一种虫草多糖保健果醋及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种虫草多糖保健果醋及其制备方法。采用的技术方案是：将苹果榨汁，调整糖度后灭菌，凉后加入活化后的酿酒酵母溶液8%～12%，于22～26℃，100～150r/min摇床中酒精发酵4～6天，晾凉，接入4～8%醋酸菌发酵液，于28～35℃温箱中醋酸发酵1～3天，按照每100mL，加入45～60mL苹果原汁、25～40mL苹果原醋、0.3～0.5g虫草多糖、0.3～0.5mL虫草提取液、2～3g绵白糖、0.15～0.3g柠檬酸和余量水，配制虫草多糖果醋。本发明具有缓解体力疲劳、增强免疫力、辅助降血脂和辅助降血糖的功能。
【专利说明】一种虫草多糖保健果醋及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种虫草多糖保健果醋，是将虫草多糖和虫草提取液，加入自行发酵的苹果醋制成的保健果醋。
【背景技术】
[0002]在20世纪70年代后国内外对冬虫夏草多糖的结构和活性的研究逐步开展起来。发现虫草多糖对腹腔巨噬细胞的吞噬功能有明显的激活作用，可增加脾脏营养性血流量，促进淋巴细胞的转化，能明显促进肝、脾吞噬活性，还对单核巨噬细胞、NK细胞均有一定作用，是一种作用较广的免疫增强剂。另外，虫草多糖有显著的降血糖和降血脂作用，可以增强慢性丙型肝炎患者细胞免疫功能，改善肝功能，并具有一定的抗纤维化作用。
[0003]随着生活节奏的加快和思想观念的转变，人们越来越注重自身保健。果醋含有十种以上的有机酸和人体所需的多种氨基酸以及丰富的维生素、矿物质和果酸。具有防止动脉硬化、降血压、促进肠胃消化、增强食欲、防止肠胃疾病、美容、减肥、消除或减轻疲劳等功效。
[0004]目前，虫草保健品包括虫草口服液、虫草菊花八宝茶、虫草糖果、虫草酒、虫草咖啡、虫草奶茶等，虽然品种繁多，但与果醋结合的却很少，如何将虫草多糖与果醋相结合，并提高其功能性，是一个值得试验的课题。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于生产一种虫草多糖保健果醋，将虫草多糖与苹果醋结合，提高了两者原有的功能，同时改善了果醋的风味，使其具有类似巧克力般的焦糖味。
[0006]本发明提供的虫草多糖保健果醋，其组成如下:每100 mL虫草多糖保健果醋中，含有45~60 mL苹果原汁、25~40 mL苹果原醋、0.3~0.5 g虫草多糖、0.3~0.5 mL虫草提取液、2~3 g绵白糖、0.15~0.3 g柠檬酸、和余量水。
[0007]本发明提供的虫草多糖保健果醋的制备方法，包括如下步骤:
1) 苹果原汁的制备:苹果洗净去皮、去烂、去核后切成小块，用质量浓度为
.0.01-0.05%的柠檬酸护色5分钟，加水榨汁、过滤、滤液调整糖度至IOBx -14ΒΧ,灭菌，得苹果原汁，备用；
2)酿酒酵母的活化:酿酒酵母干粉加水或加入质量浓度为59TlO%的糖水溶解，得质量浓度为0.02%~0.06%的酿酒酵母溶液，置于37°C的恒温箱中复水20 mirT30 min，备用；
3)醋酸菌的培养:葡萄糖、酵母膏、琼脂按质量比为1:1:2的比例配成固体培养基，灭菌后在50-60 1:时，按体积百分比加入2-4 %的无水乙醇溶液，制成斜面，冷却后接醋酸菌，28~35 °C恒温箱中培养2~3天，得固体菌种；按每100 mL加入葡萄糖I g、酵母膏I g、无水乙醇2 mL制成液体培养基，接入固体菌种广2环，在10(Tl50 r/min摇床中，28~35 V培养2~3天，得醋酸菌发酵液；
