专利名称：一种含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种山茱萸的发酵加工新方法，特别涉及利用山茱萸提取熊 果酸的方法，属于食品化学领域。
背景技术：
山茱萸为山茱萸禾斗植物Co272M 0/7Yci/7a7j's Sieb. et Zucc，是一种重要 的野生资源，果其肉味酸、涩，微温，归肝肾经，有补益肝肾、涩精固脱的 功效，主治眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、遗尿尿频、大汗虚脱、内热消 渴，是中医临床常用的名贵传统抗衰老药物之一。山茱萸在我国浙江、河南、 山西、四川等地均有分布和栽培，资源丰富，市场广阔，其市场开发经济效 益可观。
熊果酸是山茱萸果实中一种重要化学成分，平均含量0.234%。熊果酸具 有广泛的生物活性，包括抗癌、对肝的损伤保护、抗炎、抗菌、抗氧化等， 是山茱萸果实中的主要活性成分之一，其提取工艺研究及新用途开发是本领 域研究的热点。
在山茱萸中多糖也是重要的活性物质，含量较高。在制备以熊果酸为主 要活性成分的山茱萸提取物中，多糖的去除是重要的步骤，目前多采用大孔 树脂层析等方法；但该种层析方法，不易于工厂化生产。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，该方法具有成本低、工艺简单、易于工业化生产、环境友好等特点。
为了解决上述技术问题，本发明提供一种含熊果酸的山茱萸提取物的制 备方法，包括以下步骤
1) 、将山茱萸粉与水相混合，然后接种山茱萸粉重量2% 4%的葡萄酒
酵母菌进行摇床发酵，发酵温度为25 35'C，发酵时间4d 8d;得发酵液；
2) 、在发酵液中加入蒸馏水后于50 7(TC水浴0.5 2h，然后在50 70'C 和30 40KHZ的频率下超声波处理1 3次，每次的超声波处理时间为10 20min;
3) 、过滤步骤2)的所得物，在所得的滤渣中加入体积浓度为75% 95% 乙醇，于40 60。C和30 40KHZ的频率下超声波萃取5 15min;然后抽滤浓 縮，得浓縮液；
4) 、浓縮液用石油醚萃取，取下层液进行浓縮和干燥，得到含熊果酸的 山茱萸提取物。
作为本发明的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法的改进步骤l)中每 g山茱萸粉溶于0.5 3ml水中。
作为本发明的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法的进一步改进步骤
1) 中摇床发酵的转速为110rpm 150rpm。
作为本发明的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法的进一步改进步骤
2) 中的蒸馏水与步骤l)中的山茱萸粉的体积重量比为20 60ml/g。
作为本发明的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法的进一步改进步骤
3) 中的乙醇与步骤l)中的山茱萸粉的体积重量比为20 60ml/g。
作为本发明的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法的进一步改进步骤4)中石油醚与浓缩液的体积1 2: 3。
在本发明中，葡萄酒酵母菌可选用Saccharomyces cerevisiae
ATCC26497 ， Saccharomyces cerevisiae ATCC9080 ， 或Saccharomyces
cerevisiae CICC1012等葡萄酒酵母菌。
本发明最终所得的含熊果酸的山茱萸提取物为片状固体。 本发明属于一种山茱萸的发酵加工新方法，其技术方案主要是①利用
了葡萄酒酵母菌发酵除糖，从而除去原料山茱萸中的可溶性糖；②利用熊果
酸溶于乙醇不溶于水、石油醚的性质，采用水及石油醚除杂，从而提高产品
中熊果酸的纯度。
在本发明中，步骤l)中发酵容器的容量选用反应体系体积的2 4倍。 本发明的方法与传统方法相比较，优点在于-
(1) 本发明采用发酵法除糖，方法简便，易于操作；且能将多糖物质通 过发酵转化为本工艺可利用的酒精；由于酒精可回收利用，因此本发明的方 法环境友好，无污染，还能降低生产成本。本发明所得的含熊果酸的山茱萸 提取物主要用于保健食品开发领域。
现有技术中的大孔树脂除糖法虽然也能够达到较好的除糖效果，但层析 技术是目前大规模工业生产上不易操作的，且在食品工业方面要求极严格； 因此不适于生产含熊果酸的山茱萸提取物。
(2) 本发明较传统的层析除糖技术更易于工业化操作。
(4) 本发明以廉价、无毒的乙醇为萃取剂，且酒精可以循环使用，降低 了生产成本。
(5) 本在发明中过滤步骤2)的所得物后，所得的滤液中含有少量酒精，可回收利用；能进一步降低生产成本。
(6)本发明在二次除杂过程中使用石油醚，其极性小，沸点低，除杂效 果明显，容易分离，不易残留。
具体实施例方式
实施例l、 一种含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，依次进行以下步骤-
1) 、取山茱萸粉45g与25ml水均匀混合，然后接种1.5g的葡萄酒酵母菌进 行摇床发酵，发酵温度为27。C，摇床转速120rpm，发酵时间6d;得发酵液。
2) 、在发酵液中加入2500ml蒸馏水，5(TC水浴lh;然后在50。C下超声波 (频率:30 40KHZ)处理2次，每次处理15min。
3) 、过滤步骤2)的所得物，弃去滤液(此滤液中含有酒精，可回收利用)； 在所得的滤渣中加入2500ml体积浓度为95。/。乙醇，于50。C超声波(频率30 40KHZ)萃取10min。然后，将所得的溶液过滤，弃去滤渣；将滤液75 85°。 减压浓縮，直至为250ml;得浓縮液。
