专利名称：杂环取代的苯并咪唑、它们的制备及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新颖的苯并咪唑，它们的制备以及作为聚(ADP-核糖)聚合酶或PARP(EC 2.4.2.30)酶抑制剂用于生产药物的用途。
聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)也叫做聚(ADP-核糖)合酶(PARS)，是在细胞核中发现的一种调节酶(K.Ikai等，《组织化学与细胞化学杂志》1983，31，1261-1264)。假定PARP与DNA断裂的修复有关(M.S.Satoh等，《自然》1992，356，356-358)。DNA链中的损害或断裂激活酶PARP，当它被激活时，会催化ADP-核糖从NAD的转移(S.shaw，Adv.Radiat.Biol.1984，11，1-69)。在这个过程中，烟酰胺从NAD释放。烟酰胺通过其他酶转化回到NAD中，同时消耗能量载体ATP。因此PARP的过度活化将导致ATP的非生理性的大量消耗，而这在极端情况下会导致细胞损害和细胞死亡。
已知自由基诸如超氧阴离子、NO和过氧化氢可导致细胞中的DNA损害并因此激活PARP。在许多病理生理状态中都观察到了大量自由基的形成，假定这种自由基的积聚导致或有助于所观察到的细胞或器官损害。这包括例如器官的局部缺血状态，如在中风、心肌梗死(C.Thiemermann等，《美国国家科学院院报》1997，94，679-683)或肾局部缺血中出现的，还包括再灌注损害，例如在心肌梗死的溶解术后出现的(参见上文C.Thiemermann等)。因此，对酶PARP的抑制可能是至少部分阻止或减轻这种损害的一种方式。PARP抑制剂因此可代表用于治疗许多疾病的新颖的治疗物质。
酶PARP影响DNA损害的修复并因此也可参与癌症的治疗，因为在与具有细胞抑制活性的物质结合时观察到了较大的对肿瘤组织的作用潜力(G.Chen等，《癌症的化学治疗与药理学》1988，22，303)。肿瘤的非限制性实例是白血病、成胶质细胞瘤、淋巴组织瘤、黑瘤以及乳癌和宫颈癌。
此外还发现PARP抑制剂可显示出免疫抑制作用(D.Weltin等，《国际免疫药理学杂志》1995，17，265-271)。
同样还发现PARP与其中免疫系统起重要作用的免疫学紊乱或疾病有关，诸如象类风湿性关节炎和脓毒性休克，并且PARP抑制剂可显示出对疾病过程的有益影响(H.Krger等，《炎症》1996，20，203-215；W.Ehrlich等，《国际风湿病学》1995，15，171-172；C.Szabo等，《美国国家科学院院报》1998，95，3867-3872；S.Cuzzocrea等，《欧洲药理学杂志》1998，342，67-76)。为本发明的目的，PARP理解为包括上述PARP酶的同工酶。
此外，PARP抑制剂3-氨基苯甲酰胺在循环衰竭模型中显示出保护作用(S.Cuzzocrea等，《英国药理学杂志》1997，121，1065-1074)。
还有实验证据表明酶PARP的抑制剂可用作治疗糖尿病的药剂(V.Burkart等，《自然医学》1999，5，314-319)。
苯并咪唑已描述过许多次。因此，DE 38 30 060公开了作为红细胞聚集抑制剂的烷基化衍生物。DE 35 22 230提到了作为血小板聚集抑制剂的2-苯基苯并咪唑的酯衍生物。在苯环上具有取代胺基的卤素取代的2-苯基苯并咪唑已在WO 98/06703中描述为MCP-1拮抗剂。
还已知其中苯并咪唑基被酰胺基取代的2-苯基苯并咪唑。在苯环上带有烷氧基的2-苯基苯并咪唑的5-酰胺基衍生物已在WO 94/12461中描述为cAMP磷酸二酯酶的抑制剂。在有关类似衍生物的DE 35 46 575(例如实施例15)中发现这些化合物诱导了正性肌力作用。在3位上具有吡啶基的4-酰胺基衍生物同样在WO 97/48697中提到作为cAMP磷酸二酯酶的抑制剂。
在4位上有酰胺基并在2位上有杂环的苯并咪唑也是已知的，例如可见于Denn W.A.等，《医药化学杂志》1990，33，814-819。其中描述的是例如在2位上有噻吩环、有吡啶环、呋喃环和吡咯环的苯并咪唑，尽管苯并咪唑上4位的酰胺基带有对文中提到的细胞毒性作用来说重要的其他烷基氨基，但酰胺残基上的这些取代非常不利于对酶PARP的抑制作用，并常导致非活性化合物(参见M.J.Suto等，《未来药物》1991，16，723-739中第728页)。
2-苯基-苯并咪唑-4-甲酰胺的合成已在《英国化学会志，柏尔金汇刊第1辑》1979，2303-2307中作了描述。在《医药化学杂志》1990，33，814-819中提到了在酰胺残基上具有取代烷基链并据说有细胞毒性作用的类似化合物。另一方面，WO 97/04771提到了抑制PARS的苯并咪唑-4-甲酰胺。特别是，其中描述为活性的衍生物在2位上有苯环，且该苯环还可被简单取代基诸如硝基、甲氧基和CF3取代。尽管这些物质中有些显示出良好的对酶PARP的抑制，但该文中描述的衍生物具有这样的缺点它们在水溶液中显示出很小或没有溶解性，因此不能作为水溶液给药。
在许多治疗诸如中风的治疗中，活性成分作为输液静脉注射给药。为此目的，需要有在生理pH值或接近的pH值(例如5-8的pH值)下在水中具有足够溶解性的可作为PARP抑制剂的物质，以便可制备输液。然而，已描述的许多PARP抑制剂，尤其是更有效的PARP抑制剂具有这样的缺点它们在这些pH值下在水中仅有很低的或没有溶解性，因此不适于静脉给药。这种类型的活性成分只能和用于促进水溶性的赋形剂一起给药(参见WO 97/04771)。这些赋形剂，例如聚乙二醇和二甲亚砜，常常引起副作用或是不能容许的。先前从未描述过具有足够水溶性的非常有效的PARP抑制剂。
在5位上有羧酸酯基或甲酰胺基且同时在2位上有杂芳环的苯并咪唑少有描述，实例为噻唑(JP 4001631)和喹啉(WO 9820007)。例如，在苯并环上带有甲基、或带有与苯并环稠合的其他苯并环、或甚至其上是未取代的苯并咪唑常常描述为在2位上有杂芳环，例如吲哚(V.Ketarev等，《杂环组合物化学》1980，16，501-506)，喹啉(J.Gosh，《印度化学会杂志》1938，15，89)，吡啶(T.Hisano，《化学与药学通报》1982，30，2996-3004)，嘧啶(H.Bredereck等，《化学报告》1960，93，2410-2414)和吡咯(GB 966，796)。
在2位上有杂芳环诸如吡啶、呋喃、噻吩和吡咯且在4位上有羧酸衍生物的苯并咪唑已在W.A.Denny等，《医药化学杂志》1990，33，814-819中描述为可能的细胞抑制剂。然而，在这种情况下制备和提到的羧酸衍生物仅是羧酸本身和在N原子上有烷基胺残基的酰胺。
出乎意料地，现已发现也在咪唑环上具有杂芳环且在4位上具有伯甲酰胺基、也就是说与W.A.Denny等(参见上文)形成对照在酰胺N原子上没有其他基团的苯并咪唑是非常有效的酶PARP的抑制剂。通过进一步引入化学基诸如脂族胺还有可能通过例如与酸形成盐而达到明显改善的水溶性。
本发明描述了能显示出优于先前描述过的那些化合物的优点的通式I和II表示的新颖的苯并咪唑衍生物，它们是强PARP抑制剂，其中有一些还显示出能允许作为输液给药的足够的水溶性。
本发明涉及通式I和II表示的取代的苯并咪唑 其中A是萘、单环芳族、二环和三环芳族或部分芳族杂环系统，其中环体系包含最多15个碳原子和不超过4个选自N、O、S的杂原子，且环另外可带有最多2个桥氧基，且A还可被最多3个不同或相同的R3基以及1个R4基取代，和R1是氢、氯、氟、溴、碘、支链和直链C1-C6烷基、OH、硝基、CF3、CN、NR11R12、NH-CO-R13、O-C1-C4烷基，其中R11和R12彼此独立地为氢或C1-C4烷基，而R13是氢、C1-C4烷基、C1-C4烷基-苯基或苯基，和R2是氢、支链和直链C1-C6烷基，和R3是氢、氯、溴、碘、氟、CF3、OCF3、硝基、NH2、CO-R8、CO2-R8、SO2-R8、OH、O-C1-C4烷基、O-C0-C4-烷基-苯基、饱和、不饱和或部分不饱和的且还可被R33基取代的C1-C6链、苯基，此时苯环还可被最多3个相同或不同的R31基取代、以及可被最多3个R32基取代的吡啶基，和R31是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2，和R32是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2、CN，和R33是CO-NH-R8、OH、O-C1-C6烷基、O-CO-R8，和R4是-(D)p-(E)s-(CH2)q-B，其中D是S、NR43和OE是苯基，和s是0和1，和B是NR41R42和 和p可以是0和1，和q可以是0、1、2、3或4，和R41可以是氢、C1-C6烷基、(CH2)r-G，和R42可以是氢、C1-C6烷基、-CO-R8、SO2-R8、CO2-R8、-(C＝NH)-R8和-(C＝NH)-NHR8，和R41和R42可以形成邻苯二甲酰基，和R43可以是氢和C1-C4烷基，和r可以是0、1、2、3、4，和G可以是还可带有最多2个R基的苯基、NR11R12、NH-C1-C4烷基-苯基、吡咯烷、哌啶、1，2，5，6-四氢吡啶、吗啉、高哌啶、还可被C1-C6烷基取代的哌嗪、以及还可被C1-C6烷基取代的高哌嗪，和R7可以是氢、C1-C6烷基、苯基，环上还可能被最多2个R71基取代，和R71可以是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2，和R8可以是C1-C6烷基、CF3、NR11R12、苯基、C1-C4烷基-苯基，环上还可能被最多2个R81基取代，和R81可以是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2，和R9可以是氢、CO-R8、SO2-R8、CO2-R8、C1-C6烷基、C1-C4烷基-苯基和苯基，苯环上还可能被最多2个R91基取代，和R91可以是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2，和它们的互变异构形式，可能的对映和非对映形，以及它们的药物前体。
