酮的组合物，然后在l〇〇°C~190°C、0.5Torr~lOOTorr的减压条件下搅拌15分 钟~1小时，然后进行过滤，由此获得含有丙二酰基异黄酮配糖体的澄清的油脂。该情况下， 关于搅拌处理中的温度，优选的是在l〇〇°C~190°C下进行搅拌，若低于100°C，则丙二酰基 异黄酮配糖体不含有在油脂中，若超过190°C，则有丙二酰基异黄酮配糖体被氧化、分解的 顾虑，关于搅拌处理中的温度，更优选的温度为130°C~150°C。搅拌处理的时间优选30分钟 ~120分钟，更优选的是以进行90分钟以上的搅拌处理为宜，若大幅度地超过120分钟而持 续进行搅拌处理，则有容易引起丙二酰基异黄酮配糖体的氧化、分解的顾虑。
[0055] 另外，关于搅拌后的过滤，理想的是利用滤布或薄膜过滤器等适当的滤材进行过 滤，制成外观上澄清的油脂。关于过滤时的油脂温度，为了实现油脂的抗氧化，以40°C~100 °C、优选50°C~80°C为宜。此外，在使油脂中含有丙二酰基异黄酮配糖体的工序中，视需要 可添加聚甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、有机酸单甘油酯、卵磷脂等乳化剂。从风味上来看， 该乳化剂的添加量优选3重量％以下，进而优选的是以1重量％以下为宜。
[0056]本发明的非调温型巧克力用油脂或调温型巧克力用油脂中，为了提高氧化稳定性 或提高加热稳定性，可添加生育酚类、有机酸、抗坏血酸棕榈酸酯、儿茶素等抗氧化剂。这些 抗氧化剂可仅对含丙二酰基异黄酮配糖体的油脂简单地添加而容易地含有在油脂中，优选 的是含有lOppm~2000ppm的至少一种以上的抗氧化剂。
[0057](异黄酮的定量法）
[0058] 准确地秤量以异黄酮计而对应于lmg~10mg的试样，在其中添加 25mL的70% (v/v) 乙醇。在室温下搅拌萃取30分钟后，进行离心分离而获得萃取液。对残渣进一步进行2次同 样的萃取操作。利用70%(v/v)乙醇将共计3次的萃取液定容至100mL，利用0.45M1的聚偏二 氟乙稀(Polyvinylidene Fluoride，PVDF)过滤器进行过滤，将所得的滤液作为试验溶液。
[0059] 关于异黄酮的确认试验，使用十二种标准品、即异黄酮苷、染料木苷、黄豆黄苷 (glycitin)、大豆苷元(daidzein)、染料木素 (genistein)、黄豆黄素 (glycitein)、丙二酰 基异黄酮苷、丙二酰基染料木苷、丙二酰基黄豆黄苷、乙酰基异黄酮苷、乙酰基染料木苷、乙 酰基黄豆黄苷(和光纯药工业股份有限公司），确认大致相同的滞留时间的波峰。关于定量 试验，使用异黄酮苷标准品对十二种的异黄酮浓度(异黄酮苷换算值)进行定量，乘以下述 定量系数，由此算出真实的异黄酮浓度。
[0060] 根据异黄酮的定量系数:异黄酮苷（1.000)、染料木苷(0.814)、黄豆黄苷（1.090)、 丙二酰基异黄酮苷（1.444)、丙二酰基染料木苷（1.095)、丙二酰基黄豆黄苷（1.351)、乙酰 基异黄酮苷（1.094)、乙酰基染料木苷（1.064)、乙酰基黄豆黄苷（1.197)、大豆苷元 (0.583)、染料木素(0.528)、黄豆黄素(0.740)以及各种异黄酮浓度的总和求出异黄酮量。 此外，关于试验溶液及标准溶液的高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC)条件，像下述那样进行。丙二酰基异黄酮配糖体含量是以丙二酰基 异黄酮苷、丙二酰基染料木苷、丙二酰基黄豆黄苷的合计量而算出。
[0061] (HPLC 条件）
[0062] 管柱：YMC-Pack ODS-AM-3〇3(4.6mmX25〇mm)
[0063] 移动相:A液乙腈:水：乙酸= 15:85:0. l(v/v/v)
