用于治疗动脉粥样硬化的双膦酸类化合物和包含它们的装置的制作方法

专利名称：用于治疗动脉粥样硬化的双膦酸类化合物和包含它们的装置的制作方法
技术领域：
本发明涉及双膦酸类化合物的新的治疗用途和包含双膦酸类化合物的治疗装置。
双膦酸类化合物在多种涉及过量或不适当的骨再吸收的良性和恶性疾病中被广泛用于抑制破骨细胞的活性。这些焦磷酸类似物不仅可减少骨骼相关性事件的发生，而且为患者提供了临床益处并提高存活率。双膦酸类化合物能够防止体内的骨再吸收；双膦酸类化合物的治疗功效已经在骨质疏松、骨量减少、Paget′s骨病、肿瘤诱导的高钙血症(TIH)以及更近期地在骨转移(BM)和多发性骨髓瘤(MM)的治疗中得以证明(综述参见Fleisch H 1997，“双膦酸类化合物的临床”，《骨疾病中的双膦酸类化合物由实验室到患者》，EdsThe Parthenon出版集团，纽约/伦敦，第68-163页)。双膦酸类化合物抑制骨再吸收的机理尚不完全了解，并且似乎依所研究的双膦酸类化合物而异。已经显示双膦酸类化合物可强烈地结合骨羟基磷灰石晶体、减少骨代谢回转和再吸收以及降低血中羟基脯氨酸或碱性磷酸酶水平，另外还可抑制破骨细胞的形成、补充、激活和活性。最近，法呢双磷酸合酶——胆固醇生物合成甲羟戊酸途径中的一种酶——被鉴定为含氮双膦酸类化合物的分子靶标(综述于Rogers MJ，Gordon S，BenfordHL，Coxon FP，Luckman SP，Monkkonen J，Frith JC.2000.“双膦酸类化合物作用的细胞和分子机理”，Cancer 88(增刊)2961-2978)。
有关血管和骨疾病之间联系的证据正不断积累钙化是动脉粥样硬化斑的普遍特征，并且骨质疏松与动脉粥样硬化和血管钙化有关。已经发现了冠脉钙化和低骨矿物密度之间的相关性(Barengolts EI，Berman M，Kukreja SC，Kouznetsova T，Lin C，Chomka EV，“无症状绝经后妇女中的骨质疏松和冠状动脉粥样硬化”，Calcif Tissue Int.1998 62209-13)以及颈动脉粥样硬化斑程度和低骨矿物质密度之间的相关性(Uyama O，Yoshimoto Y，Yamamoto Y，Kawai A，“绝经后妇女中骨改变和颈动脉粥样硬化”，Stroke.1997 281730-2)。纵向研究已经表明骨丧失程度最高的患者的主动脉钙化进展也最严重(Kiel DP，Kauppila LI，Cupples LA，Hannan MT，O′Donnell CJ，Wilson PW，“25年内骨损失和腹部主动脉钙化的进展Framingham心脏研究，Calcif Tissue Int.200168271-6)。此外，Singleton-Merten综合征患者同时表现出进行性骨质疏松和进行性主动脉和瓣膜钙化(Singleton EB，Merten DF，“掌骨和指(趾)骨的髓腔变宽、主动脉钙化和异常出牙的不寻常综合症”，Pediatr Radiol.197312-7)。动脉粥样硬化病变与骨骼骨具有共同特征，包括存在重要的骨基质蛋白(骨粘连蛋白、骨钙蛋白、骨桥蛋白)以及frank bone(Doherty TM，Uzui H，Fitzpatrick LA，Tripathi PV，Dunstan CR，Asotra K，Rajavashisth TB，“动脉钙化中类破骨细胞的作用原理”，FASEB J.200216577-82；Watson KE，Demer LL，“动脉粥样硬化-钙化相关 ”，Curr Opin Lipidol.1996 7101-4)。然而，动脉粥样硬化和骨质疏松之间的关系以及血管钙化和动脉粥样硬化的发病机理之间的关系尚不完全了解。
许多人患有由灌注主要器官如心脏、肝脏、肾脏和脑的血管的进行性阻塞导致的循环疾病。这些人中血管的严重阻塞常常导致例如缺血性损伤、高血压、中风或心肌梗死。限制或阻碍冠脉或外周血流的动脉粥样硬化病变是与发病和死亡相关的以下缺血性疾病的主要原因冠心病、中风、动脉瘤和外周性跛行。为了中止疾病过程并防止其中心肌或其它器官受累的更严重的疾病状态，使用了或通过血管腔应用或通过血管的外部/外膜方面应用的医学再血管化术如经皮腔内冠状血管成形术(PCTA)、经皮腔内血管成形术(PTA)、支架术、动脉粥样斑切除术和其他类型的基于导管的再血管化/疾病位点的局部药物递送技术，以及旁路移植。通过超声激活含有药物的微泡为再血管化过程中局部药物递送提供了非侵入性理念。
除了先天动脉中可见的增殖性狭窄/堵塞外，导致血流堵塞/减少的类似腔损伤过程也发生于旁路移植物内、移植物的吻合点、用于营造透析通路的血管中以及静脉中。因此，再血管化术如血管成形术和/或支架术和/或其他类型的基于导管的局部递送也用于这些病理状况中。
各种再血管化术后动脉粥样硬化性冠状动脉的再狭窄发生于经历该治疗的10-80％患者中，这取决于所用的方法和动脉部位。此外，打开被动脉粥样硬化、再血管化堵塞的动脉还损伤血管壁内的内皮细胞和平滑肌细胞，从而引起血栓形成和炎症反应。细胞源性生长因子如血小板源性生长因子、浸润性巨噬细胞、白细胞或平滑肌细胞自身引起平滑肌细胞中的增殖性和迁移性反应。在局部增生和迁移的同时，炎性细胞还侵入血管损伤部位并可迁移到血管壁的更深层。增殖/迁移通常始于损伤后一到两天，并随所用的再血管化术的不同持续数天到数周。动脉粥样硬化病灶和血管中层内的细胞可迁移、增殖和/或分泌大量胞外基质蛋白。增殖、迁移和胞外基质合成持续直至受损的内皮层被修复，此时内膜中的增殖减慢。新形成的组织被称为新内膜、内膜增厚或再狭窄病变，并通常导致血管腔变窄。由于构造性重构、例如血管重构，可能发生进一步腔变窄，导致进一步内膜增厚或增生。
因此，需要有效的治疗和药物递送系统，以防止和治疗损伤、例如血管损伤、包括例如手术损伤、例如再血管化诱导的损伤后发生的以及例如心脏或其他移植物中的内膜增厚或再狭窄。
因此，本发明的一个目的是提供含有药物的医学装置，其可在该装置的包衣表面或附近持续递送药物或足够的药学活性。
本发明的另一个目的是提供具有稳定的复合药物包衣的医学装置和制备这种装置的方法。
此外，本发明的一个目的是提供药物释放包衣支架或医学装置，以将该药物定时或长期应用于身体组织。本发明的另一个目的是提供制备药物释放医学装置的方法，该装置允许定时递送或长期递送药物。因此，需要改进的生物相容性复合药物包衣，其可增强可移植医学装置表面的生物稳定性、耐磨损性、润滑性和生物活性，特别是含有热敏感性生物分子的复合药物包衣。具体而言，需要改进的、低成本的复合药物包衣和装置，其具有抗动脉粥样硬化和/或抗血栓形成和/或抗再狭窄和/或抗炎性质，并需要提供该复合药物包衣和装置的更有效的方法。本发明旨在满足这些和其他需求。
