专利名称：柑桔多甲氧基黄酮抗癌药物组合物及其制备的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含有柑桔多甲氧基黄酮的抗癌药物组合物，具体地说，该药物组合物含有柑桔果实和柑桔皮中所特有的三种多甲氧基黄酮单一成分或它们的混合物作为抗癌活性成分，加入药学上可接受的赋形剂和/或添加剂，制备成药物组合物。
柑桔果实是人们普遍食用的一种水果。柑桔皮在中国传统医药学中入药称为陈皮，性味辛、苦、温，功用理气健脾，燥湿化痰，用于胸脘胀满，食少吐泻，咳嗽痰多(中华人民共和国卫生部药典委员会编，中华人民共和国药典2000年版一部 第147页 化学工业出版社2000年北京)，1993年被国家卫生部批准为食药两用品种，在食品和中成药中广泛使用。近代研究发现柑桔皮含有挥发油、黄酮、生物碱及苦味质等成分，黄酮是主要的生物活性成分，药理研究认为其具有抗炎和增强毛细血管通透性的作用(黄泰康主编，常用中药成分与药理活性手册，第1137页 中国医药科技出版社 1994年，北京)。目前正在临床使用的以橙皮甙为主要成分的橙皮甙片，是用于治疗和预防高血压、脑溢血或其它出血性疾病的药物。
近年来发现柑桔中多甲氧基黄酮有抗癌作用，其中3′，4′，5，6，7-五甲氧基黄酮(桔皮晶，tangeretin)、3′，4′，5，6，7，8-六甲氧基黄酮(川陈皮素，nobiletin)和3，3′，4′，5，6，7，8-七甲氧基黄酮(七甲氧基黄酮，heptamethoxyflavone)或它们的混合物有抑制肿瘤细胞生长的作用(Mizuo Mizuno，et al.Chem.Pharm.Bull.1991 39(4)945-949；Satoko Suhiyama，et al. Chem.Pharm.Bull 1993，41(4)714-719；Bracke M E.，et al.Food Technol.，1994，48121)这些研究提出柑桔及其制品，如桔汁，有可能成为预防和治疗癌症的保健食品。
本发明的目的是将3′，4′，5，6，7-五甲氧基黄酮或3′，4′，5，6，7，8-六甲氧基黄酮或3，3′，4′，5，6，7，8-七甲氧基黄酮或它们的混合物作为活性成分，按照生物活性试验提供的有效抗癌剂量，加入赋形剂制备成抗癌药物组合物。
本发明的目的是通过如下措施，来制备含有3′，4′，5，6，7-五甲氧基黄酮或3′，4′，5，6，7，8-六甲氧基黄酮或3，3′，4′，5，6，7，8-七甲氧基黄酮或它们的两种或两种以上的混合物及药用载体和/或赋形剂的抗癌药物组合物。
将柑桔果实榨汁或柑桔皮粉碎，用水或不同极性的有机溶剂提取，提取液过滤、浓缩。浓缩液再用不同极性的有机溶剂提取、分离、精制，用高效液相色谱仪(HPLC)进行分析定量，得到含有不同浓度的3′，4′，5，6，7-五甲氧基黄酮或3′，4′，5，6，7，8-六甲氧基黄酮或3，3′，4′，5，6，7，8-七甲氧基黄酮或它们两种或两种以上不同比例的混合物，作为本发明抗癌药物组合物的活性成分。
提取、分离、精制所用的有机溶剂可以是乙醇、甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、乙醚、石油醚、丙酮或它们的两种或两种以上的任意比例混合物。
将人工合成的3′，4′，5，6，7-五甲氧基黄酮或3′，4′，5，6，7，8-六甲氧基黄酮或3，3′，4′，5，6，7，8-七甲氧基黄酮或它们两种或两种以上不同比例的混合物，作为本发明抗癌药物组合物的活性成分。
将柑桔果实或柑桔皮制备的活性成分和人工合成的活性成分，参照抗癌生物活性试验的得出的抗癌有效浓度，配制本发明的抗癌药物组合物。
柑桔果实或柑桔皮制备的活性成分和人工合成的活性成分可以加入药学上可接受的载体和/或赋形剂，这些载体和/或赋形剂可包括稀释剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、增溶剂、助溶剂、稳定剂，乳化剂、促渗剂。根据药物组合物的不同剂型，如注射剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服溶液剂，喷雾剂、软膏剂、凝胶剂，选用各种剂型常规使用的载体和/或赋形剂，制成本发明的抗癌药物组合物。
本发明的抗癌药物组合物的活性成分是食物中的成分，与现有抗癌药相比具有安全有效的特点。
以下用实施例进一步阐述本发明。
