双层制剂的制作方法

专利名称：双层制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及类脂物在极性溶剂中的双层制剂。这些制剂适合作为活性物质的载体用于药物组合物中，也可用于营养、化妆、食物和农业产品中。
背景技术：
天然的两亲性类脂赋形剂在药物和化妆品制造中只有有限的应用。其原因是在很多情形里缺少原材料和生产成本高，以及最终的类脂材料的性能差。
在天然的极性成双层类脂物(即两亲性类脂物)中，最常用于药品和化妆品的是磷脂。由于能形成双层，所以这些极性类脂物可以用来形成不同种类的聚集体和颗粒，例如囊泡和液晶，它们有很多技术应用。
但是，以磷脂为基础的类脂凝胶在制药工艺中只有有限的用途，这主要是由于形成凝胶的能力不足和化学稳定性差。至今主要使用的天然的成双层极性类脂物是从蛋黄或大豆中得到的磷脂酰胆碱，对于在水中最佳溶胀和形成构筑液晶态层状结构的柔性双层来说，它的亲油性略强了些。
因为脂质体是双层或层状相在大量水溶液中的分散体，因此在形成脂质体时使用以磷脂为基础的层状相并非最佳。它的溶胀步骤慢，为了在合理的时间内由磷脂材料形成脂质体和囊泡，常常需要高的机械能输入。
天然磷脂，例如蛋黄中的磷脂酰胆碱，是高度不饱和的。磷脂的酰基链的不饱和性是在室温下形成液晶态层状相的先决条件。但是，这也意味着由天然磷脂形成的双层膜对于水溶性药物具有高的可透性，因为酰基链是处在无序的流体状态。因此，由天然磷脂制备的脂质体具有包封效率低的特点，这是由于掺入的药物渗漏穿过脂质体的双层膜。通常，如果要将药物掺入天然磷脂的脂质体中，则必须加入占类脂组合物总量30-50％摩尔的大量胆固醇使其稳定。
这也适用于由于某种原因而要掺入到脂质体或其它双层结构中的非药物类的活性物质。
以磷脂为基础的囊泡和脂质体常常在引入到血流循环中之后寿命很短。从血液中被快速清除是由于它们被肝和脾的网状内皮系统(RES)摄取。为了克服这一问题，可以加入含几个碳水化合物单元的神经节苷脂或者诸如聚氧乙烯或出芽短梗孢糖等亲水性聚合物使脂质体实现空间稳定。后一类试剂通常与磷脂酰乙醇胺共价键合。原则上这一方法很有效，改性的脂质体可以免遭RES摄入。但是实际上，向脂质体制剂中加入另外的组分，如果是天然的和稀有的，则费用昂贵，如果是合成的，则不一定可生物相容，因此从安全和经济角度来看都是不利的。
先有技术使用磷脂及其它极性类脂物来制备液晶和脂质体是众所周知的。EP-B1-0126751公开了一种可控释放组合物，它可以包含一种两亲性物质，例如半乳糖脂、磷脂和甘油单脂。该专利涉及在大量的水溶液中稳定的立方和反六角形液晶相。
WO/11993公开了一种含水醇的凝胶型磷脂组合物。醇是乙醇、1-丙醇或2-丙醇。磷脂含量为15-30％(W/W)。该专利还公开了使用磷脂组合物经过水溶液稀释来制备脂质体，以及含有所述凝胶的局部用制剂。
WO91/04013公开了在类脂双层中含有一种磷脂或糖脂及一种非离子型、阴离子型或两性离子型表面活性剂的混合型少量层状类脂囊泡。优选的糖脂是脑苷脂类、神经节苷脂类和硫脑苷脂类，它们全属于糖神经鞘脂类。
糖基甘油酯是一类糖脂，是众所周知的构成植物细胞膜的组分。两类以半乳糖为基础的很常见，即，单半乳糖基二酰基甘油(MGDG)和二半乳糖基二酰基甘油(DGDG)，它们最多占类囊体膜干重的40％。
植物糖脂有与甘油连接的碳水化合物单元，主要是半乳糖单元。在MGDG中，半乳糖环的1-位上有一个与甘油连接的p键，而在DGDG中，在糖之间有一个α，1→6键。一种次要组分是植物硫脑苷脂，更准确的称呼是硫代异鼠李糖基二酰基甘油(SQDG)，它含有一个与末端脱氧葡萄糖残基的碳6相连的磺酸基而不是羟基。大多数糖脂可以用以下的通式表示 其中R1和R2各自独立地是有2-24个碳原子和0-6个双键的饱和或不饱和的脂肪酸基、进一步酯化的羟基酸(即estolides)或氢；碳水化合物是一个单糖单元；n＝1-5；R3是羟基或磺酸基。
在关于糖基甘油酯与水和其它极性溶剂的相互作用的研究中，我们出乎意料地发现来源于谷物的特殊的糖脂类物质具有某种性能，使得这类类脂物适合并且容易作为载体材料使用，尤其是用于药物组合物，也可用于其它制剂，例如化妆品、农业制剂、营养品及食品。
众所周知，来源于谷物的类脂由于有相对较高比例的极性组分，可以与水相互作用形成层状液晶相(G.Jayasinghe等，J.Disp.Sci.Technol.，1991，12，443-451)。
SE9400368-8公开了一种工业上可应用的从植物(优选谷物)中利用萃取和色谱分离法制取糖脂类物质的方法。这样制得的糖脂类物质可以在药物产品、化妆品和食品中作为两亲性物质使用。
发明的描叙本发明涉及一种包括0.01-90％重量、优选0.1-50％重量的成双层物质在极性溶剂中构成的类脂物-极性溶剂双层制剂，其特征在于，这种成双层物质是从谷物中得到的半乳糖脂类，其中包含至少50％的二半乳糖基二酰基甘油，其余为其它的极性类脂。
在一种优选的制剂中，半乳糖脂类物质由约70-80％的二半乳糖基二酰基甘油和20-30％的其它极性类脂组成。
在另一种优选的制剂中，半乳糖脂类物质含最高达100％的二半乳糖基二酰基甘油。
二半乳糖基二酰基甘油可以用以下通式表示 其中R1和R2各自独立地代表有10-22个碳原子和0-4个双键的饱和或不饱和的脂肪酸基，或是氢；R3是羟基或磺酸基。
