专利名称：：一种复方斑蝥注射制剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种复方斑蝥注射制剂及其制备方法，属于中药制药的
技术领域：
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背景技术：
：复方斑蝥制剂一种具有破血消瘦、攻毒蚀疮的作用的药物。其中复方斑蝥胶囊为《国家卫生部药品标准》中药成方制剂第十七册收载品种。方由斑蝥、人参、黄芪、刺五加、三棱、半枝莲、莪术、山茱萸、女贞子、熊胆粉、甘草共十一味药物组成，是治疗原发性肝癌、肺癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、妇科恶性肿瘤等的较好药物之一。近年來，肺癌、原发性肝癌、结直肠癌、妇科恶性肿瘤等的发病率逐年上升，已成为严重危害人类健康的最常见的恶性肿瘤，给我们的社会、经济、生活带来诸多不变。目前，市面上的以及在申请生产的复方斑蝥系列产品多为口服制剂，有复方斑蝥颗粒、片剂、胶囊、丸剂、咀嚼片等，是一种经典中成药；其给药途径为口服，主要是经过胃肠道吸收进入体循环进而发挥疗效，具有起效慢、吸收不完全、生物利用度低等缺点；同时，对口服不便的患者，口服制剂的应用具有局限性。同时生产复方斑蝥制剂的方法有很多，较为常用的是斑蝥以氯仿为溶剂来进行提取；人参、山茱萸、女贞子、半枝莲四味药材粉碎成细粉入药。但是经研究发现，上述剂型工艺中斑蝥、人参、山茱萸、女贞子、半枝莲等接入药会导致杂质含量高，以氯仿为溶剂来进行提取会导致在提取过程中溶剂有残留，因此给制剂制备带来了不便，不利于产品的质量控制；另外，产品均为浓縮后的稠膏或清膏直接干燥后与粉末药混合制备不同剂型，缺少对其有效成分的分离环节，这样也会造成杂质含量过高，纯化不完善，容易导致不良反应。
发明内容针对以上现有技术的不足，本发明研究人员经过大量的实验，提供了一种稳定性好、吸收充分、起效快、疗效高的供注射给药的复方斑蝥注射制剂及其制备方法。本发明中的斑蝥采用乙醇渗漉、超声的方法提取，方法更加科学，使得制剂中的斑蝥素含量明显提高；采用乙醇为溶剂提取除熊胆粉、斑蝥外的其余九味药材，同时对该九味药材中提取的总皂苷有效部位采用有机溶剂萃取的方式进行纯化；对醇提后的沉淀采用大孔树脂吸附的方法进行提纯，制备人参等九味提取物的多糖有效成分。最后将熊胆粉、斑蝥提取物、总皂苷提取物和多糖有效组分一起制备注射制剂。本发明的目的是公开一种复方斑蝥注射制剂。本发明的另一个目的是公丌这种复方斑蝥注射制剂的制备方法。这种注射制剂包括输液、水针剂、粉针剂和冻干粉针剂。本发明方法制备的复方斑蝥注射制剂有效成份含量较高，可达到提高生物利用度的效果。本发明复方斑蝥注射制剂是这样构成的重量组份为斑蝥0.6-6份、人参1.5-15份、黄芪7.5-100份、刺五加7.5-100份、三棱2.4-24份、半枝莲9-100份、莪术2.4-24份、山茱萸3-30份、女贞子3-30份、熊胆粉0.05-1.0份、甘草1.5-15份。本发明通过以下技术方案实现工艺歩骤一斑蝥提取物制备斑蝥的提取物是通过将斑蝥乙醇渗漉或超声提取、水沉、离心的方法得到的。具体的制备方法为将斑蝥粉碎成粗粉，用75%-95%的乙醇超声提取或用渗漉装置渗漉提取，提取液用水进行沉淀，过滤，滤液高速离心，离心液浓縮，干燥，粉碎，即得。更具体的方法为取斑蝥，粉碎成40-60目的粗粉，放入超声振荡器中，加入6-IO倍量75%-95%的乙醇浸泡30-40分钟后超声振荡提取，时间20-40分钟，频率30_50Hz，提取2-3次；或将斑蝥粗粉置入渗漉装置中渗漉提取，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓縮成稠膏，加入6-IO倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速度离心10-20分钟，离心液减压浓縮，干燥，粉碎，即得。工艺歩骤二人参等九味药材的提取取除熊胆粉外的其余人参、黄蔑等九味药材，用6-12倍量的75%_95%乙醇提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓縮成相对密度在6(TC为1.05-1.20的稠膏，加入8-10倍量的水，静置，滤过，得沉淀和上清液。1、总皂苷提取物制备总皂苷提取物是通过将上清液用有机溶剂萃取，然后用1%的氢氧化钠水溶液洗涤，弃去碱水液，减压回收有机溶剂萃取液并浓縮至干，即得。