4)苹果原醋的制备:按体积比8%~12%的接入量将活化后的酿酒酵母溶液接入苹果原汁中，于22 -26°C ,120-150 r/min的摇床中进行4_6天酒精发酵，得混合液，在按体积比4%~8%的接入量将醋酸菌发酵液接入混合液中，在28~35 °C下培养3天，灭菌，得苹果原醋，备用；
5)虫草提取液的制备:将蛹虫草子实体和乙醇按料液比1:20~1:40混合后、于闪式提取器中提取I~3 min、提取功率为50~100 W，混悬液过滤，得虫草提取液；
6)按上述的配比，取苹果原汁、苹果原醋、虫草多糖、虫草提取液、绵白糖和柠檬酸、加水至100 mL，得虫草多糖保健果醋。
[0008]虫草多糖可以采用市购的产品，也可以通过液体发酵培养中的菌丝体和培养液两种途径来制备。①培养液中虫草多糖采用水提醇沉法，将分离出来的菌液和洗涤后的菌液合并，在50°C条件下经旋转蒸发仪减压浓缩，加入2倍无水乙醇，4°C冰箱中过夜醇沉，再于离心机中4000r/min离心lOmin，沉淀即为虫草多糖。②菌丝体中虫草多糖采用闪式提取器提取。取IOg干燥好的菌丝体，加入浓度为30%的乙醇，两者比例为1:30，提取功率75W，提取时间2min。将提取液减压浓缩后加入2倍无水乙醇，4°C冰箱中过夜醇沉，再于离心机中4000r/min离心IOmin,沉淀即为虫草多糖。
[0009]本发明的有益效果是:本发明将虫草多糖与果醋结合，并经小鼠验证了其具有缓解体力疲劳、增强免疫力、辅助降血脂和辅助降血糖的功能。此外，将其两者结合后的功能性优于单独的虫草多糖和苹果醋。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]图1是虫草多 糖果醋对小鼠抗疲劳实验中游泳时间的影响；
图中，*为与空白对照组比较/X0.05，林为与空白对照组比较/X0.01。
[0011]图2是虫草多糖果醋对小鼠抗疲劳实验中肝糖原的影响；
图中，*为与空白对照组比较/X0.05，林为与空白对照组比较/X0.01。
[0012]图3是虫草多糖果醋对小鼠抗疲劳实验中乳酸含量变化的影响；
注为与空白对照组比较/X0.05，林为与空白对照组比较/X0.01。
[0013]图4是增强免疫实验中肿胀度的影响；
图中，*为与空白对照组比较/X0.05，林为与空白对照组比较/X0.01。
[0014]图5是增强免疫试验中廓清指数的影响；
图中，*为与空白对照组比较/X0.05，林为与空白对照组比较/X0.01。
[0015]图6是辅助降血脂效果实验中总胆固醇含量的影响；
图中，注为与空白对照组比较/X0.05，**为与空白对照组比较/X0.01。
[0016]图7是辅助降血脂效果实验中甘油三酯含量的影响；
图中，*为与空白对照组比较/X0.05，林为与空白对照组比较/X0.01。
[0017]图8是辅助降血脂效果实验中体重变化的影响；
图中，*为与空白对照组比较/X0.05，林为与空白对照组比较/X0.01。
[0018]图9是降血糖的效果实验；
图中，*为与空白对照组比较/X0.05，林为与空白对照组比较/X0.01。
【具体实施方式】[0019]实施例1 一种虫草多糖保健果醋及其制备方法
O 苹果原汁的制备:苹果洗净去皮、去烂、去核后切成小块，用质量浓度为0.02%的柠檬酸护色5分钟，按照料液比1:2，加水榨汁、过滤、滤液调整糖度至ΙΟΒχ，灭菌，得苹果原汁，备用；
2)酿酒酵母的活化:称取酿酒酵母干粉0.03 g和7 g葡萄糖，用IOOmL水溶解，置于37°C的恒温箱中复水30 min，得酿酒酵母溶液，备用；
