有益的效果1、本发明寻找到了阿维菌渣科学合理的再生利用途径，使其循环使用，为生产企业实现"清洁生产"提供可能，符合可持续发展战略。2、本发明开发出了新的氮素资源，使工业废弃物得到再生利用，变废为宝，从而解决了其对环境的污染问题，企业不但节约了治污费用而且会创造一定的经济效益；3、本发明提供的来自于阿维菌渣的氮素资源，能有效地提高阿维菌素的效价，降低阿维菌素生产成本，提高阿维菌素发酵企业的竟争力。具体实施例方式制造实施例1:处理100千克阿维菌渣制备阿维菌素发酵培养基的液态营养成分菌种制备菌种选用酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeMcycncxHansen)CGMCCAS2.611,枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis(Ehrcnbcrg)Cohn)AS1.398;种子的制备称取葡萄糖50克、蛋白胨25克、酵母膏10克、硫酸铵25克、氯化钠12克，加水定容5L，12rC灭菌20分钟，降温后，接入上述菌种，于35-37'C培养36小时即得种子液；发酵将100千克阿维菌素菌渣投入发酵装置内，加葡萄糖3千克，加入水400千克、上述种子液，搅拌均匀，控制温度35-37'C培养36小时发酵终止，即得液态阿维菌素发酵培养基营养成分产品。其总氮为2.1%。制造实施例2:处理100千克阿维菌渣制备阿维菌素发酵培养基的膏状营养成分菌种制备菌种选用酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaeMcycncxHansen)CGMCCAS2.174,枯草芽孢杆菌(Baci1lussubtilis(Ehrcnbcrg)Cohn)AS1.892;菌种制备称取糖蜜100克、牛肉膏25克、硝酸钠25克、氯化钠12克，加水定容10L,制备方法同实施例1。发酵将100千克阿维菌渣投入发酵装置内，加入糖蜜8千克、水900千克、上述种子液，搅拌均匀，控制温度25-3(TC，通气搅拌，培养72小时发酵终止，将发酵液固液分离，液相经真空浓縮即得膏状阿维菌素发酵培养基营养成分产品。其总氮6%，水分30%。制造实施例3:处理100千克阿维菌渣制备阿维菌素发酵培养基的粉状营养成分菌种制备菌种选用产朊假丝酵母菌(Candidautilis(henneberg)LodderKreger-vanRij)CGMCC2.1011;种子的制备12Brix的麦芽汁20L，115'C灭菌15分钟，降温后，接入酵母菌种，于30-32。C培养40小时，得种子液；发酵将100千克阿维菌素菌渣投入发酵装置内，加入红糖5千克、水200千克、种子液20L，搅拌均匀，控制温度30-32'C,通气搅拌，培养72小时发酵终止，将发酵物干燥即得粉状阿维菌素发酵培养基营养成分产品。其总氮为7.3%，水分5%。制造实施例4:处理100千克阿维菌素菌渣制备阿维菌素发酵培养基的粉状营养成分菌种制备菌种选用菌种选用产朊假丝酵母菌(Candidautilis(henneberg)LodderKreger-vanRij)CGMCC2.1011，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis(Ehrcnbcrg)Cohn)CGMCC1.398;菌种制备称取淀粉10克、酵母膏10克、.乙酸铵5克、氯化钠1克，加水定容1L,制备方法同实施例1。发酵将100千克阿维菌素菌渣投入发酵装置内，加入糊精3千克、水400千克、种子液1L,通气搅拌，控制温度35-3rC培养60小时发酵终止，将发酵液喷雾干燥即得阿维菌素发酵培养基粉状氮素产品。其总氮为6.6%，水分5.2%。应用实施例1:将本发明制造实施例2制备的膏状阿维菌素发酵培养基营养成分产品作为阿维菌素发酵培养基的有机氮成分，其操作过程为制备培养基取淀粉7%、豆饼粉0.8%、本发明的膏状物0.28%(对照组用等量常规酵母赍)、酵母粉0.4%、硫酸镁0.2%、磷酸氢二钾0.05%、碳酸钩O.002%、以水补足至100%，调PH7，0-7.2,三角瓶分装，装量为100ml/500ml，121'C灭菌30分钟；接种和培养接种量为1%，种后将三角瓶放于摇瓶机上，转速180rpm,温度28±1。C培养9天下摇瓶，以高效液相色谱仪测定化学效价。经过5次平行试验，每次试验设计实验组和对照组各10瓶，试验结果为10瓶平均数，结果，以本发明的膏状物替换常规酵母膏使用，化学效价提高5%左右。