优选的式I和式II化合物是符合下列条件的那些，其中R1可以是氢，和R2可以是氢和C1-C4烷基，和D可以是NR43和O，和p可以是0和1，s可以是0，当p为0时，q可以是0、1和2，或者当p为1时，q可以是2和3，和R42和R43可以彼此独立地为氢和C1-C4烷基，和R7可以是氢和苯基，和R9可以是氢、C1-C4烷基和C0-C4烷基-苯基。
A的优选含义为吲哚、苯并咪唑、吡咯、咪唑、呋喃、噻吩、苯并噻吩、苯并呋喃、吡唑、噻唑、苯并噻唑、邻苯二甲酰亚胺、吲唑、苯并三唑、酞嗪、二氢吲哚、异吲哚啉、吡啶、喹啉、嘧啶、哒嗪、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、萘、异噁唑、噁唑、咪唑并吡啶、吡嗪。
优选的式I和式II化合物是其中A具有下列含义的那些吡啶、噻吩、噻唑、呋喃、吲哚、噁唑、吡唑、吡咯、苯并呋喃、咪唑、苯并噻吩、异噁唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、喹啉，且杂环系统可以被最多3个R3基和1个R4基取代，其中R3是氢、氯、溴、碘、氟、COR8、CO2R8、SO2R8、饱和、不饱和或部分不饱和的且还可被O-CO-R8基取代的C1-C6链，或者是C1-C6烷基-苯基、苯基，此时苯环还可被最多3个相同或不同的R31基取代、以及可被最多3个R32基取代的吡啶基，和R4是氢和(D)p-(E)s-(CH2)q-B，但R3和R4不同时为氢。
优选的式I和式II化合物是其中A具有下列含义的那些吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、喹啉、噻唑、噻吩、吡咯和吡唑，且杂环系统可以被R3基和R4基取代，其中R3是氢、氯、溴、碘、氟、C1-C4烷基，和R4是(D)p-(E)s-(CH2)q-B。
特别优选的式I和式II化合物是以下这些，其中A可以是吡啶、噻吩和噻唑，且杂环系统被R4基取代，其中R4是(D)p-(E)s-(CH2)q-B，而R3是氢。
式I和式II化合物可以作为消旋体、作为对映体纯化合物或作为非对映体使用。如果需要对映体纯化合物，则可以例如通过用合适的旋光性碱或酸对式I和式II化合物或它们的中间体进行标准消旋体拆分得到。
本发明还涉及式I或式II化合物的内消旋体或互变异构体化合物。
本发明还涉及化合物I和II的生理上容许的盐，它们可以通过使化合物I与合适的酸或碱反应得到。合适的酸和碱是例如在Fortschritte der Arzneimittelforschung，1966，BirkhuserVerlag，第10卷，第224-285页中列出的那些，包括例如盐酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、磷酸、甲磺酸、乙酸、甲酸、马来酸、富马酸等等，以及氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾和Tris。
药物前体是指在体内代谢为通式I和II化合物的那些化合物。典型的药物前体是磷酸盐、氨基酸的氨基甲酸酯、酯以及其他等等。
本发明的苯并咪唑I和II可以用不同方式制备，如在合成方案1-3中概述的。合成方案1 苯甲醛与苯二胺缩合得到苯并咪唑VII，这优选在极性溶剂诸如乙醇或二甲基甲酰胺中在抬高的温度、通常是80-120℃下加入酸诸如乙酸进行。对该反应有益的是加入弱氧化剂诸如铜(II)盐，其作为水溶液加入。合成方案2 当苯二胺VIII中的R为NH2时，缩合反应直接产生了本发明的化合物I。否则，若R为O-烷基，则该酯可以与氨反应，合适时在抬高的温度下和在抬高的压力下进行，得到酰胺I。另一方面，酯VIII可以在极性溶剂诸如醇类象丁醇和乙醇中或在二甲基甲酰胺中、在抬高的温度优选80-130℃下与肼反应，得到酰肼VIII(R＝NHNH2)，其然后可在还原条件下诸如在醇中在回流下用阮内镍还原为酰胺I。
合成方案3 作为方案1中所示的苯甲醛VI的替换物，还可能使用苯甲酸诸如XI(参见方案2)或苄腈诸如XIV(参见方案3)代替苯甲醛。这些衍生物的制备与取代苯甲醛VI的制备类似地进行。从XI开始，向VII的缩合分两个阶段发生。首先，苯甲酸XI在肽样偶联中与苯胺VIII反应得到酰胺XII。用于这一反应的常规条件是例如在Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie，第4版，E5，第V章和R.C.Larock，《综合有机转化》，VCH出版社，1989年，第972页以及下列等等中列出的那些。然后在抬高的温度例如60-180℃下、有或没有溶剂诸如二甲基甲酰胺、并加入酸诸如乙酸或直接就在乙酸中，环闭合成苯并咪唑。
苯二胺VIII与苄腈XIV的反应同样在常规条件下进行。这可在溶剂诸如二甲基甲酰胺中加入酸进行，或者在多磷酸中在抬高的温度诸如60-200℃下进行。不过，也可能如Houben-Weyl，Methoden derorganischen Chemie，E5，第1304页以及下列等等、《美国化学会会志》1957，427和《有机化学杂志》1987，1017中所述，使用从苄腈制备脒的常规方法。
上述取代的苯并咪唑I和II是聚(ADP-核糖)聚合酶或PARP(EC2.4.2.30)酶的抑制剂。
取代苯并咪唑I和II的抑制作用可以使用文献中公开的酶测定法确定，测定Ki作为效果的量度。以这种方式测量苯并咪唑I和II对聚(ADP-核糖)聚合酶或PARP(EC 2.4.2.30)酶的抑制作用。
通式I和II的取代苯并咪唑是聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)或也叫做聚(ADP-核糖)合酶(PARS)的抑制剂，并因此可用于治疗和预防与这些酶的活性增加有关的疾病。
除了酶PARP以外，PARP同工酶也是已知的，诸如象PARP II和PARP III(WO99/64572)。
苯并咪唑I和II还出人意料地显示出对酶PARP II的抑制作用。
为了使药物有更大的可忍受性和更少的副作用，可取的是对PARP酶的选择性抑制。
而在WO97/04771中描述的2-苯基苯并咪唑-4-甲酰胺(NU 1070)以相同数量级的Ki值抑制酶PARP和PARP II，但苯并咪唑I和II在对PARP和PARP II的抑制中显示出提高的选择性。
式I和式II化合物可以用于生产用于治疗局部缺血后造成的损害和用于预防各种器官中预期的局部缺血的药物。
本发明的通式I和II的苯并咪唑因此可用于治疗和预防局部缺血、外伤(颅脑外伤)、大量出血、蛛网膜下出血和中风后出现的神经变性疾病，和诸如多梗死性痴呆、早老性痴呆、杭廷顿氏舞蹈病等神经变性疾病，和癫痫，特别是普遍性癫痫发作，诸如象小发作和强直阵挛性癫痫发作和部分癫痫发作诸如颞叶，和复杂的部分癫痫发作，还可用于治疗和预防心局部缺血后心脏的损害和肾局部缺血后肾脏的损害，例如急性肾机能不全、急性肾衰竭或肾移植过程中和之后发生的损害。通式I和II化合物还可用于治疗急性心肌梗死和其医疗溶解(例如用TPA、瑞替普酶、链激酶进行的或用激光或Rotablator(腐烂烧蚀材料)机械进行的)过程中和之后出现的损害，和心脏瓣膜置换、动脉瘤切除和心脏移植过程中和之后出现的微梗塞。在临界狭窄冠状动脉的再血管形成例如在PTCA和旁路手术中，和在临界狭窄外周动脉例如腿动脉的再血管形成的情况下，同样有可能使用本发明的苯并咪唑I和II进行治疗。此外，该苯并咪唑I和II可有益于肿瘤及其转移的化疗，并可用于治疗炎症和风湿性疾病诸如象类风湿性关节炎，和用于治疗糖尿病。
按照本发明的药物制剂包含治疗有效量的化合物I和II以及常规药物赋形剂。
对于局部外用，例如以撒粉、软膏或喷雾剂形式，活性成分可以常规浓度存在。活性成分通常以从0.001至1重量％、优选0.001至0.1重量％的量存在。
至于内用，制剂以单剂给药。每kg体重以单剂给药0.1至100mg。根据疾病的性质和严重程度，制剂可以每天给药1剂或多剂。
对于所需的给药方式来说合适的是，按照本发明的药物制剂包含常规载体和稀释剂以及活性成分。对于局部外用，有可能使用药物赋形剂诸如乙醇、异丙醇、乙氧基化蓖麻油、乙氧基化氢化蓖麻油、聚丙烯酸、聚乙二醇、聚硬脂酸乙二醇酯、乙氧基化脂肪醇、液体石蜡、凡士林和羊毛脂。适于内用的实例是乳糖、丙二醇、乙醇、淀粉、滑石和聚乙烯吡咯烷酮。
还可能存在抗氧剂诸如生育酚和丁化羟基甲氧苯和丁化羟基甲苯，调味剂，稳定剂，乳化剂和润滑剂。