作为脂肪酸基的优选实施例，R1和R2可以举出天然存在的脂肪酰基，例如得自饱和酸如棕榈酸(C15H31CO；16∶0)和硬脂酸(C17H35CO；18∶0)；单不饱和酸如油酸(C17H33CO；18∶1)；以及多不饱和酸如亚油酸(C17H31CO；18∶2)和亚麻酸(C17H29CO；18∶3)的基团。脂肪酸基也可以包括与甘油部分相连的羟基酸，其羟基部分被其它的脂肪酸酯化，即所称的estolides。
作为半乳糖脂类物质一部分的其它极性类脂物是不同的糖脂和磷脂(例如MGDG和磷脂酰胆碱)的混合物。其成分取决于制造半乳糖脂类所用的原料和方法。
半乳糖脂类物质的各组分的具体比例对于本发明并非关键，只要DGDG含量至少为50％。但是对于很多应用来说，使用高含量的DGDG这一最重要的成双层组分，会达到最好的效果。
半乳糖脂类物质可以从几乎任何植物材料中提取。优选的植物材料是谷物和谷粒(例如小麦、黑麦、燕麦、玉米、大米、小米和芝麻)的种子和核仁。燕麦粒及面筋的类脂物含量高，因此对用于制备工艺中有利。半乳糖脂类物质的二半乳糖基二酰基甘油，如果适用的话，也可以是合成的产物。
半乳糖脂类物质可以在各种不同的有序化溶液中作为极性类脂组分使用，类脂在其中形成有序化的颗粒，它们分散在无规混合的稀溶液中，例如水、乙醇、甘油及其它极性溶剂或它们的混合物中。DGDG分子的几何形状类似于一个截头圆锥，这使得有可能在生理条件下于水溶液中形成柔性的双层，即层状液晶相，以及脂质体或囊泡。
半乳糖类脂可以掺入(即溶胀)大量的极性溶剂，例如水。向半乳糖类脂中加水会导致透明的粘性凝胶的自发形成。这种凝胶由层状液晶相Lα组成，其中类脂双层和水成层状结构交替排列。Lα相容易用偏振光显微镜检测，它是热力学稳定的物相。
由于凝胶的层状液晶结构粘度高，所以溶胀步骤相当慢；但是，可以在缓慢搅动下于24小时之内制得水溶液含量低至10％(W/W)的均匀透明的样品。一旦形成了凝胶，它对化学及微生物降解就十分稳定，因此可以长时间保持其物理完整性。
半乳糖基酰基甘油和极性溶剂的交替层状排列使得凝胶结构对于掺入亲油性和亲水性的生物活性物质都合适。层状结构在高剪切速率下的粘度相对较低，这使得可以用注射器和细针将凝胶注射。这类制剂可以用于向人和动物的各种部位施用药物。
极性溶剂优选与生物相容并且已批准用于药物、化妆品或食品配方中的那些溶剂，例如水、乙醇、1-丙醇、1，2-丙二醇、甘油及它们的混合物。
根据一项优选的实施方案，本发明涉及一种在极性溶剂中含25-90％重量的半乳糖脂类物质的凝胶制剂。
凝胶容易通过向干的半乳糖脂类物质中加入极性溶剂(例如水或水溶液)来制备，最终的类脂浓度为25-90％(W/W)。令混合物在室温和温和的搅拌下于合适的容器(如玻璃烧瓶或开口烧杯)中溶胀1-24小时。也可以用棒在玻璃管内混合并在室温下离心来制备凝胶。
这些凝胶是假塑型的，而且就物理外观和抗微生物而言十分稳定。凝胶的粘度不受温度适度变化的显著影向，因此可以例如从冰箱直接转移到注射器或其它的施药装置中。
还证实了，对于掺入的活性组分，本发明的凝胶比用磷脂制成的凝胶可以更有效地起缓释介质作用。
还证实了本发明的凝胶可以掺入很大一类有治疗活性的组分，包括亲油性的组分、盐酸盐、硝酸盐、两亲化合物、蛋白质和肽。
根据另一优选实施方案，本发明涉及一种脂质体制剂，它在一种极性溶剂中含有0.01-25％重量的半乳糖脂类物质。
半乳糖基酰基甘油的一个固有的有利特点是每个类脂分子中的半乳糖单元都含有极性头基团，它可以对脂质体起空间稳定作用，从而在注射到血流中之后寿命较长。
脂质体是多层的囊泡，它是通过直接水化制备的。将一种极性溶剂，例如水或水溶液，加到干的半乳糖脂类物质中，使最终的类脂浓度为0.01-25％(W/W)。令混合物在室温和温和的搅动下溶胀和平衡1-24小时，形成脂质体分散体。脂质体也可以通过向根据上述制得的凝胶中加入过量的极性溶剂，即，简单地将凝胶稀释来制备。
单层囊泡是由多层囊泡分散体通过例如膜挤压或高压均化而制得的。
半乳糖脂类物质的罕见的和令人惊奇的溶胀性质使其非常容易制备脂质体分散体和水基凝胶。例如，脂质体在水中自发形成即使在大规模地制备脂质体分散体方面也极其有用。这和由磷脂形成脂质体时需要使用诸如氯仿、乙醚、乙醇或其混合物等有机溶剂的步骤不同。常规的磷脂脂质体制备的按比例放大是一个公认的难题，曾经提出过许多不同的方法来克服这些困难。本发明以一种简单和可重复的方式提供了脂质体分散体，它对脂质体的实际应用，例如作为药物载体的应用，会有重要意义。
本发明的脂质体已证实具有令人吃惊的良好的包封效率。还已证实，本发明的脂质体令人吃惊地显著延长了活性组分的持续时间，即使囊泡是在这些组分的溶液中形成并因此只有一部分组分被囊泡包封。
还进一步证实了本发明的脂质体减小了一种有效抗癌药物的毒性，而又不降低其药效。
本发明的脂质体具有生物粘着性，因此可以解决掺入的活性组分在例如角膜和粘膜等生物表面上足量存在的问题。
本发明的脂质体可以掺入很大一类活性组分，包括亲油性组分、盐酸盐、硝酸盐、两亲化合物、蛋白质、肽及其它物质。
以半乳糖或任何其它单糖单元(例如葡糖糖)为基础的合成的二糖基二酰基甘油和以非半乳糖的其它碳水化合物单元(例如葡萄糖)为基础的从任何来源分离出的天然糖基甘油酯，均可根据本发明使用。
半乳糖脂类物质由下述的不同谷物制备半乳糖脂物质，按实施例中所述用于制备本发明的载体制剂和药物组合物。在本说明书中，若无另外的说明，％是指重量％。溶剂混合物中的溶剂的比例按体积份数给出。
得自燕麦的半乳糖脂类物质在200Kg的燕麦粒(Kungsrnen AB，瑞典)磨细，在萃取槽中于70℃和搅拌下用1000L 95％的乙醇萃取3小时。将浆体在仍然温热时离心，与固体颗粒分开。液体级分在60℃下蒸发，得到约10Kg浅褐色油。