具体的制备方法为将人参、黄芪等九味药材提取后的上清液，用有机溶剂萃取2-3次(有机溶剂可以是用于提取皂苷类成分的任何有机溶剂，包括乙酸乙酯、正丁醇、异戊醇等)，合并萃取液，用1%的氢氧化钠水溶液洗涤二次，弃去碱水液，减压回收有机溶剂萃取液并浓縮至干，即得总皂苷提取物。2、多糖有效组分制备多糖的有效组分是通过将上述人参、黄芪等九味药材的沉淀，采用大孔树脂吸附除杂，超滤的方法获得。具体的制备方法为将上述人参、黄芪等九味药材的沉淀，加3-6倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮成稠膏，稠膏加入8-12倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好大孔吸附树脂，用6-10倍量的水洗脱，收集直接流出液和水洗液，分别用截留分子量为l力-和20万的超滤膜超滤，收集，浓縮，干燥，即得。上述制备方法中的大孔吸附树脂为非极性或弱极性，包括D101型、DA-201型、AB-8型等。故本发明提取工艺为方中十一味，除熊胆粉外，粉碎成40-60目的粗粉，放入超声振荡器中，加入6-10倍量75%_95%的乙醇浸泡30-40分钟后超声振荡提取，时间20-40分钟，频率30-50Hz，提取2-3次；或将斑蝥粗粉置入渗漉装置中渗漉提取，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入6-10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速度离心10-20分钟，离心液减压浓缩，干燥，粉碎，得斑蝥提取物备用；其余人参等9味用6-12倍量的75%-95%乙醇提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓縮成相对密度在60'C为1.05-1.20的稠膏，加入8-IO倍量的水，静置，滤过，得沉淀和上清液。上清液用有机溶剂萃取2-3次(有机溶剂可以是用于提取皂苷类成分的任何有机溶剂，包括乙酸乙酯、TH丁醇、异戊醇等)，合并萃取液，用1%的氢氧化钠水溶液洗涤二次，弃去碱水液，减压回收有机溶剂萃取液并浓縮至干，得总皂苷提取物备用；取沉淀加3-6倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮成稠膏，稠膏加入8-12倍量的水搅拌，静置，上清液过己处理好大孔吸附树脂，用6-10倍量的水洗脱，收集直接流出液和水洗液，分别用截留分子量为l万和20万的超滤膜超滤，收集，浓縮，干燥，得多糖有效组分备用。本发明注射制剂包括输液制剂、水针制剂、粉针制剂和冻干粉针制剂。本发明注射制剂的制备方法为取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入适量辅料，采用液体制剂的制备方法，制备成输液制剂、水针制剂、粉针制剂和冻干粉针制剂。具体的制备方法为本发明输液剂的制备方法为取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入等渗调节剂和适量防腐剂，调pH值4.0-6.0，用0.22um微孔滤膜滤过，灭菌，制备成输液剂。本发明输液剂中的等渗调节剂，可以是葡萄糖、木糖醇、山梨醇、氯化钠、氯化钙、氯化镁、氯化钾、乳酸钠和右旋糖酐等中的一种或几种的组合物；本发明输液剂中的防腐剂可以是苯甲醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、氯甲酚等其中的一种或几种的混合物。本发明水针剂的制备方法为取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，调pH值4.0-6.0，用0.22um微孔滤膜滤过，灭菌，制备成水针剂。本发明粉针制剂的制备方法为取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入水溶性注射用赋形剂，调pH值4.0-6.0，用0.22um微孔滤膜滤过，干燥，制备成粉针制剂。本发明冻干粉针剂的制备方法为取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入冻干赋形剂，调pH值4.0-6.0，用0.22um微孔滤膜滤过，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。上述粉针剂和冻干粉针剂中的赋形剂，可以是甘露醇、果糖、葡聚糖、右旋糖酑、聚乙烯吡洛垸酮等中的一种或几种的组合物。