见表l表l<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>应用实施例2:将本发明制造实施例3制备的粉状阿维菌素发酵培养基营养成分产品作为阿维菌素发酵培养基的有机氮成分，其操作过程为制备培养基取淀粉7%、豆饼粉0.4/、本发明的粉状物0.4%(对照组用等量豆饼粉)、酵母粉0.4%、硫酸镁0.2%、磷酸氢二钾0.05%、碳酸钩0.002%、以水补足至100%,调PH7.0-7.2,三角瓶分装，装量为100ml/500ml，121"C灭菌30分钟；接种和培养接种量为1%，种后将三角瓶放于摇瓶机上，转速180rpm,温度28±1。C培养9天下摇瓶，以高效液相色谱仪测定化学效价。经过5次平行试验，每次试验设计实验组和对照组各10瓶，试验结果为10瓶平均数，结果，以本发明的粉状物部分替换豆饼粉使用，化学效价提高3%左右。见表2表2<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>应用实施例3:将本发明制造实施例1制备的液状阿维菌素发酵培养基营养成分产品作为阿维菌素发酵培养基的有机氮成分，其搡作过程为制备培养基取淀粉7%、豆饼粉0.4%、本发明的液状物1.5%(对照组用0.豆饼粉)、酵母粉0.、硫酸镁0.2%、磷酸氢二钾0,05%、碳酸钩O.002%、以水补足至100°/，调PH7.0-7.2,三角瓶分装，装量为100ml/500ml，121'C灭菌30分钟；接种和培养接种量为1°/，种后将三角瓶放于摇瓶机上，转速180rpm,温度28士1。C培养9天下摇瓶，以高效液相色谱仪测定化学效价。经过5次平行试验，每次试验设计实验组和对照组各10瓶，试验结果为10瓶平均数，结果，以本发明的液状物部分替换豆饼粉使用，化学效价提高3%以上。见表3:表3<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>权利要求1.一种阿维菌素发酵培养基的营养成分，其特征在于该营养成分是用阿维菌渣经过接种酵母菌，芽胞杆菌进行发酵后的发酵物；或该发酵物经过固液分离，液相浓缩成的膏状物；或该发酵物经干燥后的粉状物。2.根据权利要求l所述阿维菌素发酵培养基的营养成分，其特征在于所述的酵母菌为酿酒酵母(Saccharomyescerevisiae),产朊假丝酵母菌(Candidautilis(hernieberg)LodderKreger-vanRij),所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis),其中酵母菌在阿维菌渣发酵中单独使用或与芽孢杆菌复合使用。3.制备权利要求1或2所述的阿维菌素发酵培养基的营养成分的方法,其特征在于该方法步骤如下菌种制备:酵母菌与芽孢杆菌复合种子液培养基碳源O.1-10%、氮源0.1-5%、氯化钠O.01-1%;培养基经灭菌后接入酵母菌和芽孢杆菌或接入酵母菌，控制温度25-37°C有氧培养24-72小时；发酵将阿维菌渣投Xt酵装置内，补充1-8%的碳源，加入2-10倍的水，按发酵体积2-20y。的接种量接入种子液，控制温度25-37。C,在培养过程通气搅拌，培养24-72小时即得成熟发酵物；该发酵物即为阿维菌素发酵培养基的营养成分；或将成熟发酵物经固液分离后，液相真空浓缩成膏状即得膏状阿维菌素发酵培养基的营养成分；或将成熟发酵物经干燥后粉碎即得粉状阿维菌素发酵培养基的营养成分。4、根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的碳源选自葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、糖蜜、红糖、糊精、淀粉；所述的氮源选自蛋白胨、酵母膏、酵母粉、牛肉膏、铵盐、硝酸盐。5、阿维菌渣在阿维菌素发酵培养基中作为营养成分的应用。全文摘要本发明涉及抗生素发酵菌渣的再生循环利用领域。提供了一种以阿维菌渣为原料，经微生物发酵处理后，经分离和浓缩干燥过程，制备成用于阿维菌素发酵作为培养基的营养成分的产品，并将该产品应用于阿维菌素发酵培养基中。本发明解决了阿维菌素发酵废渣对环境污染问题，实现了该废渣的再生循环利用，达到清洁生产的目的。文档编号C12N1/20GK101525642SQ20081000800公开日2009年9月9日申请日期2008年3月3日优先权日2008年3月3日发明者孙淑荣,孙玉胜,兰马申请人:迈德金生物技术(北京)有限公司