专利名称：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)的反应培养基的制作方法
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的反应培养基本发明涉及用于检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的培养基。本发明也涉及这种培养基的用途并且涉及用于鉴定MRSA细菌的方法。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是特征在于其以具有对抗生素甲氧西林和相关抗生素如苯唑西林的抗性为特征的金黄色葡萄球菌菌株。这种抗性最常见是由于基因mecA表达，导致产生修饰的蛋白质PIi^a (也称作PBP^i或PBP2')。MRSA细菌代表大部分的医院感染，并经常导致严重的和潜在致死的健康问题。最常见通过护理人员在患者之间交叉传播的MRSA极具传染性并且导致很难控制的地方性传染感染。除了合适的治疗外，筛查MRSA携带者并隔离被定植(colonize)的患者构成如今官方组织如美国卫生保健流行病学会推荐的最有效方法。早期的和系统的筛查因此是重要的。MRSA可以通过多种技术检测。因而有可能通过分子生物学技术检测MRSA。在这个方面，可以特别地提到申请 EP8874M。然而，此类方法在例行检验中仍是昂贵的并且要求合格的人员。也可能使用常规培养基(如申请EP1390524中所述的培养基)检测金黄色葡萄球菌。MRSA的检测在一个额外步骤中借助特异性凝集试验(Slidex MRSA, bioMerieux) 实施或借助琼脂扩散方法在苯唑西林片存在下实施(Comit6de Γ Antibiogramme de la SocieteFrancaise de Microbiologie [法国微生物学会抗菌谱委员会]推荐)。也可能在琼脂培养基上在抗生素存在下培养可能是MRSA的细菌。这种培养基也可以是生色的，其利于MRSA的判读和检测。可以特别提到申请EP1543147中所述的培养基。然而，由于在所述条件下的磷酸酶活性检测不是很特异，因此需要将它与几种其他酶活性的检测组合，从而降低该培养基的生产力并增加其成本。本发明建议通过提供一种用于分离和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的新的、灵敏的、特异的和快速的检测培养基解决现有技术的空白。令人惊讶地，本发明的发明人已经展示，使用低浓度和预定浓度的抗生素的组合能够获得用于分离和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的优异的检测培养基。这种作用是格外令人惊讶的，因为单独使用的抗生素无论如何不能在本发明的浓度上区分 MRSA0在进一步继续之前，无论如何不是限制性的以下定义将能够更清晰地理解本发明。出于本发明的目的，术语反应培养基意指包含微牛物(如金黄色葡萄球菌)存活和/或生长所需之全部要素的培养基。这种反应培养基可以仅充当检测(reveal)培养基，或可以充当培养和检测培养基。在第一种情况下，在接种之前培养微生物，并且在第二种情况下，反应培养基也构成该
培养培养基。
