专利名称：高含量EGCg儿茶素的提取方法
技术领域：
本发明属于化学技术领域具体涉及一种可直接用于药物原料的高含量EGCg儿茶素提取方法。
茶多酚中的主要成分儿茶素，包括了表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCg)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECg)和表儿茶素(EC)等几种主要成分，其中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCg)儿茶素的含量最高，占儿茶素50％以上。但因茶叶采摘期、产地及品种等条件的不同，儿茶素中主要成分的组成比例也有所不同。自从发现茶叶提取物(茶多酚)具有优良的清除自由基、防护脂质过氧化和预防化学致癌活性等多种药效以来，其生物活性和药理功能最强的EGCg儿茶素也越来越受到国内外的重视。目前，国内外发展以天然植物的有效成分作为药用原料，开发“绿色技术”，发展“绿色工程”已成为热门课题。茶多酚的进一步提取和应用也不例外。虽然茶多酚的生产在国内已较为普及，通常以该产品作为天然抗氧化添加剂和保健品形式面市，但由于提取工艺的限制，产品中往往杂质含量高，有些还含有危害健康的诸如氯仿等有机溶剂残留和农药残留，因此市场开发受到了极大的限制。为了进一步拓展潜在的市场，并满足生物医学领域中的应用要求，迫切需要无有机溶剂残留和农残的高含量EGCg儿茶素。因此，作为可直接用于药物原料的高含量EGCg儿茶素产品，需求量将会越来越大，其市场前景广阔。
本发明的目的在于提供一种能生产无有机溶剂残留和农药残留的、品质纯正的、可直接用于药物原料的、白色至浅黄色的絮状高含量EGCg儿茶素的提取方法。
实现本发明目的的技术方案是这样的以黄色茶多酚为原料，在室温、压力范围为0.1MPa～1.0MPa的条件下，经过一系列的惰性溶剂多步逆流萃取后，调整溶液的pH值在2.5～7.5之间，进行二价或三价金属盐沉淀反应，沉淀经过滤、热水洗涤和酸溶后，用乙酸乙酯萃取，萃取的有机溶剂相进行水洗脱酸、减压浓缩、重结晶，养晶后的结晶物经过滤、冷冻双重水洗涤，最后进行冷冻干燥，可获得具有高生物活性的、无有机溶剂残留和农药残留的、白色至浅黄色的絮状固体；上述无害惰性有机溶剂可以是指正己烷、环己烷、石油醚、乙醚、乙醇、正丁醇、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、丁酸丙酯、丁酸丁酯中的任一种或任意种以任意比例混合，且最佳可以是正己烷、石油醚、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯中的任一种或任意种以任意比例混合；上述沉淀反应的金属盐可以是氯化钙、硫酸铝、硫酸铝钾、乙酸铝、乙酸铅中的任一种，最佳选择是硫酸铝；上述沉淀反应溶液的pH值范围的最佳选择可以是4.5～5.5。
上述黄色茶多酚可以是指多酚含量不低于80％的普通黄色茶多酚中的任一种；上述逆流萃取可以是指不用固态吸附剂的两溶剂相以反向流动形式连续进行混合萃取的过程；上述逆流萃取的压力范围的最佳选择可以是0.2～0.6MPa。
本发明提供的提取方法，所提取的高含量EGCg儿茶素产品，生物活性高，无有机溶剂残留和农药残留，儿茶素中EGCg有效含量达90％以上，可直接用于药物原料。并且，提取率高，产品质量稳定，工艺过程无三废污染。
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例1.取100克80％的黄色茶多酚，溶于1000mL的丁酸乙酯中，不溶物离心弃去，分离出的丁酸乙酯相用1500mL的水逆流萃取1次，将所得水相蒸发浓缩至原体积的1/2～1/3，以脱除水相中残留的丁酸乙酯。然后用1/2～1/4体积的乙酸丁酯相逆流萃取上述水相3～4次，所得水相用0.1mol/dm3的硫酸铝溶液进行沉淀反应，并用0.5mol/dm3的氢氧化钠溶液调整溶液的pH值至5.0～5.5，此时应有大量的沉淀析出，沉淀经一段时间的陈化(老化)，然后抽滤得沉淀物。沉淀物用1000～2000mL的70℃热水洗涤2～3次，所得沉淀物用3～5℃的2.0mol/dm3的盐酸(HCl)溶液酸化溶解，抽滤以除去少量不溶物。然后再用等体积的的乙酸丙酯相逆流萃取上述酸化液3～4次，合并有机相并水洗脱酸，真空蒸发浓缩、重结晶，5℃以下养晶12h～72h后，趁冷过滤，冷冻双重水水洗1～2次，最后将所得固形物进行冷冻干燥，即为白色至浅黄色的絮状高含量EGCg儿茶素产品。