将该油加到含6.25Kg硅胶(Matrex Silica Si，粒度20-45mm，孔径60，Amicon公司，美国)的不锈钢柱中。柱温为50℃。然后用30L己烷∶异丙醇的90∶10混合物洗，以便除掉所有的非极性类脂物。随后用20L的己烷∶异丙醇的60∶40混合物从柱中洗脱出半乳糖脂类物质，得到半乳糖基二酰基甘油级分。将此级分蒸发，得到约700gDGDG，是主要的类脂物。然后将半乳糖脂类物质分散在水中并进行冷冻干燥，得到自由流动的粉末。
从半乳糖脂中富集DGDG将50g如上所述从燕麦中得到的、DGDG含量约为70％的半乳糖脂溶在250ml己烷∶异丙醇的70∶30混合物中，总量为300ml。将所得的溶液装在硅胶(110g)柱上，极性较小的组分用1L己烷∶异丙醇的70∶30混合物洗脱。富集的DGDG级分用2L丙酮洗脱。将丙酮级分蒸发和冷冻干燥。总产量为17g几乎纯的DGDG产物。
半乳糖脂的氢化将如上所述从燕麦得到的200g半乳糖脂混合物溶解在2L温热的异丙醇中。一个压力反应器(Model No.4552M；Parr Instrument公司，美国)的搅拌器杆上装有两个叶片，在反应器底部放入15g钯/碳催化剂(pd15％，水分53％，Engelhard Rome s.r.i.，意大利)。然后将溶液在氮密封下转移到反应器中以减小着火的危险。将反应器密封，先用氮加压三次以便除去空气，然后用氢气(Plus 4.5，AGA Gas AB公司，瑞典)加压三次。随后将氢气压力保持在6巴，搅拌器设定在600rpm，将混合物加热至70℃。为使反应混合物达到其设定温度需要14分钟。氢化过程进行6小时，随后将反应产物经0.45μm的过滤器过滤，以便除掉碳颗粒和钯。在旋转蒸发器上蒸走溶剂，残余的固体物质分散在1600ml去离子水中，冷冻干燥。
过滤和冷冻干燥后的氢化半乳糖脂的产量为155g。氢化效果用气体色谱法鉴定；在氢化产物中只检测到饱和的脂肪酸。
得自面筋的半乳糖脂1Kg的面筋粉(AB ，瑞典)用4L 95％乙醇在烧杯中于70℃下萃取3小时。然后在400-500KPa的压力下过滤，所得滤饼用1L温热的95％乙醇洗。将合并的乙醇溶液在最高60℃下蒸发，得到约60g黄色油。
将该油加到装有45g硅胶(Matrex Silica Si，粒度20-45μm，孔径60A，Amicon公司，美国)的不锈钢柱中。然后用700m1己烷∶异丙醇的90∶10混合物洗，去除中性的类脂。
为了除掉MGDG和其它一些极性类脂，随后用1000ml的己烷∶异丙醇的70∶30混合物洗柱子。DGDG的洗脱用1000ml纯丙酮进行。蒸发后得到约4g接近于纯的DGDG产物。
得自黑麦的半乳糖脂将100g黑麦片(Kung srnen AB，瑞典)在工业己烷和异丙醇的90∶10混合物中搅拌60分钟。将浆体过滤并蒸发，得到0.5g极性类脂。将此残渣溶在10ml的己烷与异丙醇的70∶30混合物中，倒在串联连接的三个Sep-pak Silica plus柱上(Millipore公司，美国)，用20ml同样的溶剂混合物洗，用15ml丙酮洗脱。将洗脱液蒸发并冷冻干燥，得到47mg半乳糖脂。
不同半乳糖脂类物质的化学与物理特性类脂类别分析用高效液相色谱(HPLC)法进行类脂类别分析，使用装有二醇改性的硅胶(LiChrosphere 100 DIOL，5μm，250mm×4mm内径；E.Merek，德国)的柱子。将柱子封闭在保持75℃的水浴内。分析系统由HPLC泵CM4000(LDC/Milton Roy，美国)和有20μl注射回路的7125型注射器(Rheodyne公司，美国)构成。所用的汽化光散射检测器是Sedex45(S.E.D.E.R E.，法国)，装有一个Sedex 55雾化室，漂移管温度和空气入口压力分别为97℃和2.0巴。
分析期间流动相的流量为1ml/min。使用在25分钟内线性变化的二元梯度溶剂，由100％A开始，以100％B结束，其中A＝己烷∶异丙醇∶正丁醇∶四氢呋喃∶异辛烷∶水，64∶20∶6∶4.5∶4.5∶1；B＝异丙醇∶正丁醇∶四氢呋喃∶异辛烷∶水，75∶6∶4.5∶4.5∶10。所有溶剂均含180mg/l的乙酸铵。
数据的采集和处理用GynkoSoft数据系统版本4.22(Softron GmbH，德国)进行。用于分析的典型注入量为100μg。根据与可靠标准物(Karlshamns Lipid Teknik AB，瑞典)的保留时间的比较进行鉴定。在此体系中未检测出挥发性化合物。根据峰面积计算来定量。
用一台Zetasizer 4型仪器(Malvern Instruments公司，英国)对半乳糖脂的稀的水基分散体测定电动(Zeta)电势。
表I各种不同的半乳糖脂类物质的特性

在此表1和后面的表2中采用以下缩写o-GL ＝得自燕麦的半乳糖脂o-h-GL＝得自燕麦的氢化半乳糖脂o-DGDG＝得自燕麦的富集的半乳糖脂w-GL ＝得自小麦的半乳糖脂w-DGDG＝得自小麦的富集的半乳糖脂r-GL ＝得自黑麦的半乳糖脂脂肪酸分析在将类脂经酯基转移作用转化成脂肪酸甲酯之后，用气相色谱法进行脂肪酸分布分析。用毛细管柱状气相色谱法进行分离和定量，使用Varian3500毛细管气相色谱仪，该仪器装有30m×0.25mm内径的毛细管柱(DB-WAX；J&W Scientific公司，美国)、柱上注入器和火焰离子化检测器。使用氦作为载气。用GynkoSoft数据系统版本4.22(Softron公司，德国)进行积分。为进行酯基转移作用，将1mg的类脂样品加到2ml的碳酸二甲酯与异辛烷的1∶1混合物中。加入在200ml甲醇中溶有2.3g钠的甲醇溶液1ml，将试管激烈摇荡30秒，在室温下放置15分钟以保证完全反应。加入3ml水，摇荡试管，然后在2g下离心。将0.5μl的有机层注入到分离条件如下的色谱仪上。加热室程序控温，从130℃开始(2分钟)，增高到150℃(30℃/min)和220°(3.2℃/min)，保持10分钟。注入器温度为130℃，检测器温度为250℃。开始时气体流量为2.7ml/min。结果用外标法表示成规一化的重量百分数。对于没有可利用的或纯度合格的标准的次要组分，来使用校正因子。
