专利名称：一种耐热菌复合培养基及耐热菌的检测方法
技术领域：
本发明涉及固体食品中耐热菌的检测技术领域，具体地讲是一种耐热菌复合培养 基及耐热菌的检测方法。
背景技术：
耐热菌是一类含有芽孢，经热加工仍然存活，适宜条件下孢子可活化为营养体从 而导致食品腐败的细菌的总称；目前，对耐热菌的研究主要涉及果汁中嗜酸耐热菌等，其检 测方法与试剂皆针对液体食品，不适合固体食品中耐热菌的检测；现有标准SN 0178《出口 食品嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)计数方法》中使用葡萄糖胰蛋白胨 琼脂，但是葡萄糖胰蛋白胨琼脂耐热菌检出率较低。
发明内容
本发明的目的是克服上述已有技术的不足，而提供一种耐热菌复合培养基。本发明的另一目的是提供一种耐热菌的检测方法。本发明主要解决现有的培养基用于检测固体食品中的耐热菌检测结果不准确的 问题。为了达到上述目的，本发明是这样实现的一种耐热复合菌培养基，其特殊之处 在于它含有下述百分重量配比的原料胰蛋白胨10 20%、细菌琼脂粉50 70%、牛肉 膏1 10%、酵母膏1 10%、葡萄糖1 10%、溴甲酚紫0. 1 0.9%、复合维B 0. 1 0. 9%、硝酸钙0. 1 0. 9%、吐温80 1 10%。本发明的一种耐热菌复合培养基，其较好的百分重量配比为胰蛋白胨12 17%、细菌琼脂粉55 65%、牛肉膏4 7%、酵母膏8 10%、葡萄糖2 5%、溴甲酚紫 0. 1 0. 5%、复合维B 0. 6 0. 9%、硝酸钙0. 6 0. 9%、吐温80 2 5%。本发明的一种耐热菌复合培养基，其最佳的百分重量配比为胰蛋白胨15%、细 菌琼脂粉60%、牛肉膏6%、酵母膏9%、葡萄糖4%、溴甲酚紫0.4%、复合维B 0.8%、硝酸 钙0. 8%、吐温 80 4%。本发明的一种耐热菌的检测方法，其特殊之处在于样品稀释液置于实验试管中， 同时设置温度对照试管，水浴温度控制在74°C 士2°C，当对照试管温度上升至74°C时，开始 计时，水浴lOmin，每隔3min摇动试管一次，加热完毕，取出实验试管冷却，然后接种实验试 管稀释液，倾倒耐热菌复合培养基，于36°C 士 1°C的培养箱内培养48h士2h，计数，得耐热菌 的检测结果。本发明的耐热菌复合培养基各成分作用原理如下胰蛋白胨低分子肽，游离氨基酸，提供营养基础。酵母膏提供维生素和氨基酸。葡萄糖提供营养。吐温80 表面活性剂，降低菌表面和培养基的表面张力，使营养物质更易吸收。
3
细菌琼脂粉凝固剂。溴甲酚紫指示剂。牛肉膏(可用肉浸液代替)提供营养物质和微量的金属元素。复合维B 提供B类元素，芽孢构成的成分。硝酸钙酶反应促进，菌体成分构成，增加耐热性。本发明所述的一种耐热菌复合培养基及耐热菌的检测方法与已有技术相比具有 突出的实质性特点和显著进步采用耐热菌复合培养基可准确检测热加工中心温度条件下 固体食品中残存的耐热菌数量，检出率比市售培养基(葡萄糖胰蛋白胨琼脂)高20%，且菌 落特征显著，易于计数。
具体实施例方式为了更好地理解与实施，下面结合实施例详细说明本发明。实施例1，准确地称取胰蛋白胨1. 5g、细菌琼脂粉6. 0g、牛肉膏0. 6g、酵母膏0. 9g、 葡萄糖0.4g、溴甲酚紫0.04g，复合维B 0.08g、硝酸钙:0.08g、吐温80 0.4g，混合后为耐热
菌培养基。实施例2，准确地称取胰蛋白胨1. 2g、细菌琼脂粉6. 5g、牛肉膏0. 4g、酵母膏0. Sg、 葡萄糖0. 5g、溴甲酚紫0. 05g，复合维B 0. 06g、硝酸钙0. 09g、吐温80 0. 4g，混合后为耐热
菌培养基。实施例3，准确地称取胰蛋白胨1. 7g、细菌琼脂粉5. 5g、牛肉膏0. 7g、酵母膏lg、葡 萄糖0.44g、溴甲酚紫O.Olg，复合维B 0.09g、硝酸钙0.06g、吐温80 0. 5g，混合后为耐热
菌培养基。实施例4，准确地称取胰蛋白胨1.6g、细菌琼脂粉6.3g、牛肉膏0.5g、酵母膏lg、葡 萄糖0. 2g、溴甲酚紫0. 05g，复合维B 0. 09g、硝酸钙0. 06g、吐温80 0. 2g，混合后为耐热菌