反应培养基可以是固体、半固体或液体。术语“固体培养基”意指例如凝胶化的培养基。优选地，本发明的培养基是凝胶化的培养基。琼脂是微生物学中用于培养微生物的常规凝胶剂，但是可以使用明胶或琼脂糖。若干制品是市售的，例如Colombia琼脂、胰酪胨大豆琼脂、Mac Conkey琼脂、Sabouraud琼脂或更常见是那些在《微生物学培养基手册》(CRC Press)中描述的琼脂。本发明的反应培养可以含有其他可能的添加剂，例如蛋白胨、一种或多种生长因子、碳水化合物、一种或多种选择剂、缓冲溶液、一种或多种凝胶剂等。这种反应培养基可以是能立即使用(即能立即用于在管或烧瓶中或在培养皿上接种)的液体或凝胶形式。当这种培养基以烧瓶中的凝胶形式提供时，该培养基优选地在倾入培养皿之前再生出来(使其经历 100°C )。优选地，本发明的培养基是选择性培养基，即包含有利于金黄色葡萄球菌生长的抑制剂的培养基。可以特别提到氯化锂(LiCl)、叠氮化纳(NaN3)、粘菌素、两性霉素、氨曲南、结肠霉素、氯化钠(NaCl)、去铁胺和弧菌抑制化合物0/129。出于本发明的目的，酶促活性或代谢活性的底H(或酶底物)选自可以被水解以产生以下产物的任意底物，其中所述的产物使得能够直接或间接检测α-葡糖苷酶酶促活性或代谢作用，例如，具体地如糖苷酶(osidase)活性，优选α-葡糖苷酶或酯酶活性，优选磷酸酶或肽酶活性，优选凝固酶活性；或碳水化合物糖的代谢，优选甘露醇的代谢。该底物可以是天然或合成的底物。该底物的代谢引起反应培养基或生物细胞的物理化学特性变化。这种变化可以由操作员目视方式或使用光谱测定仪、电仪器、磁仪器等仪器通过物理化学方法、尤其光学方法检测。优选地，它是光学特性变化，如吸收、荧光或化学发光的修饰。作为生色底物，可以特别提到基于吲哚酚、黄酮、茜素、吖啶、吩噁嗪、硝基酚、硝基苯胺、萘酚、儿茶酚、羟喹或香豆素的底物。优选地，本发明中使用的底物是基于吲哚酚的。作为荧光底物，可以特别提到基于伞形酮或基于香豆素、基于9-羟基异吩噻唑、 吩噁嗪、萘酚、萘胺或2'-羟苯基-杂环或2'-氨基苯基-杂环或者还基于荧光素的底物。作为α -葡糖苷酶酶促活性的底物，可以更特别地提到以下底物 5-溴-6-氯-3-吲哚氧基-α -葡糖苷、二羟黄酮-α -葡糖苷、3，4_环己酮七叶苷e_ α -葡糖苷、8-羟基喹啉-α -葡糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚氧基-α -葡糖苷、5_溴_4_氯_3_吲哚氧基-N-甲基-α -葡糖苷、6-氯-3-吲哚氧基-α -葡糖苷、5_溴_3_吲哚氧基-α -葡糖苷、5-碘-3-吲哚氧基-α -葡糖苷、6-氟-3-吲哚氧基-α -葡糖苷、茜素_ α _葡糖苷、 硝基苯基-α -葡糖苷、4-甲基伞花基-α -葡糖苷、萘酚苯-α -葡糖苷、吲哚氧基_Ν_甲基-α -葡糖苷、萘基-α -葡糖苷、氨基苯基-α -葡糖苷、二氯氨基苯基_ α -葡糖苷。优选地，本发明中使用的底物是优选地与5-溴-4-氯-3-吲哚氧基-N-甲基-α -葡糖苷组合的5-溴-4-氯-3-吲哚氧基-α -葡糖苷。作为磷酸酶酶促活性的底物，可以更特别地提到底物磷酸5-溴-6-氯-3-吲哚氧基酯、3，4_环己酮七叶苷磷酸酯、磷酸5-溴-4-氯-3-吲哚氧基酯、磷酸5-溴-4-氯-3-吲哚氧基-N-甲酯、磷酸6-氯-3-吲哚氧基酯、磷酸5-溴-3-吲哚氧基酯、磷酸5-碘-3-吲哚氧基酯、磷酸6-氟-3-吲哚氧基酯、磷酸硝基苯酯、磷酸4-甲基伞花酯、磷酸吲哚氧基-N-甲酯、磷酸奈酯。作为凝固酶底物，可以更特别地提到底物Boc-Val-Pro-Arg-7-酰胺_4_甲基香豆素、Bz-Phe-Val-Arg-对-硝基苯胺、Z-Gly-Pro-Arg-4-甲氧基-β -萘酰胺和纤维蛋白溶酶原。一般而言，这些底物与凝血酶原源(如纯化的凝血酶原或血浆)组合使用。本发明中使用的底物可以与其他底物如糖苷酶(尤其葡糖苷酶或核糖苷酶)、酯酶(尤其磷酸酶或磷脂酶)、肽酶(尤其凝固酶)的底物组合。本发明的底物可以在宽ρΗ范围内、尤其在ρΗ 5. 5至10之间、优选在ρΗ 6. 5至10 之间使用。当本发明的培养基包含α-葡糖苷酶酶促活性的底物或几种底物时，底物的浓度优选地在0. Olg/Ι至2g/l之间，甚至更优选地在0. 02g/l至0. 2g/l之间，并且有利地是 0. lg/Ι。