现已令人惊讶地发现双膦酸类化合物、尤其是唑来膦酸(zoledronicacid)任选地以及其他活性化合物、例如具有mTOR抑制性质的化合物或具有抗炎性质的化合物，可用于治疗动脉粥样硬化，并且当局部应用于动脉粥样硬化病变部位时尤其具有有益效果。
特别地，已经发现唑来膦酸令人惊讶地非常适于自基于导管的装置、腔内医学装置或应用于血管外部/外膜方面的装置递送、特别是受控递送。药学上可接受的聚合物不会改变或不会对唑来膦酸的治疗性质产生不利影响。相反，唑来膦酸在任何药学上可接受的聚合物中于体温下、人血浆中尤其稳定，允许在包衣支架中出乎意料地长期保存。唑来膦酸尤其非常适应是因为其易于通过聚合物固定于医学装置中，且可容易地控制其从包衣释放到身体组织的速度。此外，唑来膦酸包衣支架允许长期递送药物。尤其值得一提的是控制唑来膦酸包衣支架的生物有效性，以获得与液体制剂相同的生物学效果。
此外，现已发现唑来膦酸对动脉粥样硬化和移植后再狭窄和狭窄、尤其是动脉粥样硬化和再血管化后的再狭窄具有有益效果。
因此，本发明的第一方面提供了在需要这种治疗的患者中治疗动脉粥样硬化的方法，该方法包括向该患者施用有效量的双膦酸类化合物。
在该方面，本发明还提供了双膦酸类化合物在制备用于治疗动脉粥样硬化的药物中的用途。
在该方面，本发明还提供了双膦酸类化合物用于治疗哺乳动物中与疾病或病理状况相关的动脉粥样硬化的用途。
在该方面，本发明甚至还提供了双膦酸类化合物用于治疗与肾衰竭相关的钙化的用途。
本发明尤其可应用于防止和治疗血管、例如动脉以及瓣膜、例如心脏瓣膜的动脉粥样硬化性钙化。
除了抑制骨再吸收，双膦酸类化合物还可有利地抑制并甚至可能逆转哺乳动物中与疾病或病理状况相关的血管生成(WO 00/7114)。因此，用双膦酸类化合物治疗动脉粥样硬化斑患者可有利地导致对可导致血栓形成等、与斑不稳定和破裂相关的血管生成的抑制。此外，抑制钙化、尤其是抑制钙化结节形成，可抑制或减少斑不稳定和破裂(Prog Cardiovasc Dis.2002 44349-56)。
因此，在一个具体实施方案中，本发明包括双膦酸类化合物治疗稳定动脉粥样硬化斑并从而降低心肌梗死、猝死和中风的危险的用途。
在本说明书中，术语“治疗”指预防性或防止性治疗以及治愈性或减轻性治疗动脉粥样硬化，尤其是防止和治疗动脉和瓣膜的动脉粥样硬化性钙化，和稳定动脉粥样硬化斑、优选导致心肌梗死、猝死、急性冠脉综合征、外周动脉性跛行和中风危险的降低。此外，本发明还尤其包括治疗和防止中空管中平滑肌细胞的增殖和迁移或细胞增殖增加或凋亡减少或基质沉积增加，以及治疗脉管壁中内膜增厚。
因此，在另一实施方案中，本发明提供了(I)防止和治疗患者中血管和瓣膜的动脉粥样硬化性钙化的方法，该方法包括向该患者施用有效量的双膦酸类化合物；和(II)双膦酸类化合物在制备用于防止和治疗血管和瓣膜的动脉粥样硬化性钙化的药物中的用途。
(III)双膦酸类化合物在制备用于防止和治疗与肾衰竭相关的血管和瓣膜钙化的药物中的用途。
因此，在另一实施方案中，本发明提供了(I)稳定患者中动脉粥样硬化斑的方法，该方法包括向该患者施用有效量的双膦酸类化合物；和(II)双膦酸类化合物在制备用于稳定动脉粥样硬化斑的药物中的用途。
因此，在再一实施方案中，本发明提供了(I)在患者中治疗和防止中空管中平滑肌细胞增殖和迁移或细胞增殖增加或凋亡减少或基质沉积增加，或治疗脉管壁中内膜增厚的方法，该方法包括向该患者施用有效量的双膦酸类化合物；和
(II)双膦酸类化合物在制备用于在患者中治疗和防止中空管中平滑肌细胞增殖和迁移或细胞增殖增加或凋亡减少或基质沉积增加，或治疗脉管壁中内膜增厚的药物中的用途。
本发明的用途和方法代表对恶性疾病的现有疗法的改进，其中双膦酸类化合物被用于防止或抑制骨转移或过量骨再吸收的发生，还用于治疗炎性疾病如类风湿性关节炎和骨关节炎，以及所有形式的骨质疏松和骨质减少。
用于本发明的双膦酸类化合物优选为N-双膦酸类化合物。
为了本说明书的目的，N-双膦酸类化合物是除了特征性偕双膦酸部分(例如“P-C-P”)外还含有含氮侧链的化合物，例如式I化合物及其药学上可接受的盐或其任何水合物， 其中X为氢、羟基、氨基、烷酰基或被C1-C4烷基或烷酰基取代的氨基；R为氢或C1-C4烷基，且Rx烃基侧链，其含有任选取代的氨基或含氮杂环(包括芳族含氮杂环)。
因此，例如适用于本发明的双膦酸类化合物可包括以下化合物或其药学上可接受的盐或其任何水合物3-氨基-1-羟基丙烷-1，1-双膦酸(pamidronic acid，帕米膦酸)，例如帕米膦酸盐(pamidronate，APD)；3-(N，N-二甲基氨基)-1-羟基丙烷-1，1-双膦酸，例如二甲基-APD；4-氨基-1-羟基丁烷-1，1-双膦酸(alendronic acid，阿仑膦酸)，例如阿仑特罗(alendronate)；1-羟基-3-(甲基戊基氨基)-亚丙基-双膦酸(ibandronic acid，伊本膦酸)，例如伊本膦酸盐(ibandronate)；6-氨基-1-羟基己烷-1，1-双膦酸，例如氨基-己基-BP；3-(N-甲基-N-正戊基氨基)-1-羟基丙烷-1，1-双膦酸，例如甲基-戊基-APD(＝BM 21.0955)；1-羟基-2-(咪唑-1-基)乙烷-1，1-双膦酸，例如唑来膦酸；1-羟基-2-(3-吡啶基)乙烷-1，1-双膦酸(risedronic acid，利塞膦酸)，例如利塞膦酸盐(risedronate)，包括其N-甲基吡啶鎓盐，例如N-甲基碘化吡啶鎓盐如NE-10244或NE-10446；3-[N-(2-苯硫基乙基)-N-甲基氨基]-1-羟基丙烷-1，1-双膦酸；1-羟基-3-(吡咯烷-1-基)丙烷-1，1-双膦酸，例如EB 1053(Leo)；1-(N-苯基氨基硫代羰基)甲烷-1，1-双膦酸，例如FR 78844(Fujisawa)；5-苯甲酰基-3，4-二氢-2H-吡唑-3，3-双膦酸四乙酯，例如U-81581(Upjohn)；以及1-羟基-2-(咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)乙烷-1，1-双膦酸，例如YM 529。
在一个实施方案中，用于本发明的尤其优选的N-双膦酸类化合物包括式II化合物及其药理学可接受的盐， 其中Het为咪唑、噁唑、异噁唑、噁二唑、噻唑、噻二唑、吡啶、1，2，3-三唑、1，2，4-三唑或苯并咪唑基团，其任选被以下基团取代烷基、烷氧基、卤素、羟基、羧基、任选被烷基或烷酰基取代的氨基或任选被烷基、硝基、氨基或氨基烷基取代的苄基；A为含有1至8个碳原子的直链或支链、饱和或不饱和的烃部分；X′为氢原子，任选被烷酰基取代，或任选被烷基或烷酰基取代的氨基，且R为氢原子或烷基。