表2脂肪酸成分的鉴定

二半乳糖基二酰基甘油的NMR谱用一台Bmker AM-400型分光计(Bruker Analytische Messtechnik公司，德国)在100.614MHZ的13C频率下记录一维质子偶合天然丰度13CNMR谱。脉冲角为36°，脉冲重复时间1.0秒，每个数据点的分辨率1.526Hz。在处理时采用3Hz的谱宽。将样品(10-40mg)在730μlDMSO-d6(Aldrich Chemical Comp.，美国)和20μl D2O(AldrichChemical Comp.美国)的混合物中稀释，转移到NMR管(内径5mm)中。
表3得自小麦和燕麦的二半乳糖基二酰基甘油的13C化学位移(ppm)

实施例实施例1 水基凝胶的形成将从燕麦中得到的半乳糖脂类物质与不同数量的水混合，以便试验在水中的溶胀度。类脂一水样品按重量在玻璃管中配制。将样品在室温下交替地用棒混合和离心，直到形成表观上均匀的体系。在室温下存放6个月后检查样品的物理外观。用偏振光显微镜检测层状液晶相。结果总结在下表中半乳糖脂类物质，％ 外观1.0 细小分散体；略有沉降4.8 细小分散体；略有沉降10.5等体积的层状相+水相19.3层状相+水相；水相＜10％体积24.8层状相45.0层状相这表明，在半乳糖脂含量约为25％和更高时，形成均匀的单相凝胶。
实施例2 水基凝胶的粘度性质根据实施例1制备含55％水的半乳糖脂凝胶。用一台装有同心转筒(C14；转矩元件91gcm)的Bohlin VOR流变仪(Bohlin Reologi AB，瑞典)在不同的切速和温度下测定粘度。粘度测定在制备之后24小时进行。稳流粘度值(Pa.s)总结如下切速1/s 20℃40℃60℃0.292 98.884.577.00.581 65.754.542.12.312 46.034.019.59.207 37.429.615.0
可以断定，样品是剪切稀化型(假塑型)，即，粘度与剪切速率有关，这是典型的层状液晶相的流变性质。另外，温度升高只使粘度略有降低，表明在所研究的温度范围内不存在相转变。凝胶在室温下存放18个月之后进行目测检查。未观察到微生物生长。存放期间物理外观无变化，这是值得注意的，因为未在存放温度、抗氧化剂、防腐剂等方面采取预防措施。
这反映了半乳糖脂类物质即使在能够引起酰基链水解或微生物降解的水环境中也具备优良的稳定性。
实施例3 释放试验对于最初含60％类脂和50mM亚甲蓝的半乳糖脂和磷脂凝胶进行水溶性染料亚甲蓝(E.Merck，德国)的体外释放试验。半乳糖脂类物质由燕麦制得。磷脂是经色谱纯化的得自大豆的磷脂酰胆碱(S-PC；KarlshamnsLipidTeknik AB，瑞典)。扩散介质是在37℃下平衡的膜过滤水。扩散池由其中装有约2.6g凝胶的用再生纤维素制成的膜管(Spectra/por；截止分子量6000-8000；平面宽度1.0cm)构成。将管子浸入到一个恒温的烧杯(内径10cm)中，烧杯中装有250g介质，处在离底部约3cm的固定位置处。将烧杯放在转速为200rpm的磁搅拌器上。在选定的时间抽出一份介质，在665nm处作分光光度分析。作为参比，还测定了亚甲蓝从装有50nM亚甲蓝水溶液的纤维素管中的释放。
2.5小时后未检测到半乳糖脂凝胶中染料的释放，而S-PC凝胶中释放1.3％。5小时后，半乳糖脂凝胶只释放其染料含量的0.13％，这比自S-PC凝胶中释放的约小12倍。
这表明，半乳糖脂制剂在体内施用时将缓慢释放生物活性物质，从而可作为储存制剂使用。
实施例4 释放试验对于最初含60％类脂，15％瑞莫必利(remoxipride)盐酸盐和25％水的半乳糖脂凝胶进行水溶性药物瑞莫必利盐酸盐-水合物(Astra AB，瑞典)的体外释放试验。
扩散介质是在37℃下平衡的磷酸盐缓冲液(pH7.4；离子强度0.05M)。扩散池由装有约1ml凝胶的用再生纤维素制成的膜管(Spectra/Por 3；截止分子量3500；平面宽度1.0cm；长度4cm)组成。将管子在两端用重量夹封住，放在其中装有600ml磷酸盐缓冲液的恒温离解浴中(SotaxAT6；内径10cm)。缓冲液用一个转动的浆片以50rpm的速度搅拌。在预定的时间抽取1ml样品进行分析，并向样品中补加1ml缓冲液。用带有μ-Bondapak C18柱的反相液体色谱测定瑞莫必利的浓度。使用的洗脱液为pH1.8的磷酸盐缓冲液和乙腈(4∶1)。使用分光光度检测器，波长为254nm。
凝胶使掺入药物的释放令人吃惊地慢。在2小时后从半乳糖脂凝胶中释放出的掺入的药物不到2％。4小时后释放出约3％。
这表明，半乳糖脂制剂适合作为非肠道的储存剂，用来持续释放生物活性物质，这里的例子是瑞莫必利盐酸盐。
实施例5 脂质体的形成脂质体是多层的囊泡，它的制备及鉴定如下。将水加到得自燕麦的半乳糖脂中使最终浓度为1.0％和10.0％类脂。使样品在温和的搅动下于室温下平衡24小时，得到脂质体分散体。