这是因为在这个底物浓度上，获得更好的着色反差。底物也可以是与指示剂偶联的代谢底物，如碳源，其中所述指示剂在代谢产物之一存在下产生显色。在代谢碳水化合物的情况下，底物优选地是与PH值指示剂偶联的甘露出于本发明的目的，属于头孢菌素家族的抗生素是优选地选自以下的抗生素ο第一代头孢菌素，如头孢氨苄、头孢噻啶、头孢噻吩、头孢唑啉、头孢羟氨苄、头孢西酮、头孢曲秦、头孢匹林、头孢拉定、头孢乙睛、头孢沙定、头孢替唑；ο第二代头孢菌素，如头孢西丁、头孢呋辛、头孢孟多、头孢克洛、头孢替坦、头孢尼西、头孢替安、氯碳头孢、头孢美唑、头孢丙烯、头孢雷特；ο第三代头孢菌素，如头孢噻肟、头孢他啶、头孢磺啶、头孢曲松、头孢甲肟、拉氧头孢、头孢唑肟、头孢克肟、头孢地泰、头孢他美、头孢匹胺、头孢哌酮、头孢泊肟、头孢布烯、 头孢地尼、头孢托仑、头孢曲松、头孢哌酮、头孢拉宗；ο第四代头孢菌素，如头孢吡肟、头孢匹罗。头霉素如头孢西丁、头孢替坦、头孢美唑、头孢拉宗或拉氧头孢属于头孢菌素亚家族。在本发明的上下文中，属于头孢菌素家族的抗生素优选地是头孢西丁并且可以与头孢噻肟组合。出于本发明的目的，属于碳青霉烯家族的抗生素是优选地选自美罗培南、厄他培南、亚胺培南、多利培南、法罗培南的抗生素。在本发明的上下文中，属于碳青霉烯家族的抗生素优选地是厄他培南。出于本发明的目的，属于氨基糖苷家族的抗生素是优选地选自阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、卡那霉素、奈替霉素、链霉素、妥布霉素的抗生素。亚抑制浓度意指在适于使用生物学样品搜索金黄色葡萄球菌的培养基(如 chromID 金黄色葡萄球菌培养基(bioMerieux))中低于抑制MSSA所需的抗生素浓度的浓度。这个浓度在头孢西丁的情况下是低于大约:3mg/l，在头孢噻肟的情况下是低于大约 aiig/Ι，在厄他培南的情况下是低于大约lmg/1，在头孢哌酮的情况下是低于大约aiig/Ι，在头孢泊肟的情况下是低于大约ang/1，并且在头孢地尼的情况下是低于大约lmg/1。术语两种抗生素的预定组合意指两种特定抗生素的组合，这两种抗生素的每一种处于特定的亚抑制浓度。可以通过实施例A的试验具体地确定这种组合。术语“生物学样品”意指从支气管、气管或肺吸气样品或胸水样品，从支气管-肺泡灌洗液，从咳痰，从血液或从肺活组织检查，从关节液或心包液、生物学流体衍生的临床样品或从任何类型的食物衍生的食物样品。该样品可以因而是液体或固体并且以非限制性方式可以提到来自血液、血浆、尿或粪便的临床样品或来自从鼻、会阴、喉、皮肤、伤口或脑脊液取得的样品的临床样品，或可以提到食物样品。在这个方面，本发明涉及用于检测和/或鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 的反应培养基，其包含第一抗生素和第二抗生素的两种抗生素的预定组合，所述第一抗生素属于头孢菌素家族，所述的第一和第二抗生素各自处于亚抑制浓度。根据本发明的一个优选实施方案，所述的第一抗生素属于头霉素亚家族。根据本发明的一个更优选的实施方案，所述的第一抗生素是头孢西丁。根据本发明的一个优选实施方案，所述的第二抗生素属于碳青霉烯家族。根据本发明的一个优选实施方案，所述的第二抗生素属于头孢菌素家族。根据本发明的一个优选实施方案，所述的第二抗生素属于氨基糖苷家族。根据本发明的一个优选实施方案，培养基也包含底物，其用于检测酶促活性优选糖苷酶(osidase)活性、酯酶活性或肽酶活性，或代谢活性优选碳水化合物代谢。在糖苷酶活性的情况下，优选地是α -葡糖苷酶活性。在酯酶活性的情况下，优选是磷酸酶活性。在肽酶活性的情况下，优选地是凝固酶活性。在碳水化合物代谢的情况下， 优选地是与PH值指示剂偶联的甘露醇。根据本发明的一个优选实施方案，该底物是用于检测糖苷酶酶促活性、优选 α-葡糖苷酶酶促活性的底物。