专利名称：在花瓣中发挥功能的来自紫苏的启动子的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型启动子。更加详细地说，本发明涉及来自紫苏的花色素苷3-酰基转移酶(3AT)基因的转录调控区域及其利用。
背景技术：
通过利用基因重组技术，使有用的基因在目的植物中表达，可将新的性状赋予该植物。如此制作的基因重组植物已被大范围商业化栽培。基因表达的调控主要在转录阶段进行控制，所以转录调控在调控基因表达上最为重要。即为制作产业上有用的基因重组植物，在适当时期、用适当组织、以适当强度转录目的基因非常重要。转录的开始在很多情况下通过位于转录区域的5’侧的DNA序列来控制，其终止通过位于转录区域的3’侧的DNA 序列来控制。将确定基因转录的起始位点，直接调控其频率的DNA上的区域称为启动子，将确定转录终止的区域成为终止子。启动子有时存在于起始密码子的5’侧数十bp处，多含有TATA盒等的序列。其还在5’侧具有结合各种转录调控因子的顺式作用元件，这些顺式作用元件的存在控制着转录的时期、进行转录的组织、转录的强度。转录调控因子根据其氨基酸序列的不同分为很多家族。例如，Myb型转录调控因子、bHLH(碱性/螺旋-环-螺旋 (basic helix loop helix))型转录调控因子等是有名的家族。实际上，很多情况下，转录控制区域与启动子在同样意义上使用，没有严格区别。作为花的颜色的主要成分的花色素苷为总称为类黄酮的次级代谢产物之一。花色素苷的颜色依赖于其结构。即作为花色素苷的发色团的花色素B环的羟基数增加时颜色变蓝。且还已知修饰花色素苷的芳香族酰基(香豆酰基、咖啡酰基等)的数量增加时，花色素苷的颜色变蓝(即最大吸收波长向长波长移动)，花色素苷的稳定性增加(以下参照非专利文献1)。与花色素苷的生物合成有关的酶及编码该酶的基因被广泛研究(参照相同非专利文献1)。例如，催化向花色素苷转移芳香族酰基的反应的酶基因可从龙胆、薰衣草、矮牵牛等中获得(以下参照专利文献1、专利文献2)。与红紫苏叶中积累的花色素苷(丙二酰基紫苏宁、3-0- (6-0- (E) -ρ-香豆酰基-β -D-吡喃葡萄糖基)-5-0- (6-0-丙二酰基-β -D-glucopyranosyl)-花青素(3-0- (6-0- (E) -p-coumaroyl- β -D-glucopyranosyl) -5-0-(6-0-malonyl- β -D-glucopyranos yl)-cyanidin))(以下参照非专利文献 2)的合成有关的酶基因以羟基肉桂酰辅酶A 花色素苷3葡萄糖苷-芳香族酰基转移酶(3AT)的基因{以下简称“紫苏花色素苷3-酰基转移酶(3AT)基因”。}为代表已有一部分基因被报道(参照相同专利文献1)。而且也获得了关于花色素苷的生物合成酶基因转录调控的知识和见解。这些基因的位于起始密码子5’侧的转录控制区域中，具有Myb型转录调控因子、 bHLH型转录调控因子结合的顺式作用元件序列。还已知Myb型转录调控因子和bHLH型转录调控因子控制矮牵牛、玉米、紫苏等的花色素苷的合成(参照相同非专利文献1)。在植物中负责基因转录的启动子(以下称转录调控区域)中，有无论在何种组织或发育阶段的何种时期均发挥功能的所谓组成型启动子、和仅在特定器官·组织中发挥功
3能的器官·组织特异性启动子、及仅在发育阶段的特定时期表达的时期特异性启动子。作为用于使有用基因在基因重组植物中表达的启动子，常用的是组成型启动子。作为代表性的组成型启动子，有花椰菜花叶病毒35S启动子、以此为基础构建的启动子(以下参照非专利文献3)、Macl启动子(以下参照非专利文献4)等。但是，在植物中，很多基因均为组织 器官特异性或时期特异性表达。这说明使基因进行组织·器官特异性或时期特异性表达对植物来说是必需的。有利用此种组织 器官特异性或时期特异性的转录调控区域进行植物的基因重组的例子。例如，有使用种子特异性的转录调控区域使蛋白质在种中积累的例子。但是，植物虽可开出多种颜色的花，但由于种所具有的遗传性限制，所以能开出所有颜色的花的种很少。例如，在月季、康乃馨等中，自然界中不存在能开蓝色、紫色花的品种。