在另一实施方案中，用于本发明的尤其优选的双膦酸类化合物包括式III化合物以其药理学可接受的盐或异构体，
其中Het′为取代或未取代的五元芳族杂环，选自咪唑基、咪唑啉基、异噁唑基、噁唑基、噁唑啉基、噻唑基、噻唑啉基、三唑基、噁二唑基和噻二唑基，其中所述环可以被部分氢化，且其中所述取代基选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、苯基、环己基、环己基甲基、卤素和氨基中的至少一个，且其中Het′的两个相邻的烷基取代基可一起形成第二个环；Y为氢或C1-C4烷基；X″为氢、羟基、氨基或被C1-C4烷基取代的氨基，且R为氢或C1-C4烷基。
在另一实施方案中，用于本发明的尤其优选的双膦酸类化合物包括式IV化合物或其药理学可接受的盐， 其中Het为咪唑基、2H-1，2，3-三唑基、1H-1，2，4-三唑基或4H-1，2，4-三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基或噻二唑基，其为未取代的或被下述取代基C-单或二取代低级烷基、低级烷氧基、又可被低级烷基、低级烷氧基和/或卤素单或二取代的苯基、羟基、二低级烷基氨基、低级烷硫基和/或卤素，且在可取代的N-原子上被低级烷基或被苯基低级烷基N-取代，所述苯基低级烷基又可在苯基部分被低级烷基、低级烷氧基和/或卤素单或二取代，且R2为氢、羟基、氨基、低级烷硫基或卤素；低级基团具有不超过且包括7个碳原子。
特别优选的用于本发明的N-双膦酸类化合物的实例为2-(1-甲基咪唑-2-基)-1-羟基乙烷-1，1-双膦酸；2-(1-苄基咪唑-2-基)-1-羟基乙烷-1，1-双膦酸；2-(1-甲基咪唑4-基)-1-羟基乙烷-1，1-双膦酸；1-氨基-2-(1-甲基咪唑-4-基)乙烷-1，1-双膦酸；1-氨基-2-(1-苄基咪唑-4-基)乙烷-1，1-双膦酸；2-(1-甲基咪唑-2-基)乙烷-1，1-双膦酸；2-(1-苄基咪唑-2-基)乙烷-1，1-双膦酸；2-(咪唑-1-基)-1-羟基乙烷-1，1-双膦酸；2-(咪唑-1-基)乙烷-1，1-双膦酸；2-(4H-1，2，4-三唑-4-基)-1-羟基乙烷-1，1-双膦酸；2-(噻唑-2-基)乙烷-1，1-双膦酸；2-(咪唑-2-基)乙烷-1，1-双膦酸；2-(2-甲基咪唑-4(5)-基)乙烷-1，1-双膦酸；2-(2-苯基咪唑-4(5)-基)乙烷-1，1-双膦酸；2-(4，5-二甲基咪唑-1-基)-1-羟基乙烷-1，1-双膦酸，和2-(2-甲基咪唑-4(5)-基)-1-羟基乙烷-1，1-双膦酸，及其药理学可接受的盐。
最优选的用于本发明的N-双膦酸类化合物为2-(咪唑-1-基)-1-羟基乙烷-1，1-双膦酸(唑来膦酸)或其药理学可接受的盐。
上述提及的所有N-双膦酸衍生物均可从文献中已知。这包括它们的制备(例如参见EP-A-513760，第13-48页)。例如，3-氨基-1-羟基丙烷-1，1-双膦酸可按照例如美国专利US 3,962,432中的描述制备，其二钠盐可按照美国专利4,639,338和4,711,880中的描述制备，1-羟基-2-(咪唑-1-基)乙烷-1，1-双膦酸按照例如美国专利4,939,130中的描述制备。还参见美国专利4,777,163、4,687,767和EP 0275821B。
适当时，N-双膦酸类化合物可以以异构体或异构体混合物的形式使用，通常为旋光异构体如对映异构体或非对映异构体或几何异构体，通常为顺式-反式异构体。旋光异构体可以以纯对映体和/或外消旋物的形式获得。
N-双膦酸类化合物还可以以其水合物形式使用或者包括在其结晶中使用的其它溶剂。
药理学可接受的盐优选为与碱形成的盐，便利地为由元素周期表的Ia、Ib、IIa和IIb族的金属衍生的金属盐，包括碱金属盐如钾盐和特别是钠盐，或碱土金属盐、优选为钙盐或镁盐，还可以是与氨或有机胺形成的铵盐。
特别优选的药学可接受的盐是其中双膦酸的一、二、三或四个、特别是一或两个酸性氢被药学可接受的阳离子、特别是钠、钾或铵且首选是钠替代的那些盐。
非常优选的一组药学可接受的盐的特征在于在每个膦酸基团中具有一个酸性氢和一个药学可接受的阳离子、特别是钠。
本发明的活性剂(N-双膦酸类化合物)优选以含有治疗有效量的活性成分且任选含有或混合有适于施用的无机或有机、固态或液态的药学可接受的载体的药物组合物的形式使用。
药物组合物可例如是用于肠内如口服、直肠、气溶胶吸入或经鼻施用的组合物、用于胃肠道外如静脉内或皮下施用的组合物或用于透皮施用(例如被动或离子电渗)的组合物。
优选地，药物组合物适用于口服或胃肠道外(尤其是静脉内、动脉内或透皮)施用。静脉内和口服且首先和首要是静脉内施用被认为特别重要。优选双膦酸类活性成分为胃肠道外的形式、最优选为静脉内的形式。
具体的施用模式和剂量可由主治医师酌情考虑患者的具体情形、特别是年龄、体重、生活方式、活动水平、激素状态(例如绝经后)和骨矿物密度而选择。但是，最优选静脉内施用双膦酸类化合物。
本发明的活性剂的剂量可取决于多种因素，如活性成分作用的效力和持续时间、施用模式、温血动物的种属和/或温血动物的性别、年龄、体重和个体状况。
通常的剂量为对体重约75kg的温血动物施用0.002-20.0mg/kg、特别是0.01-10.0mg/kg的单剂量的双膦酸类活性成分。如果希望，该剂量也可以以几个、任选相等的部分剂量施用。
“mg/kg”指mg药物/kg所治疗哺乳动物、包括人的体重。
以上提及的剂量-作为单剂(优选)或以几个部分剂量施用-可以重复，例如每天一次、每周一次、每月一次、每三个月一次、每六个月一次或每年一次。换言之，该药物组合物可以以连续每日治疗至间歇性周期治疗的方案施用。
优选地，双膦酸类化合物以与用于治疗通常用双膦酸衍生物治疗的疾病的相同数量级的剂量施用，这些疾病为例如Paget’s病、肿瘤诱导的高钙血症或骨质疏松。换言之，优选双膦酸衍生物的施用剂量在Paget’s病、肿瘤诱导的高钙血症或骨质疏松的治疗中将同样治疗有效，即优选它们的施用剂量将同样有效抑制骨再吸收。例如，对于优选的含氮双膦酸类化合物、例如唑来膦酸及其盐，可以使用约0.5至约20mg、优选约1至约10mg的双膦酸类化合物剂量用于治疗人类患者。
单剂量单位形式的制剂优选含有约1％至约90％活性化合物，非单剂量单位形式的制剂优选含有约0.1％至约20％活性成分。单剂量单位形式如胶囊剂、片剂或糖衣丸含有例如约1mg至约500mg活性成分。
用于肠内和胃肠道外施用的药物制剂例如是剂量单位形式的那些，例如糖衣丸、片剂或胶囊还有安瓿。它们可以以本身已知的方法制备，例如通过常规的混合、制粒、成型、溶解或冷冻干燥法来制备。