α -葡糖苷酶酶促活性的所述底物优选地是吲哚氧基-α -葡糖苷。优选地，使用的底物是5-溴-4-氯-3-吲哚氧基-N-甲基-α -葡糖苷(Χ-Ν-甲基-α -葡糖苷)。优选地，该底物以0. Olg/Ι至2g/l之间、优选地0. 02g/l至0. 3g/l之间的浓度存在于该培养基中。根据本发明的一个具体实施方案，所述的培养基包含第二酶底物或代谢底物。这种底物可以是α-葡糖苷酶底物或另一种底物。优选地，这种第二底物是α-葡糖苷酶底物。当所述的培养基包含第二种α-葡糖苷酶底物时，这种底物优选地是 5-溴-4-氯-3-吲哚氧基-α-葡糖苷(Χ-α-葡糖苷)。优选地，这种第二底物以0. Olg/ 1至2g/l之间、优选地0. 02g/l至0. 3g/l之间的浓度存在于该培养基中。根据本发明的一个优选实施方案，属于头孢菌素家族的所述第一和/或第二抗生素选自ο第一代头孢菌素，优选地是头孢氨苄、头孢噻啶、头孢噻吩、头孢唑啉、头孢羟氨苄、头孢西酮、头孢曲秦、头孢匹林、头孢拉定、头孢乙睛、头孢沙定、头孢替唑；ο第二代头孢菌素，优选地是头孢西丁、头孢呋辛、头孢孟多、头孢克洛、头孢替坦、头孢尼西、头孢替安、氯碳头孢、头孢美唑、头孢丙烯、头孢雷特；ο第三代头孢菌素，优选地是头孢噻肟、头孢他啶、头孢磺啶、头孢曲松、头孢甲肟、拉氧头孢、头孢唑肟、头孢克肟、头孢地泰、头孢他美、头孢匹胺、头孢哌酮、头孢泊肟、头孢布烯、头孢地尼、头孢托仑、头孢曲松、头孢哌酮、头孢拉宗；ο第四代头孢菌素，优选地是头孢吡肟、头孢匹罗。
根据本发明的一个优选实施方案，属于碳青霉烯家族的所述第二抗生素选自美罗培南、厄他培南和亚胺培南。根据本发明的一个优选实施方案，两种抗生素的组合选自头孢西丁-头孢噻肟组合或头孢西丁-厄他培南组合。根据本发明的一个优选实施方案，该培养基也可以包含有利于金黄色葡萄球菌生长的至少一种抑制剂混合物，如氯化锂(LiCl)、叠氮化纳(NaN3)、粘菌素、两性霉素、氨曲南、结肠霉素、氯化钠(NaCl)和去铁胺。根据本发明的一个优选实施方案，所述的培养基也包含有利于金黄色葡萄球菌生长的包含4种抑制剂的抑制剂混合物，所述抑制剂是LiCI、弧菌抑制化合物0/129、氨曲南
和两性霉素。根据本发明的一个优选实施方案，两种抗生素的组合包含头孢西丁和头孢噻肟。 优选地，所述的头孢西丁亚抑制浓度在0. 25mg/l至1. 5mg/l之间、优选地在0. 5mg/l至 lmg/1之间。优选地，所述的头孢噻肟亚抑制浓度在0. 25mg/l至1. 5mg/l之间、优选地在 0. 5mg/l 至 lmg/1 之间。根据本发明的一个优选实施方案，两种抗生素的组合包含头孢西丁和头孢曲松。 优选地，所述的头孢西丁亚抑制浓度在0. 25mg/l至1. 5mg/l之间、优选地在0. 5mg/l至 lmg/1之间。优选地，所述的头孢曲松亚抑制浓度在0. 25mg/l至1. 5mg/l之间、优选地在 0. 5mg/l 至 lmg/1 之间。根据本发明的一个优选实施方案，两种抗生素的组合包含头孢西丁和厄他培南。 优选地，所述的头孢西丁亚抑制浓度在0. 25mg/l和1. 5mg/l之间、优选地在0. 5mg/l至 lmg/1之间。优选地，所述的厄他培南亚抑制浓度在0. 5mg/l至0. 75mg/l之间。根据本发明的一个优选实施方案，两种抗生素的组合包含头孢西丁和头孢泊肟。 优选地，所述的头孢西丁亚抑制浓度在0. 25mg/l至lmg/1之间、优选地在0. 5mg/l至Img/ 1之间。优选地，所述的头孢泊肟亚抑制浓度在0. 75mg/l至lmg/1之间、优选地在0. 5mg/l 至lmg/1之间。根据本发明的一个优选实施方案，两种抗生素的组合包含头孢西丁和头孢哌酮。 优选地，所述的头孢西丁亚抑制浓度在0. 25mg/l至1. 5mg/l之间、优选地在0. 