培养基。实施例5，准确地称取胰蛋白胨lg、细菌琼脂粉5g、牛肉膏lg、酵母膏lg、葡萄糖 0.898、溴甲酚紫0.098，复合维8 O.Olg、硝酸钙0.01g、吐温80 lg，混合后为耐热菌培养基。实施例6，准确地称取胰蛋白胨2g、细菌琼脂粉7g、牛肉膏0. lg、酵母膏0. lg、葡萄 糖0. lg、溴甲酚紫O.Olg，复合维B 0.09g、硝酸钙0.09g、吐温80 0. 51g，混合后为耐热菌
培养基。实施例7，准确地称取胰蛋白胨1.25g、细菌琼脂粉6.5g、牛肉膏0.5g、酵母膏 0. 5g、葡萄糖lg、溴甲酚紫0. 05g，复合维B 0. 05g、硝酸钙0. 05g、吐温80 0. lg，混合后为
耐热菌培养基。实施例8，耐热菌的检测是针对热加工中心温度为74°C，持续IOmin的低温肉制 品；当热加工中心温度与持续时间有异，可随之改变水浴温度与时间；检测步骤如下将上述实施例1的耐热菌培养基10g，加入到400ml水中，将耐热 菌复合培养基的PH值调为6.0 7. 5，备用；再称取25 士 0. Ig样品，加入无菌均质瓶(袋) 中，加入225mL无菌稀释液，均质lmin-2min，使样品分散良好，此时稀释度为1 10;取2份 IOmL上述稀释液，分别放入2支带有塑料封口的18mmX150mm试管中，摇勻，其中1支试管用于实验，另1支用作温度对照试管；将试管置于水浴锅振荡温浴，温度控制在74°C 士2°C， 当对照管温度上升至74°C时，开始计时，水浴lOmin，每隔3min摇动实验试管一次，加热完 毕，取出实验试管，立即置冷水中，30s内冷却，摇勻试管，接种LOmL稀释液，倾倒耐热菌复 合培养基，于36°C 士 1°C的培养箱内培养48h士2h，计数，得耐热菌的检测结果。
权利要求
一种耐热菌复合培养基，其特征在于它由下述百分重量配比的原料组成胰蛋白胨10～20％、细菌琼脂粉50～70％、牛肉膏1～10％、酵母膏1～10％、葡萄糖1～10％、溴甲酚紫0.1～0.9％、复合维B 0.1～0.9％、硝酸钙0.1～0.9％、吐温80 1～10％。
2.根据权利要求1所述的一种耐热菌复合培养基，其特征在于它由下述百分重量配比 的原料组成胰蛋白胨12 17%、细菌琼脂粉55 65%、牛肉膏4 7%、酵母膏8 10%、 葡萄糖2 5%、溴甲酚紫0. 1 0.5%、复合维B 0.6 0.9%、硝酸钙0. 6 0.9%、吐 温80 2 5%。
3.根据权利要求2所述的一种耐热菌复合培养基，其特征在于它由下述百分重量配比 的原料组成胰蛋白胨15%、细菌琼脂粉60%、牛肉膏6%、酵母膏9%、葡萄糖4%、溴甲酚 紫0.4%、复合维B 0. 8%、硝酸钙0. 8%、吐温80 4%。
4.一种耐热菌的检测方法，其特征在于样品稀释液置于实验试管中，同时设置温度 对照试管，水浴温度控制在74°C 士2°C，当对照试管温度上升至74°C时，开始计时，水浴 lOmin，每隔3min摇动实验试管一次，加热完毕，取出实验试管冷却，然后接种实验试管稀 释液，倾倒耐热菌复合培养基，于36°C 士 1°C的培养箱内培养48h士2h，计数，得耐热菌的检 测结果。
全文摘要
本发明公开了一种耐热菌复合培养基，其特点是它含有下述百分重量配比的原料胰蛋白胨10～20％、细菌琼脂粉50～70％、牛肉膏1～10％、酵母膏1～10％、葡萄糖1～10％、溴甲酚紫0.1～0.9％；耐热菌的检测方法包括样品中加入无菌稀释液，均质后取稀释液进行实验，接种稀释液，倾倒耐热菌复合培养基，于36℃±1℃的培养箱内培养48h±2h，计数得耐热菌的检测结果；采用耐热菌复合培养基可准确检测热加工中心温度条件下固体食品中残存的芽孢菌数量，检出率比市售培养基高20％，且菌落特征显著，易于计数。
文档编号C12Q1/06GK101948904SQ20101028993
公开日2011年1月19日 申请日期2010年9月21日 优先权日2010年9月21日
发明者宋维娟, 徐世明, 徐冬雪, 赵瑞连 申请人:烟台喜旺科技发展有限公司