专利名称：1'－乙酰氧基胡椒酚乙酸酯生产方法
技术领域：
本发明涉及一种用超临界二氧化碳萃取和分子蒸馏技术从姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜中提取分离纯化1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的生产方法。
背景技术：
1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯英文名为1’-acetoxychavicol acetate，分子式为C13H14O4，分子量为234.25，结构式为 2005年7月7日，日本专利JP2005179201公开了从大高良姜果实的甲醇提取物中分离得到的1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯具有抑制HIV-1 NL43在MT-4细胞中的复制作用，而对MT-4细胞存活无影响，显示高度安全性和抑制HIV Rev蛋白核外迁移的特点。还有研究报道显示1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯具有抗肿瘤(Moffatt J，A，et al.[J].Carcinogenesis，2000，212151-2157；zheng Q etal.[J].J Cancer Res Clin Oncol，2002，128539～546)、抗细菌(Janssen AM，[J].planta Med，1985(6)507～511)、抗真菌(Ficker C E，et al.[J].JEthnophamacal，2003，85589～593)、抗溃疡(Mitsuis，et al.[J].Chem PhamBu11，1976，242377～2382)、抗氧化(Kubota K，et al.[J].Spec Publ R SocChem，2001，274601～607)、抗炎(Nakamura Y，[J].Cancer Res，1998，5848 32～4839)等生物活性，近年来还研究发现它具有抗结核活性。
2006年8月10日，日本专利JP2006206541公开了1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯化学合成方法，但存在收率较低和环境污染问题。
传统的提取分离技术是用甲醇回流提取后用正已烷-乙酸乙酯萃取，通过层析柱分离，再用正已烷-乙酸乙酯洗脱的方法制备1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯，不但有效成分破坏严重、收率和纯度低、杂质多、工艺流程复杂、生产效率低，而且对环境造成污染，影响生产人员的安全和健康，产品中残留的有机溶剂对人体的健康构成威胁。
发明内容
针对目前化学合成或提取分离技术制备1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯存在的问题，本发明提供一种收率、纯度和生产效率高，安全、健康、清洁的超临界二氧化碳萃取和分子蒸馏技术从姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpiniagalanga Willd.的干燥根茎大良姜中提取分离纯化1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的生产方法，技术方案如下取姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜，干燥至含水分小于10％，粉碎成10～60目细粉，置超临界二氧化碳萃取器中，萃取釜温度为40℃～60℃，压力为10Mpa～40Mpa；分离釜温度为40℃～70℃，压力为10Mpa～20Mpa；解析釜温度为40℃～50℃，压力为5Mpa～15Mpa；流量为5～50kg/h；萃取时间为1～3小时。
取上述超临界二氧化碳萃取物置分子蒸馏器中，进料速度为0.5～5ml/min，真空度为5～30Mpa，加热温度为80～200℃，冷却温度为2～10℃，转速为100～300r/min，收集蒸馏液，即得1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯。采用常规制剂方法，将1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯制成软胶囊剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、注射剂在医药中应用。
采用以下方法检测本发明的有益效果1.结构确证试验采用元素分析、紫外吸收光谱、红外吸收光谱、质谱、核磁共振谱解析并确证本发明提取分离精制得到的化合物的结构。
2.收率计算 W1为1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯重量。
W2为大良姜药材重量。
3.纯度测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(50∶50)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 取1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯对照品0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取0.1ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯20μg)。
供试品溶液的制备 取本品约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取0.1ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，按外标法计算，即得。
具体实施例方式
实施例1取姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜，干燥至含水分为4.2％，粉碎成50目细粉，置超临界二氧化碳萃取器中，萃取釜温度为54℃，压力为27.5Mpa；分离釜温度为60℃，压力为12.5Mpa；解析釜温度为40℃，压力为6.5MPa；流量为10kg/h；萃取时间为1.5h。取上述超临界二氧化碳萃取物置分子蒸馏器中，进料速度为1.5ml/min，真空度为15Mpa，加热温度为120℃，冷却温度为5℃，转速为250r/min，收集馏液，即得化合物1(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)。采用常规制剂方法将该化合物(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)制成软胶囊剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、注射剂在医药中应用。
实施例2取姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜，干燥至含水分为6.1％，粉碎成60目细粉，置超临界二氧化碳萃取器中，萃取釜温度为40℃，压力为20Mpa；分离釜温度为45℃，压力为10Mpa；解析釜温度为45℃，压力为8MPa；流量为20kg/h；萃取时间为1小时。取上述超临界二氧化碳萃取物置分子蒸馏器中，进料速度为1ml/min，真空度为10Mpa，加热温度为100℃，冷却温度为3℃，转速为100r/min，收集馏液，即得化合物2(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)。采用常规制剂方法将该化合物(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)制成软胶囊剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、注射剂在医药中应用。
实施例3取姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜，干燥至含水分为5.2％，粉碎成40目细粉，置超临界二氧化碳萃取器中，萃取釜温度为45℃，压力为30Mpa；分离釜温度为55℃，压力为16Mpa；解析釜温度为45℃，压力为15MPa；流量为30kg/h；萃取时间为2小时。取上述超临界二氧化碳萃取物置分子蒸馏器中，进料速度为0.5ml/min，真空度为5Mpa，加热温度为80℃，冷却温度为6℃，转速为200r/min，收集馏液，即得化合物3(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)。采用常规制剂方法将该化合物(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)制成软胶囊剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、注射剂在医药中应用。