5mg/l至 lmg/1之间。优选地，所述的头孢哌酮亚抑制浓度在0. 5mg/l至0. 75mg/l之间、优选地在 0. 75mg/l 至 lmg/1 之间。根据本发明的一个优选实施方案，两种抗生素的组合包含头孢西丁和头孢地尼。 优选地，所述的头孢西丁亚抑制浓度在0. 25mg/l至1. 5mg/l之间、优选地在0. 5mg/l至 0. 75mg/l之间。优选地，所述的头孢西丁亚抑制浓度在0. 05mg/l至0. 5mg/l之间、优选地在 0. lmg/1 至 0. 25mg/l 之间。本发明也涉及如上文定义的反应培养基用于分离和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外用途。当使用这种培养基时，优选地借助能够获得有色或荧光菌落的特异性α -葡糖苷酶活性检测MRSA。其余金黄色葡萄球菌菌种显示无色或具有与金黄色葡萄球菌菌落不同的颜色或荧光。最后，本发明涉及用于检测和/或鉴定生物学样品中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法，其包括a)在如上文定义的反应培养基上接种可能含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)的生物学样品；b)孵育；c)鉴定 MRSA 菌落。优选地在30°C至42°C之间的温度实施孵育。优选地借助能够获得有色或荧光菌落的特异性α -葡糖苷酶活性检测MRSA。其余葡萄球菌属菌种显示无色或具有与金黄色葡萄球菌菌落不同的颜色或荧光。以下实施例以说明的方式提供且本质上无论如何不是限制性的。它们将使得更清晰地理解本发明成为可能。实施例A用于确定本发明两种抗生素的预定组合的试验可以实施以下试验以确定本发明两种抗生素的预定组合，该试验取决于所用的抗生素，并且更一般地取决于所述反应培养基的配方。为辅助理解该试验，在头孢西丁和头孢噻肟组合的情况下，使用一套包含MSSA和 MRSA的微生物菌株实施下面的这项试验，但是当然可以对其他抗生素实施该试验。适用于搜索生物学样品中金黄色葡萄球菌的10种反应培养基(如chromID 金黄色葡萄球菌培养基，bi0M6rieux)和多个浓度的头孢西丁(Omg/1至3mg/l之间)和头孢噻肟(Omg/1和aiig/Ι之间)用来获得0至5mg/l之间的抗生素浓度。多个浓度例如根据算术分布或几何分布均勻地隔开。以这种方式等分每种培养基，从而可以在每种培养基上以纯培养物接种每种微生物菌株。在适宜温度、优选30至37°C，在合适的孵育时间、优选18至M小时后，检查这些培养基，从而选出包含头孢西丁和头孢噻肟组合的培养基，所述的头孢西丁和头孢噻肟组合能够检测最大数目的MRSA，同时使它们与最大数目的MSSA菌株区分。可能必须调整每种抗生素的浓度而重复该试验。实施例B包含α -葡糖苷酶底物的本发明的培养基1.制备本发明的培养基以下实验中测试的培养基是包含chromID MRSA培养基(bioM6rieux参考号43 451)作为基础培养基且包含以下要素的培养基培养基T =ChromID MRSA对照培养基(参考号43451)，其特别包含浓度0. lg/Ι的 X-N-甲基-α -葡糖苷底物和％ig/l的头孢西丁。培养基S 培养基T，还包含浓度25、37、45或50mg/l的Χ-α -葡糖苷底物。培养基A 培养基S (Χ- α -葡糖苷浓度45mg/l)，头孢西丁替换为浓度1、2、4、8、 16、32mg/l的头孢曲松。培养基B 培养基S (Χ-α-葡糖苷浓度45mg/l)，头孢西丁替换为浓度1、2、4、8、 16,32mg/l的头孢噻肟。培养基C 培养基S (Χ- α -葡糖苷浓度45mg/l)，头孢西丁替换为浓度0. 1、0. 25、