为了制备单层囊泡，将一部分分散体转移到玻璃管中并用装有微细探头的超声波发生器(XL-2020；Heat Systems公司，美国)在氮气氛和0℃下分散。采用以下的设定值输出控制3.5，处理时间3×2分，脉冲停顿时间2×4分。
所形成的脂质体分散体的粒度大小分布用动态光散射法(Zetasizer4，Malvern Instrument，英国)在室温和90°角下测定，使用ZET5110粒度分析池和多重模态分析。得到以下作为Z均值报导的结果超声前 大小，nm1.0％分散体 46710.0％分散体 551超声后1.0％分散体 14410.0％分散体 148用光学显微镜(40-100X，Olympus CH-2，日本)研究了超声前后形成的分散体。将少量的脂质体分散体放在玻璃载片上。然后观察在交叉放置的偏振片之间的样品的外观。只有未经超声的脂质体能观察到具有Malthesian十字线的特征形状。半乳糖脂形成囊泡的能力也由冷冻断裂透射电镜的结果得到证实。
这些结果显示了半乳糖脂形成多层囊泡的优异能力，它只需使用简单的直接水化法，不必加入挥发性有机溶剂或助表面活性剂。随后，小的单层囊泡容易如上所述用超声法形成，或者用任何常规的方法，例如经过聚碳酸酯膜挤出的方法形成。
实施例6 包封效率研究了掺入到由燕麦制备的半乳糖脂类物质囊泡中的染料的包封效率。半乳糖脂类物质在4.8％的浓度下于20mM的荧光黄水溶液中直接水化。分散体在室温下溶胀24小时。
载有染料的囊泡在室温下用凝胶渗透法在Sephadex G50柱(高60cm，内径1.5cm)上与未掺入的染料分离。使用pH调节至7.4的EDTA缓中液(1mM EDTA，5mM Tris，150mM NaCl)作为洗脱液。将一个浓的载有染料的脂质体分散体加入到柱床中，随后加入缓冲的EDTA溶液。用装有微流量池和图形记录器的紫外分光光度计在240nm下连续监测柱子的洗脱液，将其收集到一个自动分级收集器中。分开收集载有染料的囊泡和未被捕集的染料的溶液这两个级分，调节到一定的体积。在285.2nm处用分光光度法测定染料浓度，由这些数据计算俘获体积和包封效率。得到以下结果俘获体积2.1μl/mg类脂，包封效率11％。囊泡大小经测定为509nm(Z均值)。
如实施例5中所述，半乳糖脂的直接水化形成了多层囊泡。以上数据表明这些囊泡比基于磷脂的常规囊泡具有高得多的俘获体积和更好的包封效率，常规囊泡据报道俘获体积约为0.5μl/mg类脂。
制备多层囊泡的直接水化法是一种技术上简单和快速的方法，因此适合工业应用。将这种方法用于半乳糖脂类物质还有可能得到高得多的俘获体积，即包封效率要好得多，而这是先前用磷脂制备多层囊泡时的主要缺点。
实施例7 水基分散体的形成将得自燕麦的富集的半乳糖脂类物质DGDG与水混合，以便试验它在水中的溶胀能力。类脂一水样品按实施例1中所述制备。结果总结在下表中富集的半乳糖脂，％外观1.1 细小的乳状分散体9.6 略粘的乳状分散体21.2 粘稠的乳状分散体与未富集的物质一样，富集过的物质在水中的溶胀能力极好，容易形成均匀的分散体。
实施例8 水基分散体的形成将得自燕麦的氢化的半乳糖脂类物质与水混合，试验它在水中的溶胀能力。类脂一水样品按实施例1中所述制备。
氢化的半乳糖脂，％ 外观1.3 细小的白色分散体5.7 略粘的白色分散体10.2 粘稠的白色分散体与未氢化的物质一样，氢化过的物质在水中的溶胀能力极好。这种物质只含饱和的脂肪酸基，这意味着它在干的状态和在水存在时都形成高度有序的结晶结构。以水中分散体的形式存在的氢化物质的链熔点用示差扫描量热计测定约为55℃。未氢化的物质的相应数值远低于0℃。
实施例9 无水的粘性分散体的制备粘性分散体按照以下配方制备组分％半乳糖脂 10.0甘油，99％90.0组分％半乳糖脂 20.0甘油，99％80.0
将得自燕麦的半乳糖脂和甘油在室温下交替地用棒混合和离心，直到形成高度粘稠、均匀和外观上各向同性的液体。根据在偏振光显微镜中的织构，两种液体均由层状相在甘油中的分散体(即，多层囊泡)组成。在室温下存放一年后检查样品的物理外观。不管半乳糖脂浓度如何，均未观察到发生沉降，说明甘油对囊泡分散体有稳定作用。
实施例10 制备用于改善粘膜状态的无水制剂含巯基的试剂例如DL-半胱氨酸和N-乙酰基半胱氨酸可以促进人类十二指肠溃疡的愈合和防止复发。胃溃疡可以因局部缺血或诸如乙醇或乙酰基水杨酸等有害物质而产生，它们损害和除掉了十二指肠粘膜。使用以下组分制备了一种制剂组分％得自燕麦的半乳糖脂10.0N-乙酰基-L-半胱氨酸 10.0甘油，99％80.0在开口的烧杯中于温和的搅拌下将N-乙酰基-L-半胱氨酸在甘油中加热至约60℃使其溶解。然后加入半乳糖脂类物质，将所形成的表观上透明的液体转移到一个带塑料盖的玻璃容器中。偏振光显微镜揭示此制剂是一个分散体，将其在冰箱中存放6个月以上。
选择甘油作为溶剂，因为含巯基物质例如N-乙酰基-L-半胱氨酸在水溶液中不稳定，可能转化成对粘膜无药效的物质。
半乳糖脂物质本身是有好处的，因为在对小鼠的体内研究中显示出它对胃粘膜有保护作用。
按实施例11-14所述用一种消炎药氢化可的松制成各种不同的局部用制剂。半乳糖脂类物质由燕麦制得。所有的制剂在室温下均稳定2个月以上。
实施例11组分％半乳糖脂10.3氢化可的松 1.0水 88.7
氢化可的松和半乳糖脂在涡动混合器中充分混合。加水后将制剂交替地涡动、离心和温和地加热，直至得多细小的乳状分散体。