原因是月季、康乃馨不具有用于合成许多开蓝色、紫色花的种所合成的称为花翠素的花色素时所必需的类黄酮3’，5’-羟化酶基因(以下也简称为F3’5’H)基因。通过在这些种中导入作为开蓝色、紫色花的种的矮牵牛、三色堇等的F3’ 5’ H基因，可使这些种的花色变蓝。此时，为使来自不同种的F3’ 5’ H基因转录，使用来自金鱼草或矮牵牛的查耳酮合成酶基因的转录调控区域。例如，作为包含来自金鱼草或矮牵牛的查耳酮合成酶基因的转录调控区域的质粒，可例举以下专利文献3中记载的质粒pCGP485、pCGP653，作为包含组成型转录调控区域的质粒，可例举质粒pCGP628(包含Macl启动子)、以下专利文献4中记载的质粒pSPB130 (包含附加有增强子的花椰菜花叶病毒35S启动子)。但是，很难预测这样的启动子在重组植物中可在何种程度上发挥强功能，是否可带来目的表达型。且在导入与宿主植物相同或类似的碱基序列或导入基因在染色体上被多复制或被反复插入时，有时会引起基因的沉默(以下参照非专利文献幻。因此，为使复数的外源基因表达而反复使用相同启动子有时会引起基因的沉默，所以应避免。综上所述，虽然一部分启动子被用于改变花的颜色，但仍然进一步需要用于改变其他花的颜色而与宿主植物和目的相符合的有用的启动子。现有技术文献专利文献专利文献1 WO 96/25500公报专利文献2 WO 01/72984公报专利文献3 WO 94/28140公报专利文献4 WO 05/17147公报非专利文献非专利文献1 Plant J. 54，737-749，2008非专利文献 2 Agricultural and Biological Chemistry, 53, 797-800,1989非专利文献3 Plant Cell Physiology 1996，37，49-59非专利文献4 Plant Molecular Biology 1990，15，373-381非专利文献5 Annals of Botany 1997，79，3-1
发明内容
本发明欲解决的课题在于提供用于改变植物花色的有用的新型启动子。
为使外源基因在重组植物中、优选在特定的器官、组织中、更优选在积累花色素苷的器官、花瓣中表达时，期望选择适当的启动子，终止子。本发明欲解决的课题还在于得到此种序列。本申请发明人为解决上述课题锐意研究，反复实验，结果作为用于改变植物花色的有用的新型启动子，发现了来自紫苏的花色素苷3-酰基转移酶(3AT)基因的转录调控区域，并确认了其有用性，从而完成了本申请发明。即本发明如下。[1] 一种核酸，其特征在于，选自以下(1) ⑷中的核酸(1)核酸，其含有序列号1所示的碱基序列，(2)核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且含有通过1个或数个碱基序列发生附加、缺失及/或取代而对序列号1所示的碱基序列进行修饰的碱基序列，(3)核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且为可与由序列号1中所示的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在高严谨条件下杂交的核酸，及(4)核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且为与序列号1中所示的碱基序列有至少90%序列同一性的核酸。[2] 一种表达载体或表达盒，其特征在于，包含所述[1]中所述的核酸。[3]根据所述[2]中所述的表达载体或表达盒，其特征在于，包含序列号2中所示的碱基序列。[4] 一种除菊花以外的非人类宿主，其特征在于，通过所述[2]或[3]中所述的表达载体或表达盒转化。[5] 一种除菊花以外的植物或其后代或其营养繁殖体或其部分或组织，其特征在于，导入了所述[1]中所述的核酸。[6]根据所述[5]中所述的除菊花以外的植物或其后代或其营养繁殖体或其部分或组织，其特征在于，其为切花。[7] 一种切花加工品，其特征在于，使用所述[6]中所述的切花。已知认为在红紫苏的叶中控制酶基因转录的启动子区域、即紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域可在作为不同种的矮牵牛和月季的花瓣中作为转录调控区域发挥功能。因此，利用紫苏花色素苷3-酰基转移酶基因的转录调控区域，可在花等花色素苷积累的组织内特异性地启动外源基因的转录。作为进行转录的外源基因，有与花色、香味有关的基因，但不限于这些。