0.5,0. 75、lmg/1的厄他培南。培养基D 培养基S(X_ α -葡糖苷浓度45mg/l)，头孢西丁替换为浓度0. 5、1、
1.5、2mg/l的头孢哌酮。
培养基E 培养基S(X_ α -葡糖苷浓度45mg/l)，头孢西丁替换为浓度0. 5、1、 1. 5、2mg/l的头孢泊肟。 培养基F 培养基S (Χ- α -葡糖苷浓度45mg/l)，头孢西丁替换为以下浓度的头孢
西丁/头孢噻肟
权利要求
1.用于检测和/或鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)的反应培养基，其包含第一抗生素和第二抗生素两种抗生素的预定组合，所述第一抗生素属于头孢菌素家族，所述的第一抗生素和第二抗生素各自处于亚抑制浓度。
2.权利要求1的反应培养基，其中所述的第一抗生素属于头霉素亚家族。
3.权利要求1的反应培养基，其中所述的第二抗生素属于碳青霉烯家族。
4.权利要求1或2的反应培养基，其中所述的第二抗生素属于头孢菌素家族。
5.权利要求1至4中任一项的反应培养基，其还包含用于检测酶促活性或代谢活性的底物。
6.权利要求5的反应培养基，其中所述的酶促活性是氧化酶、酯酶或肽酶活性。
7.权利要求6的反应培养基，其中所述的氧化酶酶促活性是α-葡糖苷酶活性。
8.权利要求5的反应培养基，其中所述的代谢活性是碳水化合物的代谢。
9.权利要求1至8中任一项的反应培养基，其还包含酶促活性或代谢活性的第二底物。
10.权利要求9的反应培养基，其中所述的第二底物是α-葡糖苷酶酶促活性的底物。
11.权利要求1至10中任一项的反应培养基，其中属于头孢菌素家族的所述第一抗生素和/或第二抗生素选自ο第一代头孢菌素，优选地选自头孢氨苄、头孢噻啶、头孢噻吩、头孢唑啉、头孢羟氨苄、头孢西酮、头孢曲秦、头孢匹林、头孢拉定、头孢乙睛、头孢沙定、头孢替唑；O第二代头孢菌素，优选地选自头孢西丁、头孢呋辛、头孢孟多、头孢克洛、头孢替坦、 头孢尼西、头孢替安、氯碳头孢、头孢美唑、头孢丙烯、头孢雷特；O第三代头孢菌素，优选地选自头孢噻肟、头孢他啶、头孢磺啶、头孢曲松、头孢甲肟、 拉氧头孢、头孢唑肟、头孢克肟、头孢地泰、头孢他美、头孢匹胺、头孢哌酮、头孢泊肟、头孢布烯、头孢地尼、头孢托仑、头孢曲松、头孢哌酮、头孢拉宗；O第四代头孢菌素，优选地选自头孢吡肟、头孢匹罗。
12.权利要求1至11中任一项的反应培养基，其中属于碳青霉烯家族的所述第二抗生素选自美罗培南、厄他培南和亚胺培南。
13.权利要求1至12中任一项的反应培养基，其中两种抗生素的组合选自头孢西丁-头孢噻肟组合或头孢西丁-厄他培南组合。
14.权利要求1至13中任一项的反应培养基的体外用途，其用于分离和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。
15.用于检测和/或鉴定生物学样品中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法， 其包括a)在权利要求1至13中任一项的反应培养基上接种可能含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA的生物学样品；b)孵育；c)鉴定菌落为MRSA菌落。
全文摘要
本发明涉及用于检测和/或鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的反应培养基，其包含第一抗生素和第二抗生素两种抗生素的预定组合，所述第一抗生素属于头孢菌素家族，所述的第一和第二抗生素各自处于亚抑制浓度。
文档编号C12Q1/04GK102177248SQ200980140214
公开日2011年9月7日 申请日期2009年10月7日 优先权日2008年10月8日
发明者D·罗比雄, G·赞巴尔迪, S·奥伦加 申请人:生物梅里埃公司