与现有技术相比，本发明是以乙醇渗漉或超声提取、水沉、离心的方法提取斑蝥药材，提取效果好，操作方便，稳定性好；采用乙醇为溶剂提取除熊胆粉、斑蝥外的其余九味药材，同时对该九味药材中提取的总皂苷有效部位采用有机溶剂萃取的方式进行纯化，使得复方斑蝥药物的有效成分集中且纯度较高；对醇提后的沉淀采用大孔树脂吸附的方法进行提纯，制备人参等九味提取物的多糖有效成分，获得的多糖组分药理作用好、不良反应小。针对本发明所述制备工艺，申请人进行了大量的试验研究，具体如下实验l:斑蝥提取物工艺实验研究斑蝥中所含的主要成分为斑蝥素等，参照部颁标准和公丌专利，我们同时选用了氯仿、水作为溶媒提取，或斑蝥直接粉碎成细粉入药，以斑蝥素的含量为指标，对不同方法进行比较，结果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由以上含量测定结果可以看出，采用本发明所述的醇提取方法制备斑蝥提取物，其含量高于氯仿提取和直接入药，同时氯仿属于毒性有机溶剂，在制备中有残留，直接入药杂质限度无控制，容易过高，故选择本发明制备方法对于斑蝥中有效成分的提取是合理的。实验2:人参等九味提取工艺研究按照本发明所述的工艺条件，制备三批总皂苷提取物，以野黄芩苷的含量和总皂苷含量为指标，结果见下表。提取工艺实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由实验结果可见，野黄芩苷平均含量为0.9468，RSD为0.98%,总皂苷含量为82.0%，RSD为1.71%,证明该工艺稳定可行，质量可控。实验3:本发明制剂对实验小鼠移植性肿瘤S,,H22的抑制作用一、材料1、动物实验动物昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄各半。2、药物本发明药物、市售复方斑蝥胶囊。二、方法与结果1、对小鼠移植性肿瘤S,的影响取肿瘤生长良好的S，小鼠，无菌条件下抽取腹水，用无菌生理盐水按l:3稀释，显微镜下计数，调瘤细胞数为1.0X107个/ml(置冰浴中)。然后取0.2ml小鼠腋部皮下接种，24小时后称重。取试验药物，给药剂量为对照组生理盐水20ml/kg;市售复方斑蝥胶囊组2.Og/kg;本发明药物组2.0g生药/kg。每闩给药一次，连续十天，末次给药后24小时，取小鼠按常规方法处死解剖肿瘤，称重。结果见下表。对小鼠实体瘤S,的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2、对小鼠移植性肿瘤H22的影响:取传代后生长良好的&2小鼠，无菌条件下抽取腹水，力n4倍量无菌生理盐水混匀，接种于小鼠右前肢腋窝处皮下，每支接种0.2ml，24小时后随机分组，尾静脉注射给药和灌胃给药，剂量同上，每日给药一次，连续十天。末次给药后逐日记录各组小鼠死亡情况，计算各组小鼠平均生存天数，计算生命延长率。结果见下表。对小鼠&2腹水瘤的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>根据以上实验结果，复方斑蝥注射制剂可明显抑制小鼠抑制性肿瘤S,的生长，降低瘤重;对小鼠接种H22腹水瘤后的生存期有一定的延长作用。由于治疗组间有显著性差异(P〈0.05)，故本发明制剂组与市售复方斑蝥胶囊组比较，在临床用量相同的情况下，本发明制剂组对比市售复方斑蝥胶囊的疗效更好，生物利用度更高。经试验研究表明本发明所述制备工艺具有较强的科学性、可行性，所得样品质量稳定，符合治疗的质量要求。本品给药途径为注射给药，不需经过胃肠道的消化吸收，具有疗效确切、奇效快的特点。扩展了本药物的给药方式，便于广大患者使用。具体实施例方式具体实施例方式本发明实施例1:斑蝥3.97g、人参9.92g、黄芪49.58g、刺五加49.58g、三棱15.83g、半枝莲59.5g、莪术15.83g、山茱萸19.83g、女贞子19.83g、熊胆粉0.4g、甘草9.92g制备方法为方中十一味，除熊胆粉外，粉碎成50目的粗粉，放入超声振荡器中，加入10倍量90%的乙醇浸泡40分钟后超声振荡提取，时间40分钟，频率30-50Hz，提取3次，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓縮成稠膏，加入8倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速度离心20分钟，离心液减压浓縮，干燥，粉碎备用；取其余人参等9味药材，用12倍量的90%乙醇提取3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓縮成相对密度在6(TC为1.10的稠膏，加入10倍量的水，静置，滤过，得沉淀和上清液。