图1表示pSFL205的示意图。图2表示紫苏3AT基因导入用双元载体pSPB3311的示意图。
具体实施例方式作为本发明的转录调控区域，例如可例举由序列号1所示的碱基序列组成的核酸。但是，由序列号1所示的碱基序列组成的核酸中数个(1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个) 碱基发生附加、缺失及/或取代而进行修饰的碱基序列所组成的启动子，认为其也维持与原有启动子同样的活性。本发明还涉及如下核酸，只要在花瓣中作为转录调控区域发挥功能，也可为由通过1个或数个碱基序列发生附加、缺失及/或取代而对序列号1中所示的碱基序列进行修饰的碱基序列组成的核酸。本发明还进一步涉及如下核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且为可与序列号1所示的碱基序列在高严谨条件下杂交的核酸，或可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且为与序列号1中所示的碱基序列有至少90%序列同一性的核酸。作为这些核酸，可例举为可与含有序列号1中所示的碱基序列的多核苷酸在严谨条件下杂交、由与序列号ι中所示的碱基序列优选有约70%以上、更优选有约80%、81%、 82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91 %,92%,93%,94%,95%,96%, 97%、98%、最优选有约99%的碱基序列同一性的碱基序列所组成的核酸。在此，严谨条件是指由本领域技术人员很容易确定的杂交条件，通常依赖探针长度、洗涤温度及盐浓度并可凭经验实现。通常，探针越长，用于适合退火的温度越高，探针越短退火温度越低。杂交通常依赖于互补链存在于接近但低于其熔点的环境中时变性DNA 的再退火能力。具体地说，例如作为低严谨条件，可例举在杂交后的筛选的洗涤阶段中，在 37°C 42°C的温度条件下，在5XSSC、0. 1% SDS溶液中洗涤等。此外，作为高严谨条件，例如可例举在洗涤阶段，在65°C、0. IX SSC及0. SDS中洗涤等。通过将严谨条件提高到更高，可得到同源性高的多核苷酸。本发明还涉及包含紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域的表达载体或表达盒及由该表达载体或表达盒转化的非人类宿主。本说明书中，“表达盒”指在任意核酸上连接启动子和终止子的DNA片段。进而，本发明涉及将紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域与有用的外源基因连接，导入该基因而得到的具有改变颜色等有用性状的植物或其后代或其营养繁殖体或其部分或组织，特别是花瓣、切花。作为可转化的植物的例子，可例举月季、菊花、康乃馨、金鱼草、仙客来、兰花、洋桔梗、小苍兰、非洲菊、唐菖蒲、霞草、长寿花、百合、天竺葵、老鹳草、矮牵牛、蓝猪耳、郁金香、稻子、大麦、小麦、菜籽、马铃薯、西红柿、白杨、香蕉、蓝桉、番薯、黄豆、苜蓿、羽扇豆、玉米等，但不限于这些。本发明涉及使用上述切花的加工品(切花加工品)。在此，作为切花加工品，包括使用该切花的押花、保鲜花、干花、树脂密封品等，但不限于这些。本说明书中，用语“菊花植物(也简称为“菊花”)”指菊科(Asteraceae)菊属 (Chrysanthemum)的植物,作为代表种可例举菊花(Chrysanthemum mori folium)。
实施例以下，通过实施例，具体说明本发明。在无特殊要求的情况下，分子生物学的方法按照Molecular Cloning (Sam brook and Russell, 2001)进行。^mm ι : ^ - 3- tmwumykM^m^M.