例如，用于口服施用的药物制剂可如下获得将活性成分与固态载体混合，酌情将所得混合物制粒，如果希望或者必须时可在加入适宜的助剂后将该混合物或颗粒制成片剂或糖衣丸芯。适宜的载体特别是填充剂，如糖，例如乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇、纤维素制品和/或磷酸钙、例如磷酸三钙或磷酸氢钙；以及粘合剂，如使用例如玉米淀粉、小麦淀粉、稻米淀粉或马铃薯淀粉制备的淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果希望还可以有崩解剂，如上述所提及的淀粉，以及羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐如海藻酸钠。助剂特别为流动调节剂和润滑剂，例如硅酸、滑石粉、硬脂酸或其盐如硬脂酸镁或硬脂酸钙和/或聚乙二醇。糖衣丸芯具有可耐胃液的适宜包衣，所述包衣尤其使用任选含有阿拉伯树胶、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛的浓缩糖溶液，或者使用在适宜的有机溶剂或溶剂混合物中的漆用(lacquer)溶液，以生成耐胃液的包衣，或者使用适宜纤维素制品如醋酸纤维素酞酸酯或羟丙甲基纤维素酞酸酯的溶液。可将着色物质或色素加入片剂或糖衣丸包衣中，例如以鉴别或指示活性成分的不同剂量。
其它可口服施用的药物制剂是由明胶制成的干填充胶囊剂和由明胶及增塑剂如甘油或山梨醇制成的密封软胶囊剂。干填充胶囊剂可含有颗粒形式的活性成分，所述活性成分例如与填充剂如乳糖、粘合剂如淀粉和/或助流剂如滑石粉或硬脂酸镁以及酌情与稳定剂混合。在软胶囊中，活性成分优选溶于或悬浮于适宜的液体如脂肪油、石蜡油或液态聚乙二醇中，还可能加入稳定剂。
胃肠道外制剂特别是以多种方式均有效的可注射液体，所述方式如动脉内、肌内、腹膜内、鼻内、皮内、皮下或者优选静脉内。该液体优选是可临用前配制的等张水溶液或悬浮液，例如由仅含有活性成分或还含有药学可接受载体的冷冻干燥制剂配制。药物制剂可以是灭菌的和/或含有助剂，所述助剂例如是防腐剂、稳定剂、润湿剂和/或乳化剂、增溶剂、调节渗透压的盐和/或缓冲剂。
用于透皮施用的适合制剂包括有效量的活性成分和载体。有利的载体包括可吸收的药理学可接受的溶剂以有助于穿透宿主皮肤。透皮装置的特征在于为绷带剂形式，所述绷带剂包括背衬部分(backing member)、含有化合物及任选载体的储库，还任选包括控速屏障以在延长的时期内以控速和预定的速度递送宿主皮肤上的活性成分，并且包括将所述装置固定在皮肤上的子段。
在根据本发明的另一方面，双膦酸类化合物被局部应用于动脉粥样硬化病变部位，特别是自基于导管的装置、腔内医学装置或应用于血管外部/外膜方面的装置通过受控递送应用。
已经发现通过将药物递送装置应用于脉管的外部/外膜方面、例如包绕在脉管周围、然后该装置释放抗动脉粥样硬化和/或抗血栓形成和/或抗再狭窄和/或抗炎的药物，可以治疗由灌注主要器官如心脏、肝脏、肾脏和脑的血管的进行性堵塞导致的循环疾病。
在本说明书中，中空管意指任何中空管，其具有转运气体或液体、优选液体且最优选血液的功能、例如脉管、静脉、动脉等，并且其可以受到动脉粥样硬化和/或血栓形成和/或再狭窄和/或炎症的影响。
在本说明书中，对双膦酸类化合物、例如唑来膦酸的指代除了游离双膦酸类化合物外还包括其药学上可接受的盐和酯，且盐和酸包括其水合物以及溶剂合物。
根据本发明，双膦酸类化合物例如唑来膦酸可以用作唯一的活性成分或联合以下物质免疫抑制剂，例如钙调磷酸酶抑制剂、例如环孢菌素、例如环孢菌素A，或FK506；EDG-受体激动剂，例如FTY720；mTOR抑制剂，例如雷帕霉素衍生物、例如40-O-(2-羟乙基)雷帕霉素；抗炎剂，例如类固醇、例如皮质类固醇、例如地塞米松或泼尼松，NSAID、例如环加氧酶抑制剂、例如cox-2抑制剂、例如塞来昔布、洛芬昔布、依托昔布(etoricoxib)、伐地昔布(valdecoxib)或鲁米昔布(lumiracoxib)；或抗增殖剂，例如微管稳定或去稳定剂，包括但不限于紫杉烷例如紫杉醇(taxol)、紫杉醇(paclitaxel)或多西他赛，长春花生物碱类例如长春碱、特别是硫酸长春碱、长春新碱、特别是硫酸长春新碱和长春烯碱、discodermolides或埃坡霉素或其衍生物、例如埃坡霉素B或其衍生物，或端粒酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂，例如星形孢菌素和相关的小分子，例如UCN-01、BAY43-9006、苔藓虫素1、哌立福新(Perifosine)、Limofosine、米哚妥林(midostaurin)、RO318220、RO320432、GO 6976、Isis 3521、LY333531、LY379196、SU5416、SU6668、AG1296、通称为酪氨酸磷酸化抑制剂(tyrphostin)的活性剂如AG957。
在该另一方面，本发明还提供了双膦酸类化合物例如唑来膦酸联合以下物质的局部施用或递送钙调磷酸酶抑制剂，例如如上所公开；mTOR抑制剂，例如雷帕霉素衍生物、例如40-O-(2-羟乙基)-雷帕霉素；EDG-受体激动剂，例如如上所公开；微管稳定或去稳定剂，例如如上所公开；破骨细胞活性抑制剂，例如如上所公开；抑制PDGF受体酪氨酸激酶的化合物或抗体或结合PDGF或降低PEGF受体表达的化合物，例如如上所公开；抑制EGF受体酪氨酸激酶的化合物或抗体或结合EGF或降低EGF受体表达的化合物，例如如上所公开；抑制VEGF受体酪氨酸激酶或VEGF受体的化合物或抗体或结合VEGF的化合物，例如如上所公开；激酶调节剂(即拮抗剂或激动剂)的抑制剂，例如如上所公开。
根据本发明该方面的具体发现，提供了1.在有需要的哺乳动物中防止或治疗中空管中平滑肌细胞增殖和迁移或细胞增殖增加或凋亡减少或基质沉积增加的方法，该方法包括局部施用治疗有效量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸以及任选地一种或多种例如如上所公开的其他活性成分。
2.在有需要的哺乳动物中稳定易损动脉粥样硬化斑的方法，该方法包括局部施用治疗有效量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸以及任选地一种或多种例如如上所公开的其他活性成分。
