本发明涉及一种大环内酯类抗生素的分离纯化方法，特别是莫西菌素的纯化方法。
背景技术：
莫西菌素，别名莫西克汀，英文名称为moxidectin，白色或类白色无定形粉末，几乎不溶于水，极易溶于乙醇（96%），微溶于己烷，是一种新型抗寄生虫药，是由链霉菌发酵的单一成分的大环内酯类抗生素。
莫西菌素与其他大环内酯类抗寄生虫药如伊维菌素和阿维菌素相比成分单一，有着更高的驱虫活性和长效、安全等特性，尤其对线虫(成虫和幼虫)和节肢动物，在极低的剂量下就有很好的抗虫活性，对犬、牛、绵羊、马的线虫和节肢动物寄生虫有高度驱除活性，已被广泛用于治疗奶牛、猪等动物体内外寄生虫病。莫西菌素现有的制备工艺多是多次萃取、层析、结晶等，操作繁琐，分离效果差，回收率低。专利《一种通过结晶作用纯化莫西菌素的方法》（专利号：200410068440.7），采用结晶的方法纯化莫西菌素，步骤繁琐，要多次用到正己烷、正庚烷等有机溶剂；专利《莫西菌素的制备方法》（专利号：201510229838.2）公开的方法中要经过保护反应、氧化反应、脱保护反应和肟化反应后才制得莫西菌素，过程复杂。因此本领域需要一种操作简单、快速、高效、绿色环保的纯化莫西菌素的方法。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种莫西菌素的分离纯化方法，采用超临界流体色谱系统分离纯化莫西菌素，解决目前在纯化莫西菌素的过程中存在的过程繁琐等问题。该方法包括以下步骤：
（1）用乙腈溶解莫西菌素粗品，然后用微孔滤膜进行过滤；
（2）配制夹带剂（甲醇、乙醇、乙腈的混合物）；
（3）用超临界流体色谱系统对过滤后的粗品进行分离纯化：色谱柱为内径为4.6mm~50mm，色谱柱内装有硅胶基质类填料，流填料粒度5~75μm，流动相为带有一定比例夹带剂的超临界co2，用示差检测器检测，进样后在目标峰处收集目标馏分；
（4）将收集的目标馏分旋蒸浓缩得到莫西菌素。
本发明的有益效果是采用超临界流体色谱分离纯化莫西菌素操作简单、易控制，使用带有少量夹带剂的超临界co2作为流动相，绿色环保，得到的莫西菌素的纯度高。
具体实施方式：
实施例1
（1）用乙腈溶解莫西菌素粗品，然后用0.45μm微孔滤膜进行过滤；
（2）配制甲醇：乙醇：乙腈=40:40:20的夹带剂；
（3）用超临界流体色谱系统对过滤后的粗品进行分离纯化，具体方法为：色谱柱尺寸为φ10×250mm，柱内装有裸硅胶填料，填料粒度10μm，流动相为超临界co2：夹带剂=88:12，流速3ml/min，流动相体系平衡系统15min，进样1g，洗脱60min后开始接收目标组分，然后使用超临界co2：夹带剂=60:40的流动相进行洗脱杂质，采用示差检测器检测，收集目标馏分；
（4）将收集的目标馏分旋蒸浓缩得到莫西菌素，经检测纯度达96.8%。
实施例2
（1）用乙腈溶解莫西菌素粗品，然后用0.45μm微孔滤膜进行过滤；
（2）配制甲醇：乙醇：乙腈=38:38:24的夹带剂；
（3）用超临界流体色谱系统对过滤后的粗品进行分离纯化，具体方法为：色谱柱尺寸为φ20×250mm，柱内装有十八烷基硅烷键合硅胶填料，填料粒度15μm，流动相为超临界co2：夹带剂=92:8，流速12ml/min，流动相体系平衡系统15min，进样5g，洗脱62min后开始接收目标组分，然后使用超临界co2：夹带剂=60:40的流动相进行洗脱杂质，采用示差检测器检测，收集目标馏分；
（4）将收集的目标馏分旋蒸浓缩得到莫西菌素，经检测纯度达96.6%。
实施例3
（1）用乙腈溶解莫西菌素粗品，然后用0.45μm微孔滤膜进行过滤；
（2）配制甲醇：乙醇：乙腈=35:35:30的夹带剂；
（3）用超临界流体色谱系统对过滤后的粗品进行分离纯化，具体方法为：色谱柱尺寸为φ50×250mm，柱内装有二醇基硅胶填料，填料粒度15μm，流动相为超临界co2：夹带剂=96:4，流速66ml/min，流动相体系平衡系统15min，进样20g，洗脱62min后开始接收目标组分，然后使用超临界co2：夹带剂=60:40的流动相进行洗脱杂质，采用示差检测器检测，收集目标馏分；
（4）将收集的目标馏分旋蒸浓缩得到莫西菌素，经检测纯度达96.5%。