制剂中除活性成分以外还存在的物质以及生产药物制剂期间所用的物质是毒理学上可接受的并且是与特定活性成分相容的。药物制剂以常规方式生产，例如通过将活性成分与常规载体和稀释剂混合。
药物制剂可以各种方式给药，例如口服给药、胃肠外给药诸如通过输液静脉给药、皮下注射、腹膜内注射和局部给药。因此，可能的剂型是片剂、乳液、输液和注射溶液、糊剂、软膏剂、凝胶剂、膏霜、洗液、撒粉和喷雾剂。
实施例A聚(ADP-核糖)聚合酶或PARP(EC 2.4.2.30)酶的抑制a)ELISA测定材料ELISA显色试剂TMB混合物SIGMA T-854096孔微量滴定板(FALCON微量检验III柔性测定板，#3912)用组蛋白(SIGMA，H-7755)涂覆。为此，将组蛋白以50μg/ml的浓度溶于碳酸盐缓冲液(0.05M Na2HCO3；pH9.4)。该微量滴定板的单个孔各自用150μl这种组蛋白溶液在室温下温育至少2小时，或者在4℃下温育过夜。然后这些孔通过加入存在于碳酸盐缓冲液中的150μl 1％强度的BSA溶液(SIGMA，A-7888)在室温下封闭2小时。接下来用洗涤缓冲液(0.05％吐温10在1×PBS中；PBS(磷酸缓冲盐水；Gibco，序号10010)0.21g/l KH2PO4，9g/l NaCl，0.726g/l Na2HPO4·7H2O，pH7.4)洗涤三次。洗涤步骤均在微量滴定板洗涤器(“Columbus”微量滴定板洗涤器，SLT-Labinstruments，Austria)中进行。
酶反应需要的是酶反应溶液和底物溶液，在每种情况下都制成预混合物。这些溶液的绝对用量取决于预定的测定孔的数目。
每孔中酶反应溶液的组成为
-4μl PARP反应缓冲液(1M Tris-HCl pH8.0，100mM MgCl2，10mMDTT)-20ng PARP(人或牛的)-4μl活化DNA(1mg/ml；SIGMA，D-4522)-40μl H2O每孔中底物溶液的组成为-5μl PARP反应缓冲液(10x)-0.8μl NAD溶液(10mM，SIGMA N-1511)-44μl H2O将抑制剂溶于1×PARP反应缓冲液中。偶尔用于以更高浓度溶解抑制剂的DMSO最多到2％终浓度是没有问题的。至于酶反应，将40μl酶反应溶液加入到各孔中并用10μl抑制剂溶液温育10分钟。然后通过向每孔中加入50μl底物溶液使酶反应开始。该反应在室温下进行30分钟，然后通过用洗涤缓冲液洗涤三次使反应终止。
所用的初级抗体是以1∶5000稀释的特异性抗-聚(ADP-核糖)抗体。稀释用抗体缓冲液(BSA在PBS中的1％溶液；0.05％吐温20)进行。对初级抗体的温育时间是在室温下1小时。接下来用洗涤缓冲液洗涤三次后，用以抗体缓冲液1∶10000倍稀释的次级抗体(抗小鼠IgG，Fab片段，过氧化物酶偶联的，Boehringer Mannheim，序号1500.686；抗兔IgG，过氧化物酶偶联的，SIGMA，序号A-6154)在室温下温育1小时。用洗涤缓冲液洗涤三次后，接着每孔使用100μl显色试剂(TMB混合物，SIGMA)在室温下进行约15分钟的显色反应。显色反应通过加入100μl 2MH2SO4终止。之后立即用ELISA滴定板阅读器(EAR340AT“Easy Reader”，SLT-Labinstruments，Austria)(450nm对620nm)进行测量。
用多种浓度来构建剂量-作用图，以确定抑制剂的Ki。对于某特定抑制剂浓度获得一式三份的数值。算术均值使用MicrosoftExcel确定。IC50使用MicrosoftOrigin软件(5.0版)(“乙状拟合”)确定。使用“校准抑制剂”将以这种方式计算得到的IC50值转化为Ki值。“校准抑制剂”也在各项分析中加以测量。“校准抑制剂”的Ki值以技术人员熟悉的方式通过Dixon图表分析用相同的测定系统确定。
b)HTRF(同源时间分辨荧光)测定在HTRFPARP测定中，组蛋白作为用于被PARP修饰的目标蛋白质，间接地用XL665荧光团标记。抗体直接用铕穴合物标记。如果XL665荧光团在空间上就在邻近位置，这是通过与组蛋白上的聚(ADP-核糖)的结合确保的，那么能量转移就是可能的。在665nm下的发射于是与结合抗体的量成正比，其依次又等同于聚(ADP-核糖)的量。因此，测得的信号相当于PARP活性。除非另有说明，否则所用的材料与在ELISA中所用的(参见上文)相同。
将组蛋白(Sigma M7755)以3mg/ml的浓度溶于Hepes缓冲液(50mM，pH＝7.5)。生物素化用磺基-NHS-LC-生物素(Pierce，#21335T)进行。每摩尔组蛋白使用4摩尔生物素。温育时间为90分钟(室温)。该生物素化组蛋白然后在G25 SF HR10/10柱(Pharmacia，17-0591-01)上用Hepes缓冲液(50mM，pH＝7.0)纯化，以除去过量的生物素化试剂。抗-聚(ADP-核糖)抗体使用双功能偶联试剂用铕穴合物标记(Lopez，E.等，《临床化学》39/2，196-201，1993；美国专利5,534,622)。纯化用G25SF HR10/30柱进行。达到每摩尔抗体3.1摩尔穴合物的摩尔比。收率为25％。该缀合物在-80℃下在存在于磷酸盐缓冲液(0.1M，pH＝7)中的0.1％BSA的存在下储存。
至于酶反应，用移液管向每孔中加入下列物质-10μl存在于PARP HTRF反应缓冲液(50mM Tris-HCl pH8.0，10mM MgCl2，1mM DTT)中的PARP溶液，其中含有20ng PARP(人或牛的)-10μl存在于PARP HTRF反应缓冲液(50μg/ml)中的活化DNA(SIGMA D4522)-10μl存在于PARP HTRF反应缓冲液(1.25μM)中的生物素化组蛋白-10μl存在于PARP HTRF反应缓冲液中的抑制剂这些试剂预温育2分钟，然后通过加入10μl存在于PARP HTRF反应缓冲液(400μM)中的NAD溶液使反应开始。反应时间为在室温下30分钟。
然后通过加入10μl存在于“展开”缓冲液(100mM Tris-HCl pH7.2，0.2M KF，0.05％BSA)中的PARP抑制剂(25μM，Ki＝10nM)使反应终止。
然后加入下列物质-10μl EDTA溶液(SIGMA，E-7889，0.5M水溶液)-100μl存在于“展开”缓冲液(15-31.25nM)中的Sa-XL665(Packard Instruments)-50μl存在于“展开”缓冲液(1.6-3.3nM)中的抗-PARP穴合物。
30分钟(最多4小时)后可以进行测量。测量在“Discovery HTRF微量滴定板分析器”(Packard Instruments)中进行。如对ELISA测定中所述计算Ki值。
实施例B水溶性的测定将要测量的化合物直接溶于固定体积的水中，用醋酸钠溶液将所得溶液调节至pH5-6，以便达到要检测的活性成分浓度。如果测量的物质不是水溶性盐形式的，就将它溶于最小量的二甲亚砜中，然后用水稀释(二甲亚砜终浓度≤1％)，之后再次调节pH。强PARP抑制剂NU 1076(WO 97/04771)显示溶解度＜0.01％，而本发明实施例1化合物显示溶解度＞0.5％。
本发明的最佳PARP抑制剂是实施例15、16、25、36和37所述的那些。
实施例实施例12-吡啶-4-基苯并咪唑-4-甲酰胺a)2-吡啶-4-基苯并咪唑-4-羧酸乙酯将1g(5.5mmol)2，3-二氨基苯甲酸乙酯和0.7ml(11.3mmol)乙酸溶于15ml乙醇，然后在30分钟内滴加溶于25ml乙醇中的0.77g(7.2mmol)吡啶-4-甲醛。然后迅速滴加1.44g(7.2mmol)硫酸酮(II)在20ml水中的溶液。该混合物在回流下沸腾2小时。然后使该反应溶液冷却至50℃，之后加入2.25ml 32％浓度的盐酸。然后在该溶液仍热的时候小心地滴加2.13g(8.9mmol)水合硫化钠和25ml水的溶液。将该混合物搅拌10分钟。然后将该反应混合物倒入冰水中，将所得沉淀滤出。滤液用碳酸氢钠水溶液使成碱性并用乙酸乙酯萃取。有机相用水洗涤、干燥并真空浓缩。得到1.15g产物。
b)2-吡啶-4-基苯并咪唑-4-卡巴肼将1g(3.7mmol)产物1a溶于30ml丁醇。加入6ml水合肼，该混合物在回流下沸腾8小时。冷却后，将该反应溶液真空浓缩。残余物用乙醚搅拌并进行吸滤，得到0.74g产物。
c)2-吡啶-4-基苯并咪唑-4-甲酰胺0.7g(2.8mmol)产物1b和1.5g阮内镍(在水中的悬浮液)在45ml二甲基甲酰胺/水(2/1)中在100℃下加热8小时。冷却并过滤后，滤液用水稀释，然后吸滤出沉淀。得到0.16g产物。1H-NMR(D6-DMSO)d ＝7.4(1H)，7.85(2H)，7.9(1H)，8.2(2H)，8.8(2H)和9.2(1H)ppm.
实施例22-吡啶-4-基苯并咪唑-4-甲酰胺×2甲磺酸将61mg(0.26mmol)从实施例1得到的化合物溶于1ml四氢呋喃，并加入25mg(0.26mmol)溶于5ml水中的甲磺酸。该混合物然后用水稀释并冷冻干燥。得到58mg产物。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝2.6(3H)，6.9(1H)，7.1(1H)，7.3-7.5(3H)，7.8(1H)，8.1(1H)，8.8(1H)，9.0(1H)和9.1(1H)ppm.