[0064] B液乙腈:水：乙酸= 35:65:0. l(v/v/v)
[0065] A液液直线浓度梯度(50分钟）
[0066]流速：1.0ml/分钟
[0067]温度：25°C
[0068] 检测：紫外线（Ultraviolet，UV)254nm
[0069] 注入量：l〇yl
[0070] 实施例
[0071] 以下，对本发明示出实施例加以更详细说明，但本发明的精神不限定于以下的实 施例。此外，例中的％及份均是指重量基准。
[0072] 〈A.非调温型巧克力用油脂及巧克力的制造〉
[0073]将帕吉德(Pakiddo)Y(融点33°C，不二制油股份有限公司制造)作为比较例A1的油 月旨，所述帕吉德(Pakiddo)Y包含以含有碳数12以下的脂肪酸的油脂及棕榈油作为主成分的 酯交换油。另外，将帕吉德(Pakiddo)N(融点35°C，不二制油股份有限公司制造)作为比较例 A2的油脂，所述帕吉德(Pakiddo)N同样地以含有碳数12以下的脂肪酸的油脂及棕榈油作为 主成分。
[0074](实施例A1、实施例A2)
[0075] 对于3000g帕吉德(Pakiddo)Y，添加0.324g的含异黄酮的组合物（商品名：大豆黄 酮（Soy flav〇ne)HG，不二制油股份有限公司制造，丙二酰基异黄酮配糖体含量为41.3%) 粉末，升温到180°C，在lOTorr的减压条件下进行40分钟搅拌处理。然后，冷却到油温80°C 后，以东洋(T0Y0)No.5滤纸（相当于lwn)进行过滤，获得含有45ppm的丙二酰基异黄酮配糖 体的实施例A1的油脂。
[0076]另外，除了将帕吉德(Pakiddo)Y换成帕吉德(Pakiddo)N以外，与实施例A1同样地 获得实施例A2的油脂。
[0077] 将实施例A1、实施例A2及比较例A1、比较例A2的油脂以表A1所示的配方混合，获得 实施例A3、实施例A4及比较例A3的油脂。
[0078] 表A1
[0079] [表 A1]
[00811 (白巧克力的制作）
[0082]利用混合机将14份全脂奶粉、5份脱脂奶粉、43.9份砂糖、4.1份可可脂及23份实施 例A1的油脂混合，调整(混合)料团。使其通过精制机(refiner)，将粒度调整为20微米(微粒 化）。将所得的薄片(flake)精炼(混练）。此外，在精炼最终阶段中添加剩余的10份实施例A1 的油脂及0.4份卵磷脂，制作在油分中含有10%的可可脂的白巧克力。最终配方是记载于表 A2中。
[0083]另外，分别使用实施例A2~实施例A4、比较例A1~比较例A3的油脂代替实施例A1 的油脂，同样地制作巧克力。
[0084] 表A2
[0085] [表 A2]
[0086]白巧克力的配方(份）
[0088]将像所述那样制备的巧克力在油脂融化的温度(50°C)下流入到模具中，在18°C下 冷却固化后在20°C下熟化(老化)一周。通过以下的方法及评价对所得的巧克力进行风味确 认试验及保存性确认试验。项目是设定为风味、起霜(bloom)或粒化(graining)的程度。 [0089](巧克力的风味确认试验）
[0090]关于巧克力的风味，将评价项目设定为乳味、甜味及风味表现的速度，由6名官能 审查员对这些项目进行评价。将结果示于表A3中。
[0091](评价的基准）
[0092] 乳味或甜味:感到强或浓?>〇>A>X弱或淡
[0093] 风味表现的速度:很快感到味道◎>〇> A > X放入口中后，一段时间后才感到 味道
[0094]将在所有项目中达到?以上的评价的巧克力设为风味评价良好。
[0095] 表A3
[0096] [表 A3]
[0097]巧克力的风味评价
[0099] 关于使用含有5ppm以上的丙二酰基异黄酮配糖体的油脂即实施例A1~实施例A4 的巧克力，确