上清液用乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，用1%的氢氧化钠水溶液洗涤二次，弃去碱水液，减压回收有机溶剂萃取液并浓縮至干，即得总皂苷提取物；取沉淀加6倍量的水煎煮提取3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮成稠膏，稠膏加入10倍量的水搅拌，静置，上清液过巳处理好大孔吸附树脂，用8倍量的水洗脱，收集直接流出液和水洗液，分别用截留分子量为l万和20万的超滤膜超滤，收集，浓縮，干燥，即得多糖有效组分；将上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，用氯化钠调节等渗，再加入适量尼泊金乙酯，调pH值为5.0，用0.22iim微孔滤膜滤过，灭菌，制备成输液剂1000瓶。用法用量静脉滴注，一次2-3瓶，一日2次。本发明实施例2:斑蝥0.6g、人参1.5g、黄芪7.5g、剌五加7.5g、三棱2.4g、半枝莲9g、莪术2.4g、山茱萸3g、女贞子3g、熊胆粉0.05g、甘草1.5g制备方法为方中十一味，除熊胆粉外，粉碎成40目的粗粉，放入超声振荡器中，加入6倍量75%的乙醇浸泡30分钟后超声振荡提取，时间20分钟，频率30Hz，提取2次，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓縮成稠膏，加入6倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速度离心10分钟，离心液减压浓縮，干燥，粉碎备用；其余人参等9味用6倍量的75%乙醇提取2次，合并提取液，过滤，滤液减压浓縮成相对密度在60。C为1.05的稠膏，加入8倍量的水，静置，滤过，得沉淀和上清液。上清液用乙酸乙酯萃取2次，合并萃取液，用1%的氢氧化钠水溶液洗涤二次，弃去碱水液，减压回收有机溶剂萃取液并浓縮至干，得总皂苷提取物备用；取沉淀加3倍量的水煎煮提取2次，每次0.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩成稠膏，稠膏加入8倍量的水搅拌，静置，上清液过己处理好大孔吸附树脂，用6倍量的水洗脱，收集直接流出液和水洗液，分别用截留分子量为l万和20万的超滤膜超滤，收集，浓縮，干燥，即得多糖；取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，调pH值4.0，用0.22um微孔滤膜滤过，灭菌，制备成水针剂1000支。用法用量肌内或静脉注射，一次l-2支，一日2次本发明实施例3:斑蝥6g、人参15g、黄芪100g、刺五加100g、三棱24g、半枝莲i00g、莪术24g、山茱萸30g、女贞子30g、熊胆粉1.0g、甘草15g制备方法为方中十一味，除熊胆粉外，粉碎成60目的粗粉，置入渗漉装置中渗漉提取，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓縮成稠膏，加入10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速度离心20分钟，离心液减压浓縮，干燥，粉碎备用；其余人参等9味用12倍量的95%乙醇提取3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓縮成相对密度在6(TC为1.20的稠膏，加入10倍量的水，静置，滤过，得沉淀和上清液。上清液用正丁醇液萃取3次，合并萃取液，用1%的氢氧化钠水溶液洗涤二次，弃去碱水液，减压回收有机溶剂萃取液并浓縮至干，备用；取沉淀加6倍量的水煎煮提取3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮成稠膏，稠膏加入12倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好大孔吸附树脂，用10倍量的水洗脱，收集直接流出液和水洗液，分别用截留分子量为l力'和20万的超滤膜超滤，收集，浓縮，干燥，即得；取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入甘露醇和果糖，调pH值6.0，用0.22Pm微孔滤膜滤过，干燥，制备成粉针制剂1000支。