实施例12组分％半乳糖脂22.1氢化可的松 1.21-丙醇 16.1水 60.6将氢化可的松于温和地加热和搅拌下溶解。如水和半乳糖脂之后，将混合物交替地涡动、离心和温和地加热，直到形成不透明的高度粘稠的凝胶。
实施例13组分％半乳糖脂18.9氢化可的松 0.81，2-丙二醇 26.3水 54.0将氢化可的松在温和地加热与搅拌下溶解在1，2-丙二醇中。加水和半乳糖脂类物质之后，将混合物交替地涡动、离心和温和地加热，直到形成几乎透明的浅黄色凝胶。
实施例14组分 ％半乳糖脂26.8氢化可的松 1.2乙醇20.7水 51.3
将氢化可的松在温和地搅拌与混合下溶解在乙醇中。加完水和半乳糖脂之后，将混合物交替地涡动、离心及温和地加热，直到形成透明的浅褐色凝胶。
在实施例15-17中描叙了各种不同的无水的局部用制剂。同样，选择氢化可的松作为模型药物。半乳糖脂由燕麦制备。所有的制剂在室温下均稳定2个月以上。
实施例15组分 ％半乳糖脂7.0氢化可的松 0.8甘油，99％(W/W)92.2将半乳糖脂分散在甘油中。在得到一个均匀的凝胶相之后，加入氢化可的松。将混合物温和地加热，然后在涡动混合器上混合。所形成的悬浮液制剂是一种浅黄色的粘稠凝胶，其中包含着细小分散的氢化可的松固体颗粒。
实施例16组分 ％半乳糖脂 13.5氢化可的松 1.1甘油，99％(W/W)85.4根据实施例15制备制剂。所得的制剂是浅黄色不透明的、高度粘稠的凝胶。
实施例17组分 ％半乳糖脂 21.8氢化可的松 1.1丙醇 14.5甘油，99％(W/W)62.6
将氢化可的松在温和地加热与混和下部分地溶解在丙醇中。加完半乳糖脂并激烈混合后，加入甘油。然后将制剂涡动混合、离心和加热，直到形成浅黄色的凝胶状物相。凝胶中含有细小分散的氢化可的松颗粒。
实施例18 一种阴道用药的杀真菌制剂组分％半乳糖脂 45.6硝酸双氯苯咪唑 1.8水52.6将硝酸双氯苯咪唑和由燕麦制得的半乳糖脂在涡动混合器上充分混合。加完水后将制剂交替地涡动和搅拌，直到形成均匀和高度粘稠的浅褐色凝胶。
实施例19 作为伤口敷料的杀菌制剂组分％半乳糖脂 42.8强力霉素盐酸盐 1.7水55.5将强力霉素盐酸盐溶在水中形成黄色溶液。加完由燕麦制得的半乳糖脂之后，将混合物交替地涡动和搅拌，直到形成高度粘稠的浅褐色凝胶。
实施例20 外耳道用药的杀菌制剂组分％半乳糖脂 2.0强力霉素盐酸盐 2.0水96.0将强力霉素盐酸盐溶在水中形成浅黄色溶液，加完由燕麦得到的半乳糖脂之后，将混合物涡动混合，直到得到载有强力霉素的黄色乳状囊泡分散体。
实施例21 经鼻用药的抗糖尿病制剂组分 ％半乳糖脂 3.5胰岛素溶液100IU/ml 96.5(Actrapid Human，NoroNordisk AS，丹麦)将得自燕麦的半乳糖脂在温和地搅拌下于市售的胰岛素溶液中水化24小时。将所形成的分散体转移到可以产生细小气溶胶喷雾的常规的鼻用抽吸瓶中。
实施例22 杀精子制剂组分 ％半乳糖脂 22.5壬苯聚醇 5.0水 72.5将上述三种组分的混合物交替地涡动混合、离心和温和地加热，直至形成浅褐色的透明凝胶。
实施例23 直肠用药的止痛制剂组分 ％半乳糖脂 43.4朴热息痛 2.9水 53.7将由燕麦制得的半乳糖脂和朴热息痛充分混合。加完水后，将制剂交替地用棒混合与温和地加热，然后在室温下离心，直到形成高度粘稠的浅褐色凝胶。
这种半乳糖脂制剂的粘度不因温度的适度变化而显著改变。保存在冰箱中的制剂容易转移到注射器或类似装置中，然后可以经直肠用药并随即被热至体温，但并不损失其粘度或稠度。
实施例24 眼部用药的抗青光眼制剂组分 ％半乳糖脂 1.00噻吗心安马来酸盐 0.34水 98.66将由燕麦制备的半乳糖脂分散在一部分水中，令其在温和的搅拌下于室温下溶胀过夜。然后将溶在其余水中的噻吗心安马来酸盐加入，将所形成的脂质体分散体转移到玻璃管中，用装有尖细探头的超声波发生器(XL-2020；Heat Systems公司，美国；输出控制4)在氮气氛和0℃下分散10分钟。
这样形成了可作为滴眼剂使用的透明分散体，其中含有小的单层囊泡和药理上有效数量的药物。半乳糖脂为制剂提供了增高的粘度和改进的生物粘着性，由于在角膜上保留时间延长，这会使药物的生物利用度更好。
实施例25 在半乳糖脂脂质体中掺入γ-亚麻酸锂盐按下述制备带有γ-亚麻酸锂盐(一种抗癌药物)的脂质体半乳糖脂制剂组分 ％Li-GLA(γ-亚麻酸锂) 1.5富集的半乳糖脂 10.02.3％甘油水溶液 加至100.0γ-亚麻酸含量为75％的Li-GLA得自苏格兰的Callanish公司。将自燕麦得到的富集的半乳糖脂类物质与Li-GLA混合在一起，然后加入2.3％甘油溶液。将混合物放置水化(或溶胀)8小时。在12000rpm下高切速混合30秒后，将脂质体分散体在86MPa下均化3分钟(Emulsi Flex-C30，Avestin Inc.，加拿大)。Li-GLA浓度1.5％相当于53mM。如在后面的试验6中所报道的，对这种脂质体分散体的溶血作用进行了体外试验。
实施例26 含10％L-酪氨酸的分散体的制备按以下方式制备一种分散体组分 ％得自燕麦的半乳糖脂 6.4L-酪氨酸10.0水 83.6将所有的组分掺混并在15000rpm下高切速混合4分钟以便形成均匀的分散体。所形成的分散体在制备后稳定几周。
附图的简要说明

图1是实施例9中由10％(W/W)的半乳糖脂/甘油制得的脂质体的偏振光显微照相图案，放大倍数100。带有Malthesian十字的球形是脂质体的特征。
