酶法生产一种手性四氢吡唑并嘧啶的工艺的制作方法
【专利摘要】一种酶催化手性拆分制备3-甲酸-5R-乙苯-7S-3氟甲烷-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶的工艺，工艺调节温和，不使用有机溶剂，使用固定化猪胰脂肪酶催化3-乙酯-5-乙苯-7-3氟甲烷-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶选择性水解，得到产品。产品反应转化率高，产品ee值高，有较好的工业应用价值。
【专利说明】酶法生产一种手性四氢吡唑并嘧啶的工艺
【技术领域】
[0001] 本发明属于制药工程领域，特别是涉及到一种酶催化手性拆分制备3-甲 酸-5R-乙苯-7S-3氟甲烷-四氢吡唑并[1，5-a]嘧啶的技术。
【背景技术】
[0002] 由于四氢吡唑并[1，5-a]嘧啶分子中同时存在吡唑和嘧啶两类重要的活性结构 单元，因而这类化合物往往具有较好的药物和生物活性，长期以来受到人们的广泛关注。 例如，治疗骨质疏松症、丙肝、结核病、抗病毒等。四氢吡唑并[1，5-a]嘧啶分子中有2个 手性中心，其不同异构体的药理活性相差很大，例如，（5R，7S)异构体的抗丙肝病毒的活性、 治疗结核病的用分别比（5S，7R)异构体大10倍、2个数量级。根据我国药品食品监督管理 局的规定，含手性药物，必须明确个异构体的药理活性，然后决定是否是否采用单一对映体 (异构体）给药。目前，制备单一对映体(异构体）是制药工业的热点之一。本发明将采用酶 法手性拆分方法，从外消旋四氢吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物拆分得到单一异构体：3_甲 酸-5R-乙苯-7S-3氟甲烷-四氢吡唑并[1，5-a]嘧啶，其结构式为 ：
【权利要求】
1. 一种酶催化制备3-甲酸-5R-乙苯-7S-3氟甲烷-四氢吡唑并[1，5-a]嘧啶的工 艺，其特征在于使用固定化猪胰脂肪酶手性拆分3-乙酯-5-乙苯-7-3氟甲烷-四氢吡唑并 [1，5-a]嘧陡，制取3-甲酸-5R-乙苯-7S-3氟甲烷-四氢吡唑并[1，5-a]嘧啶；催化反应 过程为，使用搅拌反应釜，涡轮搅拌桨，加入磷酸缓冲液，其pH为6. 8-7,装料系数0. 7-0. 8， 加入表面活性剂吐温80,加入量为25-50g/L，加入底物3-乙酯-5-乙苯-7-3氟甲烷-四 氢吡唑并[1，5-a]嘧啶，加入量50-100 g/L;剧烈搅拌，使其乳化后，加入固定化猪胰脂肪 酶，酶添加量为120_140U/mL，反应温度30-35°C，反应时间为9-llh ;反应结束后，滤出固定 化脂胰脂肪酶，调pH至10-11，离心，分离有机相，得到未反应的3-乙酯-5S-乙苯-7R-3氟 甲烧-四氢吡唑并[1，5-a]嘧啶，外消旋后重用；水相调节pH为4-5,离心，分离水与3-甲 酸-5R-乙苯-7S-3氟甲烷-四氢吡唑并[1，5-a]嘧陡，即得到产物3-甲酸-5R-乙苯-7S-3 氟甲烷-四氢吡唑并[l，5-a]嘧啶，反应转化率50-53%，产品ee值为96-98%。
【文档编号】C12P41/00GK104232730SQ201410442165
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月2日 优先权日:2014年9月2日
【发明者】张媛媛, 邹慧斌, 刘涛, 刘均洪 申请人:青岛科技大学