实施例4取姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜，干燥至含水分为5.5％，粉碎成30目细粉，置超临界二氧化碳萃取器中，萃取釜温度为50℃，压力为25Mpa；分离釜温度为44℃，压力为18Mpa；解析釜温度为48℃，压力为5MPa；流量为40kg/h；萃取时间为3小时。取上述超临界二氧化碳萃取物置分子蒸馏器中，进料速度为2.0ml/min，真空度为20Mpa，加热温度为150℃，冷却温度为8℃，转速为150r/min，收集馏液，即得化合物4(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)。采用常规制剂方法将该化合物(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)制成软胶囊剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、注射剂在医药中应用。
实施例5取姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜，干燥至含水分为4.3％，粉碎成20目细粉，置超临界二氧化碳萃取器中，萃取釜温度为55℃，压力为40Mpa；分离釜温度为68℃，压力为15Mpa；解析釜温度为45℃，压力为12MPa；流量为50kg/h；萃取时间为2.5小时。取上述超临界二氧化碳萃取物置分子蒸馏器中，进料速度为3.5ml/min，真空度为25Mpa，加热温度为160℃，冷却温度为4℃，转速为200r/min，收集馏液，即得化合物5(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)。采用常规制剂方法将该化合物(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)制成软胶囊剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、注射剂在医药中应用。
实施例6取姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜，干燥至含水分为4.9％，粉碎成55目细粉，置超临界二氧化碳萃取器中，萃取釜温度为49℃，压力为23Mpa；分离釜温度为66℃，压力为11Mpa；解析釜温度为43℃，压力为8MPa；流量为5kg/h；萃取时间为3小时。取上述超临界二氧化碳萃取物置分子蒸馏器中，进料速度为4.5ml/min，真空度为28Mpa，加热温度为115℃，冷却温度为2℃，转速为180r/min，收集馏液，即得化合物6(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)。采用常规制剂方法将该化合物(1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯)制成软胶囊剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、注射剂在医药中应用。
本发明取得的有益效果1.结构确证试验取以上6个实施例制备的化合物进行结构确证试验，结果如下①元素分析仪器型号德国元素分析系统Vario ELIII理论值C％66.67％，H5.98％。
检测值1)C％66.83％，H％6.01％2)C％66.74％，H％6.15％②紫外吸收光谱仪器型号日本日立公司UV-3400检测值220.15nmn→π*跃迁产生的吸收峰，是酯基的紫外吸收。
259.25nmπ→π*跃迁产生的吸收峰，是苯环的吸收。
③红外吸收光谱仪器型号美国尼高力公司NEXUS670检测值2941cm-1C-H st，1746cm-1C＝O st，1639cm-1C＝C st，1231cm-1CO-O st as，1201cm-1O-C-C st as。
④质谱仪器型号美国Varian公司VARIAN 2200
检测值得到以下质核比的离子碎片231，189，172，147，131。其中231是分子离子，脱去质核比为42的乙酰基离子得到189的离子碎片；分子离子231脱去质核比为59的乙酸根离子得到172的离子碎片；分子离子231脱去2个质核比为42的乙酰基离子得到147的离子碎片；147的离子碎片脱去质核比为16的氧离子得到131的离子碎片。
⑤核磁共振谱仪器型号瑞士Bruker公司AVANCE-400检测值1H-NMR(400MHz，CDCl3)7.396～7.372，7.112～7.091，6.301～6.284，6.063～6.016，5.432～5.314，2.306，2.287。
13C-NMR(400MHz，CDCl3)169.011，169.894，150.203，136.587，136.432，128.115，120.987，116.843，75.421，20.969，21.154。
综合解析以上试验结果确证本发明从姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜中提取分离精制的化合物为1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯，其分子式为C13H14O4，分子量为234.25，结构式为 2.1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯提取分离精制收率及纯度检测结果取以上6个实施例制备的1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯进行检测，结果见表。
表1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯提取分离精制收率及纯度检测结果
权利要求
1. 1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯生产方法，其特征是用超临界二氧化碳萃取和分子蒸馏技术从大良姜中提取分离纯化1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的生产方法。
2.权利要求1所述的1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯生产方法，其特征是用取水分干燥至小于10％并粉碎成10～60目细粉的大良姜，置超临界二氧化碳萃取器中，萃取釜温度为40℃～60℃，压力为10Mpa～40Mpa；分离釜温度为40℃～70℃，压力为10Mpa～20Mpa；解析釜温度为40℃～50℃，压力为5Mpa～15Mpa；流量为5～50kg/h；萃取时间为1～3小时；取上述超临界二氧化碳萃取物置分子蒸馏器中，进料速度为0.5～5ml/min，真空度为5～30Mpa，加热温度为80～200℃，冷却温度为2～10℃，转速为100～300r/min，收集蒸馏液，即得1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的生产方法。
3.权利要求1所述的1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯生产方法，其特征是生产1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的原料大良姜是姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎。
4.权利要求1所述的1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯生产方法，其特征是生产所得的1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的英文名为1’-acetoxychavicol acetate，分子式为C13H14O4，分子量为234.25，结构式为
5.用权利要求1所述方法生产的1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯制成的软胶囊剂、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、注射剂在制备医药制剂中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种用超临界二氧化碳萃取和分子蒸馏技术从姜科Zingiberaceae山姜属植物红豆蔻Alpinia galanga Willd.的干燥根茎大良姜中提取分离纯化1’－乙酰氧基胡椒酚乙酸酯的生产方法，该方法具有收率、纯度和生产效率高，安全、健康、清洁的特点。
文档编号A61K31/22GK101029005SQ200710100578
公开日2007年9月5日 申请日期2007年4月11日 优先权日2007年4月11日
发明者刘孝乐 申请人:南昌弘益科技有限公司