实施例32-(苯并咪唑-5-基)苯并咪唑-4-甲酰胺a)2-(苯并咪唑-5-基)苯并咪唑-4-羧酸将2g(12mmol)2，3-二氨基苯甲酸甲酯和2g(12mmol)苯并咪唑-5-羧酸依次加入到预热到90℃的70ml多磷酸中。该混合物然后在200℃下加热1小时。随后将该反应混合物冷却至50-60℃并小心地倒入冰水中。所得沉淀吸滤滤出并干燥。得到2.7g产物。
b)2-(苯并咪唑-5-基)苯并咪唑-4-羧酸乙酯2.6g(9.3mmol)产物3a在100ml乙醇中搅拌，然后小心地加入10ml浓硫酸。该混合物在回流下沸腾1小时。然后将该反应溶液小心地倒入冰水中。所得溶液用碳酸氢钠水溶液使成碱性并用乙酸乙酯萃取。将有机相分离、干燥并真空浓缩。得到2.7g产物。
c)2-(苯并咪唑-5-基)苯并咪唑-4-卡巴肼与1b过程类似，2.6g(8.5mmol)产物3b与水合肼反应。得到1.4g产物。
d)2-(苯并咪唑-5-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与1c过程类似，1.4g产物3c用阮内镍处理。得到0.65g产物。
1H-NMR(D6-DMSO)δ＝7.3(1H)，7.7-7.9(5H)，8.2(1H)，8.4(1H)，8.5(1H)和9.5(1H)ppm.
实施例42-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)苯并咪唑-5-基)-苯并咪唑-4-甲酰胺×3HCla)1-(2-(N，N-二乙氨基)-1-乙基)苯并咪唑-5-羧酸乙酯5.4g(28.4mmol)苯并咪唑-5-羧酸乙酯、9.8g(56.8mmol)N-(2-氯-1-乙基)-N，N-二乙胺和7.9g(56.8mmol)碳酸钾在100ml二甲基甲酰胺中在100℃下加热4小时。该混合物然后过滤，滤液真空浓缩，所得残余物用色谱法纯化(流动相乙酸乙酯/丙酮＝1/1)。得到2.6g含有3-(2-(N，N-二乙氨基)-1-乙基)-苯并咪唑-5-羧酸乙酯和该产物的异构体混合物。
b)1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)苯并咪唑-5-羧酸×2HCl将2.5g(8.6mmol)产物4a溶于50ml乙醇，加入50ml 1M氢氧化钠溶液后，在回流下沸腾1小时。冷却后，该反应溶液用稀盐酸中和并真空浓缩。以这种方式得到的残余物与四氢呋喃和甲醇的混合物(1/1)一起搅拌并过滤。将滤液真空浓缩，然后溶于水，加入2当量盐酸后，冷冻干燥。得到3.4g异构体混合物。
c)2-氨基-3-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)苯并咪唑-5-基)酰胺基)苯甲酸甲酯在室温下向3.3g(9.9mmol)产物4b和100ml无水二甲基甲酰胺的溶液中依次加入1.6g(9.9mmol)2，3-二氨基苯甲酸甲酯、0.44g(3.3mmol)N-羟基苯并三唑(HOBT)和6.2ml(44.4mmol)三乙胺。然后，在15℃下，分批加入1.9g(9.9mmol)N’-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺(EDC)。该混合物在室温下搅拌16小时。然后将该反应混合物真空浓缩。残余物在水和乙酸乙酯之间分配。分离水相，用碳酸氢钠水溶液使成碱性并用乙酸乙酯萃取。将该有机相分离，用活性炭处理，过滤，干燥并真空浓缩。得到1.5g产物，为异构体混合物。
d)2-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)苯并咪唑-5-基)苯并咪唑-4-羧酸甲酯1.5g产物4c在75ml乙酸中在回流下沸腾1小时。该混合物然后真空浓缩。得到2.2g产物。
e)2-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)苯并咪唑-5-基)苯并咪唑-4-卡巴肼与1b过程类似，2.2g产物4d与水合肼反应。得到粗产物，其不经纯化用于下一步反应。
f)2-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)苯并咪唑-5-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×3HCl与1c过程类似，从4e得到的产物用阮内镍处理。最后将粗产物溶于热的异丙醇，并加入少量氯化氢的异丙醇溶液。产物随冷却结晶。得到0.98g异构体混合物。
MSm/e＝376(M+)。
实施例52-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)吲哚-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺
a)1-(2-N，N-二乙氨基乙-1-基)吲哚-3-醛将1.1g(45.4mmol)氢化钠(80％浓度)在0℃下分批加入到5g(34.5mmol)吲哚-3-醛在100ml无水四氢呋喃中的溶液中。该混合物然后搅拌15分钟，之后滴加溶于50ml无水四氢呋喃中的7.4g(68.9mmol)N-(2-氯-1-乙基)-N，N-二乙胺。该混合物随后在室温下搅拌16小时。然后向该反应溶液中滴加40ml水(N.B.氢化钠)，并真空除去有机溶剂。剩余相用水稀释并用醚萃取。该有机相用2M盐酸和水洗涤，干燥并真空浓缩。
b)2-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)吲哚-3-基)苯并咪唑-4-羧酸甲酯与方法1a类似，1.9g(7.8mmol)产物5a与1g(6mmol)2，3-二氨基苯甲酸甲酯反应。得到1.5g产物。
c)2-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)吲哚-3-基)苯并咪唑-4-卡巴肼与方法1b类似，1.5g产物5b与水合肼反应。得到0.39g产物。
d)2-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)吲哚-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与方法1c类似，0.35g产物5c用阮内镍处理。得到0.14g产物。
1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.1(3H)，2.8-3.2(6H)，4.6(2H)，7.2.-7.4(3H)，7.6-7.9(4H)，8.4(2H)和9.6(1H)ppm.
实施例62-(吡嗪-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺1.68g(7.5mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺和3.04g(30mmol)三乙胺在50ml二甲基甲酰胺中的溶液在室温下搅拌1小时。加入0.93g(7.5mmol)吡嗪-2-羧酸和1.01g(7.5mmol)N-羟基苯并三唑(HOBt)。在室温下搅拌15分钟后，将该混合物冷却至0℃。加入1.44g(7.5mmol)N’-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺(EDC)，该混合物在室温下搅拌16小时。然后将该反应混合物真空浓缩。残余物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠溶液之间分配。水相用二氯甲烷萃取。合并后的有机相用硫酸镁干燥。将真空浓缩后得到的残余物溶于50ml冰醋酸并回流30分钟。将该反应混合物真空浓缩，残余物在二乙醚中搅拌。将沉淀滤出并在40℃下真空干燥。得到1.11g棕色结晶。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝7.42(1H)，7.6-7.9(2H)，7.95(1H)，8.8-8.9(2H)，9.2(1H)，9.7(1H)ppm.MSm/e＝239(M+)实施例7-11与实施例6类似地制备实施例72-(喹啉-6-基)苯并咪唑-4-甲酰胺1H-NMR(D6-DMSO)δ＝7.4(1H)，7.55-8.2(4H)，8.2-8.3(1H)，8.4-8.7(2H)，8.8-9.2(2H)，9.3(宽峰，1H)，13.0(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝288(M+)实施例82-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)吡咯-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺1H-NMR(D6-DMSO)δ＝0.8-1.0(6H)，2.4-2.6(4H)，2.7-2.8(2H)，4.0-4.1(2H)，6.7-6.75(1H)，7.1-7.15(1H)，7.5-7.8(3H)，8.0-8.2(2H)ppm.MSm/e＝326(M++H)实施例92-(1-(N，N-二甲氨基)萘-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×HCl1H-NMR(D6-DMSO)δ＝2.9(3H)，3.0(3H)，7.25-7.3(1H)，7.4-7.7(2H)，7.75(1H)，7.8(1H)，7.8-7.9(2H)，8.2-8.3(2H)ppm.MSm/e＝330(M+)实施例102-吡啶-3-基苯并咪唑-4-甲酰胺1H-NMR(D6-DMSO)δ＝7.25(1H)，7.5-7.7(3H)，7.75(1H)，7.8-8.0(2H)，7.25-7.3(1H)，7.4(1H)ppm.MSm/e＝238(M+)
实施例112-(2-氨基甲基噻唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×HCl1H-NMR(D6-DMSO)δ＝4.0-5.0(宽峰，NH)，4.75(1H)，4.8(1H)，7.5(1H)，7.8(1H)，7.95(1H)，9.0(宽峰)ppm.MSm/e＝273(M+)实施例122-异噁唑-5-基苯并咪唑-4-甲酰胺将0.81g(7.5mmol)氯甲酸乙酯在5ml四氢呋喃中的溶液在-10℃下滴加到0.85g(7.5mmol)异噁唑-5-羧酸和3.79g(37.5mmol)三乙胺在50ml四氢呋喃中的溶液中。在-10℃下搅拌1小时后，加入1.68g(7.5mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺。该反应混合物在室温下搅拌16小时。然后将该反应混合物真空浓缩。残余物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠溶液之间分配。水相用二氯甲烷萃取。合并后的有机相用硫酸镁干燥。将真空浓缩后得到的残余物溶于10ml冰醋酸并在100℃下搅拌60分钟。将该反应混合物真空浓缩，残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠溶液之间分配。有机相用硫酸镁干燥并真空浓缩。将残余物溶于异丙醇，将用石油醚产生的沉淀滤出，用石油醚洗涤并在35℃下真空干燥。得到120mg黄色结晶。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝7.3(1H)，7.45-7.5(1H)，7.75-8.0(3H)，8.8(1H)，9.1(1H)ppm.MSm/e＝228(M+)实施例132-(2-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2HCla)2-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氨基)烟酸乙酯×2草酸1.86g(0.01mol)2-氯烟酸乙酯、1.16g(0.01mol)1-(N，N-二乙氨基)-2-氨基乙烷、2.76g(0.02mol)碳酸钾和一刮勺尖量的18-冠醚-6在50ml二甲基甲酰胺中的混合物在120℃下搅拌6小时。除去固体后，将该反应混合物真空浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯。有机相用水洗涤、用硫酸镁干燥并真空浓缩。将该淡棕色油溶于异丙醇，草酸盐用草酸沉淀。分离并真空干燥后得到2.2g白色结晶。
b)2-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氨基)烟酸将1.15g(4.33mmol)产物13a游离碱加入到100ml甲醇中，并加入100ml 2M氢氧化钠溶液。该反应混合物在室温下搅拌16小时，然后将该反应混合物真空浓缩，并向含水残余物中加入100ml 2M盐酸。真空浓缩得到12.47g产物和NaCl的混合物。
c)2-(2-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2HCl0.84g(3.75mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺在35ml吡啶中搅拌5分钟，然后加入0.89g(3.75mmol)产物13b。将该反应混合物搅拌5分钟并冷却至0℃。加入0.72g(3.75mmol)N’-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺(EDC)后，该反应混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌16小时。将该反应混合物真空浓缩，然后用甲苯真空浓缩两次。残余物在水和乙酸乙酯之间分配。水相用1M氢氧化钠溶液碱化，用固体氯化钠饱和并用二氯甲烷充分萃取。有机相用硫酸镁干燥并真空浓缩。将残余物溶于2ml冰醋酸并在100℃下搅拌1小时。将真空浓缩后的残余物溶于二氯甲烷，盐酸盐用盐酸醚溶液沉淀并通过过滤滤出，用二乙醚洗涤并在35℃下真空干燥。得到0.52g黄色粉末。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.1-1.3(6H)，3.1-3.3(4H)，3.35-3.5(2H)，4.0-4.15(2H)，7.0-7.1(1H)，7.4-7.5(1H)，7.8-7.95(2H)，8.2-8.3(1H)，8.4(1H)，8.7(1H)，10.6(1H)ppm.MSm/e＝353(M++H)实施例142-(2-((2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2HCl合成与实施例13类似地进行。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.25(6H)，2.6(3H)，3.1-3.25(4H)，3.3-3.45(2H)，3.8-3.9(2H)，7.0-7.1(1H)，7.45-7.55(1H)，7.8(1H)，7.95-8.05(2H)，8.15-8.2(1H)，8.4-8.45(1H)，8.8(宽峰，1H)，
10.55(宽峰，1H)ppm.