实施例1福建永春芦柑皮500g粉碎，加95％乙醇1000ml提取两次，提取液合并过滤，减压浓缩，浓缩液用200ml石油醚提取三次，提取液合并，减压浓缩，得多甲氧基黄酮混合物15g。用高效液相色谱仪进行定量分析，样品含有3′，4′，5，6，7-五甲氧基黄酮14.3％，3′，4′，5，6，7，8-六甲氧基黄酮10.5％，3，3′，4′，5，6，7，8-七甲氧基黄酮8.4％。
实施例2福建永春芦柑皮500g粉碎，加甲醇1000ml提取两次，提取液合并过滤，减压浓缩，浓缩液用200ml石油醚提取三次，提取液合并，减压浓缩，得多甲氧基黄酮混合物13g。用高效液相色谱仪进行定量分析，样品含有3′，4′，5，6，7-五甲氧基黄酮11.4％，3′，4′，5，6，7，8-六甲氧基黄酮13.2％，3，3′，4′，5，6，7，8-七甲氧基黄酮10.8％。
实施例3福建永春芦柑300g榨汁，汁液加入乙酸乙酯400ml和石油醚800ml混合，剧烈振摇10分钟，离心分离，弃去水相，有机相减压浓缩，得多甲氧基黄酮混合物8g。用高效液相色谱仪进行定量分析，样品含有3′，4′，5，6，7-五甲氧基黄酮9.8％，3′，4′，5，6，7，8-六甲氧基黄酮11.6％，3，3′，4′，5，6，7，8-七甲氧基黄酮15.1％。
实施例4多甲氧基黄酮混合物 50mg丙二醇 10ml将多甲氧基黄酮混合物溶于丙二醇中，按注射液常规制备工艺制成注射液。
实施例5多甲氧基黄酮混合物 100mg微晶纤维素 30mg淀粉60mg羧甲基淀粉钠20mg硬脂酸镁5mg
按片剂常规制备工艺制成片剂。
生物活性试验例采用HL-60人白血病细胞株、BGC-823人胃癌细胞株、Hela人宫颈癌细胞株，用10％胎牛血清的RPMI-1640培养基(每毫升含100微克青霉素和100微克链霉素)传代，在动物细胞培养箱中培养。
1.癌细胞株HL-60人白血病测试方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法试验药品实施例1多甲氧基黄酮混合物药物浓度5μg，10μg结果细胞增殖抑制率72％，85％2.癌细胞株BGC-823人胃癌测试方法SRB法试验药品实施例1多甲氧基黄酮混合物药物浓度5μg，10μg结果细胞增殖抑制率63％，78％3.癌细胞株HL-60人白血病测试方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法试验药品实施例3多甲氧基黄酮混合物药物浓度5μg，10μg结果细胞增殖抑制率76％，87％4.癌细胞株Hela人宫颈癌测试方法SRB法试验药品实施例3多甲氧基黄酮混合物药物浓度5μg，10μg结果细胞增殖抑制率71％，82％
权利要求
1.一种抗癌药物组合物，其特征是含有下列柑桔多甲氧基黄酮类活性成分3′，4′，5，6，7-五甲氧基黄酮(桔皮晶，tangeretin)或3′，4′，5，6，7，8-六甲氧基黄酮(川陈皮素，nobiletin)或3，3′，4′，5，6，7，8-七甲氧基黄酮(七甲氧基黄酮，heptamethoxyflavone)或它们的两种或两种以上的混合物及药用载体和/或赋形剂。
2.根据权利要求1所述药物组合物，其特征是所含柑桔多甲氧基黄酮类活性成分可以是从柑、桔、橙果实或果皮提取制备的，也可以是人工合成的。
3.根据权利要求2所述药物组合物的柑桔多甲氧基黄酮类活性成分，如果是提取制备的，其特征是从柑、桔、橙果实或果皮中用有机溶剂、含水有机溶剂或水提取制备的。
4.根据权利要求3所述药物组合物的制备方法中，所述有机溶剂是指乙醇、甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、乙醚、石油醚、丙酮或它们的两种或两种以上的任意比例混合物。
5.根据权利要求1所述药物组合物的柑桔多甲氧基黄酮类活性成分，其特征是含有抗癌有效量的桔皮晶或川陈皮素或七甲氧基黄酮或它们的两种或两种以上的混合物。
6.根据权利要求5所述药物组合物，其剂型包括，但不限于针剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服溶液剂、喷雾剂、软膏剂、凝胶剂。
全文摘要
本发明涉及一种含有柑桔多甲氧基黄酮的抗癌药物组合物及其制备，该药物组合物含有从柑桔中提取的或人工合成的3′，4′，5，6，7－五甲氧基黄酮或3′，4′，5，6，7，8－六甲氧基黄酮或3，3′，4′，5，6，7，8－七甲氧基黄酮或它们的混合物作为抗癌活性成分，加入载体和/或赋形剂制备成药物组合物。
文档编号A61K31/352GK1436528SQ0211263
公开日2003年8月20日 申请日期2002年2月5日 优先权日2002年2月5日
发明者郭萍 申请人:南京凯优科贸有限公司