一种协同抑制常见微生物的天然抑箘剂组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种协同抑制常见微生物的天然抑箘剂组合物，ε-聚赖氨酸和乳酸链球菌素按不同比例组合对抑制大肠杆菌、藤黄微球菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉起到协同的作用，并将该组合应用于鲜切胡萝卜的保鲜。本发明的ε-聚赖氨酸和乳酸链球菌素组合物解决了常规抑菌方法中单一抑菌剂用量较大的问题，同时采用两种抑菌剂组合物扩大了抑菌谱，可在较低剂量的条件下应用于食品保藏，具有较好的安全性。
【专利说明】—种协同抑制常见微生物的天然抑菌剂组合物
(-)【技术领域】
[0001]本发明涉及一种协同抑制常见微生物的天然抑菌剂组合物，属于食品安全保藏范畴。
(二)【背景技术】
[0002]随着人们生活水平的提高，绿色食品、健康食品的概念越来越被人们所接受，长期使用化学防腐剂会对人的身体造成伤害，人们希望使用天然食品防腐剂来取代化学防腐齐U。目前，国外食品防腐剂行业已相当成熟，开发出了数十种天然食品防腐剂。乳酸链球菌素又称乳链菌肽(nisin)是由乳酸链球菌产生的一种小分子多肽物质，呈白色固体粉末，在室温和酸性条件下比较稳定，经美国认证为第一个安全抑菌素。目前，已经有60多个国家和地区批准乳酸链球菌素可作为一种纯天然食品防腐剂、保鲜剂使用，被广泛用于乳制品，肉制品，罐装食品，酒精饮料，酱菜，巧克力等中的防腐保鲜。ε -聚赖氨酸是一种新型天然防腐剂，具有广谱抑菌性又安全无毒的特点，已于2003年10月被FDA批准为安全食品保藏齐IJ，在日本的食品生产中被广泛使用。
[0003]单一抑菌剂的使用往往存在抑菌谱窄，使用剂量偏大的问题，具有潜在的安全隐患。通过几种抑菌剂复配使用可以扩大抑菌谱，同时不同抑菌物质之间产生的协同效应也可在较低抑菌剂使用浓度的条件下起到更好的应用效果。因此，筛选具有协同效应的天然抑菌剂并在较低剂量的条件下应用于食品保藏对于降低生产成本和提高食品安全性具有重要的实践价值和现实意义。
(三)
【发明内容】
[0004]本发明首先采用常规方法确定了 ε -聚赖氨酸和乳酸链球菌素对食品常见微生物(表I)的最小抑菌浓度(MIC)，然后根据ε -聚赖氨酸和乳酸链球菌素对不同微生物的MIC，采用棋盘实验法得到ε -聚赖氨酸和乳酸链球菌素组合物:取96孔聚苯乙烯微孔板，用微量移液器在第I?8列沿X轴方向(从左到右)每列孔中依次加入2倍MIC?1/64倍MIC质量浓度(浓度由高到低，一次1/2倍稀释)的ε -聚赖氨酸，以同样方法在第A?F行沿Y轴方向(从上到下)每行孔中依次加入2倍MIC?1/64倍MIC质量浓度(浓度由高到低，一次1/2倍稀释)的乳酸链球菌素(乳酸链球菌素对汉逊酵母、黑曲霉、扩展青霉无最小抑菌浓度，在棋盘法中最高浓度为1000 μ g/mL，即相当于2倍MIC值，并按照1/2倍依次稀释使用)。
[0005]两种抑菌剂加入完成后即可在微孔板上获得不同质量浓度比例组合的ε -聚赖氨酸和乳酸链球菌素组合物。然后在微孔板中加入制备好的供试菌种菌液(供试菌种见表1，每个菌种均按以上方法实验)，加液完成后加盖上板，轻微振荡混匀，置于恒温培养箱中培养后观察抑菌结果并得出分级抑菌浓度指数(FIC1X根据FIC1值确定了 ε-聚赖氨酸和乳酸链球菌素浓度在质量比2:1的比例下对大肠杆菌，在质量比1:1的比例下对金黄色葡萄球菌，在质量比1:2的比例下对枯草芽孢杆菌，在质量比1:8的比例下对藤黄微球菌，在质量比1:16的比例下对扩展青霉菌具有显著的协同抑菌效果(表1)。
[0006]表1棋盘法中ε -聚赖氨酸，乳酸链球菌素对七种供试菌实验浓度和FIC1
[0007]
【权利要求】
1.ε -聚赖氨酸和乳酸链球菌素按照质量比1:16的比例形成的组合物对大肠杆菌具有协同抑菌作用。
2.ε -聚赖氨酸和乳酸链球菌素按照质量比1:8的比例形成的组合物对金黄色葡萄球菌具有协同抑菌作用。
3.ε -聚赖氨酸和乳酸链球菌素按照质量比1:2的比例形成的组合物对藤黄微球菌和扩展青霉菌具有协同抑菌作用。
4.ε -聚赖氨酸和乳酸链球菌素按照质量比1:1的比例形成的组合物对枯草芽孢杆菌具有协同抑菌作用。
【文档编号】A23L3/3463GK103549622SQ201310529325
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年10月31日 优先权日:2013年10月31日
【发明者】李大鹏, 刘洪霞 申请人:山东农业大学