已知紫苏中有叶中积累花色素苷的红色变种和不积累花色素苷的绿色变种。从前者的叶中，将其染色体DNA用所报道的方法(参照Plant Mol Biol. December 1997 ；35 (6) 915-27)进行制备。将该染色体DNA用Sau3AI(TOY0B 0公司制)进行部分酶切，通过蔗糖密度梯度法回收含有10 151Λ的DNA片段的组分。通过将该片段使用公知的方法插入作为λ噬菌体载体的一种的EMBL3 (Promega公司制)的BamHI位点，制作染色体DNA文库。 将所得到的文库以来自紫苏的作为花色素苷3-酰基转移酶的cDNA的pSAT208 (参照Plant Cell P hysiol. April 2000 ；41 (4) :495-502)为探针使用来进行筛选。文库的筛选根据已报道的方法(参照Plant Cell Physiol. July 1996 ；37 (5) :711-6)进行。将探针和杂交了的噬菌斑纯化后进行培养，从所得到的噬菌体中制备DNA。实施例2 紫苏花饩素苷3-酰基转移酶染饩体基因的碱基序列确定用)(bal酶切上述得到的DNAlO μ g，用0.7%琼脂糖凝胶分离后，在High B ond N(Amersham公司制)上转膜。将该膜用如上所述相同的方法杂交时，可知有约6. Skb的 DNA片段与探针杂交。用^CbaI酶切该DNA 20yg，用0.7%琼脂糖凝胶分离后，将约6.81Λ 的DNA片段用Gene Clean进行精制，与用)(bal酶切的pBluescriptSKII-连接。将所得到的质粒作为PSPB513。将该质粒中所含有的来自紫苏的DNA序列通过引物步查法确定。其碱基序列如序列号4中所示。该序列中有与作为花色素苷3-酰基转移酶cDNA的pSAT208 显示高同源性的区域，该区域编码的蛋白质的氨基酸序列(序列号6)与PSAT208的编码氨基酸序列相比，发现有19个氨基酸残基的取代和2个氨基酸的缺失，未观察到内含子。另外，包含与上述PSAT208显示高同源性的区域的序列，包含在认为是其起始密码子ATG上游的3438bp的序列和在认为是其终止密码子TAA下游的2052bp的序列。在上述3438bp的序列中，存在不是花色素苷3-酰基转移酶的其他开放阅读框(0RF，序列号幻。除了该部分以外，为扩增紫苏花色素苷3-酰基转移酶基因的转录调控区域进行如下实验。^mm 3 :代直苷 3-以 Ing 的 pSPB513 为模板，使用 2 种引物(5’-AAGCTTAACTATTATGATCCCACAGAG-3’ ( 序列号7，下线部为HindIII的识别序列)、5，-GGATCCGGCGGTGTTGAACGTAGC-3’ (序列号8， 下线部为BamHI的识别序列)进行PCR(95°C保持1分钟后，25个循环的52°C 1分钟、72°C 2 分钟、95°C 1分钟的反应)。用Hind III和BamHI酶切所扩增的约1. Ikb的DNA片段。用I^acI酶切专利文献4中所记载的质粒pSPB567 (在附加有增强子的花椰菜花叶病毒35S启动子的3’侧连接来自三色堇的F3’ 5’ H基因，进而在其3’侧连接胭脂碱合成酶的终止子)，将包含来自三色堇的F3’ 5’ H基因的DNA片段克隆到pBin+(参照Transgenic Research 4，288-290，1995)的I^acI位点。将在所得到的质粒中附加有增强子的花椰菜花叶病毒35S启动子在pBin+的AscI位点附近存在时的质粒作为pSPB575。用HindIII和 BamHI酶切该质粒，向其中插入用HindIII和BamHI酶切包含所述紫苏花色素苷3-酰基转移酶转录调控区域的约1. Ikb DNA片段后的DNA片段。将所得到的质粒作为pSFL205 (参照图1)。用HindIII和Mel酶切pSFL205，回收约IOObp的DNA片段。将该DNA片段、与用 SacI和XbaI酶切pSPB513而得到的约4kb的DNA片段、和用HindIII和XbaI酶切的质粒 PBin+连接，得到质粒pSPB3311 (参照图2)。该质粒pSPB3311成为包含序列号2中所示的碱基序列的双元载体，包含紫苏花色素苷3-酰基转移酶基因的转录调控区域和该基因的翻译区域及其3’侧的非翻译区域。实施例4 紫苏花饩素苷3-酰基转移酶染饩体基因在矮牵牛中的表汰将实施例3中得到的质粒pSPB3311 (双元载体)用使用叶盘法的土壤杆菌法转化到矮牵牛品种Baccara Red(Sakata ked公司制)中，得到约20个系统的转化体。