4) 、将上述浓縮液均匀分装入两个250ml分液漏斗中；对每个分液漏斗均 进行如下操作加入63ml石油醚，摇匀，静置10min，弃去上层液，所得下层 液60'C减压浓縮至糊状，所得糊状液体8(TC减压干燥4h，得1.08g为片状固体 的山茱萸提取物。
该山茱萸提取物中，熊果酸含量为10%。
实施例2、 一种含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，依次进行以下步骤: 1)、取山茱萸粉60g加入100ml水均匀混合，然后接种2.0g的葡萄酒酵母 菌进行摇床发酵，发酵温度为3(TC，摇床转速145rpm，发酵时间4d;得发酵液。
2) 、在发酵液中加入3000ml蒸馏水，60。C水浴0.5h;然后在6(TC下超声 波(频率30 40KHZ)处理2次，每次处理15min。
3) 、过滤步骤2)的所得物，弃去滤液；在所得的滤渣中加入3000ml体积 浓度为95%乙醇，于60。C超声波(频率30 40KHZ)萃取10min。然后，将 所得的溶液过滤，弃去滤渣；将滤液75'C减压浓縮，直至为300ml;得浓縮液。
4) 、将上述浓缩液均匀分装入两个250ml分液漏斗中；对每个分液漏斗均 进行如下操作加入82ml石油醚，摇匀，静置10min，弃去上层液，所得下层 液6(TC减压浓縮至糊状，所得糊状液体80。C减压干燥4h，得1.3g为片状固体 的山茱萸提取物。
该山茱萸提取物中，熊果酸含量为10.2%。
实施例3、一种含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，依次进行以下步骤
1) 、取山茱萸粉75g加入130ml水均匀混合，然后接种2.5g的葡萄酒酵母 菌进行摇床发酵，发酵温度为35'C，摇床转速130rpm，发酵时间8d;得发酵液。
2) 、在发酵液中加入3500ml蒸馏水，60"C水浴2h;然后在7(TC下超声波 (频率:30 40KHZ)处理2次，每次处理15min。
3) 、过滤步骤2)的所得物，弃去滤液；在所得的滤渣中加入2500ml体积 浓度为85%乙醇，于55。C超声波(频率30 40KHZ)萃取10min。然后，将 所得的溶液过滤，弃去滤渣；将滤液75"C减压浓縮，直至为250ml;得浓縮液。
4) 、将上述浓缩液均匀分装入两个250ml分液漏斗中；对每个分液漏斗均进行如下操作加入80ml石油醚，摇匀，静置10min，弃去上层液，所得下层 液6(TC减压浓縮至糊状，所得糊状液体8(TC减压干燥4h，得1.4g为片状固体 的山茱萸提取物。
该山茱萸提取物中，熊果酸含量为10%。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。 显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人 员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明 的保护范围。
权利要求
1、一种含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，其特征是包括以下步骤1)、将山茱萸粉与水相混合，然后接种山茱萸粉重量2％～4％的葡萄酒酵母菌进行摇床发酵，发酵温度为25～35℃，发酵时间4d～8d；得发酵液；2)、在发酵液中加入蒸馏水后于50～70℃水浴0.5～2h，然后在50～70℃和30～40KHZ的频率下超声波处理1～3次，每次的超声波处理时间为10～20min；3)、过滤步骤2)的所得物，在所得的滤渣中加入体积浓度为75％～95％乙醇，于40～60℃和30～40KHZ的频率下超声波萃取5～15min；然后抽滤浓缩，得浓缩液；4)、浓缩液用石油醚萃取，取下层液进行浓缩和干燥，得到含熊果酸的山茱萸提取物。
2、 根据权利要求l所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，其特征是: 所述步骤l)中每g山茱萸粉溶于0.5 3ml水中。
3、 根据权利要求2所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，其特征是: 所述步骤l)中摇床发酵的转速为110rpm 150rpm。
4、 根据权利要求3所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，其特征是: 所述步骤2)中的蒸馏水与步骤l)中的山茱萸粉的体积重量比为20 60ml/g。
5、 根据权利要求4所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，其特征是: 所述步骤3)中的乙醇与步骤l)中的山茱萸粉的体积重量比为20 60ml/g。
6、 根据权利要求5所述的含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，其特征是: 所述步骤4)中石油醚与浓縮液的体积1 2: 3。
全文摘要
本发明公开了一种含熊果酸的山茱萸提取物的制备方法，包括以下步骤1)将山茱萸粉与水相混合，然后接种葡萄酒酵母菌进行摇床发酵，得发酵液；2)在发酵液中加入蒸馏水后水浴，然后进行超声波处理；3)过滤步骤2)的所得物，在所得的滤渣中加入乙醇进行超声波萃取；然后抽滤浓缩，得浓缩液；4)浓缩液用石油醚萃取，取下层液进行浓缩和干燥，得到含熊果酸的山茱萸提取物。采用本发明的方法制备含熊果酸的山茱萸提取物，具有成本低、工艺简单、易于工业化生产、环境友好等特点。
文档编号C12P33/00GK101422502SQ20081016283
公开日2009年5月6日 申请日期2008年12月11日 优先权日2008年12月11日
发明者于海宁, 何国庆, 徐春根, 沈生荣, 胥伯涛, 晖 阮 申请人:浙江大学