图2表示如下面试验3中所述的在模型动物鼠中鞘内长期植入的局部麻醉药物的神经阻断作用。
生物试验试验1体内皮肤刺激性为了评价本发明的半乳糖脂的皮肤毒性，进行了以下试验。
将得自燕麦的半乳糖脂与注射用水混合，形成10％的凝胶，以每只动物0.5ml的剂量涂敷到6只新西兰雄性白兔的无伤皮肤上，在半封闭的绷带下保持4小时。在去除绷带之后的1、24、48和72小时检查皮肤的红斑与浮肿。然后由在第24、48和72小时对皮肤损伤的评价计算出平均值。结果列在下面的表5中。
表5对兔皮肤的刺激性

由此可以断定，使用半乳糖脂凝胶不会引起任何明显的刺激作用。
试验2 半乳糖脂脂质体体内清除评价3H-脂肪酸标记的DGDG的制备将500mg得自燕麦的半乳糖脂通过将脂肪酸部分中的双键用氘气(Amersham Tritium Labeling Service，英国)催化还原进行氘标记。比放射性为每个被还原的双键30-60Ci/mmol。3H-DGDG在硅胶60板上用二维薄层色谱法纯化。第一方向的移动相是氯仿∶甲醇∶水，65∶25∶4(V/V)；第二方向为氯仿∶甲醇∶乙酸水，85∶15∶10∶3.5(V/V)。DGDG斑点依次用氯仿∶甲醇∶水(65∶25∶4(V/V)和50∶50∶10(V/V)，纯甲醇，以及甲醇∶水(1∶1(V/V))洗脱。半乳糖脂分子的亲油部分中3H的比例测定如下将18nCi3H-标记的DGDG和2mg来标记的物质在1ml KOH中于60℃下碱性水解4小时。用0.2ml 5M HCl中和后，加入5ml氯仿、1.5ml乙醇和2.5ml水。在这一两相分配中，97％的放射性回收到下面一相(氯仿)中。
将未标记的半乳糖脂和3H-DGDG以2.0％(w/w)的总浓度分散在2.5％(w/w)的甘油水溶液中。将此脂质体分散体在4℃下平衡36小时。然后用尖细探头在氮气和0℃下超声3×2分钟，停顿4分钟。
小鼠试验将体重250g左右的禁食的雄性Spraque Dawley鼠用乙醚麻醉。将放射性为1.8-2.7μCi的0.5ml超声过的分散体注射入外颈静脉。在2分、15分、60分、4小时和20小时时通过动脉穿刺将动物宰杀。用氯仿∶甲醇的1∶1(v/v)混合物萃取肝和血浆中的类脂。将萃取液在氮气下干燥，再溶于氯仿中并在硅胶60板上用薄层色谱法分离，使用氯仿∶甲醇∶水∶乙酸的65∶25∶4∶4(v/v)混合物展开。将DGDG斑点刮入计数小瓶中，加入1ml的甲醇∶水的1∶1(v/v)混合物，将混合物涡动混合，然后加入10ml甲苯Instagel(Packard Instruments B.V.，荷兰)的1∶1(v/v)混合物。在Packard Tri Carb液体闪烁计数器上测定放射性。数据表示成不同时刻在10ml血浆(总体重的4％)与全肝中的3H-DGDG注入剂量的％，总结在下面的表中。
表6注入的3H-DGDG在不同时刻留在10ml血浆(总体重的4％)和肝中的％。数据表示成平均值±标准偏差(n＝3)
2分15分60分 4小时 24小时血浆 57.8±9.0 47.7±5.4 17.4±1.9 2.0±0.4 0.04±0.04肝 9.9±2.2 17.2±2.2 13.0±1.6 2.1±0.5 0.16±0.03结果表明，含DGDG的囊泡在静脉注射到小鼠内时，半寿期约为30分。另外很显然，半乳糖脂囊泡从血流中被清除并被有效地降解，主要是被肝降解。
试验3 含有局部麻醉药物的制剂和对鼠的脊柱麻醉的体内研究含有一种麻醉药物丁哌卡因盐酸盐的各种不同制剂制备如下组合物A 组合物B 组合物C组分 ％％ ％丁哌卡因盐酸盐1.00 0.50 -半乳糖脂 10.00 - 10.00甘油，99％2.57 2.482.59水 86.47 97.02 87.41在一项用鞘内导管长期植入鼠内的对照试验中，研究了这些制剂在延长对脊髓和神经根局部麻醉作用持续时间方面的能力。
根据T.L.Yaksh和T.A.Rudy的方法(Physiol.Behav.，1976，Vol.17，pp.1031-1036)的方法对于四组雄性Spraque-Dawley鼠(重量23.5-300g)在植入鞘内导管一周后进行了研究。按照下表，两组鼠以在半乳糖制剂中的形式(组合物A)接受不同剂量的丁哌卡因，第三组接受水溶液中的丁哌卡因(组合物B)，第四组接受没有任何局部麻醉剂的半乳糖脂制剂(组合物C)编组 鼠数 组合物 注射体积(μl) 注射的丁哌卡因数量(μg)高剂量 7 A 20200低剂量 7 A 10100对照 8 B 20100无效剂 6 C 20 0
将小鼠随机分配到四组中的一组。试验化合物经植入的导管向硬脑脊膜囊的下腰区内用药。在规定的时间间隔观察试验化合物对运动的影响，根据0、1、2、3和4的分数定级，0＝无运动削弱，4＝前肢和后肢均麻痹。观察鼠至少90分钟。
结果总结在图2中。所有接受活性局部麻醉物质的动物在用药的初期均显示出运动功能显著削弱。但是，这一作用的持续时间在三个组中显著不同，高剂量组的麻痹持续时间最长，对照组最短。在90分钟时所有的动物都完全恢复。高剂量组和低剂量组与对照组相比，20分钟时的差别在统计学上是明显的(Wilcoxon标记等级试验)。高剂量组在30分钟时也与对照组不同。无效剂组在任何时候都不显示任何作用。未发现意外的或有毒的作用，而且所有的作用均是可逆的。
结论含丁哌卡因的半乳糖脂制剂能显著地延长丁哌卡因在长期鞘内植入的试验鼠内神经阻断作用的持续时间。这进一步证实了半乳糖脂制剂在延长生物活性组分的相互作用方面有用。