转化按照公知的方法(Plant J. 1994, 5,p. 81)进行。此外，同样用专利文献1中所记载pBELAll (用于使薰衣草花色素苷3-酰基转移酶基因在植物中表达的双元载体，在反复使用增强子的花椰菜花叶病毒35S启动子和来自胭脂碱合成酶的终止子之间插入薰衣草的花色素苷3-酰基转移酶cDNA)转化矮牵牛品种Baccara Red(Sakata ked)，得到约20个系统的转化个体。使用包含上述2种双元载体(pSPB3311或pBELAll)的土壤杆菌转化的矮牵牛的花色与转化前的Baccara Red相比，呈相对较浅的红色。将各个代表性的重组矮牵牛分别作为Ρ ^66-7，Ρ ^67-1。将这些矮牵牛花瓣中的花色素苷用专利文献4中所记载的方法进行分析。在重组矮牵牛的花瓣中，与宿主相比高效液相色谱法中保留时间长的花色素苷量增加，这些吸收光谱在310nm附近观察到有肩峰。这说明，认为在重组矮牵牛中与芳香族酰基结合的花色素苷量增加，导入的紫苏或薰衣草的花色素苷3酰基转移酶基因在矮牵牛发挥了功能。进而通过LC-FT-ICR-MS 的方法(J. Japan. Soc. Hort. Sci. 77 :94-102 (2008)， Plant J. 54 =949-962)分析宿主和重组矮牵牛的花色素苷。使用该方法时，可测定花色素苷的精密质谱，可通过串联质谱分析得到MS/MS光谱。在Ρ ^66-7、Ρ ^67-1中，检测出了显示宿主中不存在的与花青素(香豆酰)葡萄糖苷〔m/z 595. 143717, MS/MS 287〕、花翠素(香豆酰)葡萄糖苷〔m/z 611. 139648，MS/MS 303. 1〕、甲基花青素(香豆酰)葡萄糖苷〔m/z 609. 161119，MS/MS 303. 1〕一致的分子量和MS/MS光谱的花色素苷(〔〕中表示m/z和MS/ MS 的 m/z)。已知由于与花色素苷合成有关的酶基因随矮牵牛花瓣的发育阶段不同，其转录量也发生变化。例如，将矮牵牛花瓣的生育阶段分为5个阶段，在分析各阶段花瓣中的类黄酮 3’ 5’ -羟化酶基因表达量时，该基因在矮牵牛花瓣开始开花阶段到开花不久的阶段内强表达，在成熟花瓣中表达量减少(参照PCT/AU92/00334)。另一方面，组成型启动子所控制的基因在花瓣的任一发育阶段，均具有一定的表达量。将导入了 pSPB3311的矮牵牛的花瓣同样分为5个阶段，在分析紫苏的花色素苷3 酰基转移酶基因的表达时，该基因在花瓣开始开花阶段到开花不久的阶段内强表达，在成熟花瓣中表达量减少。另外，导入了 pBELAll的矮牵牛在任一生育阶段均显示一定的转录产物的量。从以上结果可知，来自紫苏的花色素苷3-酰基转移酶转录控制区域可在与紫苏不同种的矮牵牛中转录结构基因，且显示出其转录与花色素苷生物合成酶的基因同时进行，证实为使花色发生变化，此种转录调控区域很有用。换句话说，在本实施例中，表明来自紫苏的花色素苷3-酰基转移酶染色体基因的启动子区域和终止子区域在花瓣或花色素苷积累的器官中、在用于改变花色素苷的结构即用于改变花色上，在必需水平上发挥了功能， 说明其在用于人为表达异种基因时有用。^mm 5 :代直苷 3- m^ummmm^M^.nm^^.将如图1所示的PSFL205导入月季品种Lavande中，得到27个系统的重组月季植物体。有关月季的转化，已报道了许多方法(例如，参照Firoozababy et al. Bio/ Technology 12 :883-888(1994)，美国专利第 M80789 号，美国专利第 57拟927 号， EP536327A1号公报，美国专利公开第20010007157A1号公报)，可根据这些方法进行转化。胃 # iikAgrobacterium tumefaciens AglO ^ (Lazo et al. Bio/Te chnology 9 :963-967,1991)的菌液中，将由无菌苗的叶诱导的月季的愈伤组织浸渍5分钟，用灭菌滤纸拭去多余菌液后，移植到继代培养基中，在暗处共培养2天。而后，用加入羧苄青霉素400mg/l的MS液体培养基洗涤，移植到在继代培养基中加入卡那霉素50mg/l和羧苄青霉素200mg/l的筛选·除菌用培养基中。反复移植和培养在筛选培养基上生长发育未受抑制、正常增殖的部分，筛选卡那霉素抗性愈伤组织。将显示卡那霉素抗性的转化愈伤组织在添加有卡那霉素50mg/l、羧苄青霉素 200mg/l的再分化用培养基中培养，得到卡那霉素抗性不定芽。