3)醋酸菌的培养:100ml水中，加入葡萄糖Ig、酵母膏I g、琼脂2 g配成固体培养基，灭菌后在50 °C左右时，加入2 mL无水乙醇，混匀后制成斜面培养基，冷却后接I环醋酸菌于32 °C恒温箱中培养2天，得固体菌种；100 mL水中，加入葡萄糖I g、酵母膏I g、无水乙醇2 mL制成液体培养基,高压湿热灭菌晾凉后,接入固体菌种I环,在120 r/min摇床中，32 °C恒温箱中培养2天，得醋酸菌发酵液；
4)苹果原醋的制备:将8mL活化后的酿酒酵母溶液接入100 mL苹果原汁中，于220C,150 r/min的摇床中进行6天酒精发酵，巴氏灭活酵母菌后，接入醋酸菌发酵液6 mL，于33°C温箱中培养2天，巴氏灭菌后，得苹果原醋，备用；
5)虫草多糖的制备:取IOg干燥好的蛹虫草菌丝体，加入浓度为30%的乙醇300ml，提取功率75W，提取时间2min。将提取液减压浓缩后加入2倍无水乙醇，4°C冰箱中过夜醇沉，再于离心机中4000r/min离心lOmin，沉淀即为虫草多糖；
6)虫草提取液的制备:将干燥好的蛹虫草子实体和40%乙醇按料液比1:20混合后、于闪式提取器中提取I min、提取功率为50 W，混悬液过滤，得虫草提取液，备用；
7)虫草多糖果醋的配制:50mL苹果原汁、40 mL苹果原醋、0.3 g虫草多糖、0.3 mL虫草提取液、2 g绵白糖、0.15 g柠檬酸，其余用水补足至100 mL，得虫草多糖保健果醋。
`[0020]本实施例中虫草多糖也`可以采用市购的产品。
[0021]实施例2 —种虫草多糖保健果醋及其制备方法
1)苹果原汁的制备:苹果洗净去皮、去烂、去核后切成小块，用质量浓度为0.03%的柠檬酸护色5分钟，按照料液比1:4，加水榨汁、过滤、滤液调整糖度至14Bx，灭菌，得苹果原汁，备用；
2)酿酒酵母的活化:称取酿酒酵母干粉0.02 g (可加5 g葡萄糖也可不加)，用IOOmL水溶解，置于37°C的恒温箱中复水30 min，得酿酒酵母溶液，备用；
3)醋酸菌的培养:50ml水中，加入葡萄糖0.5 g、酵母膏0.5 g、琼脂I g配成固体培养基，灭菌后在50 °C左右时，加入I mL无水乙醇，混匀后制成斜面培养基，冷却后接I环醋酸菌于30 °C恒温箱中培养3天，得固体菌种；50 mL水中，加入葡萄糖0.5g、酵母膏0.5 g、无水乙醇I mL制成液体培养基,高压湿热灭菌晾凉后,接入固体菌种2环,在150 r/min摇床中，32 °C恒温箱中培养2天，得醋酸菌发酵液；
4)苹果原醋的制备:将12mL活化后的酿酒酵母溶液接入100 mL苹果原汁中，于260C ,120 r/min的摇床中进行4天酒精发酵，巴氏灭活酵母菌后，接入醋酸菌发酵液5 mL，于32°C温箱中培养2天，巴氏灭菌后，得苹果原醋，备用；
5)虫草多糖的制备:培养液中虫草多糖的制备采用水提醇沉法，将蛹虫草子实体发酵培养后，分离发酵培养液(菌液)，并采用新鲜培养基洗涤菌丝体，合并分离出来的菌液和菌丝体洗涤液，在50°C条件下经旋转蒸发仪减压浓缩，加入2倍无水乙醇，4°C冰箱中过夜醇沉，再于离心机中4000r/min离心lOmin，沉淀即为虫草多糖；
6)虫草提取液的制备:将干燥好的蛹虫草子实体和30%乙醇按料液比1:30混合后、于闪式提取器中提取2 min、提取功率为75 W，混悬液过滤，得虫草提取液，备用；
7)虫草多糖果醋的配制:55mL苹果原汁、30 mL苹果原醋、0.5 g虫草多糖、0.4 mL虫草提取液、3 g绵白糖、0.2 g柠檬酸，其余用水补足至100 mL，得虫草多糖保健果醋。