用法用量肌内或静脉注射、滴注，一次1-2支，一日2次。本发明实施例4:斑蝥4.76g、人参11.9g、黄芪59.5g、刺五加59.5g、三棱19g、半枝莲71.4g、莪术19g、山茱萸23.8g、女贞子23.8g、熊胆粉0.48g、甘草11.9g制备方法为方中十一味，除熊胆粉外，粉碎成50目的粗粉，放入超声振荡器中，加入8倍量85%的乙醇浸泡40分钟后超声振荡提取，时间30分钟，频率40Hz，提取2次，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓縮成稠膏，加入8倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速度离心15分钟，离心液减压浓縮，干燥，粉碎备用；其余人参等9味用8倍量的85%乙醇提取3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成相对密度在60'C为1.15的稠膏，加入8倍量的水，静置，滤过，得沉淀和上清液。上清液用异戊醇萃取2次，合并萃取液，用1%的氢氧化钠水溶液洗涤二次，弃去碱水液，减压回收有机溶剂萃取液并浓縮至干，备用；取沉淀加5倍量的水煎煮提取2次，每次1.0小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮成稠膏，稠膏加入10倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好大孔吸附树脂，用8倍量的水洗脱，收集直接流出液和水洗液，分别用截留分子量为l万和20万的超滤膜超滤，收集，浓缩，干燥，即得；取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入葡聚糖和聚乙烯吡洛烷酮，调pH值4.6，用0.22um微孔滤膜滤过，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂1000支。用法用量肌内或静脉注射、滴注，一次1-2支，一闩2次。本发明实施例5:按照实施例1的处方和方法制备斑蝥提取物、总皂苷提取物和多糖有效组分。将上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，用葡萄糖调节等渗，再加入适量苯甲醇，调pH值为5.2，用0.22um微孔滤膜滤过，灭菌，制备成输液剂1000瓶。本发明实施例6按照实施例2的处方和方法制备斑蝥提取物、总皂苷提取物和多糖有效组分。取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入右旋糖酐，调pH值4.3，用0.22ym微孔滤膜滤过，干燥，制备成粉针制剂1000支。本发明实施例7按照实施例3的处方和方法制备斑蝥提取物、总皂苷提取物和多糖有效组分。取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入甘露醇和葡聚糖，调pH值5.5，用0.22um微孔滤膜滤过，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂1000支。权利要求1.一种复方斑蝥注射制剂，其特征在于药效组分按下述重量配比的原药材制成的药物斑蝥0.6-6份、人参1.5-15份、黄芪7.5-100份、刺五加7.5-100份、三棱2.4-24份、半枝莲9-100份、莪术2.4-24份、山茱萸3-30份、女贞子3-30份、熊胆粉0.05-1.0份、甘草1.5-15份；其制备方法有以下工艺步骤工艺步骤一、斑蝥提取物制备将斑蝥粉碎成粗粉，通过采用75％-95％的乙醇超声提取渗或用渗漉装置渗漉提取，再将提取液水沉、离心得到。工艺步骤二、人参等九味药材的提取取除熊胆粉外的其余人参、黄芪等九味药材，用6-12倍量的75％-95％乙醇提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓缩成相对密度在60℃为1.05-1.20的稠膏，加入8-10倍量的水，静置，滤过，得沉淀和上清液。1、总皂苷提取物制备将上清液用有机溶剂萃取，然后用1％的氢氧化钠水溶液洗涤，弃去碱水液，减压回收有机溶剂萃取液并浓缩至干，即得。2、多糖有效组分制备是将上述人参、黄芪等九味药材的沉淀，采用大孔树脂吸附除杂，超滤的方法获得。工艺步骤三、液体制剂的制备取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入适量辅料，采用液体制剂的制备方法，制备成输液制剂、水针制剂、粉针制剂和冻干粉针制剂。