3.治疗脉管壁内膜增厚或稳定易损动脉粥样硬化斑的方法，该方法包括自任何基于导管的装置、腔内医学装置或应用于脉管外部/外膜方面的装置受控递送治疗有效量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸以及任选地一种或多种例如如上所公开的其他活性成分。
4.药物递送装置或系统，其包含a)适于局部应用或施用于中空管中的医学装置、例如基于导管的装置、腔内医学装置或应用于脉管外部/外膜方面的装置，和b)治疗剂量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸以及任选地治疗剂量的一种或多种例如如上所公开的其他活性成分，每种活性成分均可释放性地附着于基于导管的递送装置、医学装置或应用于脉管外部/外膜方面的装置。
在优选实施方案中，本发明包括治疗方法、用途和装置，它们用于a)由于动脉粥样硬化、狭窄或再狭窄导致的脉管壁中内膜增厚，例如再血管化、新血管化或除常规再血管化外的任何其他血管术和/或炎症和/或血栓形成后的脉管壁中内膜增厚，b)A-V通路、例如用于肾脏透析患者的通路闭合，c)基于导管的装置或腔内医学装置近端和远端的收缩性重构，d)易损动脉粥样硬化斑。
这种局部递送装置或系统可用于减少动脉粥样硬化、狭窄或再狭窄，辅助再血管化、旁路或移植术或除常规再血管化外的任何其他血管术、例如CABG、动脉瘤修复、吻合增生，在任何血管部位、包括冠状动脉、颈动脉、肾动脉、外周动脉、脑动脉或任何其他动脉或静脉部位进行，以减少吻合狭窄，如在有或没有聚四氟乙烯移植和有或没有支架的动脉-静脉透析通路情况下，或者与任何其他心脏或移植术或先天性血管介入联用。该局部递送装置或系统用于减少该药物递送装置或系统近端和远端的收缩性重构；用于除常规再血管化外的任何其他血管术例如CABG、动脉瘤修复、吻合增生后的流量减少；用于局部递送至伴随再血管化等的外膜；用于A-V通路、例如用于肾透析患者的通路闭合。这种局部递送装置或系统也可用于稳定易损动脉粥样硬化斑。
双膦酸类化合物、例如唑来膦酸或其药学上可接受的盐在下文可称为“药物”。如上所公开可以与唑来膦酸联用的其他活性成分在下文将被统称为“辅助剂”。药物应指药物或药物+辅助剂。
局部施用优选在血管病变部位处或其附近进行。
可以通过一种或多种以下途径进行施用通过导管或其他血管内递送系统、经鼻内、经支气管内、经腹膜内或eosophagal。中空管包括循环系统脉管如血管(动脉或静脉)、组织腔、淋巴通路、消化道、包括消化管、呼吸道、分泌系统管、生殖系统管道、体腔管等。药物的局部施用或应用提供了所述药物的浓缩递送，实现通过其他施用途径不能得到的靶标组织中的组织水平。
将药物局部递送至中空管的手段可以是将药物经内部或经外部通过物理递送至中空管。局部药物递送包括导管递送系统、局部注射装置或系统或留置装置。这种装置或系统可包括但不限于支架、包衣支架、内腔套管(endolumenal sleeve)、支架-移植物、脂质体、控释基质(matrix)、聚合物内腔涂层(paving)或其他血管内装置、栓子递送微粒、基于细胞靶定如亲和性的递送装置、围绕中空管的内贴剂、围绕中空管的外贴剂、中空管套、外涂层、外部支架套管等。参见Eccleston等人(1995)InterventionalCardiology Monitor 133-40-41和Slepian，N.J.(1996)Intervente.Cardiol.1103-116或Regar E，Sianos G，Serruys PW，“支架开发和局部药物递送”，Br Med Bull 2001，59227-48，它们的公开内容在此引入作为参考。
“生物相容的”意指不引起或引起最小的负性组织反应、包括例如血栓形成和/或炎症的物质。
药物的递送或应用可使用支架或套管或鞘(sheathe)进行。可以使用由其中已浸渗或掺入药物的聚合物或其他生物相容材料、例如多孔陶瓷、例如纳米孔陶瓷组成或包衣的腔内支架。这种支架可以是生物可降解的或当旨在永久使用时可以由金属或合金、例如Ni和Ti或另一种稳定的物质制成。该药物还可以被截留在已被改性以含有微孔或通道的支架或移植体的金属中。也可以使用由含有药物的聚合物或其他生物相容材料、例如如上所公开的材料制成的腔和/或离腔(ablumenal)包衣或外部套管，用于局部递送。
支架通常用作留在导管或脉管腔内的管状结构以减轻堵塞。它们可以以非膨胀形式插入管腔，然后自动膨胀(自膨式支架)或借助原位的另一装置膨胀，例如安装导管的血管成形术球囊，该球囊在狭窄的脉管或身体通路内膨胀，以破坏与脉管壁成分相关的堵塞并获得扩大的腔体。
例如，可以以许多方法并利用任何生物相容材料将药物掺入支架内或附着于支架上；其可被掺入到例如聚合物或聚合物基质中并喷雾至支架的外表面。可以制备药物和聚合物材料在溶剂或溶剂混合物中的混合物，并将其同样通过浸渍-包衣、刷涂包衣和/或浸渍/旋转包衣应用于支架表面，让溶剂蒸发以获得截留有药物的膜。对于其中药物自微孔、支杆(struct)或通道递送的支架，可另外涂敷聚合物溶液，作为外层以控制药物释放；备选地，药物可包含在微孔、支杆或通道中而辅助剂可掺入到外层中，或者反之亦然。药物也可以附着在支架的内层而辅助剂在外层，或者反之亦然。药物还可以通过共价键、例如酯、酰胺或酸酐、包括化学衍生化连接到支架表面。药物还可掺入到生物相容多孔陶瓷包衣、例如纳米多孔陶瓷包衣中。
聚合物材料的实例包括生物相容的可降解材料，例如基于内酯的聚酯或共聚酯，例如聚交酯；聚交酯-乙交酯；聚已酸丙酯-乙交酯；聚原酸酯；聚酐；聚氨基酸；多糖；聚磷腈；聚(醚-酯)共聚物、例如PEO-PLLA，或它们的混合物；和生物相容的非降解材料，例如聚二甲基硅氧烷；聚(乙烯-醋酸乙烯)；基于丙烯酸酯(盐)的聚合物或共聚物，例如聚甲基丙烯酸丁酯、聚(甲基丙烯酸羟乙甲酯)；聚乙烯吡咯烷酮；氟化聚合物如聚四氟乙烯；纤维素酯。
当使用聚合物基质时，该基质可包含2层，例如其中掺入药物的基层，例如乙烯-醋酸乙烯共聚物和聚甲基丙烯酸丁酯，和顶层包衣，例如聚甲基丙烯酸丁酯，其不含药物且作为药物的扩散控制。备选地，药物可以包含在基层中而辅助剂可掺入到外层中，或反之亦然。聚合物基质的总厚度可以为约1至20□或更大。
根据本发明的方法或在本发明的装置或系统中，药物可以被动、主动或在激活、例如光激活下洗脱。
药物在例如不超过约1个月至1年的时间内随时间进行自聚合物材料或支架中洗脱并进入周围的组织。根据本发明的局部递送允许高浓度的药物处于疾病部位而具有低的循环化合物浓度。用于局部递送应用的药物的量将随所用的化合物、所要治疗的病症和所需效果而异。为了本发明的目的，将施用治疗有效的量。治疗有效量指的是足以治疗、例如抑制细胞增殖和/或稳定易损动脉粥样硬化斑并导致防止或治疗疾病状态的量。特别地，对于防止或治疗例如再血管化后的动脉粥样硬化或再狭窄或抗肿瘤治疗或易损动脉粥样硬化斑，局部递送较全身施用可需要更少的化合物。