[0022]实施例3效果实验
O虫草多糖果醋对小鼠抗疲劳的影响
成年小鼠，雌雄各半，18-22 g，每组10只，共分6组:空白组(蒸馏水，0.2ml/每只/每天)、虫草多糖对照组(0.5 g/Kg体重/每天)、果醋对照(0.2 ml/每只/每天)三个对照组，及本发明低剂量组(0.5 g/Kg体重/每天)、中剂量组(I g/Kg体重/每天)和高剂量组(2g/Kg体重/每天)。小鼠适应性生长I周后根据实验剂量给药。经口灌胃，灌胃量为200 μ L/d，连续30天。末次给予受试样品30 min后，分别将分组的小鼠负重游泳记录时间、取肝脏，提取糖原，用蒽酮法测糖原含量以及游泳后间隔休息后采血测血乳酸含量和血乳酸曲线下面积，结果见图1-图3。
[0023]从图1-图3中可以看出，各虫草多糖果醋剂量组的游泳时间、肝糖原含量、血乳酸曲线下面积均优于空白对照组，且差异极显著。随果醋中虫草多糖剂量效果显著，此外虫草多糖果醋剂量组的效果都明显优于单独的果醋和单独的多糖对照组。
[0024]可见，小鼠喂食虫草多糖果醋，负重游泳时间显著延长，肝糖原含量显著升高，游泳后血乳酸含量显著下降，因此虫草多糖果醋具有缓解体力疲劳的功能。
[0025]2)增强免疫力效果
小鼠18-22 g，雄性，每组10只，共分6组:空白组(蒸馏水，0.2ml/每只/每天)、虫草多糖对照组(0.5 g/Kg体重/每天)、果醋对照(0.2 ml/每只/每天)三个对照组，及本发明低剂量组(0.5 g/Kg体重/每天)、中剂量组(I g/Kg体重/每天)和高剂量组(2 g/Kg体重/每天)。小鼠适应性生长I周后根据实验剂量给药。经口灌胃，灌胃量为200yL/d，连续30天。末次给药30 min后，分别通过抑制迟发型变态反应、增强碳廓清能力判断虫草多糖果醋增强免疫力的效果。结果见图4-图5。
[0026]从图4-图5中可以看出，虫草多糖果醋饲喂小鼠的迟发型变态反应和碳廓清两项指标均为阳性，因此虫草多糖果醋具有增强免疫力功效。
[0027]3)辅助降血脂效果
小鼠24-28 g，雌雄各半，适应性生长I周后根据TC水平随机分组，每组10只。共分6组:空白组(蒸馏水，0.2ml/每只/每天)、虫草多糖对照组(0.5 g/Kg体重/每天)、果醋对照(0.2 ml/每只/每天)三个对照组，及本发明低剂量组(0.5 g/Kg体重/每天)、中剂量组(I g/Kg体重/每天)和高剂量组(2 g/Kg体重/每天)。小鼠适应性生长I周后根据实验剂量给药，在给予高脂饲料的同时给予不同剂量的受试样品，经口灌胃，灌胃量为200μ!7d，连续30天。实验结束禁食16小时，根据总胆固醇测定试剂盒(COD-PAP法)及甘油三酯测定试剂盒(GPO-PAP法)中说明书所述，分别测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平。结果如图6-图7所示。
[0028]从图6-图7可见，虫草多糖果醋各剂量组的TC、TG水平与对照组相比均有不同程度的降低，且差异极具显著性。此外，果醋对照组的TC、TG水平也比空白对照组稍低，多糖对照组比低剂量组稍高，可见果醋也具有降血脂功效，并且果醋与虫草多糖结合后功能有明显提高。综上，TC、TG两项指标阳性，可判定虫草多糖果醋具有辅助降血脂功能。[0029]从图8可以看出小鼠的体重变化，说明虫草多糖果醋可通过降血脂达到明显的减肥效果。
[0030]4)辅助降血糖效果