2.根据权利要求1所述的复方斑蝥注射制剂，其特征在于，有效成分的制备方法，还包括以下歩骤方中十一味，除熊胆粉外，粉碎成40-60目的粗粉，放入超声振荡器中，加入6-10倍量75%_95%的乙醇浸泡30-40分钟后超声振荡提取，时间20-40分钟，频率30-50Hz，提取2_3次；或将斑蝥粗粉置入渗漉装置中渗漉提取，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓縮成稠膏，加入6-10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速度离心10-20分钟，离心液减压浓縮，干燥，粉碎，得斑蝥提取物备用；其余人参等9味用6-12倍量的75%-95%乙醇提取2-3次，合并提取液，过滤，滤液减压浓縮成相对密度在60。C为1.05-1.20的稠膏，加入8-10倍量的水，静置，滤过，得沉淀和上清液。上清液用有机溶剂萃取2-3次(有机溶剂可以是用于提取皂苷类成分的任何有机溶剂，包括乙酸乙酯、正丁醇、异戊醇等)，合并萃取液，用1%的氢氧化钠水溶液洗涤二次，弃去碱水液，减压回收有机溶剂萃取液并浓縮至干，得总皂苷提取物备用；取沉淀加3-6倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓縮成稠膏，稠膏加入8-12倍量的水搅拌，静置，上清液过已处理好大孔吸附树脂，用6-10倍量的水洗脱，收集直接流出液和水洗液，分别用截留分子量为l万和20万的超滤膜超滤，收集，浓縮，干燥，得多糖有效组分备用。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的大孔吸附树脂为非极性或弱极性，包括D101型、DA-201型、AB-8型等。4.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，还包括以下歩骤输液剂的制备取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入等渗调节剂和适量防腐剂，调pH值f0-6.0，用0.22um微孔滤膜滤过，灭菌，制备成输液剂；水针剂的制备取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，调pH值4.0-6.0，用0.22um微孔滤膜滤过，灭菌，制备成水针剂；粉针制剂的制备取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入水溶性注射用赋形剂，调pH值4.0-6.0，用0.22um微孔滤膜滤过，干燥，制备成粉针制剂；冻干粉针剂的制备取上述斑蝥提取物、总皂苷提取物、多糖有效组分用注射用水溶解，再加入熊胆粉使溶解，加入冻干赋形剂，调pH值4.0-6.0，用0.22um微孔滤膜滤过，冷冻干燥，制备成冻干粉针剂。5.根据权利要求1或4所述的复方斑蝥注射制剂的制备方法，其特征在于，所述辅料为等渗调节剂可以是葡萄糖、木糖醇、山梨醇、氯化钠、氯化钙、氯化镁、氯化钾、乳酸钠和右旋糖酐等中的一种或几种的组合物；所述的防腐剂可以是苯甲醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、氯甲酚等其中的一种或几种的混合物。6.根据权利要求1或4所述的复方斑蝥注射制剂的制备方法，其特征在于，所述粉针剂和冻干粉针剂中使用的赋形剂，可以是甘露醇、果糖、葡聚糖、右旋糖酐、聚乙烯吡洛烷酮等中的一种或几种的组合物。全文摘要本发明公开了一种复方斑蝥注射制剂及其制备方法，它由斑蝥、人参、黄芪、刺五加、三棱、半枝莲、莪术、山茱萸、女贞子、熊胆粉、甘草及适当辅料制备而成。本发明将斑蝥用乙醇渗漉或超声提取、水沉、离心的方法提取，提取效果好，操作方便，稳定性好；采用乙醇为溶剂提取除熊胆粉、斑蝥外的其余九味药材，同时对该九味药材中提取的总皂苷有效部位采用有机溶剂萃取的方式进行纯化，使得复方斑蝥药物的有效成分集中且纯度较高；对醇提后的沉淀采用大孔树脂吸附的方法进行提纯，制备人参等九味提取物的多糖有效成分，获得的多糖组分药理作用好、不良反应小。本发明方法制备的复方斑蝥注射制剂有效成份含量较高，可达到提高生物利用度的效果。文档编号A61K9/14GK101357212SQ20071007786公开日2009年2月4日申请日期2007年7月31日优先权日2007年7月31日发明者叶湘武申请人:贵州益佰制药股份有限公司