优选的组合为包含双膦酸类化合物、例如唑来膦酸联用或联合以下物质的那些组合具有抗增殖性质的化合物，例如紫杉醇(taxol)、紫杉醇(paclitaxel)、多西他赛、埃坡霉素；酪氨酸激酶抑制剂；VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂；VEGF受体抑制剂；结合VEGF的化合物；mTOR抑制剂，例如雷帕霉素衍生物、例如40-O-(2-羟乙基)雷帕霉素；具有抗炎性质的化合物，例如类固醇、环加氧酶抑制剂。双膦酸类化合物、例如唑来膦酸与具有抗炎性质的化合物的组合当用于治疗或防止糖尿病患者中的再狭窄时具有尤其有益的效果。
可以在动物试验方法以及在临床中、例如按照下文中描述的方法证明药物的效用。
以下实施例阐明了上文所述的本发明。
在以下实施例1至4中，术语“活性成分”因理解为根据本发明可使用的以上提及的任何一种双膦酸衍生物。
实施例实施例1含有活性成分包衣小丸的胶囊，例如以帕米膦酸二钠五水合物作为活性成分芯丸活性成分(研细) 197.3mg微晶纤维素(AvicelPH 105)52.7mg250.0mg+内层包衣料纤维素HP-M 60310.0mg聚乙二醇 2.0mg滑石粉8.0mg
270.0mg+耐胃液的外层包衣料EudragitL 30D(固态) 90.0mg柠檬酸三乙酯 21.0mgAntifoamAF 2.0mg水滑石粉7.0mg390.0mg将活性成分、例如帕米膦酸二钠与AvicelPH 105的混合物用水润湿并捏和、挤压，形成小球。然后将干燥小丸在流化床中用由纤维素HP-M603、聚乙二醇(PEG)8000和滑石粉组成的内层包衣料和由EudragitL 30D、柠檬酸三乙酯和AntifoanAF组成的耐胃液水性包衣料连续包衣。将包衣的小丸用滑石扑粉，并借助市售胶囊填充机、例如Hfliger和Karg将其填充入胶囊(0号胶囊)中。
实施例2含有例如1-羟基-2-(咪唑-1-基)-乙烷-1，1-双膦酸作为活性成分的Monolith胶粘透皮系统组成聚异丁烯(PIB)300(Oppanol B1，BASF) 5.0gPIB 35000(Oppanol B10，BASF)3.0gPIB 1200000(Oppanol B100，BASF) 9.0g氢化的烃类树脂(Escorez 5320，Exxon) 43.0g1-十二烷基氮杂环庚-2-酮 20.0g(Azone，Nelson Res.，Irvine/CA)活性成分20.0g共计 100.0g制备
将上述组分通过在滚筒齿轮床(roller gear bed)中翻转而一起溶于150g特定沸点的石油馏分100-125中。借助涂布装置、使用300mm的医用刀片将该溶液涂布于聚酯薄膜上(Hostaphan，Kalle)，得到约75g/m2的涂层。在干燥(于60℃下15分钟)后，将聚硅氧烷处理的聚酯薄膜(厚度75mm，Laufenberg)用作剥离膜。用打孔器在制成的系统上打出所需形式的5至30cm2大小的孔。将所完成的系统逐个密封在镀铝纸囊中。
实施例3含1.0mg干燥、冻干的1-羟基-2-(咪唑-1-基)乙烷-1，1-双膦酸(其混合钠盐)的小瓶。在用1ml水稀释后，得到用于静脉内输注的溶液(浓度为1mg/ml)。
组成活性成分(游离双膦酸) 1.0mg甘露醇 46.0mg柠檬酸三钠×2H2O 约3.0mg水 1ml注射用水 1ml。
在1ml水中，将活性成分用柠檬酸三钠×2H2O滴定至pH为6.0。然后加入甘露醇，将溶液冻干，并将冻干物填充入小瓶中。
实施例4含有溶于水中的活性成分、例如帕米膦酸二钠五水合物的安瓿。该溶液(浓度为3mg/ml)在稀释后用于静脉内输注。
组成活性成分 19.73mg(≈5.0mg无水活性成分)甘露醇 250mg注射用水 5ml。
实施例5双膦酸类化合物在动脉和瓣膜钙化模型中的效果双膦酸类化合物对小鼠模型中动脉钙化、瓣膜钙化和斑稳定化的影响使用形成易损斑的晚期动脉粥样硬化进展的小鼠模型。将雄性4-6周龄的LDLr-/-小鼠分成每组18-20只动物的治疗组。用先前已显示可产生广泛动脉粥样硬化的含有1.25％胆固醇、7.5％可可油、7.5％酪蛋白和0.5％胆酸钠的食物(高胆固醇/胆酸食物)喂养所有动物。在第15周，将一组动物处死以作为预处理、基线对照。从食物施用的第15周至18周，对余下的LDLr-/-动物每天一次皮下给以赋形剂或唑来膦酸溶液(10mg/kg/天)，每周7天中5天给药。从第19至22周，不进行治疗，但仍使小鼠保持诱导动脉粥样硬化的高胆固醇/胆酸食物。在第22周末将小鼠处死并摘除心脏和主动脉。将附着在含有主动脉窦的主动脉的最近部分的心脏的上面部分包埋在OCT中并冰冻。用低温恒温器从主动脉窦切割10微米厚的切片。将每只动物的28个切片用von Kassa和/或苏木精染色。通过求积法分析横截面的面积，以确定动脉粥样硬化病变面积和心脏瓣膜内的钙化程度。将剩余的主动脉(从升主动脉到髂分叉(iliac bifurcation))以及主动脉的主要分枝固定、石蜡包埋并横切以用于组织学分析。使用适宜的染色方法学确定主动脉和无名动脉(也称为无脉动脉)的动脉粥样硬化程度和病变组成，这些染色方法包括苏木精和曙红染色、弹性蛋白的Verhoff vonGiessen染色、钙的Von Kassa染色和炎性细胞的免疫组织化学染色。
与赋形剂治疗的动物相比，用唑来膦酸治疗4周显著减少了喂养高胆固醇/胆酸食物的第15至22周之间主动脉和无名动脉中动脉粥样硬化的进展。此外，用唑来膦酸治疗导致所谓的“易损”或易破裂斑转变成更稳定的表型，该“易损”斑或易破裂斑具有大的、通常为钙化的富含脂质的核心和薄纤维状帽，在基线和赋形剂治疗的动物中于第22周都观察到炎性细胞浸润。在第22周，先前用唑来膦酸治疗4周的动物与第15周的基线病变和第22周的赋形剂治疗的动物相比，均表现出动脉粥样硬化病变具有更厚的纤维状帽和较少的炎性细胞和钙化面积。与安慰剂治疗的动物相比，唑来膦酸治疗还导致显著较少的主动脉瓣膜钙化。双膦酸类化合物对肾透析患者中动脉和瓣膜钙化的效果经历透析的一名52岁末期肾衰竭男性患者被诊断具有严重骨质疏松症。通过2小时静脉内输注90mg帕米膦酸二钠、每月一次共3个月治疗该患者。最初用帕米膦酸二钠治疗后一年观察到动脉和瓣膜钙化的显著减少。由三位内科医师以不知情的方式观察放射显影图独立地确证了钙化的减少。
实施例6在28天大鼠颈动脉球囊损伤模型中对新近新内膜病变形成的抑制许多化合物已经表现出在安置球囊的大鼠颈动脉模型中于二周时抑制内膜病变形成，而仅少数化合物被证明在第4周有效。在以下大鼠模型中对唑来膦酸进行了试验。