所得到的不定芽在1/2MS培养基中发根后进行驯化。驯化个体上盆后，在閉链系温室中栽培开花。月季花瓣中所含有的花色素量如下测定。将冷冻干燥花瓣0. 5g在含有細10. 1% TFA的50%乙腈(CH3CN)中、在超声波下提取20分钟，用0. 45 μ m的过滤器过滤。将上述滤液0. 2ml在玻璃试管减压干固，溶解于0. 2ml的6N盐酸(HCl)中，100°C下水解20分钟。 分解后的花色素用O.aiil 1-戊醇提取，有机层用HPLC通过以下条件分析。色谱柱使用 0DS-A312(6mm<j5xl5cm，YMC 株式会社)，流动相使用 AcOH MeOH H2O = 15 20 65 的溶液，以流速lml/min洗脱。检测使用光电二极管阵列检测器SPD_M10A(岛津制作所)测定600-400nm的光谱，用最大吸收波长(Xmax)及保留时间(R. T.)鉴定，用520nm吸光度的面积定量。在该HPLC条件下，花翠素及花青素的R.T.及λ max分别为4. O分钟和5. 2 分钟及534nm和525nm。鉴定和定量使用从funakoshi株式会社购入的花翠素盐酸盐及花青素盐酸盐作为标准品。重组月季花瓣中所含有的花翠素的含有率(总花色素量中花翠素的比例)最高为 51%,平均为20. 5%。该结果表明紫苏花色素苷3-酰基转移酶转录调控区域与可在与紫苏不同种的植物中转录目的基因。已知认为在红紫苏的叶中控制酶基因转录的启动子区域、即紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域可在作为不同种的矮牵牛和月季的花瓣中作为转录调控区域而发挥功能。因此，利用紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域，可在花等花色素苷积累的组织内特异性地启动外源基因的转录。作为进行转录的外源基因，有与花色、香味有关的基因，但不限于这些。
权利要求
1.一种核酸，其特征在于，选自以下(1) 中的核酸(1)核酸，其含有序列号1所示的碱基序列，(2)核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且含有通过1个或数个碱基序列发生附加、缺失及/或取代而对序列号1所示的碱基序列进行修饰的碱基序列，(3)核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且为可与由序列号1中所示的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在高严谨条件下杂交的核酸，及(4)核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且为与序列号1中所示的碱基序列有至少90%序列同一性的核酸。
2.一种表达载体或表达盒，其特征在于，包含权利要求1中所述的核酸。
3.根据权利要求2中所述的表达载体或表达盒，其特征在于，包含序列号2中所示的碱基序列。
4.一种除菊花以外的非人类宿主，其特征在于，通过权利要求2或3中所述的表达载体或表达盒转化。
5.一种除菊花以外的植物或其后代或其营养繁殖体或其部分或组织，其特征在于，导入了权利要求1中所述的核酸。
6.根据权利要求5中所述的除菊花以外的植物或其后代或其营养繁殖体或其部分或组织，其特征在于，其为切花。
7.一种切花加工品，其特征在于，使用权利要求6中所述的切花。
全文摘要
本发明提供用于改变植物花色的有用的新型启动子，即选自以下(1)～(4)中的核酸(1)核酸，其含有序列号1所示的碱基序列，(2)核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且通过1个或数个碱基序列发生附加、缺失及/或取代而对序列号1所示的碱基序列进行修饰的碱基序列，(3)核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且为可与由序列号1中所示的碱基序列的互补碱基序列所组成的核酸在高严谨条件下杂交的核酸，及(4)核酸，其可作为紫苏花色素苷3-酰基转移酶的转录调控区域而发挥功能，且为与序列号1中所示的碱基序列有至少90％序列同一性的核酸。
文档编号C12N9/10GK102421896SQ201080018269
公开日2012年4月18日 申请日期2010年3月9日 优先权日2009年4月24日
发明者水谷正子, 田中良和 申请人:三得利控股株式会社