小鼠24-28g，雄性，适应性生长I周后禁食24小时，尾静脉注射链脲霉素造模，5天后禁食3-5小时，测血糖值，将血糖值为10-25mmol/L的成模小鼠随机分组，每组10只，经口灌胃给药，灌胃量为200μ L/d，连续30天。共分8组:模型空白组(蒸馏水，0.2ml/每只/每天)、模型虫草多糖对照组(0.5 g/Kg体重/每天)、模型果醋对照(0.2 ml/每只/每天)三个对照组，本发明低剂量组(0.5 g/Kg体重/每天)、中剂量组(I g/Kg体重/每天)和高剂量组(2 g/Kg体重/每天)，正常小鼠空白对照组(蒸馏水，0.2ml/每只/每天)和正常小鼠高剂量组(2 g/Kg体重/每天)。给药前后分别测定模型小鼠空腹3-5小时的血糖值，计算血糖值和血糖下降百分率。结果如图9所示。
[0031]从图9可见，各虫草多糖果醋剂量组的血糖值均低于模型空白对照组，且差异具有显著性。而果醋组与空白组血糖值相仿，说明果醋没有明显的降血糖功效，但虫草多糖与果醋相结合比单纯使用虫草多糖降血糖效果明显增强。此外血糖的下降程度也随果醋中虫草多糖剂量的加大而有所升高。可判定为虫草多糖果醋具有辅助降血糖功效。
[0032]对正常小鼠饲喂高剂量的虫草多糖果醋，与正常小鼠空白组相比，血糖值有轻微升高而不是下降，说明正常小鼠饲喂高剂量的虫草多糖果醋不会造成血糖过低等副作用。
【权利要求】
1.一种虫草多糖保健果醋，其特征在于组成如下:每100 mL虫草多糖保健果醋中，含有45~60 mL苹果原汁、25~40 mL苹果原醋、0.3~0.5 g虫草多糖、0.3~0.5 mL虫草提取液、2~3 g绵白糖、0.15~0.3 g柠檬酸、和余量水。
2.权利要求1所述的一种虫草多糖保健果醋的制备方法，其特征在于方法如下: 1)苹果原汁的制备:苹果洗净去皮、去烂、去核后切成小块，用质量浓度为0.01-0.05%的柠檬酸护色5分钟，加水榨汁、过滤、滤液调整糖度至IOBx -14Βχ，灭菌，得苹果原汁，备用； 2)酿酒酵母的活化:酿酒酵母干粉加水或加入质量浓度为59TlO%的糖水溶解，得质量浓度为0.02%~0.06%的酿酒酵母溶液，置于37°C的恒温箱中复水20 mirT30 min，备用； 3)醋酸菌的培养:葡萄糖、酵母膏、琼脂按质量比为1:1:2的比例配成固体培养基，灭菌后在50-60 1:时，按体积百分比加入2-4 %的无水乙醇溶液，制成斜面，冷却后接醋酸菌，28~35 °C恒温箱中培养2~3天，得固体菌种；按每100 mL加入葡萄糖I g、酵母膏I g、无水乙醇2 mL制成液体培养基，接入固体菌种广2环，在10(Tl50 r/min摇床中，28~35 V培养2~3天，得醋酸菌发酵液； 4)苹果原醋的制备:按体积比8%~12%的接入量将活化后的酿酒酵母溶液接入苹果原汁中，于22 -260C ,120-150 r/min的摇床中进行4_6天酒精发酵，得混合液，在按体积比4%~8%的接入量将醋酸菌发酵液接入混合液中，在28~35 °C下培养3天，灭菌，得苹果原醋，备用； 5)虫草提取液的制备:将蛹虫草子实体和乙醇按料液比1:20~1:40混合后、于闪式提取器中提取1~3 min、提取功率为50~100 W，混悬液过滤，得虫草提取液； 6)按权利要求1所述的配比，取苹果原汁、苹果原醋、虫草多糖、虫草提取液、绵白糖和柠檬酸、加水至100 mL，得虫草多糖保健果醋。
【文档编号】C12J1/00GK103695281SQ201310746502
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月30日 优先权日:2013年12月30日
【发明者】孟雪莲, 陈长兰, 代启超, 孙冬梅, 贲松彬, 佟丽 申请人:辽宁大学