向大鼠口服给以安慰剂/唑来膦酸。在手术前3天开始每天给药并持续31天。使用Clowes等人，Lab.Invest.1983；49；208-215所述的方法以球囊致大鼠颈动脉损伤。于球囊损伤后28天处死后，摘除颈动脉并进行处理用于组织学和形态测量学评价。在该试验中，唑来膦酸当以0.2至3.5mg、优选0.5至2.0mg/kg的剂量施用时显著减少了球囊损伤后第28天的新内膜病变形成。例如，对于以0.5、1.0和2.0mg/kg(经口管饲)施用的唑来膦酸，抑制百分比在所有三种剂量下类似在最低剂量(0.5mg/kg)为17％，在最高剂量(2.0mg/kg)为37％。唑来膦酸在球囊损伤后4周具有抑制病变的有益效果。
实施例7在28天兔髂支架模型中对再狭窄的抑制在新西兰白兔髂动脉中实施联合血管成形术和支架术。通过将动脉中部的一个3.0×9.0血管成形术球囊充气然后将导管“拉回”1个球囊长度实施髂动脉球囊损伤。重复球囊损伤2次，并将3.0×12mm的支架在髂动脉中于6atm下放置30秒。然后以相同方式在对侧髂动脉上实施球囊损伤和支架放置。进行支架放置后的血管造影。所有动物接受40mg/天的口服阿司匹林作为抗血小板治疗并喂饲标准低胆固醇兔用固型食物。支架术后28天，将动物麻醉并实施安乐死，并将动脉树用乳酸化林格液于100mmHg灌注数分钟，然后用10％福尔马林以100mmHg灌注15分钟。切除远端主动脉和近端股动脉之间的血管部分并清除外膜周围组织。将动脉的支架化切片包埋在塑料中并从每个支架的近端、中间和远端部分切取切片。将所有切片用苏木精-曙红和Movat pentachrome染料染色。进行计算机化求积法以确定内弹性层(IEL)、外弹性层(EEL)和内腔的面积。测量支架支杆处和支架支架之间的新内膜和新内膜厚度。测量EEL内的面积作为脉管面积。数据表示为平均值±SEM。由于测量每只动物的两个支架化动脉，每只动物产生平均值，所以使用方差分析(ANOVA)进行组织学数据的统计分析。P＜0.05视为统计学显著。
从支架术前3天至支架术后27天，每天一次通过管饲法以30mg/kg口服施用唑来膦酸。在该模型中，与安慰剂治疗相比，唑来膦酸治疗导致再狭窄病变形成程度的显著减小例如，用唑来膦酸治疗使平均新内膜厚度显著减小(29％减小；P＜0.0001)、新内膜面积显著减小(17％减小；P＜.04)和动脉狭窄百分比显著减小(17％减小；P＜.0002)。与对照相比，唑来膦酸治疗没有导致EEL面积的差异，表明治疗与收缩性重构或动脉瘤型动脉扩张不相关。在第28天，安慰剂治疗的动物中存在广泛的新内膜形成，该病变由蛋白聚糖/胶原基质中的大量平滑肌细胞组成并具有明显的完全内皮愈合。在用唑来膦酸治疗动物的动脉片段中，内膜充分痊愈，特征是致密的新内膜由平滑肌细胞和完全覆盖支架支杆上和支杆之间内腔表面的内皮组成。
支架制备将支架称重然后放置进行包衣。在支架旋转时，将溶于甲醇和四氢呋喃中的聚交酯乙交酯(0.70mg/ml)、唑来膦酸(0.0015mg/ml)和酪氨酸激酶抑制剂(1mg/ml)的溶液喷于其上。将包衣支架从喷雾中移走并让其风干。最后称重后，确定支架上的包衣量。
实施例8唑来膦酸在体温下于药学上可接受的聚合物中的稳定性以及唑来膦酸自聚合物包衣的释放将4个2cm的如上所述包衣支架件置于100ml pH7.4磷酸缓冲液(PBS)中。将来自每一系列的另外四件置于100ml聚乙二醇(PEG)/水溶液(40/60v/v，PEG分子量＝400)中。将支架件在37℃于振荡器中温育。每天更换缓冲液和PEG溶液并对溶液进行不同的测定，以确定释放的唑来膦酸浓度。该试验显示唑来膦酸自包衣支架中稳定释放45天以上。术语“稳定的唑来膦酸释放”指药物释放速度的变化小于10％。本领域技术人员使用的控释技术出人意料地允许对所需唑来膦酸释放速度方便地进行调节。因此，通过选择包衣混合物中反应物的适宜量，可能容易地控制唑来膦酸包衣支架的生物有效性。根据所用包衣技术的类型，药物可自包衣中被动、主动或通过光激活洗脱。
还研究了血浆中唑来膦酸的释放。将1cm包衣支架件置于1ml含柠檬酸的人血浆(来自Helena实验室)中，该血浆为冻干形式并通过加入1ml无菌去离子水复原。将三组支架血浆溶液在37℃温育，并每天更换血浆。在另外的研究中，发现人血浆中的唑来膦酸可于37℃稳定72小时。
对每份样品的最后一件实施PDGF-刺激的受体酪氨酸激酶试验，以确定唑来膦酸活性。以类似于E.Andrejauskas-Buchdunger和U.Regenass在Cancer Research 52，5353-5358(1992)中描述的方法，体外测量BALB/c3T3细胞的PDGF受体免疫复合物中PDGF-刺激的受体酪氨酸激酶活性的抑制。该试验表明45天后自支架释放的唑来膦酸的活性仍然为唑来膦酸正常活性的91％。在相同试验中，游离唑来膦酸表现出其活性一天一天地急剧降低。这些试验表明唑来膦酸在聚合物包衣中具有出乎意料的高稳定性。
实施例9协同组合的实例类似于实施例6的其他实验揭示了唑来膦酸与各种其他试剂联用的协同组合。
将跨越单独或组合的活性剂的IC50值的数据点输入CalcuSyn程序(CalcuSyn，Biosoft，Cambridge UK)。该程序计算非专属(non-exclusive)的组合指数(CI)，该值表示两种化合物的相互作用，其中CI～1代表接近加合的效果，0.85-0.9表示微小的协同作用，低于0.8的值表示具有协同性。
权利要求
1.在需要这种治疗的患者中治疗动脉粥样硬化的方法，该方法包括向该患者施用有效量的双膦酸类化合物。
2.双膦酸类化合物在制备用于治疗动脉粥样硬化的药物中的用途。
3.双膦酸类化合物治疗哺乳动物中与疾病或病理状况相关的动脉粥样硬化的用途。
4.双膦酸类化合物治疗与肾衰竭相关的钙化的用途。
5.防止和治疗患者中血管和瓣膜的动脉粥样硬化性钙化的方法，该方法包括向该患者施用有效量的双膦酸类化合物；或者双膦酸类化合物在制备用于防止和治疗血管和瓣膜的动脉粥样硬化性钙化的药物中的用途；或者双膦酸类化合物在制备用于防止和治疗与肾衰竭相关的血管和瓣膜钙化的药物中的用途。
6.稳定患者中动脉粥样硬化斑的方法，该方法包括向该患者施用有效量的双膦酸类化合物；或双膦酸类化合物在制备用于稳定动脉粥样硬化斑的药物中的用途。
7.在有需要的哺乳动物中防止或治疗中空管中平滑肌细胞增殖和迁移或细胞增殖增加或凋亡减少或基质沉积增加的方法，该方法包括施用治疗有效量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸或其药学上可接受的盐以及任选地一种或多种其他活性成分。