MSm/e＝367(M++H)实施例152-(6-((2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2HCl合成与实施例13类似地进行。1H-NMR(D4-甲醇)δ＝1.45(6H)，3.25(3H)，3.3-3.5(6H)，4.2(2H)，7.1(1H)，7.7 (1H)，7.95(1H)，8.05(1H)，8.35(1H)，8.7(1H)ppm.MSm/e＝367(M++H)实施例162-(6-(4-丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺合成与实施例13类似地进行。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝0.95(3H)，1.7-1.8(2H)，2.7-2.8(2H)，3.0-3.2(6H)，4.5-4.65(2H)，7.15-7.25(1H)，7.4(1H)，7.75-7.95(2H)，8.45(1H)，9.05(1H)，10.95(宽峰，1H)ppm.MSm/e ＝ 365(M++H)实施例172-(2-(3-(N，N-二乙氨基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2HCl合成与实施例13类似地进行。1H-NMR(D4-甲醇)δ＝1.2(6H)，2.0-2.1(2H)，2.85-3.0(6H)，3.6-3.7(2H)，7.7-7.8(1H)，7.3-7.4(1H)，8.1-8.2(2H)，7.75(1H)，7.9(1H)ppm.MSm/e＝367(M++H)实施例182-(3-氨基噻吩-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×HCla)4-叔丁氧基羰基氨基噻吩-3-羧酸
2.76g(0.022mol)4-氨基噻吩-3-羧酸乙酯和4.81g(0.022mol)二碳酸二叔丁酯与一刮勺尖量的4-N，N-二甲氨基吡啶在100ml四氢呋喃中在室温下搅拌8小时。该反应混合物用乙酸乙酯稀释并用5％柠檬酸溶液洗涤三次。有机相用硫酸镁干燥，然后真空浓缩。将残余物溶于100ml乙醇，加入100ml 2M氢氧化钠溶液后，该混合物在室温下搅拌16小时。真空浓缩后的含水残余物与100ml 2M盐酸混合。将沉淀滤出并用水洗涤，在40℃下真空干燥。残余物用乙酸乙酯过滤。过滤后，将滤液真空浓缩。得到0.85g黄色粉末。
b)2-(3-氨基噻吩-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×HCl将0.35g(3.21mmol)氯甲酸乙酯在5ml二氯甲烷中的溶液在-10℃下滴加到0.78g(3.21mmol)产物18a和1.67g(16.05mmol)三乙胺在25ml二氯甲烷中的溶液中。在-10℃下搅拌1小时后，加入0.72g(3.21mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺。该反应混合物在室温下搅拌16小时。该反应混合物然后真空浓缩。将残余物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠溶液之间分配。水相用二氯甲烷萃取。合并后的有机相用硫酸镁干燥。将真空浓缩后得到的残余物溶于10ml冰醋酸并在100℃下搅拌30分钟。将该反应混合物真空浓缩，残余物溶于少量乙酸乙酯。将用正戊烷产生的沉淀滤出并溶于5ml二氯甲烷。加入5ml 4M二噁烷HCl溶液后，该混合物在室温下搅拌16小时。将结晶滤出，用二氯甲烷和二乙醚洗涤并在35℃下真空干燥。得到30mg黄褐色结晶。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝7.3-7.4(1H)，7.7-7.8(2H)，7.85-7.9(1H)，8.6(1H)，8.75(1H)ppm.MSm/e＝258(M+)实施例192-(2-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×HCla)2-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氧基)烟酸乙酯×2草酸1.05g(6.28mmol)2-羟基烟酸乙酯、1.64g(6.28mmol)2-溴-N，N-二乙基乙胺×HBr、1.74g碳酸钾和一刮勺尖量的18-冠醚-6在25ml二甲基甲酰胺中的混合物在室温下搅拌16小时。然后除去固体，将滤液真空浓缩。残余物在水和乙酸乙酯之间分配。有机相用硫酸镁干燥并真空浓缩。将残余物溶于异丙醇，用草酸沉淀出草酸盐，分离后，在40℃下真空干燥。得到2.2g白色结晶。
b)2-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氧基)烟酸0.87g(3.27mmol)产物21a与实施例13b类似地进行反应。得到3.54g产物18b和NaCl的混合物。
c)2-(2-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×HCl1.68g(7.5mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺和1.79g(7.5mmol)产物21b与实施例13c类似地进行反应。得到390mg黄褐色粉末。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.2-1.3(6H)，3.2-3.3(4H)，3.4-3.5(2H)，4.5-4.6(2H)，6.7-6.8(1H)，7.4-7.5(1H)，7.8(1H)，7.9-8.1(2H)，8.3-8.4(1H)，8.7(宽峰，1H)，8.9-9.0(1H)，10.8(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝353(M+)实施例202-(1-苯磺酰基吡咯-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺a)1-苯磺酰基吡咯-3-甲醛5.91g(0.037mol) 2，5-二甲氧基四氢呋喃-3-甲醛、5.80g(0.037mol)苯磺酰胺和一刮勺尖量的4-甲苯磺酸在50ml甲苯中的溶液带脱水器回流直到不再分离出水。该反应混合物用水洗涤三次。有机相用硫酸镁同时加入活性炭和硅胶干燥，并真空浓缩。得到7.68g棕色树脂。
b)2-(1-苯磺酰基吡咯-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺将1.68g(7.5mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺加入到0.84g(15mmol)氢氧化钾粉末在100ml乙醇中的溶液中。搅拌5分钟后，迅速滴加1.35g(22.5mmol)冰醋酸，并经过30分钟滴加产物20a在20ml乙醇中的溶液。然后迅速滴加2.49g(12.5mmol)醋酸铜(II)在20ml水中的温热溶液。将该反应混合物回流2小时。将固体滤出。残余物在二氯甲烷和水之间分配。该混合物用氨水使成碱性。水相用二氯甲烷萃取。合并后的有机相用硫酸镁干燥并真空浓缩。得到0.82g黄色结晶。
1H-NMR(D6-DMSO)δ＝7.05(1H)，7.3-7.35(1H)，7.55-7.65(2H)，7.65-7.75(5H)，7.8-7.9(2H)，8.0-8.1(2H)，8.2(1H)，9.3(1H)ppm.