实施例2.取100克95％的黄色茶多酚，溶于2000mL的水中，直接用1/2～1/4体积的丁酸乙酯相逆流萃取3～4次，弃去丁酸乙酯相。将所得水相蒸发浓缩至原体积的1/2～1/3，以脱除水相中残留的丁酸乙酯。然后用等体积的乙酸丙酯相逆流萃取2～3次，合并有机相，真空蒸发浓缩干燥。将干燥后的粗提物溶于2000mL的水中，用0.1mol/dm3的硫酸铝溶液进行沉淀反应，并用0.5mol/dm3的氢氧化钠溶液调整溶液的pH值至6.0左右，此时应有大量的沉淀析出，沉淀经一段时间的陈化，过滤，60℃热水洗涤2～3次后，用3℃～5℃的2.0mol/dm3的盐酸(HCl)溶液酸化溶解，抽滤以除去少量不溶物。然后再用等体积的的乙酸乙酯相逆流萃取上述酸化液3～4次，合并有机相并水洗脱酸，真空蒸发浓缩、重结晶。5℃以下养晶12h～72h后，趁冷过滤，冷水洗1～2次，冷冻干燥，即为品质纯正的白色絮状高含量EGCg儿茶素产品。
实施例3.取200克95％的黄色茶多酚，溶于1000mL的水中，用含有正己烷(或石油醚)的乙酸乙酯相(正己烷或石油醚∶乙酸乙酯＝1∶10)逆流萃取，所得水相用0.1mol/dm3的硫酸铝溶液进行沉淀反应，以下同实施例2，即可获得白色絮状的高含量EGCg儿茶素产品。
权利要求
1.一种高含量EGCg儿茶素的提取方法，其特点是以普通的黄色茶多酚为原料，在室温、压力范围为0.1MPa～1.0MPa的条件下，经过一系列惰性溶剂多步逆流萃取后，调整溶液的pH值在2.5～7.5之间，进行二价或三价金属盐沉淀反应，沉淀经过滤、热水洗涤和酸溶后，用乙酸乙酯萃取，萃取的有机溶剂相进行水洗脱酸、减压浓缩、重结晶的结晶物经过滤、冷冻双重水洗涤，最后进行冷冻干燥。
2.根据权利要求1所述的高含量EGCg儿茶素的提取方法，其特征是所述无害惰性有机溶剂是指正己烷、环己烷、石油醚、乙醚、乙醇、正丁醇、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、丁酸丙酯、丁酸丁酯中的任一种或任意种以任意比例混合，且最佳选择是正己烷、石油醚、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯中的任一种或任意种以任意比例混合。
3.根据权利要求1或2所述的高含量EGCg儿茶素的提取方法，其特征是所述沉淀反应的金属盐是氯化钙、硫酸铝、硫酸铝钾、乙酸铝、乙酸铅中的任一种，且最佳选择是硫酸铝。
4.根据权利要求1或2或3所述的高含量EGCg儿茶素的提取方法，其特征是所述沉淀反应溶液的pH值的最佳控制范围为4.5～5.5。
5.根据权利要求1或4所述的高含量EGCg儿茶素的提取方法，其特征是所述黄色茶多酚是指多酚含量不低于80％的普通黄色茶多酚中的任一种。
6.根据权利要求1或5所述的高含量EGCg儿茶素的提取方法，其特征是所述逆流萃取是指不用固态吸附剂的两溶剂相以反向流动形式连续进行混合萃取的过程。
7.根据权利要求1或6所述的高含量EGCg儿茶素的提取方法，其特征是所述逆流萃取的压力范围的最佳选择是0.2MPa～0.6MPa。
全文摘要
本发明涉及一种可直接用于药物原料的高含量EGCg儿茶素的提取方法,其以普通的黄色茶多酚为原料,在室温、压力范围为0.1～1.0MPa的条件下,经过一系列的无害惰性有机溶剂多步逆流萃取后,调整溶液的pH值在2.5～7.5之间,进行二价或三价金属盐沉淀反应,沉淀经过滤、热水洗涤和酸溶后,用乙酸乙酯萃取,萃取的有机溶剂相再进行水洗脱酸、减压浓缩、重结晶,养晶后的结晶物经过滤、冷冻双重水洗涤,最后进行冷冻干燥而成。采用该工艺提取的产品,无有机溶剂残留和农药残留,儿茶素中EGCg有效含量达90%以上,可直接用于药物原料。
文档编号C07D311/62GK1367171SQ01139179
公开日2002年9月4日 申请日期2001年12月21日 优先权日2001年12月21日
发明者郑亚津, 陈平 申请人:浙江一新制药股份有限公司