8.治疗脉管壁中内膜增厚的方法，该方法包括施用治疗有效量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸或其药学上可接受的盐以及任选地一种或多种其他活性成分。
9.根据前述权利要求任一项的方法或用途，其中双膦酸类化合物被局部施用。
10.根据权利要求9的用于治疗脉管壁中内膜增厚或者稳定易损动脉粥样硬化斑的方法或用途，该方法或用途包括自基于导管的装置、腔内医学装置或应用于脉管外部/外膜方面的装置受控递送治疗有效量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸或其药学上可接受的盐以及任选地一种或多种其他活性成分。
11.根据权利要求9的方法或用途，其中双膦酸类化合物、例如唑来膦酸或其药学上可接受的盐与一种或多种选自以下的其他活性成分联合施用或递送钙调磷酸酶抑制剂、EDG-受体激动剂、抗炎剂、mTOR抑制剂、抗增殖剂、微管稳定或去稳定剂、酪氨酸激酶抑制剂、抑制破骨细胞活性的化合物、抑制PDGF受体酪氨酸激酶的化合物或结合PDGF或降低PEGF受体表达的化合物或抗体、抑制EGF受体酪氨酸激酶的化合物或抗体或结合EGF或降低EGF受体表达的化合物、抑制VEGF受体酪氨酸激酶或VEGF受体的化合物或抗体或结合VEGF的化合物或抗体、激酶调节剂。
12.药物递送装置或系统，包含a)适于局部应用或施用于中空管中的医学装置和b)可释放性地附着于该医学装置的治疗剂量的唑来膦酸或其药学上可接受的盐。
13.根据权利要求12的装置，其包含b)治疗剂量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸或其药学上可接受的盐以及治疗剂量的一种或多种其它活性成分，每种活性成分可释放性地附着于该医学装置并且其他活性成分选自钙调磷酸酶抑制剂、EDG-受体激动剂、抗炎剂、mTOR抑制剂、抗增殖剂、微管稳定或去稳定剂、酪氨酸激酶抑制剂、抑制破骨细胞活性的化合物、抑制PDGF受体酪氨酸激酶的化合物或抗体或结合PDGF或降低PEGF受体表达的化合物、抑制EGF受体酪氨酸激酶的化合物或抗体或结合EGF或降低EGF受体表达的化合物、抑制VEGF受体酪氨酸激酶或VEGF受体的化合物或抗体或结合VEGF的化合物、激酶调节剂的抑制剂。
14.根据权利要求12的装置，其包含b)治疗剂量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸或其药学上可接受的盐以及治疗剂量的一种或多种其他活性成分，每种活性成分可释放性地附着于该医学装置并且其他活性成分选自钙调磷酸酶抑制剂、mTOR抑制剂、EDG-受体激动剂、抗炎剂、微管稳定或去稳定剂、抑制破骨细胞活性的化合物、抑制PDGF受体酪氨酸激酶的化合物或抗体或结合PDGF或降低PEGF受体表达的化合物、抑制EGF受体酪氨酸激酶的化合物或抗体或结合EGF或降低EGF受体表达的化合物、抑制VEGF受体酪氨酸激酶或VEGF受体的化合物或抗体或结合VEGF的化合物、激酶调节剂(即拮抗剂或激动剂)的抑制剂。
15.根据权利要求9至14任一项的方法、用途或装置，其中使用导管递送系统、应用于脉管外部/外膜方面的装置、局部注射装置、留置装置、支架、包衣支架、套管、支架-移植物、聚合物内腔涂层或控释基质进行施用或递送。
16.根据前述权利要求任一项的方法、用途或装置，其中双膦酸类化合物选自以下化合物或其药学上可接受的盐或其任何水合物3-氨基-1-羟基丙烷-1，1-双膦酸(帕米膦酸)，例如帕米膦酸钠(APD)；3-(N，N-二甲基氨基)-1-羟基丙烷-1，1-双膦酸，例如二甲基-APD；4-氨基-1-羟基丁烷-1，1-双膦酸(阿仑膦酸)，例如阿仑特罗；1-羟基-亚乙基-双膦酸，例如依替膦酸钠；1-羟基-3-(甲基戊基氨基)-亚丙基-双膦酸(伊本膦酸)，例如依班膦酸钠；6-氨基-1-羟基己烷-1，1-双膦酸，例如氨基-己基-BP；3-(N-甲基-N-正戊基氨基)-1-羟基丙烷-1，1-双膦酸，例如甲基-戊基-APD(＝BM 21.0955)；1-羟基-2-(咪唑-1-基)乙烷-1，1-双膦酸；1-羟基-2-(3-吡啶基)乙烷-1，1-双膦酸(利塞膦酸)，例如利塞膦酸钠，包括其N-甲基吡啶鎓盐，例如N-甲基碘化吡啶鎓如NE-10244或NE-10446；1-(4-氯苯硫基)甲烷-1，1-双膦酸(替鲁膦酸)，例如替鲁膦酸钠；3-[N-(2-苯硫基乙基)-N-甲基氨基]-1-羟基丙烷-1，1-双膦酸；1-羟基-3-(吡咯烷-1-基)丙烷-1，1-双膦酸，例如EB 1053(Leo)；1-(N-苯基氨基硫代羰基)甲烷-1，1-双膦酸，例如FR 78844(Fujisawa)；5-苯甲酰基-3，4-二氢-2H-吡唑-3，3-双膦酸四乙酯，例如U-81581(Upjohn)；1-羟基-2-(咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)乙烷-1，1-双膦酸，例如YM 529，以及1，1-二氯甲烷-1，1-双膦酸(氯屈膦酸)，例如氯屈膦酸二钠。
17.根据权利要求1至15任一项的方法、用途或装置，其中双膦酸类化合物是式III化合物或其药理学可接受的盐， 其中Het″为咪唑基、2H-1，2，3-三唑基、1H-1，2，4-三唑基或4H-1，2，4-三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基或噻二唑基，其为未取代的或被下述取代基C-单或二取代低级烷基、低级烷氧基、又可被低级烷基、低级烷氧基和/或卤素单或二取代的苯基、羟基、二低级烷基氨基、低级烷硫基和/或卤素，且在可取代的N-原子上被低级烷基或被苯基低级烷基N-取代，所述苯基低级烷基又可在苯基部分被低级烷基、低级烷氧基和/或卤素单或二取代，且R2为氢、羟基、氨基、低级烷硫基或卤素；低级基团具有不超过且包括7个碳原子。
18.根据权利要求17的方法、用途或装置，其中双膦酸类化合物是唑来膦酸或其药学上可接受的盐或其任何水合物。
全文摘要
本发明公开了在需要这种治疗的患者、例如动脉或瓣膜钙化的患者中治疗动脉粥样硬化、尤其是动脉粥样硬化/瓣膜钙化和斑破裂/中风的方法，该方法包括向该患者施用有效量的双膦酸类化合物、例如唑来膦酸或其盐或其水合物。本发明特别涉及双膦酸类化合物的局部施用以及适用于这种局部施用的装置、例如支架。
文档编号A61K31/662GK1705486SQ200380101456
公开日2005年12月7日 申请日期2003年10月14日 优先权日2002年10月15日
发明者M·F·普雷斯科特 申请人:诺瓦提斯公司