MSm/e＝366(M+)实施例212-吡咯-3-基苯并咪唑-4-甲酰胺0.5g(1.36mmol)产物20b和0.75g碳酸钾在25ml甲醇和10ml水中的混合物回流2小时。然后真空浓缩该反应混合物。残余物用饱和碳酸氢钠水溶液稀释并用乙酸乙酯萃取数次。用硫酸镁干燥后真空浓缩。将残余物溶于少量乙酸乙酯/四氢呋喃，产物用正戊烷沉淀，通过过滤分离并在30℃下真空干燥。得到80mg黄色结晶。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝6.75(1H)，6.9(1H)，7.2-7.3(1H)，7.5-7.7(2H)，7.7-7.8(2H)，9.4(宽峰，1H)，11.3(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝226(M++H)实施例222-(2-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶-8-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例20b类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝2.7(3H)，5.8(宽峰，NH)，7.0-7.4(5H)，8.4(1H)，8.55(1H)，10.9(1H)ppm.MSm/e＝291(M+)实施例232-(吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺0.56g(5mmol)4-吡唑羧酸与0.81g(5mmol)羰基二咪唑一起在20ml二甲基甲酰胺中在室温下搅拌2小时。加入1.12g(5mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺在10ml吡啶中的溶液。该反应混合物在50℃下搅拌2小时。然后将该反应混合物真空浓缩，残余物用水搅拌。将沉淀滤出并在40℃下真空干燥，然后在100℃下在10ml冰醋酸中搅拌。真空浓缩后的残余物与饱和碳酸氢钠溶液一起搅拌。过滤后，滤液用甲苯在真空中浓缩数次。残余物用四氢呋喃搅拌。真空浓缩得到150mg黄色粉末。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝7.2(1H)，7.55-7.7(3H)，7.75(1H)，8.4(2H)，9.3(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝291(M+)实施例242-(2-(3-(N，N-二乙氨基)丙-1-基氨基)吡啶-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺a)2-(3-(N，N-二乙氨基)丙-1-基氨基)异烟酸叔丁酯1.02g(4.77mmol)2-氯异烟酸叔丁酯、5ml 3-二乙氨基-1-丙胺、0.66g(4.77mmol)碳酸钾、一刮勺尖量的铜粉和1刮勺尖量的18-冠醚-6回流4小时。该反应混合物经快速色谱法(甲苯/四氢呋喃/甲醇，4/1/1+2.5％三乙胺)得到0.69g淡棕色油。
b)2-(3-(N，N-二乙氨基)丙-1-基氨基)异烟酸×HCl0.5g(1.63mmol)产物24a在7.5ml二噁烷和7.5ml 2M盐酸中的溶液在100℃下搅拌1小时。将该反应混合物真空浓缩，残余物在50℃下真空干燥，得到0.43g米色结晶。
c)2-(2-(3-(N，N-二乙氨基)丙-1-基氨基)吡啶-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺将0.36g(1.25mmol)产物24b加入到10ml二甲基甲酰胺和吡啶的混合物(1/1)中并搅拌15分钟。加入0.21g(1.31mmol)羰基二咪唑后，该反应混合物在室温下搅拌1小时。然后加入0.28g(1.25mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺在5ml二甲基甲酰胺/吡啶中的溶液。该反应混合物在50℃下搅拌2小时。该反应混合物真空浓缩后的残余物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠溶液之间分配。将有机相分离，用硫酸镁干燥并真空浓缩。残余物在20ml冰醋酸中在100℃下搅拌1小时。该反应混合物真空浓缩后的残余物利用快速色谱法纯化(甲苯/四氢呋喃/甲醇，4/1/1+2.5％三乙胺)。将以这种方式得到的产物溶于少量丙酮。将用二乙醚得到的沉淀分离并在40℃下真空干燥。得到0.22g黄色粉末。
1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.15-1.25(6H)，1.9-2.05(2H)，3.0-3.2(8H)，7.1(1H)，7.3-7.35(2H)，7.8(1H)，7.9(1H)，7.95(1H)，8.2(1H)，9.3 (1H)，14.0(1H)ppm.
MSm/e＝366(M+)实施例252-(2-((2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×1/2富马酸与实施例24类似地进行合成。
1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.2-1.35(6H)，3.2(3H)，3.2-3.5(4H)，3.95-4.05(4H)，6.65(2H)，7.4(1H)，7.5(2H)，7.6(1H)，7.75-7.85(2H)，7.9(1H)，8.3(1H)，9.25(1H)，14.0(1H)ppm.
MSm/e＝366(M+)实施例262-(2-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氨基)吡啶-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2HCl与实施例24类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.0-1.05(6H)，3.3-3.45(4H)，3.9-4.1(4H)，6.65(1H)，7.25-7.4(2H)，7.5(1H)，7.55-7.65(2H)，7.75(1H)，7.85(1H)，7.9-8.0(1H)，8.05(1H)，8.1-8.25(2H)，9.0(1H)，10.55(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝353(M++H)实施例272-(2-(2-(吡咯烷-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例24类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.7-1.8(4H)，2.55-2.7(4H)，2.75(2H)，3.5(2H)，6.9(1H)，7.25(1H)，7.3-7.45(2H)，7.75(1H)，7.85-7.95(2H)，8.15(1H)，9.25(1H)ppm.MSm/e＝351(M+)
实施例282-(2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2富马酸与实施例24类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝2.7-2.85(2H)，2.45-2.8(13H)，3.25-3.4(2H)，6.6(4H)，6.95(宽峰，1H)，7.25(1H)，7.3(1H)，7.4(1H)，7.8(1H)，7.85-7.95(2H)，8.15(1H)，9.25(宽峰，1H)，13.8(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝394(M++H)实施例292-(6-(2-(吡咯烷-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例24类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.65-1.8(4H)，2.5-2.6(4H)，2.65-2.75(2H)，3.55-3.7(2H)，6.65-6.75(2H)，7.35(1H)，7.5-7.6(2H)，7.75-7.85(2H)，7.9(1H)，9.3(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝351(M++H)实施例302-(6-(3-(N，N-二乙氨基)丙-1-基氨基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例24类似地进行合成。
1H-NMR(D6-DMSO)δ＝MSm/e＝367(M++H)实施例312-(6-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氨基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×1/2富马酸与实施例24类似地进行合成。
1H-NMR(D6-DMSO)δ＝0.95-1.1(6H)，2.65-2.8(6H)，3.55-3.7(2H)，6.55(1H)，6.7(1H)，7.3(1H)，7.5-7.6(2H)，7.7-7.8(2H)，7.9(1H)，9.3(宽峰，1H)ppm.
MSm/e＝353(M++H)实施例322-(6-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例24类似地进行合成。
MSm/e＝394(M++H)实施例332-(6-(2-((N，N-二乙氨基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×3富马酸与实施例24类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.05-1.2(6H)，3.0-3.1(6H)，3.15(3H)，4.0-4.15(2H)，6.6(6H)，6.75-6.85(2H)，7.05(宽峰，1H)，7.35(1H)，7.65-7.8(4H)，7.9(1H)，8.2(宽峰，1H)，9.3(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝367(M++H)实施例342-(2-(4-苯基哌嗪-1-基)吡啶-5-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2HCla)6-(4-苯基哌嗪-1-基)烟酸乙酯3.72g(0.02mol)6-氯烟酸乙酯和6.44g(0.04mol)N-苯基哌嗪的混合物在100℃下搅拌1小时。将该反应混合物真空浓缩。残余物用异丙醇搅拌。得到7.8g黄色固体。
b)6-(4-苯基哌嗪-1-基)烟酸与实施例13b类似地得到2.8g产物34b。
c)2-(6-(4-苯基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺2.27g(0.008mol)产物34b和1.79g(0.008mol)2，3-二氨基苯甲酰胺与实施例24c类似地进行反应。得到0.25g棕色固体。1H-NMR(D4-甲醇)δ＝3.85-3.95(4H)，4.35-4.45(4H)，7.35(1H)，7.55-7.7(4H)，7.75-7.85(2H)，7.95(1H)，8.05(1H)，8.2(1H)，9.05(1H)ppm.MSm/e＝399(M++H)实施例352-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2HCl与实施例34类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝3.0-3.2(2H)，3.3-3.45(2H)，3.5-3.6(2H)，4.4(2H)，4.55-4.7(2H)，7.2(1H)，7.4-7.5(4H)，7.7(2H)，7.75(1H)，7.8(1H)，7.85(1H)，8.5(1H)，8.8(宽峰，1H)，9.1(1H)，10.4(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝412(M+)实施例362-(6-(4-叔丁基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.4(9R)，3.0-3.2(2H)，3.45-3.7(4H)，4.5-4.7(2H)，7.15(1H)，7.3(1H)，7.7-7.75(2H)，7.8(1H)，8.45(1H)，9.05(1H)，9.3(1H)，10.7(宽峰，1H)ppm.MSm/e ＝ 379(M++H)实施例372-(6-(4-正丁基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×HCl与实施例34类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝0.9-1.0(3H)，1.35(2H)，1.75(2H)，3.0-3.2(4H)，3.5-3.7(4H)，4.5-4.7 (2H)，7.25(1H)，7.55(1H)，7.8-8.0(3H)，8.5-8.7(2H)，9.15(1H)，11.4(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝378(M+)实施例382-(6-(哌啶-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝322(M++H)实施例392-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝308(M++H)实施例402-(6-(2-(吡咯烷-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝351(M++H)实施例412-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝323(M++H)实施例422-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝337(M++H)实施例432-(6-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝351(M++H)实施例44
2-(6-(2-(哌啶-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝365(M++H)实施例452-(6-(3-(N，N-二甲氨基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝367(M++H)实施例462-(6-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝394(M++H)实施例472-(6-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例34类似地进行合成。
MSm/e＝353(M++H)实施例482-(6-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氧基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×富马酸a)6-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氧基)吡啶甲酸叔丁酯将1.03g(8.82mmol)2-二乙氨基乙醇加入到25ml二甲基甲酰胺中。在室温下加入0.22g(9.26mmol)氢化钠(在白色油中的60％悬浮液)。在室温下搅拌30分钟后，滴加2.03g(8.882mmol)6-溴吡啶甲酸叔丁酯在20ml二甲基甲酰胺中的溶液。该反应混合物在室温下搅拌16小时。过量氢化钠用水分解后，将该反应混合物真空浓缩。残余物用快速色谱法纯化(甲苯/四氢呋喃/甲醇，4/1/1+2.5％三乙胺)。得到0.67g淡棕色油。
b)0.55g(2.07mmol)产物42a在7.5ml二噁烷和7.5ml 2M盐酸中的溶液在100℃下搅拌3小时。将该反应混合物真空浓缩，残余物在50℃下真空干燥，得到0.58g黄色树脂。
c)2-(6-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氧基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×富马酸0.49g(1.78mmol)产物42b和0.40g(1.78mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺与实施例24c类似地进行反应。将残余物溶于异丙醇，用富马酸沉淀出富马酸盐。得到40mg黄色粉末。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.1-1.3(6H)，3.1-3.25(4H)，3.4-3.5(2H)，4.85-5.0(2H)，7.05(1H)，7.4(1H)，7.8-8.0(4H)，8.1(1H)，9.3(宽峰，1H)，13.5(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝354(M++H)实施例492-(6-(2-(哌啶-1-基)乙-1-基氧基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺a)6-(2-(哌啶-1-基)乙-1-基氧基)吡啶甲酸乙酯×HCl1.50g(9mmol)6-羟基吡啶甲酸乙酯、1.33g(9mmol)2-氯乙基哌啶、2.49g(18mmol)碳酸钾和一刮勺尖量的18-冠醚-6在25ml二甲基甲酰胺中的混合物在120℃下搅拌6小时。除去固体后，将该反应混合物真空浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯，并加入1M盐酸醚溶液至混浊。用二乙醚沉淀出盐酸盐。过滤并用四氢呋喃洗涤后，残余物在35℃下真空干燥。得到1.97g白色结晶。