试验4 含Li-GLA的脂质体的体外溶血试验根据以下方案用人全血试验了实施例25中制备的脂质体Li-GLA制剂的溶血作用并与游离的Li-GLA作了比较。
将健康志愿者的人血收集在含有143USP单位肝素钠的Vacutainer管(Becton Dickinson公司，加拿大)中。将2ml血样转移到25ml的锥形瓶中，与1.0mi试验制剂混合，该制剂试用0.9％的盐水稀释成所要求的试验浓度。然后将样品在37℃于氧∶二氧化碳为95∶5的富氧气氛中(3l/min)保温培养1小时，其间不停地轻微摇荡。在培养结束时，将10μl血液混合物转移到装在1.5ml Eppendorf管中的500μl盐水里。将10μl血加到在1.5ml Eppendorf管中的500μl纯水里，制成100％溶血的标准。然后将所有的样品在一台Eppendorf Microfuge(Brinkman Instruments公司，加拿大)中旋转2分钟，最后在一台离心分析仪(Cobas Bioanalyser；Hoffmann-La Roche公司，加拿大)上用540nm的紫外扫描进行分析。结果列在下面。
Li-GLA浓度，mM 溶血％1.0 0.85.0 1.110.0 2.812.0 6.915.0 21.917.5 38.8溶在0.9％盐水中的Li-GLA在浓度约为4-5mM时造成100％溶血。因此，在脂质体形式中Li-GLA的溶血活性大大减小。脂质体型Li-GLA溶血活性降低已在小鼠的初步体内研究中得到证实；当使用脂质体制剂代替游离的Li-GLA时，溶血减少50％至80％。脂质体制剂在鼠中不造成“血尿”，而游离的Li-GLA则会这样。另外，已经证实，游离的Li-GLA和脂质体型Li-GLA的体外抗癌细胞活性几乎完全一样。这些试验表明，脂质体半乳糖脂制剂减小了药物的溶血这一严重的副作用，而又不影响其药效。
结论总之，与本发明有关的我们的发现是，以本发明的半乳糖脂类物质为基础的类脂一连接符一极性溶剂制剂在所有方面，例如制剂的物理稳定性、药物的掺入效率和掺入的药物的缓释能力等，均比磷脂制剂优越。
权利要求
1.一种类脂-极性溶剂双层制剂，包括0.01-90％重量、优选0.1-50％重量的成双层物质在极性溶剂中构成，该制剂的特征在于，成双层物质是得自谷物的半乳糖脂，其中含至少50％的二半乳糖基二酰基甘油，其余为其它的极性类脂。
2.根据权利要求1的制剂，其中的半乳糖脂类物质含有约70-80％二半乳糖基二酰基甘油和约20-30％的其它极性类脂。
3.根据权利要求1或2的制剂，其中的半乳糖脂类物质含最多达100％的二半乳糖基二酰基甘油。
4.根据权利要求1-3中任一项的凝胶制剂，其中在极性溶剂中含有25-90％重量的半乳糖脂类物质。
5.根据权利要求1-3中任一项的脂质体制剂，其中在极性溶剂中含有0.01-25％重量的半乳糖脂类物质。
6.使用权利要求1-5中任一项的制剂作为药物、化妆品或食物产品中活性物质的载体。
7.一种药物组合物，其中含有与一种治疗活性物质混合的、根据权利要求1-5中任一项的类脂-极性溶剂双层制剂。
8.根据权利要求7的一种药物组合物，其中含有一种治疗上有效数量的治疗活性物质；一种占组合物总重量1-50％的半乳糖脂类物质；一种极性溶剂；和一种等渗有效数量的等渗试剂。
9.根据权利要求7或8的药物组合物，用于口服、经肠、肠胃外的、经直肠、经阴道、局部、眼部、经鼻或经耳用药。
10.根据权利要求7或8的药物组合物，其中的治疗活性物质是γ-亚麻酸的盐或酯，半乳糖脂类物质的数量低于组合物总重量的25％。
11.使用得自谷物的半乳糖脂类物质制备脂质体，该半乳糖脂含有至少50％的二半乳糖基二酰基甘油，其余为其它的极性类脂。
12.权利要求11的半乳糖脂类物质的应用，该半乳糖脂含有约70-80％的二半乳糖脂基二酰基甘油和20-30％其它的极性类脂。
13.权利要求10或11的半乳糖脂类物质的应用，该半乳糖脂含有最高达100％的二半乳糖基二酰基甘油。
14.使用得自谷物的半乳糖脂类物质制备凝胶，该半乳糖脂含至少50％的二半乳糖基二酰基甘油，其余为其它的极性类脂。
15.权利要求14的半乳糖脂类物质的应用，该半乳糖脂含有约70-80％的二半乳糖基二酰基甘油和20-30％的其它极性类脂。
16.权利要求14或15的半乳糖脂类物质的应用，该半乳糖脂含最高达100％的二半乳糖基二酰基甘油。
17.制备脂质体的方法，其特征在于，将0.01-25％重量的得自谷物的半乳糖脂类物质与一种数量最高达100％重量的极性溶剂混合，该半乳糖脂含至少50％的二半乳糖基二酰基甘油，其余为其它的极性类脂。
18.根据权利要求17的方法，其中的半乳糖脂类物质由约70-80％的二半乳糖基二酰基甘油和约20-30％的其它极性类脂组成。
19.根据权利要求17或18的方法，其中的半乳糖脂类物质含有最高达100％的二半乳糖基二酰基甘油。
全文摘要
本发明涉及由0.01-90％(重量)、优选0.1-50％重量的成双层物质在极性溶剂中构成的类脂-极性溶剂双层制剂，其中的成双层物质是由谷物中得到的半乳糖脂类物质，它含有至少50％的二半乳糖基二酰基甘油，其余为其它的极性类脂。这种双层制剂可以作为药物、化妆品、食物或农业产品中的活性物质的载体使用。本发明还涉及一种药物组合物，其中含有与该双层制剂混合的治疗活性物质。
文档编号A23D7/005GK1144478SQ9519230
公开日1997年3月5日 申请日期1995年2月6日 优先权日1994年2月4日
发明者A·卡尔森, B·赫斯勒夫, S·佩特罗维克-卡罗姆 申请人:施科舍里皮技术有限公司