b)6-(2-(哌啶-1-基)乙-1-基氧基)吡啶甲酸1.77g(5.62mmol)产物43a在25ml乙醇中与25ml 2M氢氧化钠溶液一起在室温下搅拌过夜。将该反应混合物与25ml 2M盐酸混合，然后真空浓缩。残余物用二甲基甲酰胺萃取，将滤液真空浓缩。将残余物溶于少量乙醇，产物用二乙醚沉淀。得到1.13g米色粉末。
c)2-(6-(2-(哌啶-1-基)乙-1-基氧基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×1/2富马酸1.08g(4.31mmol)产物43b和0.97g(4.31mmol)2，3-二氨基苯甲酰胺与实施例24c类似地进行反应。利用快速色谱法进行纯化(甲苯/四氢呋喃/甲醇，4/1/1+2.5％三乙胺)。将以这种方式得到的粗产物溶于异丙醇，用富马酸沉淀出半富马酸盐。得到0.71g米色结晶。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.35-1.45(2H)，1.45-1.6(4H)，1.55-1.75(4H)，1.85-1.95(2H)，4.6-4.75(2H)，6.6(1H)，7.0(1H)，7.4(1H)，7.8-7.95(4H)，8.05(1H)，9.3(1H)ppm.MSm/e＝366(M++H)实施例502-(6-(3-(N-苄基-N-甲氨基)丙-1-基氧基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例49类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝2.3-2.4(2H)，2.7(3H)，4.3-4.5(4H)，4.6-4.7(2H)，7.0(1H)，7.35-7.45(4H)，7.55-7.65(2H)，7.8-8.0(4H)，8.1-8.15(1H)，9.1(1H)，11.0(1H)ppm.MSm/e＝416(M++H)实施例512-(6-(3-(N，N-二乙氨基)丙-1-基氧基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例49类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.2-1.3(6H)，2.15-2.25(2H)，3.1-3.4(6H)，4.6-4.7(2H)，7.0(1H)，7.4(1H)，7.8-8.0(4H)，8.1(1H)，9.2(1H)，10.0(宽峰，1H)ppm.MSm/e＝368(M++H)
实施例522-(6-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-基氧基)吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×2富马酸与实施例49类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.9-2.0(2H)，2.25(3H)，3.3-3.6(10H)，4.5-4.6(2H)，6.6(4H)，7.0(1H)，7.45(1H)，7.8(1H)，7.9-7.95(2H)，8.0(1H)，9.3(1H)ppm.Msm/e＝395(M++H)实施例532-(6-(3-(N，N-二乙氨基)丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×HCl与实施例49类似地进行合成。1H-NMR(D6-DMSO)δ＝1.2-1.3(6H)，2.1-2.25(2H)，3.1-3.25(6H)，4.4-4.5(2H)，7.1(1H)，7.4(1H)，7.7-7.8(2H)，7.9(1H)，8.6(1H)，9.05(1H)，9.1(1H)，10.3(1H)ppm.MSm/e＝367(M++H)实施例542-(6-(苄氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例49类似地进行合成。
MSm/e＝345(M++H)实施例552-(6-(3-(N-苄基-N-甲氨基)丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例49类似地进行合成。
MSm/e＝416(M++H)实施例562-(6-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例49类似地进行合成。
MSm/e＝395(M++H)实施例572-(6-(2-哌啶-乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例49类似地进行合成。
MSm/e＝366(M++H)实施例582-(6-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺×HCl与实施例49类似地进行合成。
MSm/e＝254(M++H)实施例592-(6-(4-苄基氨基苯氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺与实施例49类似地进行合成。
MSm/e＝436(M++H)实施例60-133的合成利用下列一般方法以自动平行合成进行将醛(0.2mmol)和2，3-二氨基苯甲酰胺(0.2mmol)与Na2S2O5(0.26mmol)一起加入到5ml二甲基甲酰胺中并在140℃下搅拌2小时。将真空除去溶剂后的残余物溶于二氯甲烷并用水和1N含水HCl洗涤。含水HCl相用饱和碳酸氢钠溶液中和并用二氯甲烷萃取。将有机相真空浓缩，粗产物然后用色谱法纯化。
实施例602-(2-(4-甲基苯基)噁唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝319(M++H)实施例612-(1-(4-氟苯基)-5-甲基吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝336(M++H)
2-(2-甲基吲哚-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝291(M++H)实施例762-(3-苯基吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝304(M++H)实施例772-(6-甲氧羰基吲哚-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝335(M++H)实施例782-(2-乙基咪唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝255(M++H)实施例792-(4-(2，6-二氟苯基-1-羰基)-1-甲基吡咯-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝381(M++H)实施例802-(4-(4-氟苯基-1-羰基)-1-甲基吡咯-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝363(M++H)实施例812-(1-甲基-4-(苯基-1-羰基)吡咯-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝345(M++H)实施例822-(1-(4-氯苯基)吡咯-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝338(M++H)
2-(吲哚-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝277(M++H)实施例902-(1-(4-氯-2-硝基苯基)吡咯-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝385(M++H)实施例912-(6-甲基吡啶-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝253(M++H)实施例922-(1-(苄基氨基羰基甲基)吡咯-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝374(M++H)实施例932-(4-甲基-5-(4-三氟甲基苯基)异噁唑-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝387(M++H)实施例942-(1-苯基吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝304(M++H)实施例952-(1-(4-氯苯基)吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝339(M++H)实施例96
2-(5-甲基-1-苯基吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝318(M++H)实施例972-(1-(3-氰基-4-甲氧基吡啶-2-基)吡咯-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝359(M++H)实施例982-(1-(4-甲苯磺酰基)吲哚-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝431(M++H)实施例992-(5-甲氧基吲哚-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝307(M++H)实施例1002-(2-苯基咪唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝304(M++H)实施例1012-(1-(2-硝基苯基磺酰基)吡咯-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝412(M++H)实施例1022-(4-溴-1-(4-氯苯基甲基)吡唑-5-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝431(M++H)实施例1032-(2-(4-氟苯基羰基)苯并呋喃-5-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝400(M++H)
MSm/e＝242(M++H)实施例1112-(1-(2-氯苯基)-5-三氟甲基吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝407(M++H)实施例1122-(1-(2，4-二氯苯基)-5-三氟甲基吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝441(M++H)实施例1132-(1-叔丁基吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝284(M++H)实施例1142-(5-甲基咪唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝242(M++H)实施例1152-(4-氯-5-硝基苯并噻吩-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝374(M++H)实施例1162-(1-二甲氨基-3-甲氧基异喹啉-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝362(M++H)实施例1172-(1-苯二酰亚氨基丁基吲哚-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝478(M++H)
实施例1322-(1-(4-甲氧基苯基)-5-三氟甲基吡唑-4-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝402(M++H)实施例1332-(4-甲基-5-苯基异噁唑-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺MSm/e＝319(M++H)本发明的下列化合物可以用上文中所述的方法类似地制备1、2-吡啶-2-基苯并咪唑-4-甲酰胺2、2-(2-(2-(N，N-二甲氨基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺3、2-(2-(2-吡咯烷-1-基乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺4、2-(2-(2-哌啶-1-基乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺5、2-(2-(2-高哌啶-1-基乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺6、2-(2-(2-(4-苯基哌啶-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺7、2-(2-(2-哌嗪-1-基-乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺8、2-(2-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺9、2-(2-(2-(4-苄基哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺10、2-(2-(2-(N，N-二甲氨基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺
11、2-(2-(2-吡咯烷-1-基乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺12、2-(2-(2-哌啶-1-基乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺13、2-(2-(2-高哌啶-1-基乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺14、2-(2-(2-(4-苯基哌啶-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺15、2-(2-(2-哌嗪-1-基乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺16、2-(2-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺17、2-(2-(2-(4-苄基哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺18、2-(2-(3-(N，N-二甲氨基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺19、2-(2-(3-吡咯烷-1-基丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺20、2-(2-(3-哌啶-1-基丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺21、2-(2-(3-高哌啶-1-基丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺22、2-(2-(3-(4-苯基哌啶-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺23、2-(2-(3-哌嗪-1-基丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺24、2-(2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺25、2-(2-(3-(4-苄基哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺26、2-喹喔啉-2-基苯并咪唑-4-甲酰胺27、2-苯并呋喃-2-基苯并咪唑-4-甲酰胺28、2-苯并三唑-5-基苯并咪唑-4-甲酰胺29、2-噻唑-2-基苯并咪唑-4-甲酰胺30、2-哒嗪-4-基苯并咪唑-4-甲酰胺31、2-(1-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基)吡咯-2-基)苯并咪唑-4-甲酰胺32、2-(4-羟基吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺33、2-(4-甲氧基吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺34、2-(4-苄氧基吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺35、2-(4-(2-(N，N-二甲氨基)乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺36、2-(4-(2-(N，N-二乙氨基)乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺37、2-(4-(3-(N，N-二甲氨基)丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺38、2-(4-(3-(N，N-二乙氨基)丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺39、2-(4-(2-吡咯烷-1-基乙-1-基)羟吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺40、2-(4-(3-吡咯烷-1-基丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺41、2-(4-(2-哌啶-1-基乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺42、2-(4-(3-哌啶-1-基丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺43、2-(4-(2-哌嗪-1-基乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺
44、2-(4-(3-哌嗪-1-基丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺45、2-(4-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺46、2-(4-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺47、2-(4-(2-(4-苄基哌嗪-1-基)乙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺48、2-(4-(3-(4-苄基哌嗪-1-基)丙-1-基氧基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺49、2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺50、2-(4-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺51、2-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺52、2-(4-(4-丁基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺53、2-(6-(3-(N，N-二甲氨基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺54、2-(6-((3-(N，N-二甲氨基)丙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺55、2-(6-(2-(N，N-二甲氨基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺56、2-(6-((2-(N，N-二甲氨基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺57、2-(6-(3-(哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺58、2-(6-(3-(4-乙基哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺59、2-(6-(3-(4-苄基哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺60、2-(6-((3-(哌嗪-1-基)丙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺61、2-(6-((3-(4-乙基哌嗪-1-基)丙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺62、2-(6-((3-(4-苄基哌嗪-1-基)丙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺63、2-(6-(3-(高哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺64、2-(6-(3-(4-甲基高哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺65、2-(6-(3-(4-乙基高哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺66、2-(6-(3-(4-苄基高哌嗪-1-基)丙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺67、2-(6-((3-(高哌嗪-1-基)丙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺68、2-(6-((3-(4-甲基高哌嗪-1-基)丙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺69、2-(6-((3-(4-乙基高哌嗪-1-基)丙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺70、2-(6-((3-(4-苄基高哌嗪-1-基)丙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺71、2-(6-(2-(哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺72、2-(6-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺73、2-(6-(2-(4-乙基哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺74、2-(6-(2-(4-苄基哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺
75、2-(6-((2-(哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺76、2-(6-((2-(甲基哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺77、2-(6-((2-(4-乙基哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺78、2-(6-((2-(4-苄基哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺79、2-(6-(2-(高哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺80、2-(6-(2-(4-甲基高哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺81、2-(6-(2-(4-乙基高哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺82、2-(6-(2-(4-苄基高哌嗪-1-基)乙-1-基氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺83、2-(6-((2-(高哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺84、2-(6-((2-(4-甲基高哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺85、2-(6-((2-(4-乙基高哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺86、2-(6-((2-(4-苄基高哌嗪-1-基)乙-1-基)甲氨基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺87、2-(6-(高哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺88、2-(6-(4-甲基高哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺89、2-(6-(4-乙基高哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺90、2-(6-(4-丙基高哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺91、2-(6-(4-丁基高哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺
92、2-(6-(4-叔丁基高哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺93、2-(6-(4-苯基高哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺94、2-(6-(4-苄基高哌嗪-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺95、2-(6-(高哌啶-1-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺96、2-(6-(吗啉-4-基)吡啶-3-基)苯并咪唑-4-甲酰胺
权利要求
1.式I或式II化合物 其中A是萘、单环芳族、二环和三环芳族或部分芳族杂环系统，其中环体系包含最多15个碳原子和不超过4个选自N、O、S的杂原子，且环另外可带有最多2个桥氧基，且A还可被最多3个不同或相同的R3基以及1个R4基取代，和R1是氢、氯、氟、溴、碘、支链和直链C1-C6烷基、OH、硝基、CF3、CN、NR11R12、NH-CO-R13、O-C1-C4烷基，其中R11和R12彼此独立地为氢或C1-C4烷基，而R13是氢、C1-C4烷基、C1-C4烷基-苯基或苯基，和R2是氢、支链和直链C1-C6烷基，和R3是氢、氯、溴、碘、氟、CF3、OCF3、硝基、NH2、CO-R8、CO2-R8、SO2-R8、OH、O-C1-C4烷基、O-C0-C4-烷基-苯基、饱和、不饱和或部分不饱和的且还可被R33基取代的C1-C6链、苯基，此时苯环还可被最多3个相同或不同的R31基取代、以及可被最多3个R32基取代的吡啶基，和R31是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2，和R32是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2、CN，和R33是CO-NH-R8、OH、O-C1-C6烷基、O-CO-R8，和R4是氢和-(D)p-(E)s-(CH2)q-B，其中D是S、NR43和OE是苯基，和s是0和1，和B是NR41R42和 和p可以是0和1，和q可以是0、1、2、3或4，和R41可以是氢、C1-C6烷基、(CH2)r-G，和R42可以是氢、C1-C6烷基、-CO-R8、SO2-R8、CO2-R8、-(C＝NH)-R8和-(C＝NH)-NHR8，和R41和R42可以形成邻苯二甲酰基，和R43可以是氢和C1-C4烷基，和r可以是0、1、2、3、4，和G可以是还可带有最多2个R基的苯基、NR11R12、NH-C1-C4烷基-苯基、吡咯烷、哌啶、1，2，5，6-四氢吡啶、吗啉、高哌啶、还可被C1-C6烷基取代的哌嗪、以及还可被C1-C6烷基取代的高哌嗪，和R7可以是氢、C1-C6烷基、苯基，环上还可能被最多2个R71基取代，和R71可以是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2，和R8可以是C1-C6烷基、CF3、NR11R12、苯基、C1-C4烷基-苯基，环上还可能被最多2个R81基取代，和R81可以是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2，和R9可以是氢、CO-R8、SO2-R8、CO2-R8、C1-C6烷基、C1-C4烷基-苯基和苯基，苯环上还可能被最多2个R91基取代，和R91可以是OH、C1-C6烷基、O-C1-C4烷基、氯、溴、碘、氟、CF3、硝基、NH2，及其互变异构形式，可能的对映和非对映形，以及其药物前体。
2.如权利要求1所述的式I或式II化合物，其中R1可以是氢，和R2可以是氢和C1-C4烷基，和D可以是NR43和O，和p可以是0和1，和s可以是0，和当p为0时，q可以是0、1和2，或者当p为1时，q可以是2和3，和R42和R43可以彼此独立地为氢和C1-C4烷基，和R7可以是氢和苯基，和R9可以是氢、C1-C4烷基和C0-C4烷基-苯基。
3.如权利要求1或2所述的式I或式II化合物，其中A具有下列含义吲哚、苯并咪唑、吡咯、咪唑、呋喃、噻吩、苯并噻吩、苯并呋喃、吡唑、噻唑、苯并噻唑、邻苯二甲酰亚胺、吲唑、苯并三唑、酞嗪、二氢吲哚、异二氢吲哚、吡啶、喹啉、嘧啶、哒嗪、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、萘、异噁唑、噁唑、咪唑并吡啶、吡嗪。
4.如权利要求2所述的式I或式II化合物，其中A具有下列含义吡啶、噻吩、噻唑、呋喃、吲哚、噁唑、吡唑、吡咯、苯并呋喃、咪唑、苯并噻吩、异噁唑、吡嗪、嘧啶、哒嗪、喹啉，且杂环系统可以被最多3个R3基和1个R4基取代，其中R3是氢、氯、溴、碘、氟、COR8、RO2R8、SO2R8、C1-C4烷基-苯基、饱和、不饱和或部分不饱和的且还可被O-CO-R8基取代的C1-C6链，苯基，此时苯环还可被最多3个相同或不同的R31基取代、以及可被最多3个相同或不同的R32基取代的吡啶基，和R4是氢和(D)p-(E)s-(CH2)q-B，但R3和R4不同时为氢。
5.如权利要求2所述的式I或式II化合物，其中A具有下列含义吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、喹啉、噻唑、噻吩、吡咯和吡唑，且杂环系统可以被R3基和R4基取代，其中R3是氢、氯、溴、碘、氟、C1-C4烷基，和R4是(D)p-(E)s-(CH2)q-B。
6.如权利要求2所述的式I或式II化合物，其中A可以是吡啶、噻吩和噻唑，且杂环系统被R4基取代，其中R4是(D)p-(E)s-(CH2)q-B，而R3是氢。
7.一种药物，它包含权利要求1-3任一项所述的化合物以及常规载体和赋形剂。
8.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗神经变性疾病和神经元损害的药物中的用途。
9.如权利要求8所述的用途，用于治疗因局部缺血、外伤或大量出血导致的神经变性疾病和神经元损害。
10.如权利要求8所述的用途，用于治疗中风和颅脑外伤。
11.如权利要求8所述的用途，用于治疗早老性痴呆、帕金森氏病和杭廷顿氏舞蹈病。
12.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗或预防因局部缺血引起的损害的药物中的用途。
13.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗癫痫，特别是普遍性癫痫发作，诸如象小发作和强直阵挛性癫痫发作和部分癫痫发作诸如颞叶性和复杂的部分癫痫发作的药物中的用途。
14.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗肾局部缺血后的肾脏损害和用于肾移植过程中和之后的治疗的药物中的用途。
15.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗心局部缺血后的心脏损害的药物中的用途。
16.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗诸如象在心脏瓣膜置换、动脉瘤切除和心脏移植过程中和之后出现的微梗塞的药物中的用途。
17.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗与临界狭窄冠状动脉的再血管形成诸如象在PTCA和旁路手术中出现的或临界狭窄外周动脉尤其是腿动脉的再血管形成有关的疾病的药物中的用途。
18.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗急性心肌梗死及其医学或机械溶解过程中和之后出现的损害的药物中的用途。
19.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗肿瘤及其转移的药物中的用途。
20.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗脓毒症和脓毒性休克的药物中的用途。
21.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗免疫学疾病诸如炎症和风湿性疾病诸如象类风湿性关节炎的药物中的用途。
22.权利要求1-6任一项所述的式I或式II化合物在生产用于治疗糖尿病的药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及新颖的苯并咪唑,它们的制备以及它们作为聚(ADP－核糖)聚合酶或PARP(EC 2.4.2.30)酶抑制剂用于生产药物的用途。
文档编号A61P13/12GK1353695SQ00808364
公开日2002年6月12日 申请日期2000年4月27日 优先权日1999年5月7日
发明者W·鲁比什, M·考克, T·霍格, R·格兰戴尔, U·霍尔赞坎普, S·舒尔茨, R·穆勒 申请人:巴斯福股份公司